Патологический процесс вызывается патогенным действием разных микроорганизмов: Bact. coli, Bact. puogenes, Bact. рyocyaneus, Staphylococcus et Streptococcus pyogenes.

У больных коров резко снижается или прекращается молокоотдача. Вначале молоко мало изменено, но уже на второй или третий день из соска с трудом выдавливается несколько капель сыворотки или гнойного экссудата с примесью нитей фибрина. Когда фибринозное воспаление обязано своим происхождением катаральному, в молоке образуются хлопья, оно приобретает вид гноя.

Пораженная четверть вымени увеличивается в объеме, становится плотной и болезненной, иногда в ней обнаруживают уплотненные очаги. При пальпации цистерны и ее основания слышится характерная крепитация от сдавливания фибринозных отложений. Надвымянные лимфатические узлы увеличиваются. Общее состояние животного подавленное, температура тела повышается до 40-41°С.

Прогноз течения заболевания сомнительный, так как патологический процесс осложняется развитием обширных гнойных очагов или гангреной вымени, метастазами в легких, почках и печени. После излечения в железе остаются одиночные или множественные узлы, располагающиеся преимущественно у основания соска и представляющие собой инкапсулированные очаги воспаления. Молочная продуктивность полностью не восстанавливается.

Гнойный мастит протекает в трех формах: гнойно-катаральной, абсцессов вымени и флегмоны вымени.

Гнойный мастит, как правило, развивается из катарального воспаления молочной цистерны, молочных ходов или альвеол вследствие проникновения инфекции через сосковый канал. Возбудителями гнойного воспаления являются различные микробы, чаще стрептококки и стафилококки. В лечебной практике приходится иметь дело преимущественно со стрептококковым воспалением вымени.

Острое гнойно-катаральное воспаление вымени сопровождается полной агалактией или резким уменьшением удоев. Из пораженной четверти железы молоко почти не выделяется, или оно становится водянистым, соленым или горьким, содержит хлопьевидные сгустки, нередко приобретает красноватый оттенок, местная температура повышена, на непигментированной коже ярко выступает краснота. Пораженная четверть вымени увеличена, отечна, болезненна при ощупывании во время доения. Надвымянный лимфатический узел пораженной стороны увеличен. Заметны признаки общего угнетения (отсутствие аппетита, учащение пульса и дыхания), температура тела повышается до 41°С.

Через 3-4 дня явления острого воспаления ослабевают, патологический процесс ослабляется или принимает хроническую форму.

Хроническая форма гнойно-катарального мастита развивается из острой или нарастает постепенно. Иногда (при агалактии) острый процесс остается незамеченным, так как общая реакция организма, наблюдающаяся в начале заболевания, расценивается как заболевание других органов - желудка, кишечника или легких. При хроническом течении заболевания явления острого воспаления ослабевают, местная и общая температура тела снижается, вымя становится безболезненным, но молоко остается жидким, желтоватого цвета, слизистым и неприятным на вкус. Молочная продуктивность коровы с каждым днем снижается или молоко прекращает выделяться.

Геморрагический мастит возникает на почве катарального или серозного воспаления и характеризуется кровоизлияниями в толщу ткани, просвет альвеол и молочных ходов.

Часто геморрагический мастит служит симптомом общего поражения организма септического или пиемического характера.

Процесс начинается в первые дни послеродового периода и протекает остро. Поражается половина или вся молочная железа. Молоко приобретает водянистую консистенцию, красноватый цвет, содержит мелкие хлопья. Наблюдается сильный отек пораженного участка. Непигментированная кожа покрывается красными или багровыми пятнами, местная температура повышается, вымя болезненно, лимфатические узлы увеличены.

Геморрагический мастит сопровождается общим угнетением, аппетит уменьшается или отсутствует, температура тела поднимается до 41°С. Если процесс ограничивается местным воспалением животное в течение 7-10 суток выздоравливает.

6. Изменения качества молока при мастите

При мастите в вымени возникает расстройство лимфообращения, усиливается проницаемость капиллярных мембран и сосудов, степень которой зависит от интенсивности воспалительной реакции и биологических свойств возбудителя.

Вследствие уменьшения в молоке больных маститом коров казеина, кальция и других веществ нарушается осмотическое давление, в результате чего в молочную железу проникает большое количество плазмы крови.

В молоке увеличивается количество сывороточных белков (альбуминов, глобулинов), хлоридов, клеточных элементов, лейкоцитов и наблюдается сдвиг реакции молока в начале заболевания в щелочную сторону. При переходе в хроническую форму реакция молока становится нейтральной и иногда слабокислой.

Расстройство функций железистой ткани молочной железы приводит к уменьшению удоя. Секреторные нарушения паренхимы вымени выражаются в физико-химических изменениях молока, повышается его щелочность, появляются сгустки, хлопья, кровь, гной.

При нормальном функционировании молочной железы в молоке содержатся соматические клетки. Они формируются из эпителиальных клеток слизистой оболочки соскового канала, молочной цистерны, молочных ходов, а также из элементов крови - лейкоцитов и эритроцитов.

На количество соматических клеток оказывают влияние физиологические процессы, происходящие в молочной железе, возраст животного, стадия лактации, сезон года, генетические и породные факторы.

Однако, количество соматических клеток значительно увеличивается при возникновении патологических изменений в молочной железе при мастите. Через сосуды воспаленной ткани проникают лейкоциты, составляющие до 95% соматических клеток молока.

Известно, что молоко, полученное из здоровых четвертей вымени, содержит до 500 тыс. соматических клеток в 1 мл, а из больных маститом четвертей вымени - до нескольких десятков миллионов клеток.

Установлено, что при субклиническом мастите количество соматических клеток увеличивается в 20 раз, а при клиническом проявлении заболевания в 100 раз. При субклиническом мастите молоко не имеет видимых изменений, отличается от молока здоровых животных только по химическому составу и физическим свойствам (табл. 1,2,3 и 4). Так, например, плотность маститного молока варьирует от 1,016 г./см³ до 1,021 г./см³ при температуре 20°С.

1. Состав молока из здоровых и больных маститом четвертей вымени

Показатель	Здоровые четверти	Больные четверти
		нарушение секреции	субклинический мастит
Молочный жир, %	3,85	3,94	3,84
Общий белок, %	3,07	3,20	3,32
Казеин, %	2,40	2,38	2,17
Растворимые белки (альбумин + глобулин), %	0,67	0,82	1,14
Лактоза, %	4,65	4,32	3,20
Хлор, мг/мл	1210	1480	2030
Кальций, мг/мл	1188	1140	1008
Сухое вещество, %	12,27	12,23	11,65
СОМО, %	8,46	8,27	7,81
Кислотность,°Т	16,25	14,65	11,20
Плотность, град	22,70	26,98	25,10
Количество соматических клеток в 1 мл молока, тыс.	237	1820	8160
Количество лейкоцитов, тыс. в 1 мл молока	163	1440	6750
Наличие патогенной микрофлоры, %	6,8	25,6	66,2

Вязкость молока из воспаленных долей вымени сразу после доения составляет 1,93•10^-3 Н/м, при норме 1,8•10^-3 Н/м, температура кипения анормального молока - 100,1°С, а замерзания - минус 0,32°С.

2. Физико-химические свойства молока из здоровых и больных маститом четвертей вымени

Показатель	Четверти вымени
	здоровые	больные
рН	6,54-6,51	6,88-7,19
Кислотность,°Т	16	5-13
Плотность,°А	1,030	1,024-1,025
Сухие вещества, %	13,8	До 10,8
Лейкоциты, клеток в 1 мл	до 500000	свыше 500000
Жир, %	5,3	1,5-3,5
Фосфолипиды, мг/г жира	3,55	4,78
Белок общий, %	3,6	3,6
Казеин, %	2,7	1,9-2,6
Альбумин и глобулин, %	0,9	1,35-3,1
Лактоза, %	4,3	1,5-3,8
Гликопротеиды, мг%	63,0	100,5
N-ацетилнейраминовая кислота, мг%	27,8	33,05
Зола, %	0,8	1,0
Хлор, %	8,2	22,2
Хлорное число	1,5	5,7-15,0
Кальций, мг%	226	123,9
Натрий, мг%	61,6	98,9

Электропроводность маститного молока составила 57•10^-2 см/м^-1 при норме 46•10^-2 см/м^-1. При определении рН молока наблюдалось резкое смещение в щелочную сторону, величина рН составила 6,98-7,02. Кислотность маститного молока колебалась в пределах 23-24°Т.

При субклиническом мастите молоко чаще видимых изменений не имеет, но могут содержаться мельчайшие частицы коагулированного белка, обнаруживающиеся только при фильтрации. Для молока, полученного от больных животных, характерно также снижение массовой доли жирных кислот и увеличение содержания низкомолекулярных и свободных жирных кислот.

Изменение белкового состава в молоке маститных коров характеризуется уменьшением количества аминокислот (глутаминовая кислота, тирозин, валин, метионин, фенилаланин, лейцин, изолейцин).

Содержание общего белка возрастает из-за увеличения соматических клеток в молоке (свыше 500 тыс./мл) и за счет увеличения сывороточных белков. В ряде случаев количество белка в молоке не изменяется, но количество казеина в нем снижается, а количество сывороточных белков возрастает. Содержание отдельных фракций казеина и сывороточных белков тоже изменяется. Количество б- и в-казеина уменьшается, а каппа-казеина, альбумина и иммуноглобулина значительно увеличивается.

3. Физико-химические свойства молока коров при мастите

Показатель	Молоко коров
	здоровые	больные
Кислотность, °Т	16-18	23-24
рН	6,6-6,8	6,98-7,02
Плотность, г/см3 (при 20°С)	1,027-1,032	1,016-1,021
Вязкость, Па•с	1,8•10-3	1,93•10-3
Температура замерзания,°С	-0,54	0,32
Температура кипения,°С	100,2	100,1
Поверхностное натяжение, н/м	5•10-3	5,63•10-3
Электропроводность, см/м -1	46•10-2	57•10-2

Титруемая кислотность выражается в градусах Тернера (°Т) - количество миллилитров 0,1 н раствора гидроокиси натрия (калия), необходимое для нейтрализации 100 мл или 100 г. продукта (1°Т соответствует 0,009% молочной кислоты). Кислотность свежевыдоенного молока составляет 16-18°Т. Титруемая кислотность молока обусловливается наличием белков (4-5°Т), кислых солей (около 11°Т) и двуокиси углерода (1-2°Т). Данный показатель зависит от состояния здоровья, кормового рациона, породы, периода лактации. Титруемая кислотность является критерием оценки свежести и натуральности молока.

рН - активная кислотность - концентрация свободных ионов водорода в молоке, численно равна отрицательному десятичному логарифму концентрации водородных ионов (Н⁺), выраженной в моль/л. рН цельного молока - в среднем 6,7.

Плотность - масса молока при 20°С, заключенная в единице объема (г/см³), колеблется в пределах 1027-1038. Данное свойство молока обусловлено плотностью его компонентов: молочного жира, лактозы, белков, солей, сухого остатка молока, сухого обезжиренного остатка, лимонной кислоты. Зависит плотность молока от температуры и химического состава. Сразу же после доения плотность молока ниже по сравнению с плотностью, определенной через несколько часов, за счет повышенного содержания газов в молоке и понижения плотности жира и белков в результате температурного расширения.

На плотность может влиять кормление животных, болезни. Она изменяется при фальсификации - понижается при добавлении воды, повышается при снятии сливок или разбавлении обезжиренным молоком.

По величине плотности судят о натуральности молока.

Электропроводность молока обусловливается главным образом ионами С1^-, Na⁺, K⁺ и зависит от состояния здоровья животных, периода лактации, породы.

При маститах электропроводность молока животных повышается, при фальсификации молока водой - понижается.

В молоке при мастите уменьшается общее количество сухих веществ, содержание молочного жира, казеина, лактозы, солей кальция, калия, фосфора, магния, витаминов. Наряду с этим увеличивается содержание водорастворимых фракций белка (альбумина, глобулина), хлора, натрия, ферментов (каталазы, редуктазы, фосфатазы).

Изменение содержания лактозы - один из основных показателей воспалительного процесса вымени. Этот показатель в маститном молоке уменьшается на 10-20% и более.

4. Состав молока коров при заболевании маститом

Показатель	Молоко коров
	здоровые	больные
Лактоза, %	4,7	2,84-3,45
Жир, %	4,2	3,64-3,73
СОМО, %	0,091	0,341
Общий белок, %, в том числе казеин	3,6 2,8	3,56-3,79 1,9-2,3
Сывороточные белки	0,8	1,1-1,4
Сухое вещество, %	13,1	11,62-12,90
Число соматических клеток, тыс./мл	100-300	200-1000
Хлорид натрия, %	0,091	0,147

Жирность молока коров при мастите ниже в среднем на 5-12%. Величина жировых шариков заметно снижается (с 4 до 2 мкм), что отрицательно влияет на результат сепарирования молока и сбивания сливок. Однако этот показатель подвержен значительным колебаниям и сам по себе не является признаком субклинического мастита.

Содержание сухого обезжиренного молочного остатка в молоке коров с субклинической формой заболевания уменьшается на 3-13%.

Содержание минеральных веществ в молоке коров, имеющих очаговое поражение вымени, изменяется по-разному.

Так, количество натрия и хлора в среднем увеличивается на 25-30%, а фосфора, кальция - уменьшается на 20-25%. В то же время возрастает содержание фосфолипидов, наблюдается снижение количества витаминов (особенно тиамина, рибофлавина и аскорбиновой кислоты). В молоке больных животных активизируются ферменты. Повышается активность каталазы, липазы, редуктазы, фосфотазы, оксидазы. Кислотность в таком молоке уменьшается на 5-10°Т, а рН иногда увеличивается на 0,7. Кроме того, имеет место снижение титра лизоцима М и электропроводимости молока. Из-за нарушения равновесия между кальцием и фосфором, связанным с казеином, понижается термоустойчивость молока.

Установлено, что молоко маститных коров задерживает развитие многих производных штаммов молочнокислых бактерий, ацидофильной и болгарской палочек, молочных и сливочных стрептококков. Отрицательные свойства маститного молока до некоторой степени снижаются при смешивании с молоком здоровых животных, однако качество выработанных молочных продуктов ухудшается. Кефир, творог и сыр, приготовленные из молока, имеющего в составе 25% примеси маститного, отличаются низкими вкусовыми свойствами, рыхлой консистенцией и характеризуются длительным процессом созревания. При использовании молока-сырья, содержащего от 6 до 12% примеси маститного молока готовые сыры имеют низкую органолептическую оценку и непригодны для реализации.

В результате ослабления жизнедеятельности бактерий заквасок изменяется соотношение белковых фракций и протеолиза белков. Получается рыхлый, слабый сгусток, непригодный для выработки высококачественного сыра. Для предупреждения попадания в общий удой примеси маститного молока, необходимо вести раздельное доение здоровых и больных коров.

Технологические качества молока коров, больных маститом, снижаются вследствие:

- увеличения в нем количества хлора и натрия;

- уменьшения содержания обезжиренных сухих веществ;

- снижения способности молочных белков к свертыванию (инертность сычужного фермента, замедленное выделение молочной сыворотки);

- появления в молоке ингибиторов в результате терапевтических мероприятий.

При обработке и переработке маститного молока в нем происходят нежелательные изменения. Так, повышенное содержание хлора и натрия приводит к изменению вкуса (появляется соленый и горький привкус).

Понижается устойчивость молока к нагреванию (вследствие повышенного содержания сывороточных альбуминов и иммунных глобулинов). Присутствие маститного молока отражается на качестве сухого порошкового продукта. При производстве сгущенного молока пониженная его устойчивость к нагреванию может привести к спонтанному свертыванию. В этом процессе одновременно наблюдается также протеолиз, протекающий под влиянием микроорганизмов, содержащихся в молоке.

Молоко животных, больных субклиническим маститом, медленно свертывается сычужным ферментом (время свертывания увеличивается на 25-80%), полученный сгусток имеет менее плотную консистенцию и качество готового продукта ухудшается. При технологической переработке молока коров, больных маститом, количество выработанных продуктов сокращается вследствие снижения способности молочных белков к свертыванию из-за понижения активности сычужного фермента.

Маститное молоко оказывает отрицательное действие при производстве твердых и мягких сыров. Инертность сычужного фермента в маститном молоке объясняется пониженным содержанием в нем кальция, низкой кислотностью и повышенным количеством составных частей сыворотки. При замедленном и неполном сычужном свертывании задерживается отделение сыворотки. В этом случае в сырной массе образуется повышенное количество молочной сыворотки, что влияет на последующие процессы брожения, которые могут идти в нежелательном направлении. Переработка маститного молока на масло приводит к отрицательному воздействию на качество продукта и к появлению в нем постороннего запаха.

7. Методы диагностики мастита

Для профилактики маститов и предупреждения получения молока низкого качества необходимо своевременно проводить диагностические исследования.

Как отмечено выше, по клиническим признакам маститы у коров подразделяют на серозный, катаральный, фиброзный, гнойный и геморрагический. Показатели дифференциальной диагностики клинически выраженного мастита представлены в таблице 5.

Субклинический мастит диагностируют путем исследования молока с одним из быстрых диагностических тестов (БМТ), используя при этом пробу молока с димастином, мастидином, мастотестом Воронежским, или с помощью анализатора Экотест-303 и маститоизмерителя фирмы «Драмински». Действие быстрых маститных тестов основано на выявлении увеличенного количества лейкоцитов и изменения рН молока.

Более эффективно исследовать цистернальное (первые порции) и паренхимное (последние порции) молоко. Исследования проводят обычно на молочно-контрольных пластинах (МКП-1 или МКП-2), которые имеют по четыре (числу четвертей вымени) лунки с углублением, объемом 1 мл или 2,5 мл.

5. Дифференциальная диагностика клинически выраженного мастита у коров

Мастит	Клиническое состояние	Секрет пораженной четверти вымени
	животного	вымени	четверти и сосков вымени
Серозный	Часто, без изменений, реже легкое угнетение, температура тела нормальная или незначительно повышена	Кожа напряжена, непигментиро-ванные участки гиперемированы, температура повышена, болезненность значительная	Поражены чаще половина или всё вымя, оно увеличено, неравномерно уплотнено, часто сосок местами увеличен, отечный	Вначале внешне не изменен, а затем жидкий, часто с хлопьями
Катаральный	Без видимых изменений, иногда легкое угнетение, аппетит понижен, температура тела повышена	Кожа без изменений, температура изредка незначительно повышена, болезненность слабо выражена или отсутствует	Поражена одна четверть, она увеличена или местами уплотнена, особенно у основания; сосок без изменений, реже отечный, у основания очаги флюктуации	Жидкий, водянистый, серовато-белого цвета с примесью желтоватых или беловатых хлопьев, реже выделяется небольшое количество желтоватой сыворотки с хлопьями или густая сметано-образная масса
Фибринозный	Угнетенное, аппетит понижен или отсутствует, температура тела повышена, хромота, исхудание	Кожа напряжена, непигментированные участки гиперемированы, температура повышена, четверть вымени болезненна	Поражена одна четверть; она резко увеличена, уплотнена с наличием отдельных плотных узлов и очагов размягчения, сосок отечный, иногда отмечают крепитацию	С крошками фибрина, реже густой экссудат с преобладанием хлопьев, могут быть примеси крови, сгустки
Гнойно-катаральный	Угнетение, отказ от корма, температура тела повышена, хромота	Кожа напряжена, непигментированные участки гиперемированы, температура кожи повышена, болезненность выражена	Пораженная четверть вымени увеличена, местами уплотненные очаги; сосок иногда отечный	Слизисто-гнойный, чаще густой с хлопьями белого или желтого цвета, может быть жидким, желто-красного цвета
Абсцесс вымени	Угнетенное	Кожа на месте очага напряжена, отечна, гиперемирована, горячая, болезненная	Пораженная четверть неравномерно увеличена, прощупываются флюктуирующие, напряженные очаги разной величины; при глубоком расположении абсцессов четверть увеличена, флюктуация слабо выражена	Вначале молоко не изменено, но его мало; затем оно становится водянистым, серовато-белого цвета с примесью гноя, казеина; вид секрета зависит от количества абсцессов и места их вскрытия (через кожу или просвет молочных ходов)
Флегмона	Сильно угнетенное, температура тела значительно повышена, аппетит пони-жен или отсутствует, хромота	Кожа напряжена, отечна, равномерно гиперемирована, температура высокая, болезненность значительная	Пораженная четверть значительно увеличена; сильно отечный сосок	Секрета мало, он водянистый, сероватого цвета с примесью хлопьев, нередко кровянистый с ихорозным запахом
Геморрагический	Угнетенное, температура тела значительно повышена, аппетит понижен	Кожа отечна, равномерно гиперемирована, температура повышена, болезненность значительная	Чаще поражены половина или все вымя; пораженная часть равномерно увеличена и уплотнена; сосок отечный	Секрета мало, он водянистый, красноватого цвета, с хлопьями и сгустками крови

Субклинический мастит диагностируют путем исследования молока с одним из быстрых диагностических тестов (БМТ), используя при этом пробу молока с димастином, мастидином, мастотестом Воронежским, или с помощью анализатора Экотест-303 и маститоизмерителя фирмы «Драмински». Действие быстрых маститных тестов основано на выявлении увеличенного количества лейкоцитов и изменения рН молока.

Более эффективно исследовать цистернальное (первые порции) и паренхимное (последние порции) молоко. Исследования проводят обычно на молочно-контрольных пластинах (МКП-1 или МКП-2), которые имеют по четыре (числу четвертей вымени) лунки с углублением, объемом 1 мл или 2,5 мл.

Методы выявления маститов у коров можно разделить на следующие группы:

- физико-химические,

- цитологические,

- микробиологические.

Физико-химические методы диагностики мастита. Используются как вспомогательные наряду с другими тестами. К ним относятся индикаторные методы, каталазная проба, определение хлорсахарного числа, плотности и электропроводимости молока, а также опсонофагоцитарная реакция лейкоцитов молока.

Индикаторные методы чаще используют при определении рН молока. Они основаны на изменении цвета индикатора при тех или иных изменениях рН молока. Наиболее чувствительными являются: бромтимоловый синий, бромкрезоловый пурпурный, феноловый красный, нейтральный красный, крезоловый и другие. Молоко здоровых коров имеет слабокислую реакцию (рН 6,3-6,9). При заболевании коров маститом реакция молока в большинстве случаев становится щелочной (рН 7,0 и выше) и очень редко кислой (рН 6,0 и ниже). Кислая реакция молока также бывает после отела, а щелочная - у стародойных и у коров, находящихся в запуске.

Для контроля за состоянием молочной железы руководствуются «Методическими указаниями по диагностике, лечению и профилактике маститов у коров».

Для диагностики скрыто протекающих маститов используют 10%-ный раствор мастидина или 10%-ный раствор мастотеста Воронежского, или 20%-ный раствор сульфанола (который перед анализом разводят водой до 10%-ной концентрации), или 5%-ный раствор димастина, мастоприма или 4%-ный раствор гидроокиси натрия (проба Уатсайда), а также пробу отстаивания.

Все диагностикумы содержат поверхностно-активные вещества, которые, взаимодействуя с лейкоцитами, образуют сгусток, а индикатор изменяет цвет в зависимости от реакции среды (рН).

Проба с димастином является одним из широко применяемых методов исследования молока с целью выявления субклинического мастита.

Для диагностики заболевания необходимы пластинки с углублениями, пипетки на 1 мл, стеклянная палочка, 5%-ный раствор димастина (приготовленный на дистиллированной воде), автомат-пипетка на 1 мл.

При исследовании в луночки пластинки от каждой доли вымени наливают по 1 мл молока последней порции удоя, добавляют по 1 мл 5%-ного раствора димастина. Содержимое луночки перемешивают стеклянной палочкой. Молоко, полученное от коров, больных маститом, образует плотный тягучий сгусток ярко-красного цвета. Если образуется сгусток желеподобной консистенции красного цвета, то считают, что молоко получено от коров, подозрительных по заболеванию маститом. Нормальное молоко остается однородным, цвет его оранжево-красный.

Проба с мастидином. Пробу проводят так же, как с димастином.

Реакцию учитывают главным образом по густоте желе. Положительная реакция - сгусток похож на белок куриного яйца, фиолетового или

темно-сиреневого цвета, отрицательная - однородная жидкость или слабый сгусток светло-сиреневого или дымчатого цвета. В таком же порядке исследуют молоко другими диагностиками (мастограм, сульфанол).

Проба с отстаиванием. В пробирку наливают 10-15 мл молока, отстаивают в течение 16-18 ч на холоде и на второй день учитывают реакцию. В молоке коров, больных маститом, на дне пробирки образуется осадок с желтоватым или синеватым оттенком высотой 0,1 см и более, а также уменьшается слой сливок. Молоко от здоровых коров осадка не образует. Если проба с отстаиваиванием дает сомнительные результаты, то для уточнения диагноза, молоко направляют на исследование в ветеринарную лабораторию, где определяют число лейкоцитов, активность каталазы и лизоцима, исследуют бактериологически.

Каталазная проба. Каталаза содержится в молоке здоровых коров в небольшом количестве, при воспалительных процессах ее содержание увеличивается. Данная проба основана на определении в молоке увеличенного содержания фермента каталазы, которая продуцируется клетками тканей, соматическими клетками, а также некоторыми микроорганизмами. Наибольшее количество каталазы вырабатывают лейкоциты. Проба основана на принципе расщепления каталазой перекиси водорода с выделением газообразного кислорода. Ставят ее в специальных каталазных или градуированных пробирках. Известны и более упрощенные, ускоренные модификации пробы в виде смешивания молока и раствора перекиси водорода в углубленной черной пластинке или обычных пробирках, где в положительных случаях сразу после перемешивания появляется пенообразование.

Заслуживает внимания очень простой метод каталазной пробы путем погружения в раствор перекиси водорода бумажных дисков, смоченных исследуемым молоком. По времени обнаружения диска на поверхности смеси судят об активности каталазы или о количестве соматических клеток в молоке. Каталазная проба является чувствительным тестом, хотя в ряде случаев, обнаруживается положительная реакция с молоком здоровых коров.

Определение хлорсахарного числа. Хлоросахарное число - это соотношение хлоридов и лактозы (молочного сахара). В нормальном молоке в середине лактации содержится около 0,07% хлоридов и 4,5-4,7% лактозы. Наиболее приемлемым показателем является число Кестлера (процент хлоридов, умноженный на 100 и деленный на процент лактозы). Для нормального молока это число составляет 2 или меньше, а для анормального молока превышает 3.

Лактоза и хлориды имеют важное значение в регулировании осмотического давления молока. Данный показатель является величиной постоянной и характеризует состояние физиологических процессов в организме. Уровень осмотического давления молока зависит от количества растворимых в нем молочного сахара и хлористых солей.

При воспалительных процессах вымени вследствие нарушения секреции в молоке значительно уменьшается количество лактозы, которая не поступает в готовом виде из крови, а синтезируется в молочной железе.

В результате снижается осмотическое давление молока. Так как молоко и кровь изотоничны, то для выравнивания осмотического давления из крови в молоко усиленно начинают диффундировать соли, главным образом - хлористый натрий. Содержание лактозы в молоке при воспалительных процессах в молочной железе является первичным, а солей - вторичным. Границы содержания хлоридов в нормальном молоке - 0,05-0,12%, а в анормальном (при мастите) - 0,30% и более. Содержание лактозы в молоке при ранней форме мастита всегда ниже нормы (в среднем 1,5%).

Массовую долю лактозы можно определить с помощью препарата ЛУМ. Он представляет собой порошкообразную смесь, в состав которой входит лимоннокислый натрий (50%), углекислый натрий безводный (25%) и сернокислая медь (25%). Перед исследованием готовят 4%-ный раствор препарата ЛУМ на дистиллированной воде. Раствор имеет синее окрашивание. В пробирки наливают по 2 мл раствора, добавляют по 2 капли исследуемого молока, перемешивают и ставят в кипящую водяную баню на две минуты. По истечении этого времени пробирки вынимают и учитывают результаты по цвету жидкости. Для сравнения цвета оставляют одну контрольную пробирку. Если цвет реактива с молоком после выдерживания в водяной бане остается синим, молоко содержит в среднем 3% лактозы, при темно-зеленом (сине-зеленом) цвете - 3,45%, при зеленом - 4,4%, а при желто-зеленом или салатном цвете - выше 5%.

Определение плотности молока проводят спустя 2 ч после дойки при температуре 20-25°С. Для этого молоко сначала перемешивают, а затем наливают в стеклянный цилиндр и при помощи ареометра, который погружают в цилиндр, определяют плотность. Нижней границей нормы принята величина 1,027 г./см³. При заболевании коров маститом плотность молока обычно снижается.

Опсоно-фагоцитарная реакция лейкоцитов молока (ОФР) отражает состояние организма животного, ее используют для уточнения диагноза ранней формы мастита. Для постановки реакции готовят взвесь суточной культуры, содержащую 1 млрд. сапрофитного стафилококка (подогретую до 80°С в течение 30 мин), 0,5 мл взвеси антигена смешивают с 0,5 мл исследуемого молока. Смесь инкубируют в термостате в течение 30 мин, затем делают мазки, высушивают их и окрашивают по Романовскому-Гимза 10 мин. Подсчитывают 50 лейкоцитов и количество находящихся в них бактерий. Учитывают результат по количественному показателю фагоцитоза (АФ) и качественному показателю (ИФ). АФ равен количеству участвующих в фагоцитозе лейкоцитов, деленному на число подсчитанных лейкоцитов и умноженному на 100. ИФ равен количеству поглощенных бактерий, деленному на количество лейкоцитов. Оценка показателей ОФР производится по полученным результатам: при низком уровне фагоцитоза ИФ не превышает 1,0, АФ - 52,0; при среднем ИФ - 1,0-1,5, АФ - 52,0-62,0; при высоком уровне ИФ - 1,5-2,4; АФ - 62,0-79,8.

Для диагностики маститов во многих странах мира (Япония, Голландия, Германия, Англия, Швеция) применяется приборный метод, основанный на изменении электропроводимости молока. Известно, что электропроводимость молока связана с содержанием в нем ионов натрия, калия, хлора и других химических элементов. Японская фирма «Искра» разработала систему автоматического детектирования мастита «Чекгейт». Данный детектор устанавливают перед дойкой в доильный аппарат; вторую часть системы (приборный блок со световой индикацией) помещают на видном для мастера машинного доения месте. Индикаторные лампочки загораются в случае, если имеются соответствующие изменения в составе молока; другие две лампочки сообщают об окончании выделения молока по четвертям.

Цитологические методы диагностики мастита. Методы основаны на определении количества соматических клеток в молоке. Они делятся на прямые и непрямые.

В состав соматических клеток входят лейкоциты (80-85%), эритроциты, клетки плоского, цилиндрического и кубического эпителия молочной железы, колостральные тельца (15-20%). В 1939 году Уайтсайд заметил, что при добавлении к молоку коровы, больной маститом, едкого натра, после помешивания образуется густая тягучая масса. Открытие послужило основанием к использованию поверхностно-активных веществ для косвенного определения количества соматических клеток в молоке.

Проба Тромсдорфа. Один из давно известных методов обнаружения повышенного количества соматических клеток в молоке. Сущность ее заключается в осаждении повышенного содержания лейкоцитов и других клеточных элементов при центрифугировании 10 мл молока, после чего по объему осадка судят о наличии или отсутствии заболевания.

Проба Уайтсайда основана на смешивании 4%-ного раствора едкого натра с молоком в соотношении 1:5. При наличии воспалительных процессов в вымени образуется тягучая густая масса с хлопьями.

В настоящее время широко применяются быстрые маститные тесты из поверхностно-активных веществ, которые отражают количество соматических клеток в молоке. Действующим началом являются поверхностно-активные вещества типа алкиларилсульфатов и алкиларилсульфонатов. За рубежом предложен целый ряд таких реактивов: мичиганский маститный тест, бернбург, стара загора, софия и другие.

В нашей стране используются следующие препараты: димастин, мастидин, маститодиагност, универсал. Желеобразный сгусток образуется в результате разрушения поверхностно-активными веществами ядер клеток, содержащихся в молоке. Переходящая при этом в раствор нативная дезоксирибонуклеиновая кислота придает ему вязкость. Учет результатов проб проводится по характеру образования желеобразного сгустка.

Прямой подсчет соматических клеток считается наиболее точным показателем диагностики мастита. Международная молочная федерация приняла решение считать нормальным наличие в 1 мл сборного молока до 500 тыс. соматических клеток.

Метод Прескотта и Бритта считается арбитражным в международном масштабе, он является контрольным при автоматическом подсчете соматических клеток в молоке. Он основан на свойстве ядер соматических клеток ярко окрашиваться специфическими красителями. После окрашивания (по Романовкому-Гимза) и высушивания мазок молока микроскопируют под иммерсионным объективом. В каждом мазке просматривают 100 полей зрения. Подсчитывают число клеток, умножают его на коэффициент для пересчета с учетом объектива и окуляра и определяют количество клеток в 1 мл молока.

Камерный метод заключается в подсчете соматических клеток в камере Горяева. Сначала необходимо растворить жировые шарики этиловым спиртом или формалином, синтанолом ДС-10 и покрасить пробу, затем под микроскопом подсчитывают количество соматических клеток во всей камере.

Расчет числа клеток проводят по формуле:

Х = (1000•50а)/ V,

где Х - количество соматических клеток в 1 мл молока; 1000 - множитель, приводящий результат к объему 1 мл; 50 - разведение молока; а - сумма клеток в определенном объеме камеры; V - объем камеры.

Подсчет клеток с помощью прибора Культера. Данный прибор представляет собой электронный счетчик с капиллярной трубкой диаметром 100 мкм, подсчитывающий объем молока 0,1 или 0,5 мл (модель F, FN). Сначала проводят калибровку согласно инструкции изготовителя с применением стандартной суспензии частиц. Калибровку проводят по нескольким образцам молока, содержащего от 300 тыс. до 1 млн. клеток в 1 мл, что предварительно определяется под микроскопом. Модельный диаметр соматических клеток должен находиться между 5,45 и 6,25 мкм (рабочий режим счетчика). Реактив для подсчета соматических клеток, в состав которого входят вещества, способствующие растворению жировых шариков (синтанол ДС-10) и делающие раствор электролитичным (хлористый натрий), пропускают через стеклянный фильтр. Подсчет клеток в смеси молока с эмульгирующим электролитом проводят в пределах одного часа при температуре 15-25°С.

Во время подсчета электрод, погружающийся в трубку измерительного прибора, должен находиться ниже поверхности жидкости.

К 9,9 мл синтанола добавляют 0,1 мл фиксированного формалином молока. Образец подогревают при 80°С в течение 10 мин в водяной бане и охлаждают. После этого под трубку подводят стаканчик с 10 мл приготовленного молока. Включают прибор, предварительно поставив его на соответствующий рабочий режим. Результаты подсчета видны на табло (соматических клеток, тыс. на 1 мл молока).

Подсчет соматических клеток на приборе Фоссоматик. Метод основан на образовании флуоресцентного комплекса при взаимодействии люминесцентного красителя с ДНК ядра клетки, поэтому он является специфическим, так как подсчитываются только клетки, имеющие в своей структуре ядро. Фоссоматик - электронный прибор, предназначенный для подсчета соматических клеток в сыром и консервированном молоке.

Бактериологические методы диагностики мастита. Для бактериологического анализа молока на мастит с соблюдением правил асептики отбирают пробы из четвертей вымени, подозреваемых в заболевании. Для посева применяют обычные или элективные питательные среды. Чаще всего используется кровяной мясо-пептонный агар.

Для идентификации выросших культур изучают их свойства. Крупные выпуклые колонии, вне зависимости от наличия зоны гемолиза, ориентировочно относят к стафилококкам; мелкие росинчатые - к стрептококкам; серые и круглые колонии (блестящие и плоские) обычно указывают на рост бактерий группы кишечных палочек. Появление колоний с зеленым оттенком предполагает наличие синегнойной палочки. Слизистые гладкие или матовые колонии характерны для споровой микрофлоры, что свидетельствует о механическом загрязнении молока.

Для выделения и идентификации стрептококков применяют среды

Эдвардса, ТКТ и Карташовой. Из серологических методов идентификации микроорганизмов используется иммунофлюоресценция со специфическими сыворотками.

Для выделения из молока и идентификации стафилококков используют, главным образом, ДНК-новокаиновый агар, тесты Шермана, а БГКП - агары Эндо и Левина, а также жидкую элективную питательную среду Карташовой.

8. Ветеринарно-санитарная оценка молока при маститах

Ветеринарно-санитарная оценка молока при маститах зависит от глубины и характера болезни вымени.

Ветеринарно-санитарная оценка молока предусматривает опасность продукта и микроорганизмов, которые могут быть в сыром молоке при разных формах мастита. Возбудителями маститов чаще всего являются Str. uberia, Е. coli, Sir. agalactiae, Str. dysgalactiae, Staph. aureus, B. proteus vulgaris, B. pyogenes, В. cereus, Cl. perfingens, микроскопические грибы и другие микроорганизмы. Патогенные стафилококки, клостридии и стрептококки, содержащиеся в молоке, могут стать причиной заболевания людей ангиной, скарлатиной, отитом, пневмонией, менингитом и пищевых отравлений, так как применяемые режимы обеззараживания молока не инактивируют полностью микробные токсины. Гноеродные микроорганизмы обусловливают развитие гнойно-некротического воспаления в органах и тканях человека.

Распознавание и ветеринарно-санитарную экспертизу молока больных животных проводят комплексно. При изучении ветеринарных сопроводительных документов учитывают эпизоотическое благополучие местности и результаты исследований на скрытый мастит. При клиническом осмотре коров обращают внимание на клинические признаки, характерные для инфекционных, инвазионных и незаразных болезней. Для выявления молока, полученного от больных животных, проводят его органолептическое, физико-химическое и микробиологическое исследования.

У больных маститом животных снижается секреция молока и ухудшается его качество. Молоко, полученное от больных животных, представляет опасность для человека, поскольку может содержать возбудителей инфекционных болезней животных, бактериальные токсины, лекарственные препараты, токсичные метаболиты.

Физико-химические и органолептические показатели молока коров, больных маститом, претерпевают значительные изменения и не отвечают требованиям стандарта.

В молоке больных маститом коров уменьшается количество казеина, лактозы, жира и обезжиренного сухого вещества, снижаются плотность и способность к свертыванию. Увеличивается содержание хлора, альбумина, уменьшается диаметр жировых шариков.

При выраженной клинической картине болезни молоко часто приобретает творожистую консистенцию, синеватый или желтоватый цвет, соленый привкус, в нем могут быть хлопья, гной, слизь, кровь. Такое молоко после кипячения подлежит уничтожению. Если у коровы отмечается ограниченный одной-двумя долями мастит, то уничтожают только молоко из пораженных долей. Молоко из непораженных долей используют после кипячения для кормления животных. Такое молоко сдаивается в отдельные ведра, или другие емкости, которые моют и дезинфицируют после дойки и освобождения от молока.

При субклиническом мастите отдельных долей вымени молоко в сыром виде на пищевые цели не используется, так как в нем повышено содержание соматических клеток и микроорганизмов. Такое молоко должно подвергаться кипячению или пастеризации по режимам, определяемым ветеринарной службой или Правилами ветеринарно-санитарной экспертизы молока и молочных продуктов. Пастеризация или кипячение молока должны проводиться под контролем ветеринарных специалистов. При сдаче пастеризованного молока проверяется эффективность (соблюдение режимов) пастеризации в соответствии с нормативными документами

Для доения коров, больных маститом, используют переносные доильные ведра, которые дезинфицируют после каждой дойки. Молоко от этих коров из непораженных четвертей вымени собирают в отдельную емкость, пастеризуют при 85°С в течение 30 минут или кипятят и используют в хозяйстве для кормления животных. Молоко из пораженных четвертей вымени уничтожают после кипячения.

Для выявления животных, больных маститом, всех коров на ферме следует ежедневно подвергать клиническому осмотру во время доения и один раз в месяц исследовать пробы молока из каждой доли вымени.

9. Источники микробного обсеменения молока

Молоко - хорошая питательная среда для микроорганизмов, попадающих в него из различных источников.

Вымя коровы - основной источник микробного обсеменения молока. В молоко попадает большое количество микробов при плохом подмывании вымени коровы. Во входных отверстиях сосков содержится большое количество микроорганизмов, и если первые струйки молока не сдаивают в отдельную посуду, происходит значительное повышение бактериальной обсемененности молока. Сдаивание в отдельную посуду первых струек молока имеет большое практическое значение: по ним можно установить заболевание коров маститом (хлопья, кровь, гной). Больных животных доят в последнюю очередь, и молоко от них нельзя смешивать с общим удоем.

Кожа и волосяной покров животного, загрязненные частицами навоза, подстилки, грязи, пылью, в которых находится большое количество бактерий, являются потенциальным источником обсеменения молока. Эта микрофлора в основном представлена бактериями из группы кишечной палочки, вызывающими порчу молока и молочных продуктов. Чтобы избежать этого, необходимо регулярно чистить животных.

Подстилка может способствовать дополнительному обсеменению молока маслянокислыми и гнилостными бактериями. В связи с этим подстилку своевременно убирают со скотного двора и заменяют свежей. Недопустимо попадание в молоко частиц подстилки.

Насекомые, особенно мухи, на своем теле содержат большое количество разнообразной микрофлоры. Для борьбы с мухами необходимо использовать химические средства, устанавливать металлические сетки на окнах, содержать в чистоте скотные дворы.

Воздух молочной фермы может иметь значительное количество микроорганизмов непосредственно после уборки помещения и раздачи кормов. При оседании пыли вместе с ней в молоко могут попадать и бактерии. Поэтому уборку помещения и раздачу кормов следует проводить за 1-1,5 часа до доения или после него, а в помещении предусматривается хорошая вентиляция и проветривание.

Молочная посуда, аппаратура и фильтрующие материалы могут быть источником дополнительной бактериальной обсемененности молока, если нарушаются санитарно-гигиенические правила их использования, промывки и дезинфекции. Тщательно отслеживают качество и гигиеническое состояние фильтрующих материалов, следят за чистотой фляг, молокомеров, металлического оборудования. Необходимо применять высокоэффективные щелочные, кислые моющие или моюще-дезинфицирующие средства и технологические режимы их использования в соответствии с разработанными рекомендациями. Несвоевременная и некачественная очистка, и дезинфекция доильно-молочного оборудования отражается на здоровье вымени и снижает качество молока.

Корм может быть источником микробного обсеменения молока.

Технологические процессы доения и раздачи кормов не должны совпадать. При скармливании некачественных кормов у лактирующих коров могут возникать желудочно-кишечные расстройства, приводящие к повышению обсемененности молока.

Обслуживающий персонал и операторы машинного доения коров при несоблюдении санитарно-гигиенических правил и заболеваниях могут вызывать увеличение бактериальной загрязненности молока. Работники ферм обязаны постоянно следить за санитарным состоянием одежды и обуви.

Таким образом, вследствие нарушения технологических процессов и зоогигиенических правил производства молока, происходит снижение резистентности тканей и защитных систем вымени, и создаются условия для проникновения в молочную железу патогенной микрофлоры. Эти процессы происходят в результате действия человеческого фактора, который следует считать основным в возникновении и распространении мастита у коров, как на мелких фермах, так и на специализированных молочных комплексах.

Следует отметить, что микробные нагрузки на животных зависят от санитарно-гигиенических условий на молочных фермах.

В целях обеспечения и поддержания должного санитарного состояния территорий молочных ферм необходимо постоянно следить за их чистотой и благоустройством. Не реже одного раза в месяц следует проводить санитарный день для тщательной очистки стен, кормушек, автопоилок и другого оборудования в производственных, бытовых и вспомогательных помещениях. После механической очистки проводят дезинфекцию. Кормушки, загрязненные места стен, перегородок, столбов белят взвесью свежегашеной извести.

Ветеринарные специалисты осматривают дойных коров, обращая особое внимание на состояние вымени, сосков, и проверяют качество санитарной очистки помещений и территорий.

На всей территории, в помещениях молочных ферм проводят мероприятия по борьбе с грызунами, в соответствии с действующими инструкциями.

В молочном и доильном залах систематически очищают и белят взвесью свежегашеной извести стены, ежедневно моют полы.

Дезинфекцию проводят 2 раза в месяц. Для этого используют раствор гипохлора или гипохлорита кальция (натрия) с содержанием 3% активного хлора. При стойловом содержании животных подстилка подлежит ежедневной замене. Систематически по мере загрязнения доярки обязаны проводить чистку кожного покрова и обмывание задних конечностей дойных коров.

Коров доят строго в определенное время, предусмотренное распорядком дня фермы. Доярки и операторы машинного доения перед обработкой вымени коров обязаны вымыть теплой водой с мылом руки, вытереть их чистым полотенцем и надеть чистый комбинезон или халат и косынку.

При помощи пистолета-распылителя или специально выделенного для этой цели маркированного ведра проводят преддоильную обработку вымени. Воду в ведре меняют после каждого животного.

Обсушивают вымя чистой индивидуальной салфеткой или используют 2-4 полотенца, которые в период доения должны находиться в моюще-дезинфицирующем растворе с содержанием 0,03% активного хлора. Перед обсушиванием вымени полотенце предварительно прополаскивают в теплой воде и отжимают. После обсушивания осуществляют массаж вымени.

10. Профилактика мастита у коров

В молочном скотоводстве уделяется особое внимание здоровью вымени коров и повышению их устойчивости к маститу.

У высокопродуктивных молочных коров деятельность органов и систем направлена на обеспечение напряженного функционирования молочной железы. Поэтому профилактику мастита коров проводят путем создания комфортных условий для поддержания нормального физиологического состояния молочной железы, которое обеспечивается полноценным и качественным кормлением, надлежащими условиями содержания, подготовкой к доению, соблюдением правил машинного доения, обработкой сосков вымени после доения.

Профилактику мастита у коров начинают с выявления и устранения факторов, вызывающих его возникновение. Такими факторами могут быть нарушения правил кормления и содержания коров. Высокопродуктивным коровам в начале лактации требуется достаточное количество качественных кормов, которые обеспечивали бы потребность организма в энергии и питательных веществах, необходимых для синтеза молока.

Важным в этот период является правильное соотношение в рационе грубых, сочных и концентрированных кормов. Особое значение имеет сахаропротеиновое соотношение, которое обеспечивает лучшее использование питательных веществ корма, а, соответственно, повышает резистентность организма. Неполноценное кормление снижает устойчивость организма и тканей молочной железы к воздействию различных неблагоприятных факторов окружающей среды. Снижается резистентность при переходе с одного вида корма на другой. Это наблюдается в начале пастбищного периода и при переходе на зеленые корма. Перед выгоном на пастбище и в течение первых дней выпаса коровам целесообразно скармливать 2-3 кг сена или соломы, а зеленые корма смешивать с сеном или соломой.

С целью проведения контроля кормления коров исследуют корма на питательность и определяют их качество. Питательность корма устанавливают по результатам биохимического анализа. Качество кормов определяют органолептическим способом (цвет, запах, структура растений и зерна, чистота, ботанический состав). Кроме того, проводят химические, токсикологические и микроскопические исследования. Обмен веществ у коров контролируют с помощью анализа крови в разные периоды репродуктивного цикла на содержание белков, витаминов и минеральных веществ.

Важное место в профилактике мастита занимает своевременный и правильный запуск коров перед отелом. Наиболее распространенным является традиционный запуск коров в течение двух-трех недель. За одну или две недели перед запуском животным уменьшают дачу сочных кормов и концентратов. Запускают коров постепенно, при трехкратном доении животных сначала переводят на двукратное (6-10 дней), затем на однократное (5 дней), а в конце коров доят через один или два дня.