Биологическая химия

Цель занятия - получить мочевую кислоту из голубиного помета, изучить ее свойства. Содержание работы. Выделить мочевую кислоту из помета голубей, рассмотреть кристаллы мочевой кислоты под микроскопом, проделать качественную реакцию на мочевую кислоту и изучить ее свойства. Подготовка к занятию. Изучить конечные продукты белкового обмена у птиц, рептилий, млекопитающих, химическое строение и свойства мочевой кислоты.

Литература [2, с. 134-138; 4, с. 282].

Вопросы для самоконтроля 1. Напишите структурную формулу мочевой кислоты. 2. Почему у птиц и рептилий конечным продуктом белкового обмена является мочевая кислота, а не мочевина? 3. Что такое подагра?

Аппаратура и реактивы: штатив с пробирками, ступка с пестиком, воронка, ватный и бумажный фильтры, плитка, кипящая водяная баня, микроскоп, предметные стекла, углекислый калий, соляная кислота (1 : 15). 0,1 н. раствор щелочи, серный эфир, сульфат меди, концентрированная азотная кислота, концентрированный раствор аммиака.

Ход работы

Отвесьте 2 г сухого голубиного помета и тщательно разотрите его в порошок в фарфоровой ступке. Перенесите порошок в колбу на 250 мл, добавьте 2 г углекислого калия (К2СO3) и 60 мл дистиллированной воды. Прокипятите смесь, горячую жидкость с помощью воронки и ватного фильтра профильтруйте в другую колбу, в которую предварительно влейте 50 мл раствора соляной кислоты (1 часть кислоты в 15 частях воды). Дайте жидкости отстояться в течение 30 мин. Отфильтруйте осадок с помощью бумажного фильтра. Осторожно промойте осадок холодной водой. Осторожно возьмите стеклянной палочкой часть осадка с фильтра, поместите его в кайлю дистиллированной воды на предметное стекло и рассмотрите в микроскоп. Зарисуйте увиденное.под микроскопом. Оставшийся осадок перенесите и фарфоровую чашечку и высушите на кипящей бане. С чистой мочевой кислотой заводского приготовления проделайте следующие реакции: на растворимость ее в различных растворителях, на восстановление и мурексидную пробу.

Контрольные вопросы

1. Почему для выделения мочевой кислоты Вам был предложен помет голубей, а не моча крупного рогатого скота? 2. Что можно сказать о растворимости мочевой кислоты в различных растворителях? 3. Для чего нужен К2СО3 при выделении мочевой кислоты из помета голубей'.' 4. На основании чего Вы можете заключить, что полученное Вами вещество является мочевой кислотой? 5. Почему у вегетарианцев меньше шансов заболеть подагрой?

Работа № 23. Патологические составные части мочи (2 часа)

Цель занятия - изучить реакции обнаружения патологических составных частей мочи, исследовать образец мочи животного и сделать вывод о состоянии его здоровья. Содержание работы: проделать реакции обнаружения в моче белка, сахара, ацетона, желчных пигментов. Подготовка к занятию: изучить по литературе химический состав мочи и ее патологические составные части. Литература [2, с. 460-466; 4, с. 330-332; 7. с. 206-209].

Вопросы для самоконтроля

1. Какие вещества относятся к патологическим частям мочи? 2. Какие состояния принято называть альбуминурией, глюкозу-рией, кетонурией? 3. Что является причиной альбуминурии, глкжозурии, кетонурии? 4. Что является причиной повышенного содержания в моче уробилина?

Аппаратура и реактивы: спиртовка, штатив с пробирками (6 шт.) воронка, фильтр, синяя лакмусовая бумага, глазные пипетки. 2%-ный раствор уксусной кислоты, 50%-ный раствор НNO3, 10%-ный раствор NaОН, 5%-ный раствор СиSO4, раствор йода в йодистом калии.

Ход работы К патологическим составным частям мочи относятся; белок сахар, ацетоновые тела, желчные пигменты, кровь и другие вещества.

1. Обнаружения белка

Проба с кипячением. В пробирку взять 3-5 мл мочи. При помощи синей лакмусовой бумажки определить ее реакцию. Если моча щелочная, довести ее реакцию до слабокислой путем осторожного при-ливания 2%-ного раствора уксусной кислоты (пользуйтесь синей лакмусовой бумагой). Содержимое пробирки взболтать и подогреть до кипения на спиртовке. При наличие в моче белка, в зависимости от его количества в нагретой части образуются: опалесценция, муть или хлопья от коагулированного белка. Проба с азотной кислотой. В пробирку налить 1-2 мл 50%-ного раствора азотной кислоты, на которую осторожно наслоить, приливая по стенке пробирки, профильтрованную мочу так, чтобы получилось два несмешивающихся слоя: внизу - азотная кислота, наверху - моча. По линии соприкосновения жидкостей при наличии в моче белка образуется мутный белый слой или, как его обыкновенно называют, белое кольцо, состоящее из свернувшегося белка. Если состав мочи в норме, то на границе жидкостей может появиться красное кольцо в результате изменения мочевых пигментов под влиянием азотной кислоты. Иногда мутное кольцо появляется выше границы. Такое явление может зависеть от выпадения осадков кислых, мочекислых солей, или муцина мочи.

2. Обнаружение сахара с помощью качественной пробы Троммера

В пробирку налить 2-3 мл мочи, прибавить равный объем 10%-ного раствора едкого натра и затем осторожно по каплям 5% -ный раствор сернокислой меди до появления небольшой, неисчезающей при взбалтывании голубой мути - гидрата окиси меди. Затем жидкость в верхней части пробирки нагреть до кипения. Реакцию на сахар считать положительной при появлении желтого осадка гидроксида меди (I) или красного осадка оксида меди (I) не позже, чем через минуту после прекращения нагревания.

3. Обнаружения ацетона

В пробирку налить 2-3 мл мочи, прибавить несколько капель 10%-ного раствора едкого натра и затем по каплям раствор йода в йодистом калии. При наличии ацетона жидкость делается мутной, вследствие выделения бледно-желтого кристаллического осадка йодоформа, обладающего характерным запахом:

4. Обнаружение желчных пигментов с помощью пробы Гмелина

В пробирку налить 1-2 мл концентрированной азотной кислоты и осторожно прибавить из пипетки по стенке пробирки исследуемую мочу так, чтобы жидкости не смешивались; в месте их соприкосновения образуется ряд цветных колец. Характерным для желчных пигментов является образование верхнего зеленого кольца и одновременно с ним синего или фиолетового. Нижерасположенное желтое и красное кольца получаются и с нормальной мочой. Проделав все указанные реакции с образцом исследуемой мочи, сделайте вывод о состоянии здоровья животного.

Вопросы для самоконтроля

1. Объясните химизм качественной пробы Троммера на сахара. 2. Что происходит с белком, содержащимся в моче, при кипячении, с добавлением концентрированной азотной кислоты?

Литература

1. Болдырев А.С. Физколлоидная химия. - М., 1983.

2. Кононский А.И. Биохимия животных. - М., 1993.

3. ЛенинджерЛ. Основы биохимии. -М'., 1985.

4. Малахов А.Г., Вишняков СИ. Биохимия сельскохозяйственных животных. - М., 1984.

5. Николаев А.Я. Биологическая химия. - М., 1989.

6. Савронь Е.С. Биохимия животных. - М, 1966.

7. Савронь Е.С. и др. Практикум по биохимии животных. - М., 1967.

8. Фердман Д.А. Биохимия. - М. 1966.

9. Нечеткий А.В. и др. Биохимия животных. - VI.,1982.

10. Уайт А. и др. Основы биохимии. - М„ 1985.

Размещено на Allbest.ru