Микробиология питьевой воды

В распределительной сети крупных централизованных систем питьевого водоснабжения (при количестве исследуемых проб не менее 100 за год) допускается 5% нестандартных проб по общим колиформам, но не в двух последовательно отобранных пробах в одной точке.

Общая численность микроорганизмов (общее микробное число - ОМЧ) определяется по росту на мясопептонном агаре при температуре инкубации 37. Этот показатель используют для характеристики эффективности очистки питьевой воды, его необходимо рассматривать при наблюдении за качеством воды в динамике. Резкое отклонение ОМЧ даже в пределах нормативного значения (но не более 50 в 1 мл) служит сигналом о нарушении в технологии водоподготовки. Рост ОМЧ в воде распределительной сети может свидетельствовать о ее неблагополучном санитарном состоянии, которое способствует размножению микроорганизмов из-за накопления органических веществ или негерметичности, влекущей за собой подсос загрязненных грунтовых вод. (Контроль качества питьевой воды, 1999)

Аэробные сапрофиты составляют только часть общего числа микробов в воде, но являются важным санитарным показателем качества воды, так как между степенью загрязнения ее органическими веществами и микробным числом существует прямая зависимость. Кроме того, полагают, что чем выше общее микробное число, тем больше вероятность присутствия в воде патогенных микроорганизмов. Микробное число в водопроводной воде не должно превышать 100. (Карюхина, Чурбанова, 1995)

Безопасность питьевой воды в эпидемическом отношении определяется ее соответствием нормативам по микробиологическим показателям (Таблица 3). (СанПиН 2.1.4.10-74-01)

Таблица 4

(СанПиН 2.1.4.10-74-01)

3.1 Понятие о санитарно-показательных микроорганизмах

микроорганизм водоем санитарный патогенный

Основные требования, предъявляемые к санитарно-показательным микроорганизмам: 1. они должны иметь общую естественную среду обитания с патогенными микроорганизмами и выделятся во внешнюю среду в большом количестве; 2. во внешней среде обитания санитарно-показательные микроорганизмы должны по возможности равномерно распределяться и быть более устойчивыми, чем патогенные. Они должны дольше сохраняться в воде, практически не размножаясь, иметь большую устойчивость в воздействию различных неблагоприятных факторов, у них должна в меньшей степени проявляться изменчивость свойств и признаков; 3. методы определения санитарно-показательных микроорганизмов должны быть простыми, и иметь достаточную степень достоверности.

С позиции санитарной микробиологии оценка качества воды проводится с целью определения ее санитарно-эпидемиологической опасности или безопасности. Для здоровья человека. Вода играет важную роль в передаче возбудителей многих инфекций, главным образом кишечных.

Прямое количественное определение всех инфекций для контроля за качеством воды неосуществимо в связи с многообразием их видов и трудоемкости анализа.

Анализ только одной пробы воды на возможное присутствие в ней возбудителей брюшного тифа, паратифа А, паратифа В, дизентерии, инфекционной желтухи, водной лихорадки и туляремии полностью загрузил бы весь персонал даже большой бактериологической лаборатории. Кроме того, ответ в этом случае был бы дан лишь по прошествии 2-3 недель, т.е. тогда, когда население давно уже выпило исследуемую воду.

В виду очевидной нецелесообразности подробного определения безвредности воды, еще в конце XIX века делались попытки заменить поиски всех водных патогенных микробов одним каким-либо микробом пусть хотя бы и непатогенным, но зато постоянно присутствующим в человеческих фекалиях. Тогда можно было бы считать, что если исследуемая вода действительно загрязнена фекалиями, то она может быть опасной для питья, поскольку среди здорового населения могут встречаться как больные, так и бациллоносители. Поиски таких бактериологических индикаторов фекального загрязнения увенчались успехом. Оказалось, что в фекалиях человека постоянно присутствуют три следующих микроба: 1) кишечные палочки; 2) энтерококки; 3) анаэробные спорообразующие бактерии, главным образом Bac. perfingens.

Содержание этих микробов в бытовых сточных водах следующее (По Хустону и Клейну) в 1 мл сточных вод: кишечных палочек - от 100000 до 800000;

энтерококков - от 1000 до 60000;

спорообразующих анаэробов - от 100 до 2000.

Таким образом, в бытовых сточных водах преобладает кишечная палочка. Но дело не только в ее большем содержании. Основная ценность бактериального индикатора фекального загрязнения заключается в том, чтобы скорость его отмирания большинства патогенных микробов. Лишь при соблюдении этого условия микроб, постоянно присутствующий в фекалиях человека, будет показателем фекального загрязнения.

Если с этой точки зрения подойти к обнаруженным постоянным обитателям кишечника, то окажется следующее: микробы группы Bac. perfingens сохраняется в воде много дольше патогенных микробов; энтерококки, наоборот, погибают гораздо скорее; что же касается кишечной палочки, то время ее сохранения в воде приблизительно соответствует времени выживания патогенных микробов. (Доливо-Добровольский, Кульский, Никорчевская, 1971)

Поэтому главным санитарно-бактериологическим показателем воды и является кишечная палочка. (Доливо-Добровольский, 1960) Только в России, единственной стране мира, качество воды контролируют по бактерия группы кишечной палочки (индекс БГКП). В эту группу входят все представители группы кишечных бактерий и условно-патогенные представители. (Мазаев, Шлепнина, 1999)

В соответствии с ГОСТ 2874-73 и ГОСТ 18963-73 к бактериям группы кишечных палочек (БГКП) относятся грамотрицательные, не образующие спор палочки, сбраживающие лактозу или глюкозу до кислоты и газа при 37о за 24 часа и не обладающие оксидазной активностью. К БГКП относятся представители различных родов - Escherichia, Citrobacter, Enterobacter, Klebsiella, но все они выделяются в окружающую среду из кишечника человека и животных. В связи с этим обнаружение их в окружающей среде следует рассматривать, как показатель фекального загрязнения.

Из родов входящих в состав БГКП, наиболее санитарно-показательное значение имеет род Escherichia. Присутствие всех этих бактерий в окружающей среде рассматривается как свежее фекальное загрязнение. (Справочник по санитарной микробиологии, 1981)

Эшерихии - является одним из фоновых видов кишечника человека и животных. (Микробиологический словарь-справочник, 1999г.) Род Escherichia, включающий типовой вид E.coli, показатель свежего фекального загрязнения, возможная причина токсикинфекций. Представителей рода, находящихся в воде трактуют как термотоллерантные колиформные бактерии. (Сбойчаков, 2007)

Цитробактер - обитают в сточных водах, почве и других объектах внешней среды, а также в испражнениях здоровых и больных ОКИ людей. Относятся к группе условно-патогенных бактерий. (Микробиологический словарь-справочник, 1999)

К недостаткам цитробактера как СПМО относятся следующие:

1. обилие аналогов во внешней среде.

2. изменчивость во внешней среде.

3. недостаточная устойчивость к неблагоприятным воздействиям.

4. способность к размножению в воде.

5. нечеткий индикатор даже в отношении присутствия сальмонелл.

(Сбойчаков, 1999)

Исследования последних лет выявили отсутствие прямой корреляции между наличием в воде патогенных бактерий и индикаторов. В регионах с интенсивной антропогенной нагрузкой на водные объекты отмечено снижение содержания индикаторных микроорганизмов с изменением их биологических и культуральных свойств на фоне количественного преобладания потенциальных патогенных и патогенных бактерий. (Гигиена и санитария, 1991г.)

Энтеробактер - обитают в кишечнике человека и др. животных, встречаются в почве, воде, пищевых продуктах, взывают кишечные, урогенитальные, респираторные, гнойно-воспалительные заболевания человека. (Микробиологический словарь-справочник, 1999г.).

Клебсиеллы - обитают в воде, почве, в пищевых продуктах, в кишечнике и дыхательных путях человека, млекопитающих, птиц. (Микробиологический словарь-справочник, 1999)

В 1910г. на роль СПМО предложены энтерококки (Enterococcus faecalis, Enterococcus faecium). (Сбойчаков, 2007)

Энтерококки - род факультативно-анаэробных аспорогенных хемоорганотрофных грам+ бактерий. Клетки полиморфны. Широко распространены в природе. Являются одним их фоновых видов кишечника человека, млекопитающих, птиц. Нередко обнаруживаются в составе флоры кожи промежности и половых путей, полостей носа, глотки, носа. Долго выживают в почве, пищевых продуктах. (Микробиологический словарь-справочник, 1999)

Преимущества энтерококка как СПМО:

1. постоянно находится в кишечнике человека и постоянно выделяется во внешнюю среду. При этом Enterococcus faecalis в основном обитает в кишечнике человека, поэтому обнаружение его свидетельствует о загрязнение фекалиями людей. В меньшей степени у человека встречается Enterococcus faecium. Последний, в основном обнаруживается к кишечнике животных, хотя сравнительно редко также отмечается и Enterococcus faecalis.

2. не способен размножаться во внешней среде, в основном размножается Enterococcus faecium, но он имеет меньшее эпидемиологическое значение.

3. не изменяет своих свойств во внешней среде.

4. не имеет аналогов во внешней среде.

5. устойчив к неблагоприятным воздействиям внешней среды. Энтерококк в 4 раза устойчивее к хлору по сравнению с кишечной палочкой. Это его главное достоинство. Благодаря этому признаку энтерококк используют при проверке качества хлорирования воды, а так же как индикатор качества дезинфекции. Выдерживает температуру 60оС, что позволяет применять его как показатель качества пастеризации. устойчив к концентрациям поваренной соли 6,5-17%. Устойчив к рН в диапазоне 3-12.

6. для индикации энтерококков разработаны высокоселективные среды. Выживаемость энтерококка в воде приближается к выживаемости патогенных энтеробактерий. Энтерококк по праву является вторым после кишечной палочки санитарно-показательным тестом при исследовании питьевой воды.

В настоящее время энтерококкометрия узаконена в международном стандарте на воду, как показатель свежего фекального загрязнения. При обнаружении в воде атипичных кишечных палочек присутствие энтерококков становится главным показателем свежего фекального загрязнения. К сожалению, в СанПиН 2.1.4.1074-01на питьевую воду определение энтерококка не предусмотрено. (Сбойчаков, 2007)

Протей - относится к семейству Enterobacteriaceae. Широко распространены в воде, почве, продуктах, на объектах внешней среды, окружающих человека. Паразитируют у животных и человека, как правило, в кишечнике. (Микробиологический словарь справочник, 1999)

Группу протея рассматривают как виновников гнилостных процессов в природе, а следовательно, как показателей наличия органических веществ в воде водоемов. Это касается преимущественно одного вида - Pr.vulgaris; второй вид - Pr.mirabilis - обитатель кишечника человека и животных. Это экологическое различие позволило судить о характере загрязнения воды и степени ее эпидемической безопасности. Pr.vulgaris может быть показателем фекального загрязнения, Pr.vulgaris - показателем увеличения концентрации органических веществ вообще. Слабые стороны этого показателя - непостоянное наличие - Pr.mirabilis в кишечнике человека и способность достаточно интенсивного размножения обоих видов в воде. Отсутствует также метод исследования который позволил бы дифференцированно учитывать оба вида при их одновременном присутствие в исследуемой пробе. Предложенный метод не выполняет этой задачи. (Калина, Цистович,1969)

В настоящее время показано, что бактерии рода Proteus встречаются в 98% случаев в выделениях кишечника человека и животных, из них 82% случаев - Pr.mirabilis. обнаружения протея в воде указывает на загрязнение объекта разлагающимися субстратами и свидетельствует о крайнем санитарном неблагополучии. Протеометрия официально признана в США. (Сбойчаков, 2007)

Клостридии - род палочковидных перитрихиальных спорообразующих грам+ хемоорганотрофных анаэробных бактерий из семейства Bacilliaceae. (Микробиологический словарь-справочник, 1999) Особая роль в оценке питательных веществ отводится сульфидредуцирующим клостридиям. Большая способность к длительному существованию в воде, чем у других индикаторных микроорганизмов, высокая устойчивость к обеззараживающим агентам делают наличие клостридий косвенным показателем качества очистки (фильтрации) воды от устойчивых к кишечных вирусов, паразитарных простейших. Обнаружение клостридий в больших количествах вместе с кишечной палочкой говорит о свежем фекальном загрязнении. (Санитарно-бактериологическое и вирусологическое исследование воды, 1981)

Выявление спор сульфидредуцирующих клостридий проводят на водопроводах из поверхностных источников для оценки эффективности технологической обработки воды. Споры сульфидредуцирующих бактерий не должны присутствовать в 20 мл питьевой воды после завершения водоподготовки.

В качестве индикатора вирусного загрязнения питьевой воды в СанПиН включены колифаги, которые по своему биологическому происхождению, размерам, свойствам, устойчивости к факторам окружающей среды наиболее близки к кишечным вирусам. Колифаги не должны обнаруживаться в 100 мл обработанной питьевой воды. (Мазаев, Шлепнина, 1999)

4. Микробиологическая характеристика питьевой воды

4.1 Микроорганизмы составляющие общее микробное число

Вырастить одновременно все микроорганизмы, содержащиеся в исследуемом образце питьевой воды, практически невозможно. Разные микробы требуют различных условий: различной аэрации, различного рН, различных условий питания. Поэтому ограничиваются выделением только аэробных мезофильных бактерий. Эту группу преимущественно составляют сапрофитные бактерии, использующие в качестве источника азотного питания белок и продукты его распада, являющиеся главными потребителями органического вещества, вносимых в воду в процессе загрязнения человеком и животными (аварии на водопроводе, недостаточная очистка питьевой воды) (Тец, 1960)

4.2 Семейство Enterobacteriaceae.

Общая характеристика семейства. Семейство палочковидных аспорогенных капсульных либо бескапсульных перитрихиальных либо неподвижных грам отрицательных хемоорганотрофных факультативно анаэробных бактерий порядка Eubacteriales. Многие виды имеют реснички. Хорошо воспринимают анилиновые красители. Способны к половому и параполовому способу размножения. Метаболизм окислительного или (и) бродильного типа. Способность к ферментации углеводов, аминокислот и белков выражена в различной степени и является главным систематическим признаком. Нитраты редуцируют в нитриты. Представители семейства широко распространены в природе. Среди них имеются как нормальные обитатели кишечника человека и других животных, так и патогенных для них виды, а также свободноживущие сапрофиты. Систематика основывается на различиях в биохимической активности, антигенной специфичности, а также на чувствительности к фагам и бактериоцинам. (Красильников, Романовская, 1999)

Резистентность. Чувствительны к кислотам, аминогликозидам, тетрациклинам, ампицилину. Распространены формы, устойчивые к антибиотикам формы, особенно в больничных условиях.

В течении несколько месяцев сохраняются в воде и почве. (Воробьев, Кривошеин, Широкобоков, 2006) Энтеробактерии продолжительно, до 6,5 лет могут сохранятся в стерильной воде. В водопроводной воде их выживание ограничивается 31 днем. (Кирьянов, Больных, 1986) Чувствительны к действию растворов хлорамина, фенола, цитраля и других дезинфицирующих средств. (Пяткин, Кривошеин, 1980)

ОКБ включают виды E.coli, Citrobacter, Enterobacter, Klebsiella. ТКБ включают весь род Escherichia и в меньшей степени Citrobacter, Enterobacter, Klebsiella. (Руководство по контролю качества питьевой воды, 1987)

4.2.1 Род Escherichia

В 1885г. в городе Граце немецкий врач Теодор Эшерих выделил из кишечника больного младенца палочку, которую назвал Bacterium coli. Он искал возбудителя детской холеры, бушевавшей в то время. Вскоре он обнаружил аналогичный микроорганизм в кале здорового ребенка. Как выяснилось, палочка является резидентом толстого кишечника и учувствует в пищеварении, частично разлагая клетчатку, синтезирует витамины В, Е и К. Является антагонистом патогенов (гр. Candida, гнилостные бактерии), блокируя рецепторы и выделяя колицины. (Медицинская микробиология, 2009)

Морфология. Род образуют прямые палочковидные бактерии размерами 1,1-1,5?2,0-6,0 мкм; в мазках располагаются одиночно или парами. (Медицинская микробиология, 1999) E.coli в мазках представлена короткими палочками с закругленными концами; склонна к полиморфизму и может выглядеть как коккобцилла или нить. Подвижны, но также имеются неподвижные штаммы. У большинства штаммов имеются капсулы или микрокапсулы. Эшерихии обладают поверхностными структурами - фимбриями или ресничками. Некоторые пили являются факторами колонизации, обуславливающие способность этих бактерий прилипать к другим клеткам. (Энтеробактерии, 1985)

Культуральные признаки. На плотных средах образуют плоско-выпуклые, опалово-мутные S-колонии 0,3-0,5 см в диметре, с ровными или слегка волнистыми краями, или сухие плоские R-колонии с неровными краями. В проходящем свете S-колонии иногда выглядят зернистыми; колонии патогенных штаммов более мутные. Иногда образуются М-колонии (напоминают колонии клебсиелл) или мелкие колонии, напоминающие таковые у сальмонелл и шигелл.

В жидких средах эшерихии растут диффузно либо дают осадок или пленку на поверхности, кольцо на стенках пробирки. (Энтеробактерии, 1985) На жидком пептонном бульоне с бриллиантовым зеленым и желчью (бульон BRIA) - клетки E.coli давали небольшое просветление среды, белый осадок на дне пробирки, пузырьки газа на ее поверхности. прикультивировании на хромогенной среде LMX по Манафи Осмеру колиформы и E.coli давали изменение цвета среды на синий, а на поверхности регистрировалась пленка, на дне незначительный белый осадок. (Волкова, 2009)

На селективно-дифференциальных средах, колонии принимают цвет, соответствующей соответствующий окраске среды. На агаре Эндо эшерихии, ферментирующие лактозу, образуют фуксиново-красные колонии с металлическим блеском или без него, неферментирующие - бледно-розовые или бесцветные с темным центром. На среде Левина бактерии первой группы образуют темно-синие с металлическим блеском колонии, а второй - бесцветные. Н среде Плоскирева - соответственно красные с желтым оттенком и бесцветные, на агаре МакКонки - красные и бесцветные. На среде Аселя-Либермана - темно-коричневые с красноватым оттенком. На кровяном агаре могут давать полные гемолиз.

На среде с бромтимоловым синим (СБТС) спустя 18 часов культивирования клетки E.coli формировали колонии диаметром 1,9-3,0 мм круглые, непрозрачные ярко-желтые. На среде с бриллиантовым зеленым образуются колонии сиреневого цвета, диаметром 0,5-1 мм. На SS-агаре спустя 18 часов культивирования образовывались круглые кислотно-розовые колонии диаметром 2,2-3,1 мм, цвет среды изменялся на малиновый. На хромкультагаре через 18 часов появляются колонии чернильного цвета, а на селективном агаре для иерсиний Merck (коммерческая среда), образуются розовые с бледно-розовым центром колонии, 2,0-5,0 мм в диаметре, круглые, выпуклые и матовые. На селективном агаре для иерсиний Hi-Media E.coli формирует розовые, красные, выпуклые колонии, диаметром 2,0-4,0 мм, цвет среды при этом меняется на малиновый. На LRB-агаре спустя 18 часов культивирования появляются розово-малиновые колонии с изменением цвета среды на малиновый. (Волкова, 2009)

Биохимические свойства. Эшерихии ферментируют углеводы с кислотообразованием: постоянно - глюкозу (с газом или без него), манит; обычно ферментируют лактозу (иногда замедленно), не ферментируют адонит, инозит (крайне редко наблюдается положительная реакция). Другие углеводы и многоатомные спирты сбраживают вариабельно; не образуют сероводород на средах с хлоридом железа. Обычно неутилизируют цитрат, малонат. Не имеют фенилаланниндезаминазы, уреазы, желатиназы. Иногда утилизируют цитрат, дают положительную реакцию с метиловым красным и отрицательную Фогеса-Проскауэра. Постоянно имеют лизиндекарбоксилазу и непостоянно - орнитиндекарбоксиллазу и аргининдекарбоксилазу. Не растут в средах с KCN. (Энтеробактерии, 1985)

4.2.2 Род Klebsiella

Этот род относят к числу старейших в семействе (организован в 1885 году). Немецкий исследователь Клебс в 1875 году обнаружил овальные «кокки» - «monas pulmonale» - в бронхиальном секрете легких, почвах и жидких мазках желудка людей, умерших от крупозного воспаления легких, осложненного менингитом, но не сумел выделить микробы в чистую культуру. Начало открытия клебсиелл длительное время связывали и именем Фридлендера, который в 1882 году выделил из экссудата пневмонийного очага больного, умершего от пневмонии, типичного микроорганизма и определил их свойства.

Морфология. Род образуют прямые неподвижные палочки размерами 0,6-6,0?0,3-1,0 мкм. В мазках располагаются одиночно, парами или цепочками. Имеют капсулу. Под действием антибиотиков способны образовывать L-формы. (Красильников) Капсульная форма имеет размеры 3-5 на 5-8 мкм. Размеры подвержены сильным колебаниям, особенно у клебсиелл пневмонии. Жгутики отсутствуют, бактерии спор не образуют, у части штаммов имеются реснички. Обычно видна толстая полисахаридная капсула; бескапсульные формы могут быть получены при воздействии на бактерии низкой температуры, сыворотки желчи, фагов, антибиотиков и при мутациях. (Коротяев, Бабичев, 1998)

Культуральные признаки. Непременной особенностью клебсиелл считают пышный рост и образование на питательных средах больших, влажных колоний, частично сливающихся друг с другом. Нередко очень слизистых, выпуклых. Слизистый характер колоний нередко связывают с наличием капсулы и обычно используют при отборе колоний со сред первичного посева при поиске клебсиелл. Иногда слизистый характер колоний не связан с наличием капсулы. Нередко обнаруживается капсулы и в суховатых колониях. Некоторые культуры этих бактерий имеют тенденцию к продукции капсулы, но не образуют большого количества слизи и наоборот.

На продукцию слизи или капсулы влияют условия культивирования. Продукции полисахаридной субстанции особенно способствует высокое соотношение в среде углевода и азота. (Энтеробактерии, 1985) В жидких питательных средах клебсиеллы растут с образованием либо гомогенной мути, либо осадка, либо пленки на поверхности пробирки, кольца на стенке. Появление пленки часто связывают с фимбреобразующими штаммами. Культуры клебсиелл некоторых К-сероваров за обычный срок инкубации в бульоне дают почти невидимый рост.

На плотных питательных средах клебсиеллы образуют пышные частично сливающиеся слизистые колонии. На средах Эндо, МакКонки, Плоскирева большинство клебсиелл образуют колонии с металлическим блеском. (Медицинская микробиология,1999) При посеве на SS-агар формируют фиолетовые и розовые колони. (Мерджинов и др., 2005)

В косопроходящем свете по матоду Ленди независимо от наличия или отсутствия слизи или степени прозрачности в проходящем свете колонии имеют разный оттенок свечения. Хотя отмечено преобладание яркой розово-дымчатой окраски и гомогенной поверхности штаммов, имеющих отчетливую капсулу в тушевом препарате и не прозрачных в проходящем свете. Колонии таких штаммов могут иметь оранжево-дымчатую окраску с бежевым оттенком или яркую розово-зеленовато-желтую окраску, небольшую исчерченность. Растут на средах с цианистым калием. (Энтеробактерии, 1985)

Биохимические свойства. Клебсиеллы ферментируют глюкозу с образованием кислоты и газа, а также лактозу, сахарозу, манит, салицин, адонит, инозит, глицерин, целлобиозу, нерастворимый крахмал (последние 4 субстрата с образованием кислоты и газа). Они вариабельно ферментируют дульцит, не образуют индола и сероводорода, не разжижают желатин. Клебсиеллы не имеют фенилаланниндезаминазы, при наличии лизиндекарбоксилазы и уреазы.

Способны утилизировать цитрат как единственный источник углевода, а так же малонат. Дают положительную реакцию Фогеса-Проскауэра, отрицательную с метиловым красным. Некоторые клебсиеллы способны к образованию индола и разжижению желатина. Реакцию в среде с мочевиной у клебсиелл отмечают как замедленную и не такую интенсивную как у протеев. Возможна положительная реакция с метиловым красным и отрицательная Фогеса-Проскауэра у капсулированных штаммов (K. ozanae, K. rhinoscleromatis) (Энтеробактерии, 1985)

4.2.3 Род Citrobacter

Род получил свое название благодаря способности его представителей утилизировать цитрат (citrus - лимон, bacter - мелкие палочки) и использовать его в качестве источника углеводов.

Морфология. Род палочковидных бескапсульных аспорогенных перитрихиальных грамотрицательных бактерий. (Красильников, Романовская, 1999) в мазках располагаются одиночно или парами. Палочки имеют размер 2-6?1,0 мкм, перитрихи. (Медицинская микробиология, 1999)

Культуральные признаки. На среде Эндо лактозоположительные варианты Citrobacter образуют колонии, окрашенные в розовый или красный цвет, но лишенные типичного для кишечной палочки металлического блеска; у лактозоотрицательных вариантов колонии бесцветные или сероватые с розовым оттенком, более темным в центре. На среде Плоскирева лактозоотрицательные штаммы Citrobacter образуют слегка опалесцирующие выпуклые колонии, окрашенные в тон среды (слегка розоватые); лактозоположительные колонии имеют более интенсивную розово-красную окраску с темным центром. На висмут-сульфит агаре через 48 часов инкубации цитробактеры дают обильный рост под колонией. Рост на этой среде более обильный чем у сальмонелл, и отличается неприятным запахом. (Энтеробактерии, 1985)

Биохимические свойства. Ферментативные свойства являются основой для серологической идентификации цитробактеров. Они утилизируют цитрат в среде Симонса, образуют газ в глюкозе, ферментирую лактозу в разные сроки (встречаются лактозоотрицательные штаммы). Также ферментируют манит, рамнозу, сорбит, арабинозу, ксилозу, мальтозу. Обычно не ферментируют инозит. Не обладают лизиндекарбоксилазой, фенилаланиндезаминазой и желатиназой. Мочевину гидролизуют очень слабо и медленно. Положительны в реакции с метиловым красным и отрицательны в реакции Фогеса-Проскауэра. Большинство представителей рода образуют сероводород и не образуют индол. Они вариабельны в отношении сахарозы, салицина, дульцита, рафинозы и адонита, а так же проявляют различные реакции в тестах с аргинином, орнитином, малонатом. утилизируют различные соли органических кислот - мукат и D-тартрат. (Энтеробактерии, 1985)

Род Enterobacter.

Морфология. Род палочковидных перитрихиальных аспорогенных бактерий. (Микробиологический словарь-справочник, 1999г.) размеры палочек 1,2-3,0?0,6-1,0 мкм. единственный неподвижный вид - E.asburiae. Некоторые штаммы имеют капсулу. (Медицинская микробиология, 1999)

Культуральные признаки. Хорошо растут на обычных плотных питательных средах и селективно-диагностических средах с образованием колоний обычного размера, слизистых и неслизистых, напоминающие колони эшерихий или клебсиелл (лактозоположительные варианты). Малиновых или розовых, с металлическим блеском или без него. замедленно расщепляющие лактозу штаммы растут на лактозосодержащих дифференциальных средах подобно патогенным кишечным бактериям, образуя бесцветные колонии с розовым или бежевым оттенком на среде Эндо или с желтоватым на среде Плоскирева. (Энтеробактерии, 1985) На SS-агаре энтеробактеры формируют крупные слизистые колонии желтого или коричневого цвета. (Марджинов и др., 2005)

В косопроходящем свете по методу Landy колонии обычно имеют зеленовато-желтоватый оттенок. (Энтеробактерии, 1985)

Биохимические свойства. Энтеробактеры не образуют сероводород и индол, не имеют фенилаланниндезаминазы, утилизируют цитрат, слабо активны при гидролизе мочевины, вариабельны в тестах с метанолом и аминокислотами. Большинство штаммов замедленно разжижают желатин, отрицательны в реакции с метиловым красным, положительны в реакции Фогеса-Проскауэра. Ферментируют глюкозу с образованием кислоты и газа, обычно манит,, лактозу, сахарозу. Встречаются штаммы не ферментирующие последние два углевода или с замедленной положительной реакцией. Ферментируют рамнозу, ксилозу, мальтозу, сорбит, арабинозу, раффинозу, вариабельно - инозит, дульцит, салицин, адонит. (Энтеробактерии,1985)

Список использованных источников

1. Андрусенко Т.Н. и др. Гидробионтный фактор в эпидемиологии холеры// Здоровье населения и среда обитания. - 2009г. - №3 - с.14-17

2. Белетов Н.В., Корнелаева Р.П., Костринина П.Г.. Санитарная микробиология. - М.: Пищевая промышленность, 1980г. - 352с.

3. Биография проекта ФЗ РФ «О питьевой воде» //Питьевая вода. - 2001г. - с 3-7.

4. Боголюбов С.А., Кичинин Н.В., Понамарев М.В.. Комментарий к водному кодексу РФ (постатейный). - М.: ЗАО «Юстицинфром», 2007г. - 312с.

5. Виноградова А.П., Пахомчук Т.К. Комплексные санитарно-микробиологические оценки качества водных объектов в условиях антропогенной нагрузки//Гигиена и санитария. - 1991г. - №1. - с. 24-26

6. Возная Н.Ф. Химия воды и микробиология. - М.: Высш. шк. 1979, 340с. с ил.

7. Волкова Е.А. Культуральные свойства энтеробактерий на диагностических средах//Ветеринария. - 2009г. - №2 . - с26-29

8. Воробьев А.А., Кривошеин Ю.С., Широкобоков В.Н. Медицинская и санитарная микробиология. - М.: издательский центр Академия, 2006г., 464с

9. Гигиенические требования критериев и других ревалентных инфекций ВОЗ// Руководство по контролю качества питьевой воды. - Том 2. - 235с.

10. Гигиена с основами экологии человека./ Под ред. П.И. Мельниченко - М.: ГЭОТАР-Медиа, 2010г. - 752с.

11. Доливо-Добровольский Л.Б.. Микробиологические процессы очистки воды. - М.: Издательство министерства коммунального хозяйства, 1960г. - 184с.

12. Доливо-Добровольский Л.Б.,. Кульский Л.А, Никорчевская В.Ф.. Химия воды и микробиология. - К.: Высш. шк. 1971, 340с.

13. Ивчатов А.Л., Малов В.И. Химия воды и микробиология. - М.: ИнФРА-М, 2006 - 218с.

14. Карюхина Т.А., Чурбнова И.Н.. Химия воды и микробиология. - М.: Стройиздат, 1995г. - 208с. ил.

15. Коммунальная гигиена/ Под. ред. В.Т. Мазаева.- М.: ГЭОТАР-Медиа, 2005.- 304с.

16. Коротяев А.И., Бабичев С.А.. Медицинская и санитарная микробиология. - СПб: Специальная литература, 1998г. - 592с.

17. Кочемасова В.Н., Ефремова С.А., Рыбакова М.А. Санитарная микробиология и вирусология. - М.: Медицина, 1987. - 352с.

18. Красильников А.П., Романовская Т.Р.. Микробиологический словарь-справочник. - Минск: «Асар», 1999г. - 400с.

19. Линевич С.Н. Водные ресурсы, их подготовка и использование в хозяйственно-питьевом водоснабжении. Проблемы и решения. - Новочеркасск: ЮРГТУ, 2005г. - 242с.

20. Мазаев В.Т, Ильницкий А.П., Шлепнина Т.Г.. Руководство по гигиене питьевого водоснабжения. - М.: ООО «Медицинское информационное агентство», 2008г. - 320с.

21. Мазаев В.Т., Шлепнина Т.Г., Мандрыгин В.И.. Контроль качества питьевой воды. -М.: Колос, 1999г. - 168с.

22. Медицинская микробиология./ Под ред. В.Н. Царева. - М.: Практическая медицина, 2009г. - 581с.

23. Медицинская микробиология, вирусология и иммунология/ Под ред. А.А. Воробьева. М.: ООО «Медицинское информационное агентство», 2004г., 704с.

24. Медицинская экология./Под ред. А.А. Королева. - М.: Издательский центр «Академия», 2003г. - 192с.

25. Мерджинов М.М. и др. Диагностическая эффективность питательных сред для бактериологического выявления энтеробактерий.//Журнал микробиологии, эпидемиологии и иммунологии. - 2005г. - №4. - с.15-18

26. Поленов Б.В.. Защита жизни и здоровья человека в XXI веке. Восемь основных источников опасности для человечества. - М.: ООО «Группа ИДП», 2008г. - 720с.

27. Пяткин К.Д., Кривошеин Ю.С.. Микробиология. - М.: Медицина, 1980г. - 512с.

28. Руководство по медицинской микробиологии. Общая и санитарная микробиология. Книга 1/ Под. ред. А.С. Лабинской, Е.Г. Воминой. - М.: Издательство БИНОМ, 2008г. - 1800с.

29. Руководство по контролю качества питьевой воды ВОЗ, том 2// Питьевая вода. - 2001г. - №1. - с.22-26

30. Санитарно-бактериологическое исследование воды. \ Под ред. В.Н. Григорьевой, Л.В. Гириной. - Киев: ЗДОРО,Я, 1981г. - 176с.

31. Санитарная микробиология/ Под ред. Г.П. Калины, Г.Н. Цистовича. - М.: Медицина, 1969г. - 295с.

32. СанПиН 2.1.4.1074-01 «Питьевая вода. Гигиенические требования к качеству воды централизованных систем питьевого водоснабжения. Контроль качества»

33. Сбойчаков В.Б. Санитарная микробиология. - М.: ГЭОТАР-Медиа, 2007г. - 192с.

34. Справочник по санитарной микробиологии/ Под ред. Л.В. Григорьевой. - Кишинев: Картя Молдовеняскэ, 1981 - 206с.

35. Таубе П.Р., Баранова А.Г.. Химия и микробиология воды.- М.: Высш. шк. 1983 - 280с.

36. Тец В.И. Санитарная микробиология. - Ленинград: Медгиз, 1960г., 433с.

37. Тимаков В.Д., Левашев В.С., Борисов Л.Б. Микробиология. - М.: «Медицина», 1983 - 512с.

38. Трахман Н.В., Измеров И.П. «Коммунальная гигиена» М. «Медицина».-1974 327с.

39. Экологический вестник Дона «О состоянии окружающей среды и природных ресурсов Ростовской области в 2008году» Под ред.: Курдюмов С.Г., Скрипка Г.И., Парощенко М.В., Ростов-на-Дону: ООО типография «Альтаир», 2009г., 335с.

40. Экология микроорганизмов: Учеб. для студ. вузов./Под ред. А.И. Нетрусова.- М.: Издательский центр «Академия», 2004.-272с.

41. Энтеробактерии/ Под ред. В.И. Покровского. М.: Медицина, 1985г.,

Размещено на Allbest.ru