Гематологическая характеристика линя из узв и окуня оз. Виштынецкого

Лейкоциты. Лейкоциты - это белые кровяные тельца. Количество лейкоцитов у рыб колеблется от десятков до сотен тысяч в 1 мкл. Количество их колеблется в больших пределах и зависимости от возраста, пола, стадии половой зрелости, упитанности, заболеваний, сезона года, температуры среды. Количество лейкоцитов может резко меняться в пределах одного вида, даже у одной рыбы в разные периоды жизни [3].

Лейкоциты делятся на гранулоциты, содержащие в цитоплазме особую специфическую зернистость - нейтрофилы, эозинофилы, базофил, и агранулоциты, цитоплазма которых не содержит зернистости, гомогенная - моноциты, лимфоциты [39].

Преобладающими клетками белой крови рыб являются лимфоциты, которые составляют до 95 % всех лейкоцитов. Большее количество лейкоцитов в сосудистой крови рыб, а также довольно быстрые смены состава их свидетельствуют о большей защищенности водных организмов, в сравнении с наземными позвоночными животными, от различных патогенных микроорганизмов, которых на единицу объема воды приходится значительно больше, чем на ту же единицу объема воздуха [3, 21].

Лейкоциты живут от 2-4 до 12-15 дней. Их главная функция - защита (фагоцитарная) организма от заразных микробов и отравлений [13].

Нейтрофил. Диаметр этих клеток у рыб от 5,5 до 7,5; у высших позвоночных 9,5-14,3 мкм. Цитоплазма слабо базофильная, содержит мелкие гранулы, которые красятся (по Паппенгейму) в серо-голубой цвет, довольно часто образует выступы [21].

Ядро в виде вытянутого в большей или меньшей степени валика зависит от возраста клетки. Валик иногда S - образно изогнут или разделен на три и более сегмента, соединенные тонкими перемычками. Созревание нейтрофила сопровождается постепенным уплотнением ядра, при этом хроматин укрупняется и концентрируется у оболочки. Наконец, образуются сегменты, хорошо проявляется специфическая нейтрофильная зернистость [21].

Нейтрофилы могут содержать в своей цитоплазме различные включения в виде зернышек гликогена, мельчайших жировых капелек и др. Это показывает, что нейтрофилы имеют определенное отношение к внутреннему обмену (то же можно сказать и про другие виды зернистых лейкоцитов) [21].

Функциональная активность циркулирующих нейтрофилов постоянно меняется. Обладая максимально выраженной двигательной активностью, они периодически выходят за пределы кровотока, куда больше не возвращаются и переходят в ткань. Здесь они фагоцитируют микробов, переваривают их, а также продукты распада клеток. Основной функцией нейтрофилов является, таким образом, защита организма от инфекции и одновременно - от токсических воздействий. Нейтрофилы вырабатывают ферменты бактерицидного действия. В то же время они не способны вырабатывать антитела, но, адсорбируя их на своей оболочке, доставляют к очагам инфекции. Функция этих гранулоцитов не ограничивается фагоцитозом и переносом антител. В процессе жизнедеятельности нейтрофилы выделяют ряд веществ, обладающих широким спектром действия. Одни вещества повышают бактерицидную активность клеток, улучшают регенерацию тканей, усиливают двигательную активность. Зрелые сегментоядерные нейтрофилы являются специализированными клетками. Они служат катализаторами многих энзиматических реакций. Характерно, что нейтрофил все функции начинает выполнять относительно зрелым, на стадии палочкоядерной формы. А завершается формирование всех внутриклеточных структур, обеспечивающих жизнедеятельность клетки, лишь на этапе зрелого сегментоядерного нейтрофила. На его оболочке увеличивается количество активных групп, несущих отрицательный заряд. На поверхности клетки формируется рецепторная система, обеспечивающая хемотаксис [21].

Сегментоядерные нейтрофилы - клетки, форма ядер которых разнообразна из-за того, что число сегментов неодинаково в разных клетках. Отдельные сегменты соединяются тонкой перемычкой или лежат особо.

Юные нейтрофилы почти не отвечают на хемотаксические стимулы, они с трудом меняют свою форму, но обладают способностью к пролиферации. Как установлено, в кроветворных органах многочисленные депонированные зрелые нейтрофилы, несмотря на почти полную морфологическую завершенность, своего функционального качества не достигают. Видимо, их «дозревание» происходит при выходе в циркулирующий ток крови, где концентрируются наиболее зрелые формы. Все это указывает на то, что в крови продолжается дифференцировка нейтрофилов и что они постепенно стареют. Самыми старыми являются клетки с наиболее дольчатыми ядрами [21].

Нейтрофилы, как и другие гранулоциты, - это специализированные клетки, утратившие способность к делению.

При патологических состояниях организма нейтрофилы выделяют в кровь вещества, обладающие бактерицидными и антитоксическими свойствами, могут оказывать стимулирующее действие на процессы регенерации в различных органах и тканях, осуществляют фагоцитоз иммунных комплексов антиген-антитело [21].

Нейтрофилы, являясь наиболее реактивными клетками крови, высокочувствительны к разнообразным изменениям внутренней среды, которые сопутствуют нарушениям гомеостаза во многих системах организма.

Все перечисленные формы гранулоцитов развиваются у рыб еще в эмбриональный период. На стадии появления у зародыша пигментации в глазах идет активный процесс пролиферации этих клеток, что подтверждается частым присутствием на мазках различных ядерных фигур митоза. К выклеву их количество значительно возрастает. Они отличаются не только морфологически, но и функционально.

Эозинофил. Эозинофилы - специализированные формы, в основном, правильно округлые клетки разного размера. У осетровых диаметр наиболее крупных клеток колеблется от 10 до 13, более мелких - от 7,5 до 9 мкм [21].

У многих видов костистых рыб диаметр эозинофила от 8 до 10 мкм, хотя у карпа он меньше - от 5,5 до 6,5 мкм. У высших позвоночных размер эозинофилов значительно больше - от 9,0 до 22,0 мкм [21].

Цитоплазма их слабо базофильная, с голубоватым оттенком. Компактное ядро расположено эксцентрично. У рыб оно иногда двухсегментное или многолопастное, напоминающее лист клена. Ядра эозинофилов отличаются разнообразием, отражающим возрастное состояние клеток. Усложнение формы ядра указывает на «взросление» клетки, далее - старость или болезнь [21].

Крупная зернистость эозинофилов обладает ярко выраженной ацидофилией. Среди рыб гранулы этих клеток имеют наибольшую величину у осетровых и окрашены у них в ярко-оранжевый или желтый цвет. У костистых рыб гранулы окрашиваются азур-эозином в красновато-розовый цвет. В процессе поэза, благодаря появлению в цитоплазме специфической зернистости, первой морфологически различимой клеткой является промиелоцит. Однако эозинофилопоэз имеет предшественниц, которые, видимо, проходят стадии более ранних бластных форм -миелобпастов. До сих пор нет полной ясности, на каком уровне клетка приобретает способность дифференцироваться в эозинофильном направлении [21].

По основным функциям гранулы эозинофилов могут рассматриваться как лизосомы. Активность ферментов по мере созревания эозинофилов возрастает: увеличивается количество энзимов, пероксидазы, гликогена, липидов и других внутриклеточных веществ. Сама клетка приобретает способность к амебоидному перемещению и фагоцитозу (эозинофильные промиелоциты не фагоцитируют), объектом которого являются не только бактерии, но и иммунные комплексы и продукты распада тканей. Фагоцитоз не является основной функцией эозинофила. Предполагают, что эти гранулоциты могут адсорбировать многие токсические продукты белковой природы и разрушать их. Они не обладают способностью синтезировать антитела, но адсорбируют антигены и переносят их в кроветворные органы. В какой-то мере эозинофилы имеют отношение и к процессу свертывания крови, синтезируя профибринолизин [21].

У рыб, по мере созревания особей, количество эозинофилов в крови увеличивается. Но основные функциональные свойства этих клеток реализуются, как и для большинства лейкоцитов, не только в токе крови, но и вне его - в периферических тканях. При этом хемотаксис гранулоцитов вызывается соединениями, выделяемыми лимфоцитами [21].

Количество эозинофилов - клеток экстремального реагирования - в течение суток меняется и резко реагирует на изменение абиотических факторов среды. Так, отклонения температурного и солевого режимов воды от оптимальных условий приводят у рыб к увеличению количества этих клеток. Наращивается их содержание и при поражении рыбы взрывной волной.

Доля эозинофилов среди клеток белой крови возрастает под влиянием тяжелых металлов. В процессе проявления аллергии - базовой защитной реакции - на первых ее стадиях идет наращивание этих гранулоцитов. В то же время, при хронических стрессах и тяжелых случаях токсикозов у рыб наблюдается эозинофилопения [21, 27].

Базофилы. Также являются специализированными, не способными к размножению формами. Этот вид клеток - реже всего встречающаяся популяция гранулоцитов в периферической крови и кроветворных органах, что чрезвычайно затрудняет их исследование. Принадлежность к базофилам выявляется по наличию специфических для них гранул, обладающих свойством метахроматической окраски. Зернистость характеризуется неравномерностью по величине и распределению в цитоплазме [21, 27].

Клетка базофила округлая. Ядро у рыб округлое, расположено эксцентрично, но у различных животных форма ядра иная. Из-за многочисленности гранул, которые заполняют цитоплазму, ядро плохо просматривается. Гранулы имеют вид крупных базофильных зерен, азур-эозином окрашиваются в темно-синий с красным оттенком цвет. За счет их некоторого выхода из клетки ее контуры кажутся несколько «растрепанными» [21].

Базофилы, как и эозинофилы, имеют некоторый суточный ритм: наибольшая их концентрация в крови отмечается ночью, наименьшая - утром. Полупериод нахождения этих клеток в крови составляет менее пяти часов. Вообще же, длительность жизни базофилов в периферическом русле не определена, как, впрочем, и дальнейшая их судьба [21].

Базофилы отличаются крайне медленной подвижностью и способностью к фагоцитозу (это свойство не является для них ведущим). Они захватывают частицы разрушенных эритроцитов, образуя при этом фагосому. Сенсибилизированные базофилы в фагосому выделяют содержимое гранул. Базофилы могут влиять на процесс свертывания крови, активизируют его за счет содержащихся в них веществ или вызывают гипокоагуляцию крови. При дегрануляции базофилов освобождаются факторы агглютинации тромбоцитов.

За счет гепарина, содержащегося в этих гранулоцитах, базофилы могут оказывать противоположный эффект на свертывающую систему. Эти клетки исследуются при изучении жирового обмена [21].

У рыб те или иные изменения химического состава воды приводят к грануляции зерен в базофилах. Так, у карпа при недостаточном поступлении кальция из внешней среды и длительном воздействии неблагоприятного фактора обнаружены клетки с дисфункцией базофильных гранул, что свидетельствует об участии базофилов в фагоцитозе [21].

Моноциты. Это клетки белой крови, которым посвящена обширная и довольно противоречивая литература. Взгляды на их происхождение, жизненный цикл, взаимосвязь и взаимоотношения с другими клетками многократно менялись. Название было предложено Паппенгеймом и Феррадо [21].

Моноциты - незернистые лейкоциты - обнаружены у всех исследованных рыб. Этот один из самых крупных элементов периферической крови (15-20 мкм) морфологически хорошо отделяется от других клеточных структур. Цитоплазма, лишенная гранул, слабобазофильная. По Паппенгейму она окрашивается в серо-голубой, серосине-лиловый цвет светлых оттенков. Ядро большое, бобовидной формы или овальное, расположенное эксцентрически. У незрелых форм клетка округлая, ядро стойкой нежной структурой хроматиновой «сети». Зрелые моноциты могут иметь неправильную форму. Чем клетка старше, тем грубее структура ядра. Цитоплазма старых клеток имеет вакуоли, которые придают ей вид лены (пенистая). Моноциты - активные фагоциты крови - поглощают не столько бактерии, сколько продукты распада клеток и тканей. Увеличение количества этих клеток в крови свидетельствует о повышении защитных сил организма. Во внеклеточную среду они постоянно секретируют лизоцим, накапливающийся в них по мере созревания моноцита. Лизосомам приписывается решающая роль в осуществлении внутриклеточной гибели инфекционных агентов и их переваривании [21].

Вырабатывая антитела, моноциты принимают участие не только в регуляции иммуногенеза, но и в регуляции гранулопоэза.

Существует также мнение о способности моноцитов инактивировать токсины. Они содержат специальные ферменты для дезинтоксикации некоторых веществ.

Моноциты, мигрирующие в ткани, дают начало макрофагам соединительной ткани (гистиоцитам), ряду органоспецифических макрофагов - клеткам Купфера печени, альвеолярным макрофагам легкого, макрофагам костного мозга, селезенки, тимуса, лимфатических узлов, полостей тела, центральной нервной системы (микроглии), остеокластам. При определенных условиях (в очагах воспаления) моноциты также могут трансформироваться в макрофаги [21].

Для рыб цитохимическим путем установлено, что макрофаги являются производными моноцитов. Попадая из кроветворного органа в кровь, часть моноцитов сохраняет способность к пролиферации. В результате происходит дифференцировка моноцитов в сторону макрофага [21].

Однако предполагают, что и специализированных макрофагов в тканях, способных к делению, недостаточно для поддержания их популяции. Осуществляется это путем постоянного притока моноцитов из крови и их преобразования в макрофаги.

Низкий процент моноцитов в лейкограмме не всегда является признаком благополучия. Они могут концентрироваться в очагах воспаления, трансформируясь здесь в макрофаги, что часто наблюдается при длительном воздействии неблагоприятных факторов среды [21].

Лимфоциты. Это сравнительно небольшие клетки округлой и несколько неправильной формы - у рыб от 5 до 12 мкм большую часть которых занимает ядро.

У молодых форм тонкая хроматиновая структура его окрашена в бледный фиолетово-розовый цвет; цитоплазма синяя, перинуклеарная зона хорошо выражена. У зрелых клеток ядро округлое, иногда наблюдается небольшая инвагинация, хроматин уплотнен, но не однороден, имеет глыбчатую структуру. В цитоплазме часто отмечаются выступы и впячивания. Нередко она образует узкий ободок вокруг ядра, который иногда вообще как бы отсутствует. У низших позвоночных такая клетка получила название голоядерной. Это состояние характерно для малых лимфоцитов. Кроме них, встречаются еще большие и средние лимфоциты, а также бластные клетки, которые формируются в результате трансформации малых. (Согласно унитарной теории, созданной крупным русским ученым А.А. Максимовым, малому лимфоциту вообще придается значение родоначальной клетки, которая является единственной для всех ростков крови). Исключено обратное превращение бластной клетки в малый лимфоцит [21].

У средних и больших лимфоцитов ободок цитоплазмы несколько шире, чем у малых, а в ядре хроматин менее плотный, с более выраженными ядрышками, хорошо заметна перинуклеарная зона. Лимфобласт характеризуется четкой базофилией. Цитоплазма более обильная, структура ядерного хроматина рыхлая.

У рыб малые лимфоциты - единственный тип белых клеток, регулярно и в большом количестве встречающихся в крови. Именно они придают крови лимфоидный характер. Эта многочисленная группа неоднородна морфологически и функционально. Бывают случаи, когда в узком ободке их цитоплазмы, лишенной, как правило, зернистости, просматриваются азурофильные гранулы, которые принимаются за липолитические ферменты [21].

При патологических случаях встречаются лимфоциты двух- и трех ядерные. Отмечается их сферуляция - процесс, носящий обратимый характер

Особое внимание уделяется изучению функциональной активности лимфоцитов. Это связано стой существенной ролью, которая принадлежит этим клеткам в реализации иммунологических реакций организма. Специализированные лимфоциты (Т- и В-лимфоциты, различающиеся по месту своего «рождения»), выполняющие эту функцию, морфологически неразличимы. В крови циркулируют лимфоциты, находящиеся во всех стадиях дифференцировки и происходящие от различных лимфоцитопроизводящих органов. Однако деятельность их всех без исключения направлена на «патрулирование» организма посредством иммунологического надзора.

Интересно, что потомки лимфоцитов обладают свойством иммунной памяти. Хотя в реакциях клеточного иммунитета участвуюв основном лимфоциты, такую же роль играют макрофаги (моноциты) и не исключено участие гранулоцитов [21].

Постоянно мигрируют между кровью и лимфой малые лимфоциты -иммунологически зрелые, длительно живущие клетки. Неоднородность малых лимфоцитов проявляется в том, что некоторые из них являются начальными клетками с активными потенциями, в то время как другие, морфологически сходные с первыми, наоборот, не способны эволюционировать и реагировать на различные стимулы, исходящие из «микроокружения» [21].

В крови значительная часть лимфоцитов относится к долгоживущим клеткам - продолжительность их жизни от нескольких месяцев до пяти лет. К короткоживущим относятся клетки с продолжительностью жизни от нескольких часов до пяти дней [21].

Тромбоциты. У рыб эти клетки отличаются большим непостоянством форм, размеров и количества. Они могут располагаться одиночно и скоплениями. Форма этих клеток может быть как минимум четырех видов - шиловидная, веретенообразная, овальная и округлая [3, 13].

Ядра у них темно-фиолетовые, иногда почти черные, круглые, слегка удлиненные, окружены заметным слоем грязно-розовой или серо-фиолетовой цитоплазмы. У тромбоцитов ядра очень уплотнены, и в зрелых клетках почти не просматривается их структура. Иногда они бывают двудольными или вообще бесформенными. Последние, как правило, являются дегенеративными формами; нередки случаи выпячивания ядра [21].

Размер тромбоцитов чаще всего близок к размеру ядра эритроцитов того же вида рыбы, но не исключено, что они бывают и крупнее. Средняя величина тромбоцитов 0,5-0,75 мкм определяется, как правило, образом жизни рыб (у малоактивных видов они несколько крупнее) [21].

У рыб значительная часть тромбоцитов депонируется в селезенке [21].

Среди исследователей крови существует единая точка зрения относительно функциональной значимости тромбоцитов. Эти клетки участвуют в процессе свертывания крови рыбы.

У рыб время свертывания - довольно не стабильный показатель, который зависит не только от способа взятия крови, но и факторов внешней среды, физиологического состояния рыбы.

Стресс-факторы повышают скорость свертывания крови у рыб, что свидетельствует о значительном влиянии центральной нервной системы на этот процесс.

В литературе описаны и межвидовые различия свертывания крови у рыб. Однако к этим данным стоит относиться с определенным скептицизмом, помня о том, что отловленная рыба - это рыба, подвергнутая резкому стрессу. Поэтому межвидовые различия, описанные в специальной литературе, вполне могут оказаться результатом различной устойчивости рыб к стрессам.

Таким образом, организм рыб надежно защищен от больших кровопотерь. Зависимость времени свертывания крови рыб от состояния нервной системы является дополнительным защитным фактором, поскольку крупные кровопотери возможны, скорее всего, в стрессовых ситуациях (нападение хищника, драки) [3, 13].

2 Материал и методика

Объектами исследования были линь (Tinca tinca L.) и окунь (Perca fluviatilis L.), а также их кровь, взятая у живых рыб. Сбор материала для определения гематологических показателей рыб проводился в 2007 - 2008 гг. в аквариальной кафедры «Аквакультуры» ФГОУ ВПО «КГТУ» и на оз. Виштынецком. Производители линя были отловлены в р. Неманин ставными сетями и 06.06.07 перевезены в аквариальную кафедры «Аквакультуры» ФГОУ ВПО «КГТУ», где осуществлялось их выращивание в экспериментальной УЗВ. Аквариальная предназначена для выращивания рыб и ведения научной деятельности. Она включает в себя два помещения: вентиляторная и основное помещение. В вентиляторной находится лабораторное оборудование: весы, ФЭК, различная лабораторная посуда, набор пипеток, реактивов, бинокуляр, стойка с аппаратами Вейса. Здесь осуществляется также хранение кормов. В основном помещении располагаются два стационарных бассейна, один из которых отстойник, два бассейна шведского типа, три пластиковых бассейна (объемом 300 л), спаренные аквариумы, аквариум для разведения живых кормов. Для подачи воздуха в выростные емкости используется компрессор. Также имеется набор переносных компрессоров. Для очистки воды используются биофильтры. Схема УЗВ представлена на рисунке 1.

1 - рыбоводные емкости; 2-биореактор; 3-U-образные уровневые трубки; 4-эрлифт; 5-биофильтр

Рисунок 1 - Схема УЗВ в аквариальной кафедры «Аквакультуры» ФГОУ ВПО «КГТУ»

Содержание производителей осуществлялось раздельно по полу в бассейнах. Биофильтр содержал четыре модуля биологической очистки, вода в которые подавалась при помощи помп. В качестве механических фильтров использовались снабженные губками помпы. Емкости для содержания рыбы были частично закрыты крышками, чтобы обеспечить необходимую для рыбы затененность и предотвратить выпрыгивание рыбы.

Регулярно проводилась очистка биофильтров и губок механических фильтров, чистка и частичная замена воды в выростных емкостях.

Кормили производителей кормом Aller Aqua два-три раза в день. Ежедневно измеряли температуру воздуха в рабочем помещении, а также температуру воды в выростных емкостях.

Лини на протяжении большей части эксперимента содержались при температуре 24-26?С, что соответствует оптимальной температуре для роста, созревания и нереста этого вида. В период с 10.10.07 по 13.03.08 с целью имитации зимовки содержание производителей и ремонта линя осуществлялось при пониженных температурах (минимальная температура за этот период - 9,5?С у ремонтного и 10?С у маточного поголовья линя). На рисунке 2 изображен совмещенный график колебаний температуры воды и концентрации кислорода в УЗВ в период выращивания и содержания производителей линя.

Рисунок 2 - Динамика температуры воды и концентрации кислорода в бассейнах с производителями

Концентрация кислорода в экспериментальной УЗВ с производителями линя не опускалась ниже 5,56 мг/л, что соответствует благоприятным для линя значениям.

В УЗВ с двухгодовалыми особями линя, концентрация кислорода за период проведения эксперимента не опускалась ниже 6,27 мг/л, что соответствует благоприятным для рыб условиям.

В озере Виштынецкое сбор материала проводился 19-20 мая 2008 г. Окунь для исследований был выловлен ставными сетями на двух станциях, соответственно в 38 и 11 квадратах (рисунок 3), координаты которых указаны в таблице 2.

Таблица 2 - Координаты станций расположения ставных сетей в оз. Виштынецком

Номер станции	Начало сети	Конец сети
	широта	долгота	широта	долгота
1	54:25:43,4	22:43:09,1	54:25:30,3	22:43:22,4
2	54:26:55,8	22:42:23,2	54:26:46,5	22:42:13,3

Рис. 3 Расположение станций в оз. Виштынецкое

Во время отлова окуней температура воды в озере была 12°C, а содержание кислорода на ст. 1 - 11,32, на ст. 2 - 10,33 мг/л.

Всего была проанализирована кровь 5 экз. двухгодовалых линей и 9 экз. производителей линя в возрасте 4 года, 7 экз. окуня с первой станции в Виштынецком озере и 8 экз. - со второй станции.

Для сбора крови рыбу заворачивали в чистую марлю и с помощью скальпеля убирали слизь и чешую в месте взятия крови. Затем это место протирали ватным тампоном, смоченным 96% спиртом, и тщательно просушивали ватой. Иглой шприца делали прокол кожи по медиальной линии позади анального плавника и под углом 45° вводили иглу до позвоночника, где проходит ствол хвостовой артерии, иглой прорезали артерию и в шприц начинала поступать кровь

В качестве антикоагулянта применяли гепарин, которым предварительно ополаскивали шприцы, затем их высушивали [55].

Кровь для исследований брали в следующей последовательности:

1) перенесли кровь на часовое стекло;

2) приготовили мазок;

3) перенесли кровь в пробирки с консервирующим раствором;

4) перенесли кровь в трансформирующий раствор;

5) подсчитывали эритроциты в камере Горяева;

6) определяли гемоглобин на спектрофотометре;

7) фиксировали и окрашивали мазки крови;

8) определяли гемоглобин на спектрофотометре;

9) подсчитывали косвенным методом количество лейкоцитов;

10) определяли лейкоцитарную формулу [57].

Мазки приготавливали следующим образом: держа предметное стекло за узкие края переносили на него каплю крови. Другой рукой приставляли шлифовальное стекло узким краем к стеклу с кровью справа от капли под углом 45° и продвигали его влево до соприкосновения с кровью. Выжидали пока кровь расплывется по всему ребру шлифовального стекла и затем легким быстрым движением вели его слева направо до тех пор, пока не будет исчерпана вся капля. После приготовлений мазки сушили на воздухе до исчезновения влажного блеска [57].

Фиксировали и окрашивали мазки способом окраски по Паппенгейму. Предметные стекла ставили в киевский аппарат для массовой окраски мазков и заливали красителем-фиксатором Мая-Грюнвальда. Через 3 мин его заменяли рабочим красителем Романовского. Продолжали окрашивание в течение 15 мин, после чего краситель сливали, а мазки промывали водопроводной водой. Потом стекла ставили под углом для высушивания [57].

Определяли следующие показатели крови: концентрацию гемоглобина, эритроцитов, лейкоцитов, общего белка в сыворотке крови, лейкоцитарную формулу, цитометрические характеристики эритроцитов.

Подсчет эритроцитов и лейкоцитов проводился с помощью камеры Горяева. Эритроциты считали в 5 больших квадратах камеры, а лейкоциты будут подсчитаны косвенным методом. Определяемую величину получали по формуле (1).

Х = , (1)

где Х- число клеток в 1 мкл крови; а - количество подсчитанных клеток; y - степень разведения крови; n - количество малых квадратов.

для эритроцитов:

Х_э = = а*12500;

для лейкоцитов:

Х_л = = а*2500 [53].

Для определения гемоглобина использовали гемиглобинцианидный метод на ФЭК с использованием ацетонциангидрина. Расчет содержания гемоглобина будет проводиться по формуле (2):

Hb, г/л = , (2)

где Е_оп - экстинция опытной пробы; Е_ст - экстинция стандартного раствора; С - концентрация гемиглобинцианида в стандартном растворе (59,75 мг%); К - коэффициент разведения крови; 0,01 - коэффициент для пресчета концентрации гемоглобина из мг в г*л ^-1 [53].

Концентрацию белка крови рыб определяют с помощью коэффициента преломления сыворотки на рефрактометре. Коэффициент преломления довольно точно свидетельствует о количественном содержании в сыворотке белка, которое определяется по таблице [53].

Концентрацию общего белка в сыворотке крови (в г*л ^-1) определяют по графику, используя найденный коэффициент преломления [53].

Подсчет лейкоцитарной формулы крови на окрашенных препаратах проводили с использованием светового микроскопа с применением иммерсии (увеличение 90х15, 100х15). На мазках подсчитывали 200 лейкоцитов по общепринятой методике. При идентификации лейкоцитов использовали классификацию клеток крови рыб Н.Т. Ивановой (1983). Подсчет лейкоцитарной формулы проводился по следующим группам лейкоцитов: нейтрофилы, среди которых выделяли: миелоциты нейтрофильные, метамиелоциты нейтрофильные, палочкоядерные нейтрофилы, сегментоядерные нейтрофилы; псевдоэозинофилы, эозинофилы, псевдобазофилы, моноциты; малые и большие лимфоциты.

Окрашенные мазки изучали с помощью системы анализа изображений «ВидеоТест - Морфо», которая представляет собой автоматизированное рабочее место, предназначенное для проведения морфологического, стереологического и морфометрического анализа изображений со статистической обработкой полученных результатов. Мазок устанавливается под микроскоп, соединенный с TV-камерой. Телевизионный сигнал с TV-камеры передавался на плато ввода изображений и для визуализации на монитор видеоконтрольного устройства или видеоокно монитора компьютера. В плате ввода TV-сигнал оцифровывался, и изображение в цифровой форме передалось в ОЗУ компьютера для обработки и анализа. Программа позволила получить измерения различных параметров эритроцитов, провести статистическую обработку результатов, получить графики зависимости параметров [53].

Статистическую обработку полученных результатов выполняли по общепринятым методикам [1, 40, 47] в программе «Microsoft Exel 2003». Для расчета ряда показателей использовались стандартные статистические показатели, такие как: среднее значение - М, ошибка средней - m, среднеквадратическое отклонение - у и коэффициент вариации - CV. Для подтверждения достоверности различий использовали критерий Стьюдента - St.

3 Характеристика крови линя, выращенного в искусственных условиях УЗВ

3.1 Характеристика крови двухгодовалого линя.

Для оценки физиологического состояния выращенной рыбы использовали концентрационные показатели крови, а также лейкоцитарную формулу, которые характеризуют белковый обмен, дыхательную и защитную функции организма.

Средняя масса исследованных двухгодовалых линей составляла 13 г, средняя длина - 75,4 мм. Результаты исследования морфофизиологических характеристик линя представлена в таблице 3.

Таблица 3 - Морфофизиологическая характеристика двухлетков линя

Показатель	М±m	у	CV, %
Mасса, г	13,00±2,17	9,24	12,2
Длина, мм	75,40±4,13	4,85	37,3
P порки, г	9,80±1,75	3,91	39,9
Индекс почки, %	8,60±0,76	1,70	19,8
Индекс печени,%	15,50±1,48	3,31	21,4
Индекс селезенки, %	4,00±0,77	1,72	42,8

Масса и длина двухлетков линя, выращенных в условиях УЗВ, не отличались от таковых показателей у линей такого же возраста из естественных условий [6].

Лейкоцитарная формула линя представлена в таблице 4 и на рисунке 4

Таблица 4 - Лейкоцитарная формула линя, %

Лейкоциты	М±m	у	CV, %
Мн	2,63±1,71	2,95	112,6
Ммн	0,13±0,14	0,25	200,0
Пн	0,50±0,41	0,71	141,4
Сн	0,13±0,14	0,25	200,0
ОЧН	3,38±1,48	2,56	75,9
ПЭ	12,00±6,82	11,80	98,4
Мо	1,75±1,17	2,02	115,47
Блф	7,00±1,20	2,08	29,7
Млф	75,88±8,26	14,30	18,85
ОЧЛф	82,88±7,14	12,37	15,91

Рисунок 4 - Лейкоцитарная формула двухгодовалых линей, выращенных в УЗВ

Общее количество нейтрофилов в крови линя составило 3,38%. Среди них преобладали юные нейтрофилы - миелоциты, что свидетельствует об активации нейтрофилопоэза. Обращает на себя внимание высокий процент псевдоэозинофилов (12,0±6,82). Что, вероятно, связано со специфическими условиями в УЗВ.

3.2 Характеристика крови производителей линя, выращенных в условиях УЗВ

Морфофизиологические показатели, исследованных производителей линей представлены в таблице 5 и на рисунке 5.

Таблица 5 - Морфофизиологические показатели производителей линя

Показатель	Самцы	Самки
	M ± m	CV, %	M ± m	CV, %
Длина, мм	260,00±10,66	8,2	283,50±8,17	5,0
Масса, г	588,00±53,77	18,3	651,20±41,91	11,2

Рисунок 5 - Длина и масса производителей линя, выращенных в УЗВ

Применение критерия Стьюдента показало, что между самками и самцами по длине и массе нет достоверных различий.

Гематологическая характеристика производителей линя, выращенных в условиях УЗВ, представлена в таблице 6.

Таблица 6 - Гематологическая характеристика производителей линя, выращенных в УЗВ

Параметры	Самцы	Самки
	M ± m	CV, %	M ± m	CV, %
Hb, г*л-1 ОБС, г*л-1 Эр, Т*л-1 СГЭ, пг Л, Г*л-1 Эр/Л	47,19±3,28 36,2±7,911 1,470±0,100 32,18±1,66 67,00±19,63 11,66±3,45	13,9 43,7 13,7 10,0 58,6 59,2	34,66±13,45 61,25±7,141 1,28±0,07 36,18±1,72 101,88±11,081 8,32±3,24	67,2 20,2 9,0 8,2 23,1 67,5
Лейкоцитарная формула, %
Мн Ммн Пн Сн ОЧН Э Мо Блф Млф ОЧЛф	2,50±0,62 2,38±1,67 1,38±0,37 0,13±0,41 7,38±1,88 6,25±1,68 1,25±0,47 10,75±1,92 74,38±2,49 85,13±2,78	56,6 75,7 34,8 66,7 61,8 48,2 69,3 25,6 5,3 45,2	3,00±0,82 3,88±0,36 0,25±0,17 0,50±0,33 7,63±1,23 4,88±1,04 2,25±1,67 11,88±1,77 73,38±1,61 85,25±0,83	47,1 16,2 115,5 115,5 28,0 36,9 128,9 25,8 3,8 1,7

различия достоверны при (при р<0,05)

Лейкоцитарный состав крови производителей линя, выращенных в УЗВ, представлен основными группами клеток: агранулоцитами - лимфоцитами (большими и малыми) и моноцитами, и гранулоцитами - нейтрофильными миелоцитами и метамиелоцитами, палочко- и сегментоядерными нейтрофилами, эозинофилами. Общее число нейтрофилов в крови самок и самцов линя составило 7,63±1,23 и 7,38±1,88% соответственно; общее число лимфоцитов - 85,13±2,78 и 85,25±0,83%. Достоверных различий в лейкоцитарной формуле между самками и самцами линя нами не обнаружено, что подтверждает единообразие клеточного состава белой крови внутри вида среди одновозрастных рыб и отражает отсутствие полового диморфизма по этому показателю у линя такого возраста и физиологического состояния. На рисунке 6 представлена лейкоцитарная формула производителей линя.

Применение критерия Стьюдента показало, что концентрация общего белка в сыворотке крови самок, выращенных в условиях УЗВ, достоверно выше в сравнении с самцами (61,25±7,14 против 36,2±7,91) (рисунок 7). Вероятно, это было связано с особенностями метаболизма у самок в период формирования ооцитов.

Рисунок 6 - Лейкоцитарная формула производителей линя, выращенных в УЗВ

Рисунок 7 - Достоверные различия ОБС в крови производителей линя, выращенных в УЗВ

Цитометрические параметры эритроцитов производителей линя, выращенных в УЗВ. В периферической крови производителей линя, выращенных в условиях УЗВ, наблюдались здоровые, правильной формы эритроциты. Результаты анализа этих клеток представлены в таблице 7.

Эритроциты линя мелкие эллипсоидные клетки, средняя площадь которых составляет у самцов 94,06 мкм², периметр 36,63 мкм, у самок площадь эритроцитов - 87, мкм² периметр - 35,06 мкм. Применение критерия Стьюдента показало, что площадь, периметр, большая и малая оси эритроцитов самцов достоверно больше значений этих параметров эритроцитов самок (при р<0,001) (рисунки 8, 9).

Таблица 7 - Параметры эритроцитов производителей линя, выращенных в УЗВ

Показатель	Самцы	Самки
	M ± m	CV, %	M ± m	CV, %
S, мкм2 P, мкм Fk Fе Fо А, мкм В, мкм А/В	94,060±0,7581 36,630±0,1861 0,8814±0,0039 0,9981±0,0000 0,6344±0,0069 13,900±0,1091 8,659±0,0551 1,624±0,019	11,2 7,0 6,2 0,1 15,0 10,9 8,9 16,8	87,300±0,8821 35,060±0,1921 0,8916±0,0408 0,9981±0,0000 0,6324±0,0064 13,360±0,1031 8,371±0,0591 1,612±0,017	11,2 6,4 4,6 0,1 11,2 8,5 7,8 12,0

^{1, 2, 3} - различия достоверны соответственно при р< 0,05, 0,01 и 0,001

Рисунок 8 - Достоверные различия площади эритроцитов производителей линя из УЗВ



Рисунок 9 - Достоверные различия параметров эритроцитов производителей линя из УЗВ

Описанные выше цитометрические параметры производителей линя позволяют заключить, что эритроциты самцов крупнее эритроцитов самок линя, что является характерным и для других видов рыб. Например, по исследованиям Г.Г. Серпунина [52] для самцов карпа в сравнении с самками также характерна большая площадь (101,69±4,77 против 97,75±3,16), периметр (36,38±0,90 против 35,01±1,01), большая ось (13,45±0,32 против 13,01±0,21) и малая ось (9,62±0,25 против 9,59±0,18) эритроцитов.

Полученные результаты гематологических параметров производителей линя сравнили с гематологическими показателями производителей линя, выловленных в р. Немонин (естественных условий обитания), которые установила О.Е. Гончаренок (2008) (таблица 8).

Сравнение гематологических показателей самцов, выращенных в УЗВ с самцами, выловленными в р.Неманин, показало, что у первых в сравнении со вторыми концентрация гемоглобина (47,19±3,28 против 91,33±4,45 г*л^-1) и СГЭ (32,18±1,66 против 74,66±9,22 пг) достоверно ниже (при р<0,001). Нами были обнаружены достоверные различия и по концентрации эритроцитов (1,470±0,100 против 1,294±0,190 г*л^-1), которая была достоверно выше у самцов из УЗВ (при р<0,001). Выявленные различия указывают на преобладание незрелых форм эритроцитов в крови линя из УЗВ, т.е. на активацию эритропоэза, что говорит о менее благоприятных условиях для производителей, выращиваемых в УЗВ (рисунок 10, 11).

Рисунок 10 - Достоверные различия концентрации гемоглобина и СГЭ самцов линя из УЗВ и р.Неманин

Таблица 8 - Сравнительная гематологическая характеристика производителей линя из естественных условий (р. Неманин) и выращенных в УЗВ

Параметры	Производители, выращенные в условиях УЗВ	Производители, выловленные в р.Неманин [18]
	Самцы	Самки	Самцы	Самки
	M ± m	CV, %	M ± m	CV, %	M ± m	CV, %	M ± m	CV, %
Hb, г*л-1	47,19±3,283	13,9	34,66±13,45	67,2	91,33±4,453	9,7	65,75±3,74	16,1
ОБС, г*л-1	36,2±7,91	43,7	61,25±7,143	20,2	34,59±0,05	0,3	34,49±0,033	0,3
Эр, Т*л-1	1,470±0,1003	13,7	1,28±0,07	9,0	1,294±0,1903	29,4	1,259±0,119	26,7
СГЭ, пг	32,18±1,663	10,0	36,18±1,721	8,2	74,66±9,223	24,7	58,03±8,081	39,4
Л, Г*л-1	67,00±19,63	58,6	101,88±11,081	23,1	46,17±7,26	31,5	67,70±6,571	27,5
Эр/Л	11,66±3,45	59,2	8,32±3,24	67,5	28,45±1,64	11,5	19,43±1,05	15,3
Лейкоцитарная формула, %
Мн	2,50±0,62	56,6	3,00±0,82	47,1	2,13±1,16	109,3	1,56±0,39	71,4
Ммн	2,38±1,67	75,7	3,88±0,362	16,2	2,50±0,87	69,3	2,00±0,382	53,5
Пн	1,38±0,37	34,8	0,25±0,17	115,5	2,13±1,01	94,9	1,25±0,48	109,0
Сн	0,13±0,41	66,7	0,50±0,33	115,5	2,38±0,47	39,9	0,81±0,21	73,1
ОЧН	7,38±1,88	61,8	7,63±1,23	28,0	9,24±2,70	59,1	5,63±0,97	48,7
Э	6,25±1,68	48,2	4,88±1,04	36,9	6,00±0,46	15,2	1,88±1,29	194,8
Мо	1,25±0,47	69,3	2,25±1,67	128,9	1,50±0,50	66,7	2,06±0,38	52,4
Блф	10,75±1,92	25,6	11,88±1,772	25,8	6,25±1,25	40,0	5,63±0,602	30,0
Млф	74,38±2,49	5,3	73,38±1,612	3,8	77,11±3,60	9,3	84,80±1,992	6,6
ОЧЛф	85,13±2,78	45,2	85,25±0,831	1,7	83,36±2,38	5,7	90,43±1,831	5,7
Масса, г	588,00±53,77	18,3	651,25±41,91	11,2	622,50±91,87	29,5	663,75±51,82	22,1

^{1, 2, 3} - различия достоверны соответственно при р<0,05; 0,01 и 0,001

Рисунок 11 - Достоверные различия концентрации эритроцитов самцов линя из УЗВ и р.Неманин

Нами установлены достоверные различия между характеристиками крови самок, выращенных в УЗВ и самок из р. Неманин, которые проявились в общем содержании белка в сыворотке крови, концентрации лейкоцитов и СГЭ. У первых были достоверно выше концентрация общего белка в сыворотке крови (при р<0,05 и р<0,01) и концентрации лейкоцитов (при р<0,05) и достоверно ниже (при р<0,05) оказалось значение СГЭ (рисунки 12, 13).

Более высокая концентрация общего белка в сыворотке крови самок из УЗВ (61,25±7,14 против. 34,49±0,03 г*л^-1) и лейкоцитов в крови (101,88±11,08 против 67,70±6,57Г*л^-1) и более низкий СГЭ (36,18±1,72 против 58,03±8,08) в сравнении с самками из р. Неманин, по-видимому, связаны с более концентрированным кормом и более высокой температурой воды при выращивании в УЗВ (25°C против 22°C в р. Неманин).

Рисунок 12 - Достоверные различия концентрации общего белка в сыворотке крови и концентрации лейкоцитов в крови самок линя из УЗВ и из р. Неманин

Рисунок 13 - Достоверные различия СГЭ в крови самок линя из УЗВ и из р. Неманин

В лейкоцитарной формуле самок линя из УЗВ доля нейтрофильных метамиелоцитов и больших лимфоцитов была выше (р<0,01), чем у самок из р. Неманин (соответственно 3,88±0,36 против 2,00±0,38% и 11,88±1,77 против 5,63±0,60), однако доля малых лимфоцитов (р<0,05) и ОЧЛф (р<0,01) оказалась достоверно ниже у первых самок (73,38±1,61 против 84,80±1,99 и 85,25±0,83 против 90,43±1,83% соответственно) (рисунок 14).

Рисунок 14 - Достоверные различия доли нейтрофильных метамиелоцитов, больших, малых лимфоцитов и ОЧЛф в крови самок линя из УЗВ и из р. Неманин

Более высокая доля нейтрофильных метамиелоцитов при понижении малых лимфоцитов и ОЧЛф за счет увеличения больших лимфоцитов связано, вероятно, с большей температурой воды в УЗВ, в сравнении с р.Неманин.

4. Гематологическая характеристика окуня оз. Виштынецкого

Исследования гематологических параметров окуня оз. Виштынецкое проводились в мае 2008 г.

Лейкоцитарный состав крови окуня оз. Виштынецкое представлен основными клетками - лимфоцитами, моноцитами, лимфоцитами (большими и малыми), нейтрофильными миелоцитами и метамиелоцитами, палочко- и сегментоядерными нейтрофилами, эозинофилами. В целом, белая кровь окуня носит ярко выраженный лимфоидный характер - лимфоциты составляют 70-100% от общего числа лейкоцитов в периферической крови. Лимфоциты представляют собой клетки с плотным круглым или бухтообразным ядром красно-фиолетового цвета, окруженным нешироким слоем базофильной цитоплазмы. Размеры лимфоцитов могут сильно варьировать. Большие лимфоциты окуня - крупные клетки, окрашенные в сине-фиолетовый цвет, имеющие хорошо заметный слой цитоплазмы. Малые лимфоциты - более мелкие клетки, окрашенные в темно-фиолетовый цвет с едва заметным ободком цитоплазмы с небольшими выростами. Моноциты окуня - довольно крупные клетки с ядром, расположенным эксцентрично овальной или бобовидной формы. Ядро окрашено в красно-фиолетовый цвет, широкие хроматиновые нити образуют специфическую складчатую структуру. Цитоплазма занимает большую часть клетки и имеет сероватый или дымчатый цвет. Гранулоцитопоэз у окуня осуществляется по следующей схеме: миелобласт - промиелоцит - миелоцит - метамиелоцит - палочкоядерный гранулоцит - сегментоядерный гранулоцит. Подавляющее большинство клеток зернистого ряда представлено нейтрофилами. Нейтрофилы - это крупные клетки округлой формы с бледно серо-голубой окраской и нежно-розовой зернистостью. Ядро молодых нейтрофилов округлое, по мере созревания оно приобретает более вытянутую форму. На стадии сегментоядерного нейтрофила ядро становится красно-фиолетовым резко сегментированным. Эозинофилы представляют собой клетки, имеющие плотное компактное красно-фиолетовое ядро. Цитоплазма практически не просматривается из-за наличия крупных гранул. [2, 53].

Гематологические характеристики окуня оз. Виштынецкого представлены в таблице 9, лейкоцитарная формула - на рисунке 15.

В лейкоцитарной формуле окуня оз. Виштынецкого, выловленного на двух станция, достоверных различий не выявлено. На рисунке 14 показано, что среди нейтрофилов преобладают юные формы (нейтрофильные миелоциты и метамиелоциты), однако доля этих клеток не превышает значения, приведенные для окуня Ивановой Н.Т. (1983). Основная функция этих клеток - защита организма от инфекции и от токсических воздействий. Характерно, что нейтрофил все функции начинает выполнять относительно зрелым, на стадии палочкоядерной формы. Общее число лимфоцитов (их основная функция - реализация иммунологических реакций) также не превышало значение их доли в крови окуней, исследованных Ивановой Н.Т. (1983). Из вышесказанного следует, что в организме окуней нет необходимости в активации защитных функций, что говорит о благополучном физиологическом состоянии окуня оз. Виштынецкого и, следовательно, о благоприятных экологических условиях в этом озере.

Таблица 9 - Гематологические показатели окуня оз. Виштынецкого

Показатели	Ст. 1	Ст. 2
	M ± m	CV, %	M ± m	CV, %
Hb, г*л-1 ОБС, г*л-1 Эр, Т*л-1 СГЭ, пг Л, Г*л-1 Масса, г	49,8±2,85 29,38±4,62 1,710±0,1102 29,72±2,55 113,57±10,56 210,00±0,05	14,0 38,5 16,4 21,0 22,8 52,71	43,16±7,17 37,63±2,88 1,260±0,1602 42,05±12,55 146,56±31,00 70,00±0,02	44,0 20,3 34,0 79,0 56,0 67,85
Лейкоцитарная формула, %
Мн Ммн Пн Сн ОЧН Э Мо Блф Млф ОЧЛф	4,57±0,65 4,14±0,87 1,64±0,81 1,93±0,52 12,29±1,92 1,57±0,43 3,21±0,59 19,79±1,19 63,14±3,08 82,93±13,12	34,8 51,5 121,4 66,00 38,24 67,3 44,78 14,70 11,96 44,58	3,88±1,10 4,81±1,05 1,88±0,39 1,88±0,36 12,44±2,10 1,81±0,48 1,94±0,55 18,94±2,10 64,88±3,09 83,81±11,47	75,2 58,0 54,8 50,9 44,7 70,6 74,8 29,3 12,6 41,5
Параметры эритроцитов
S, мкм2 P, мкм Fk Fе Fо А, мкм В, мкм А/В	85,360±1,0412 34,340±0,2022 0,905±0,004 0,998±0,000 0,6569±0,00613 12,91±0,082 8,414±0,077 1,548±0,015	13,23 6,39 4,37 0,089 10,13 6,65 9,97 10,55	79,69±0,6302 32,950±0,1432 0,921±0,002 0,998±0,000 0,6797±0,0443 12,29±0,662 8,267±0,041 1,491±0,010	10,1 5,5 3,3 0,084 8,3 6,8 6,3 8,5

^{1, 2, 3} - различия достоверны соответственно при р< 0,05, 0,01 и 0,001

Рисунок 15 - Лейкоцитарная формула окуня на ст.1 и ст.2 оз. Виштынецкого

Применение критерия Стьюдента показало, что у окуней на станции 1 значения концентрации эритроцитов достоверно выше (р<0,01), чем у рыб на станции 2 (1,710±0,110 против 1,260±0,160 Т*л^-1), что связано с большим возрастом окуней на станции 1 (здесь выловлены рыбы в возрасте 3-5 лет) в сравнении со станцией 2 (возраст рыб 2-4 года). Достоверные различия по этому параметру представлены на рисунке 16.

Рисунок 16 - Достоверные различия концентрации эритроцитов в крови

окуня оз.Виштынецкого

При сравнении цитометрических параметров эритроцитов у окуней оз. Виштынецкого с применением критерия Стьюдента получили следующие результаты. У окуня, выловленного на станции 1, достоверно выше (р<0,001) были значения площади, периметра и большой оси эритроцитов, в сравнении с окунем со станции 2. При этом у первых достоверно ниже (р<0,01) была округлость эритроцита, то есть эритроциты окуня на станции 1 были более крупными и более вытянутыми по форме в сравнении с эритроцитами окуня со станции 2 (рисунки 17 - 19).

Рисунок 17 - Достоверные различия площади эритроцитов окуня оз. Виштынецкого

Рисунок 18 - Достоверные различия периметра и большой оси эритроцитов окуня

оз. Виштынецкого

Рисунок 19 - Достоверные различия округлости эритроцитов окуня оз. Виштынецкого

Такие различия цитометрических параметров эритроцитов, по-видимому, связаны с тем, что на станции 1 окуни были представлены более старшими возрастными группами, в сравнении со станцией 2. Полученные нами результаты, позволяют сделать вывод о том, что с возрастом эритроциты рыб становятся крупнее и приобретают более вытянутую форму.

Возраст оказывает заметное влияние на гематологические показатели рыб [17, 19, 73]. По мнению В.М. Яхненко (1984), состав крови с возрастом, несмотря на биологические различия исследованных автором видов, изменяется однотипно и определяется, в первую очередь, физиологическими факторами [56].

С возрастом концентрация гемоглобина у рыб увеличивается [4, 19, 70]. По данным Л.Д. Житеневой (1999), у белуги, осетра, сельди малопозвонковой концентрация гемоглобина с возрастом неуклонно увеличивается. Аналогичное увеличение этого показателя происходит у форели [24], налима [33], угря [22].

У производителей персидского осетра и севрюги уровень в крови гемоглобина, эритроцитов гораздо выше (при р<0,01), чем у молоди [23]. Авторы также обнаружили существенные различия между молодью и взрослыми рыбами в лейкоцитарной формуле по лимфоцитам и нейтрофилам [56]. Доля нейтрофильных миелоцитов и больших лимфоцитов у исследуемого окуня оз. Виштынецкого с возрастом достоверно уменьшалась.

Более высокие концентрации гемоглобина, СГЭ отмечены у двухлеток в сравнении с сеголетками белого и пестрого толстолобиков и большеротого буффало [66]. Что касается концентрации лейкоцитов, то по данным автора. Этот показатель оказался больше у сеголеток, чем у двухлеток.

С возрастом у красноперки наблюдается увеличение всех форм нейтрофилов и лимфоцитов, что отражает подъем неспецифического иммунитета [37]

У карпа с увеличением возраста увеличиваются концентрация гемоглобина, ОБС, СГЭ. Концентрация лейкоцитов нарастает к двухлетнему возрасту, затем испытывает тенденцию к снижению. Динамика концентрации эритроцитов с возрастом имеет противоречивый характер [56].

Гематологические показатели крови окуня различного возраста, установленные нами, представлены в таблице 10.

При установлении возрастных различий гематологических показателей окуня оз. Виштынецкого получили схожие с вышеперечисленными литературными данными результаты по концентрации гемоглобина, которая у окуней двухлетнего возраста была достоверно выше (р<0,01) в сравнении с окунями в возрасте четырех лет (42,21±3,74 против 56,55±0,11). Нами установлено также уменьшение доли нейтрофильных миелоцитов (3,38±0,17 против 1,50±0,50 у рыб в возрасте двух и трех лет соответственно) и больших лимфоцитов (24,67±1,74 против 16,75±1,75 против 14,67±2,19 при сравнении рыб в возрасте двух, трех и четырех лет соответственно). Концентрация лейкоцитов в крови окуня к трем годам достоверно увеличивалась, а к четырем снова уменьшалась. В крови окуней на станции 1 оз. Виштынецкого концентрация эритроцитов достоверно уменьшалась (р<0,01) у четырехгодовалых рыб в сравнении с пятигодовалыми. На станции 2 этот показатель достоверно уменьшался (р<0,01) в крови окуней при сравнении двухгодовалых с трехгодовалыми и двухгодовалых с четырехгодовалыми рыбами. Достоверные различия гематологических показателей представлены на рисунках 20 - 23.

Таблица 10 - Сравнительная гематологическая характеристика окуня оз. Виштынецкого по возрастам

Показатели

Станция 1

Станция 2

3 годовики

4 годовики

5 годовики

2 годовики

3 годовики

4 годовики

M ± m

CV, %

M ± m

CV, %

M ± m

CV, %

M ± m

CV, %

M ± m

CV, %

M ± m

CV, %

Hb, г*л-1 ОБС, г*л-1 Эр, Т*л-1 СГЭ, пг Л, Г*л-1 Эр/Л

52,82±0,50 13,55±4,65 1,897±0,330 28,75±5,24 121,25±21,25 15,65±0,04

1,3 48,5 24,5 25,8 24,8 0,3

46,66±2,672 25,50±2,60 1,447±0,0702 32,42±3,45 113,75±18,75 13,18±2,80

8,1 14,4 7,0 15,1 23,3 30,1

43,99±4,002 - 1,834±0,0202 23,96±1,89 127,50±0,00 14,39±0,17

12,9 - 1,7 11,2 22,3 1,7

42,21±3,743 40,13±1,37 1,663±0,1302 25,56±2,25 96,67±15,903 17,73±1,63

15,3 5,9 13,1 15,3 28,5 15,9

48,99±0,50 42,05±9,85 1,150±0,082 22,92±2,53 261,25±3,752,3 14,40±0,25

1,6 33,1 10 23,2 2,0 8,0

56,55±0,113 32,17±2,99 0,923±0,2302

Подобные документы

• Кровь. Плазма. Форменные элементы крови

  Кровь. Функции крови. Состав крови. Плазма крови. Форменные элементы крови. Процесс свертывания крови при ранении сосудов очень сложный и сводится в конечной стадии к тому, что фибриноген плазмы крови превращается в нерастворимый белок фибрин.
  
  реферат [11,7 K], добавлен 12.10.2003
  

• Физиология системы крови

  Понятие о системе крови. Органы кроветворения человека. Количество крови, понятия о ее депонировании. Форменные элементы и клетки крови. Функциональное значение белков плазмы. Поддержание постоянной кислотно-щелочного равновесия крови человека.
  
  презентация [3,1 M], добавлен 29.10.2015
  

• Свойства и состав крови

  Общая характеристика крови, ее свойства (суспензионные, коллоидные, электролитные) и основные функции. Состав плазмы, строение эритроцитов и лейкоцитов. Факторы, обуславливающие разделение крови людей на группы. Особенности процесса кроветворения.
  
  реферат [405,2 K], добавлен 25.12.2012
  

• Кровеносная система

  Понятие о внутренней среде организма. Функции крови, ее количество и физико-химические свойства. Форменные элементы крови. Свертывание крови, повреждение сосуда. Группы крови, кровеносная система, большой и малый круги кровообращения, переливание крови.
  
  учебное пособие [26,7 K], добавлен 24.03.2010
  

• Клеточный состав крови. Кроветворение

  Объем крови в организме взрослого здорового человека. Относительная плотность крови и плазмы крови. Процесс образования форменных элементов крови. Эмбриональный и постэмбриональный гемопоэз. Основные функции крови. Эритроциты, тромбоциты и лейкоциты.
  
  презентация [4,2 M], добавлен 22.12.2013
  

• Физиология крови

  Содержание воды в организме человека. Кровь как разновидность соединительных тканей. Состав крови, ее функции. Объем циркулирующей крови, содержание веществ в ее плазме. Белки плазмы крови и их функции. Виды давления крови. Регуляция постоянства рН крови.
  
  презентация [593,9 K], добавлен 29.08.2013
  

• Механизмы реализации путей гибели клетки

  Основные функции крови. Структурно-функциональная организация крови. Межклеточное вещество (плазма), форменные элементы крови (клетки). Гранулярные и агранулярные лейкоциты, постклеточные структуры. Эритроциты и тромбоциты, стволовые клетки крови.
  
  контрольная работа [2,9 M], добавлен 06.02.2011
  

• Кровь и лимфа

  Изучение функций и состава крови. Форменные элементы крови: эритроциты, лейкоциты, тромбоциты. Дыхательный пигмент эритроцитов - гемоглобин. Гранулоциты: нейтрофилы, эозинофилы, базофилы. Агранулоциты: моноциты, лимфоциты. Процесс свертывания крови.
  
  презентация [710,5 K], добавлен 15.05.2016
  

• Физиология крови и кровообращения

  Внутренняя среда человека и устойчивость всех функций организма. Рефлекторная и нервно-гуморальная саморегуляция. Количество крови у взрослого человека. Значение белков плазмы крови. Осмотическое и онкотическое давление. Форменные элементы крови.
  
  лекция [108,2 K], добавлен 25.09.2013
  

• Функции и состав крови

  Обзор процесса циркуляции крови по организму, уничтожения болезнетворных организмов. Изучение состава и форменных элементов крови. Описания классификации групп крови, зависимости группы ребенка от группы родителей, лечения заболеваний переливание крови.
  
  презентация [1,9 M], добавлен 23.09.2011
  

• главная
• рубрики
• по алфавиту
• вернуться в начало страницы
• вернуться к началу текста
• вернуться к подобным работам