Размещено на http://www.allbest.ru/

Министерство сельского хозяйства Российской Федерации

ФГОУ ВПО государственная сельскохозяйственная академия

Кафедра эпизоотологии, микробиологии и вирусологии

Курсовая работа

по дисциплине "Ветеринарная микробиология и иммунология"

ЛАБОРАТОРНАЯ ДИАГНОСТИКА СТОЛБНЯКА

План

Введение

1. Обзор литературы

2. Собственные исследования

2.1 Учет результатов

2.2 Документы, регламентирующие ход исследований

Заключение

Список использованной литературы

Приложение

Введение

Выбор темы для курсовой работы обосновывается тем, что столбняк - это раневая инфекционная болезнь, известная с древнейших времён. Столбняк фиксировали во многих странах мира. К столбняку восприимчивы все виды млекопитающих, в большей степени лошади, затем овцы, козы и крупный рогатый скот, свиньи, собаки и кошки. Птицы относительно устойчивы, а холоднокровные вообще не чувствительны к возбудителю. Болеют животные любого возраста, но молодые чаще.

Возбудитель распространён повсеместно, зональное распределение болезни прямо зависит от зонального географического распространения возбудителя в почве, которая, в свою очередь, связана с плотностью поголовья. Чаще Cl. Tetani обнаруживают в удобряемых пашнях, садовой земле, уличной грязи, кормах.

Болезнь неконтагиозна. Заражение в естественных условиях происходит в результате попадания спор возбудителя с землёй, навозом и прочим в раны. Столбняк может возникнуть при загрязнении кастрационных или операционных ран, пупочной раны у новорождённых, оказании помощи во время тяжёлых родов и при приёме новорождённых, укусах и после всевозможных хирургических и технологических операций, проводимых без соблюдения правил асептики и антисептики.

Попавшие в ткани клостридии размножаются лишь при наличии анаэробных условий, которые создаются в глубоких ранах, гематомах и некротизированных тканях. А смерть животного наступает в результате паралича дыхательного центра и сердца, асфиксии и нарушения кровообращения. Столбняк трудно дифференцировать, так как по симптомам и патологоанатомическим изменениям сходен с бешенством, отравлением стрихнином, менингитом, эпилепсией и эклампсией, пастбищной тетанией. Острым мышечным ревматизмом и пододерматитом.

Чтобы предотвратить ущерб от заболевания, необходимо вовремя провести лабораторные исследования и правильно поставить диагноз. Я решила более подробно изучить свойства возбудителя и методику его лабораторных исследований, чтобы, столкнувшись с данным заболеванием на практике, грамотно его дифференцировать.

1. Обзор литературы

Историческая справка. Гиппократ в 4 веке до нашей эры описал столбняк у человека и обратил внимание на характерный клинический симптом - ригидность мышц. В 1883 г. Н.Д. Монастырский впервые описал столбнячную бациллу. В 1884 г. Немецкий учёный А.Николайер подробно описал его и экспериментально вызвал болезнь у мелких животных. В 1889 г. Японский микробиолог Ш. Китазато выделил чистую культуру возбудителя. В 1890 г. Немецкий бактериолог Э. Беринг и Китазато разработали метод получения противостолбнячной сыворотки, а Фабер в том же году обнаружил токсин, а французский бактериолог Рамон в 1923 г. получил столбнячный анатоксин, который применяют для иммунизации животных против столбняка. В СССР изучали столбняк Н.Е. Цветков, А. Бреус, Ф.И. Каган, Н.М. Стрелков, Г.И. Елизаровский и др., разработавшие методику получения квасцового анатоксина для иммунизации животных. Столбняк наблюдается в различных странах земного шара, чаще в южных зонах. Летальность при столбняке - 50-90%, но экономический ущерб невелик, так как столбняк не заразен.[8]

Микроорганизмы из группы патогенных анаэробов обладают способностью вызывать тяжелопротекающие инфекционные болезни и токсикозы у человека и животных. Патогенные анаэробы - это преимущественно клостридии.

Клостридии - многочисленная группа почвенных анаэробных бактерий, включающая 61 вид; однако только 12 из них - патогенные микроорганизмы. Патогенные клостридии относятся к семейству Bacillaceae, роду Clostridium.[2]

Экологической особенностью различных представителей рода клостридии является их способность к сапрофитическому существованию, высокая устойчивость, к неблагоприятным воздействиям окружающей среды благодаря спорообразованию и широкое повсеместное распространение. Типичными местами их обитания и размножения служат почва и желудочно-кишечный тракт животных. [4]

Важнейшими возбудителями анаэробных клостридиозов являются C. tetani, C. botulinum, C. chauvoei, C. Perfringens, C. septicum, C. novyi, C. histolyticum, C.sordelli.

Возбудитель столбняка - C. Tetani. Вызывает остропротекающую неконтагиозную раневую инфекцию, при которой нервная система поражается экзотоксином микроба. [7]

Морфология. C. tetani - крупная тонкая палочка с закруглёнными концами, длиной 3…12 и шириной 0.3…0.8 мкм. В препаратах из пораженных тканей бактерии располагаются отдельно и группами по 2…3 клетки, из культур, особенно молодых, в жидких средах - в виде длинных изогнутых нитей. Столбнячная палочка подвижна, имеет до двадцати и более жгутиков; в старых культурах преобладают клетки без жгутиков. Капсулу не образует. Круглые споры, располагающиеся терминально в 2…3 раза шире клетки, в результате этого бактерия приобретает вид барабанной палочки. Споры формируются в культурах обычно через 2…3 суток, они также образуются и в организме. Палочки со спорами неподвижны. На 4…6-е сутки культуры в жидких средах состоят исключительно из спор и почти не содержат вегетативных клеток, которые лизируются.

Вегетативные клетки хорошо окрашиваются спиртово-водными растворами анилиновых красок. Грамположительные, но в старых культурах часть бактерий грамотрицательные. [4]

Культуральные свойства. Возбудитель столбняка - строгий анаэроб. На поверхности плотных питательных сред растёт в условиях анаэробиоза при остаточном давлении не выше 0,7 кПа. Оптимальные условия: рН 7,4…7,6 и температура 36…38?С; границы роста лежат в пределах 14…43?С. В среде Китта-Тароцци возбудитель растёт медленно; обычно через 24…36 ч появляется интенсивное равномерное помутнение с незначительным газообразованием в виде единичных пузырьков, к 5…7-м суткам выпадает рыхлый осадок, среда при этом становится прозрачной. Культуры, особенно на 3…5-е сутки роста издают своеобразный запах жжёного рога.

На глюкозо-кровяном агаре в анаэробных условиях образует нежные беловато-серые колонии с отростками и приподнятым центром , иногда в виде мелких круглых ,напоминающих капельки росы. Колонии окружены слабой зоной гемолиза (2…4мм). Если чашки дополнительно выдержать при комнатной температуре, зона гемолиза увеличится, при обильном посеве гемолиз может быть по всей поверхности среды. В высоком столбике агара через 1…2 сут вырастают плотные колонии, напоминающее чечевичное зерно, иногда диск ( R-форма). В столбике желатина через 5…12 сут появляется рост в виде ёлочки и происходит медленное разжижение субстрата. Молоко свёртывается медленно с образованием на 5…7-е сутки мелких сгустков казеина, мозговая среда чернеет при продолжительном культивировании. [3]

Биохимические свойства. В отличие от других патогенных клостридий возбудитель столбняка характеризуется слабой биохимической активностью: не сбраживает моносахариды и многоатомные спирты. Однако некоторые штаммы могут ферментировать глюкозу в зависимости от концентрации в среде ионов железа. Столбнячная палочка обладает слабыми протеолитическими свойствами, вызывая медленную ферментацию протеинов и пептонов до аминокислот, которые затем разлагаются с образованием угольной кислоты, водорода, аммиака, летучих кислот и индола. [4]

Антигенная структура. Подвижные штаммы клостридий столбняка в своём составе имеют соматический О- и жгутиковый Н-антигены. Термолабильный Н-антиген определяет типовую специфичность микроба. Описано 10 сероваров возбудителя столбняка, различающихся по структуре Н-антигена, обозначаемых цифрами I, II, III, IV и т.д. В природе чаще других встречают серовары I и II. Все они продуцируют иммунологически однородный экзотоксин, нейтрализуемый противостолбнячной сывороткой. Термостабильный О-антиген относится к групповым.

Антигенная структура столбнячного токсина изучена недостаточно. [3]

Устойчивость. Вегетативные клетки малоустойчивы к воздействию различных факторов внешней среды. Температура 60…70?С убивает столбнячные палочки в течение 30 мин, растворы обычных дезинфицирующих препаратов - через 15…20 мин.

Споры, напротив, весьма резистентны. В почве, высохшем кале, на различных предметах (гвозди, щепки, сельхоз орудия. колючки растений и др.0, защищённых от света, они сохраняются в течение многих лет. Прямой солнечный свет инактивирует споры через 3…5 сут. Во влажной среде при нагревании до 80?С сохраняют жизнеспособность 6ч, а при нагревании до 90?С - 2ч. При кипячении споры погибают через 30…50 мин, сухой жар (115?С) разрушает их только через 20 мин. Они также относительно устойчивы к различным дезинфекторам: 1%-й раствор сулемы и 5%-й раствор фенола убивают их через 8…10 ч, 5%-й раствор креолина - за 5, 1%-й раствор формалина - за 6 ч, 0,5%-й раствор соляной кислоты - за 30 мин, 10%-ная настойка йода - за10, 1%-й раствор азотнокислого серебра - за 1 мин. [5]

Патогенность. К столбняку восприимчивы все виды животных, но наиболее чувствительны лошади. Болеют также собаки, кошки и дикие млекопитающие. Описаны случаи столбняка у кур, гусей и индюков. К столбнячному токсину исключительно восприимчив человек. Холоднокровные - лягушки, змеи, черепахи, крокодилы - невосприимчивы к столбняку при температуре ниже 20?С, но введённый токсин длительное время циркулирует в их организме.

Из лабораторных животных наиболее восприимчивы белые мыши, морские свинки, кролики. Инкубационный период у белых мышей - до 36 ч, у морских свинок - до 48ч, у кроликов - до 3…4сут. Болезнь у них развивается по типу общего или восходящего столбняка. Особенно характерно эта клиническая картина проявляется у белых мышей: ригидность хвоста и инокулированной лапки. Конечность вытянута, ограничена в подвижности, туловище искривлено в сторону инокулированной лапки, постепенно процесс захватывает и вторую половину тела. Положенная на спину мышь не может самостоятельно перевернуться. Погибающие животные принимают характерную позу с искривлением тела и вытянутыми лапками. Гибель их наступает в течение от 12 ч до 5 сут. [4]

Патогенез. Основной патогенетический фактор при столбняке - экзотоксин, и в первую очередь тетаноспазмин, представляющий собой нейротоксинию. Он не поражает кожу и не оказывает цитотоксического действия. Ферменты протеазы и фибринолизин, расплавляя кровяные сгустки и тромбы, способствует распространению токсина за пределы очага размножения микробов. При глубоком ранении споры в условиях анаэробиоза быстро вегетируют, происходит интенсивное размножение бактерий и синтез токсина.

Экзотоксин поражает двигательные нервные центры, спинной и головной мозг, что в конечном итоге обуславливает основной симптомокомплекс столбняка. Под влиянием токсина снижается активность холинэстеразы и соответственно гидролиз ацетилхлорида, неизбежно ведущий к избыточному его образованию, вследствие чего концевая пластинка нервно-мышечного синапса приходит в состояние повышенного автоматического возбуждения. Судороги приводят к расстройству дыхания, развивается ларинготрахеоспазм, наступает гипоксия, респираторный и метаболический ацидоз. Под действием избыточного количества молочной кислоты может развиваться отёк мозга. Животные погибают в результате асфиксии или паралича сердца. [8]

Иммунитет и средства специфической профилактики. У животных некоторых видов отмечается естественная устойчивость к столбняку. Известно, что крупный рогатый скот и свиньи болеют реже. чем другие виды животных. Предполагают, что у них с кормом поступают споры возбудителя столбняка, которые вегетируют в пищеварительном тракте с образованием токсина, который, всасываясь в очень небольших количествах, вызывает иммунитет. В нативных сыворотках коров, зебу, буйволов, баранов обнаруживают столбнячный антитоксин, в меньшем количестве его находят в сыворотках лошадей и верблюдов.

Принято считать, что иммунитет при столбняке в основном антитоксический. Вакцинация животных столбнячным анатоксином сообщает им стойкий и напряжённый иммунитет, продолжающийся несколько лет.

У нас в стране применяют высокоэффективный концентрированный столбнячный анатоксин, представляющий собой преципитат 1%-го квасцового анатоксина, изготовленный из нативного столбнячного токсина путём обработки его формалином, теплом, алюмокалиевыми квасцами и фенолом. Применяют его с профилактической целью в местностях, энзоотически неблагополучных по столбняку, особенно там, где зарегистрированы частые случаи заболевания взрослых животных и молодняка. Иммунитет наступает через 30 сут после прививки и сохраняется у лошадей в течение 3…5 лет, у других видов животных - не менее года.

Для пассивной иммунизации и лечения больных животных предложена антитоксическая противостолбнячная сыворотка гипериммунизированных столбнячным анатоксином лошадей. [7]

2. Собственные исследования

В хозяйстве СПК "Боевик" Судиславского района пал жеребёнок в возрасте до 1 года. Ветеринарный врач хозяйства проведя осмотр животного, изучив клиническую картину заболевания поставил предварительный диагноз - столбняк. При этом для исследования в лабораторию был отправлен следующий патологический материал: Кусочки тканей из глубоких слоёв раневых поражений, гной, выделения из ран, Кусочки печени и селезёнки, массой по 20…30 г и 10 мл крови. Обосновываясь на том, что основная роль в развитии столбняка принадлежит нервнорефлекторным механизмам. Попавшие в рану столбнячные споры при благоприятных условиях прорастают , размножаются и выделяют токсин. Столбнячный токсин вызывает раздражение нервных окончаний , имеющихся в коже и мышцах, раздражение передаётся в центральную нервную систему , где возникают очаги повышенной возбудимости, вызывающие длительные судорожные сокращения мускулатуры тела и внутренних органов. Лабораторные исследования проводим согласно схеме бактериологического исследования патологического материала на столбняк.

Лабораторную диагностику проводим в две стадии: первая - это обнаружение токсина, а вторая - это выделение чистой культуры с последующей проверкой её токсичности.

В первую очередь мы проводим биопробу для обнаружения токсина в патологическом материале. Исследуемый патологический материал, в данном случае кусочки печени и селезёнки массой по 20…30 г, растираем в стерильной ступке с кварцевым песком, добавляем двойной объем физиологического раствора. Смесь выдерживаем 60 минут при комнатной температуре, после чего фильтруем через ватно-марлевый фильтр, для этой процедуры также можем использовать бумажный фильтр. Фильтрат вводим внутримышечно в бедро задней лапки двум мышам в дозе 0,5…1 мл, иногда для достижения более быстрого результата рекомендуется вводить фильтрат в область корня хвоста в смеси с хлористым кальцием. Если возбудитель столбняка имеет место, то характерные признаки проявятся уже через 48…96часов.

Следующим этапом мы должны выделить чистую культуру с последующей проверкой её токсичности. Для этого сначала мы выполним мазок-отпечаток и окрасим его по методу Грамма. Берём стерильное стекло для микроскопирования, обезжириваем его над пламенем спиртовки и кладём перед собой, затем прокаливаем пинцет и скальпель, отрезаем кусочек печени кубической формы размером приблизительно 0,5 см. Берём этот кусочек пинцетом и силой проводим по стёклышку несколько раз. Обводим мазок с обратной стороны стекла специальным карандашом по стеклу и даём мазку высохнуть на воздухе. Когда мазок высохнет, его необходимо зафиксировать. Фиксацию проводят над пламенем спиртовки. Предметное стекло медленно проводят три раза над пламенем горелки. Микроорганизмы погибают и прикрепляются к стеклу, не смываются при дальнейшей обработке. (Физический метод). Итак, мазок сделан и зафиксирован, а для его микроскопирования нам необходимо его окрасить.

Окраска по Грамму:

1) На фиксированный мазок помещаем полоску фильтровальной бумаги, пропитанную спиртовым раствором генциан кристаллвиолета, наносим на нее несколько капель дистиллированной воды для увлажнения, выдерживаем 2 мин, бумажку удаляем.

2) Препарат, не промывая, обрабатываем раствором Люголя 1-2 мин; раствор сливаем.

3) Наносим 96% этанола 45 сек,

4) Препарат тщательно промываем водой и

5) Окрашиваем фуксином Пфейффера 2 мин.

6) Вновь промываем водой, подсушиваем фильтровальной бумагой и микроскопируем

МИКРОКАРТИНА: тонкие палочки с закруглёнными концами, подвижны, встречаются клетки со жгутиками, споры, располагающиеся терминально - вид барабанной палочки, грамположительные. Микрокартина подходит под описание столбнячной палочки в научных источниках.

Далее мы выполняем посев в среды Китта-Тароцци + 0,5% глюкозы, МПА, МПБ. Существуют некоторые особенности при культивировании анаэробов:

- создание условий анаэробиоза;

- Использование специальной жидкой питательной среды мясо-пептонно печёночного бульона (среда Кита-Тароцци);

- в полужидком мясо-пептонном агаре - посев производят вглубь среды.

Техника посева

1. Посевы из проб нативного материала проводят пастеровской пипеткой, из бактериальной массы - бактериальной петлёй.

2. Посевы делаются над пламенем горелки.

3. На засеваемые пробирки, чашки Петри, колбы пишут номер экспертизы и дату посева.

Техника посева в жидкие питательные среды.

1. Пробирку с исследуемым материалом или бактериальной культурой и пробирки с питательной средой в левой руке, как при приготовлении мазка.

2. Бактериальную петлю прокаливают над пламенем горелки, снимают пробки от пробирок (в правой руке и петля, и пробка).

3. Над пламенем горелки петлю вносят в пробирку с материалом, берут одну каплю и переносят в пробирку с питательной средой.

4. Пробирки закрывают пробками, обжигают их над пламенем горелки.

Техника посева на плотные питательные среды

1. Пробирку с культурой и агаром берут в левую руку, держат скошенной поверхностью МПА кверху, пробками в сторону пламени горелки.

2. Петлю прокаливают, снимают пробки (в правой руке петля и пробки)

3. Около пламени петлю вносят в пробирку, берут одну каплю, переносят в пробирку со стерильной средой. Петлю опускают до дна пробирки, опускают в конденсационную жидкость и сеют зигзагом.

4. Закрывают пробками над пламенем горелки.

5. Петлю обжигают.

Приготовление среды Китта-Тароцци:

её основой служит печёночная вода, которую готовим путём кипячения в воде мелких кусочков говяжьей печени в соотношении 1:1. Печёночную воду смешиваем с МПБ, в соотношении 1:2. Смесь кипятят, устанавливаем необходимую рН и разливаем в пробирки по 10 мл. В пробирки добавляем кусочки варёной печени, а затем вносим по 2 мл вазелинового масла, автоклавируем при 0,5 атм в течение 20 мин. Перед употреблением пробирки со средой кипятим в водяной бане, затем охлаждаем, и только после этого проводим посев по указанной выше технологии, ставим в термостат при 37-38?С. Через 48-72 ч проводим учёт результатов.

Приготовление МПА:

К МПБ добавляем 2-3% промытого, мелко нарезанного агар-агара, нагреваем до расплавления агара, доводим до кипения. В горячем виде проверяем рН, затем доводим его до значения 7,2-7,6. Фильтруем через ватно-марлевый фильтр. Профильтрованный горячий агар разливаем по пробиркам и колбам. Стерилизуем, автоклавируем при 1 атм 20-30 мин. Затем засеваем культуру. Ставим в термостат на 48-96 ч.

Учёт результатов: На среде Китта-Тароцци при заданных ранее условиях образуется интенсивная муть с незначительным газообразованием. Через 48 ч наступает просветление бульона, на дне пробирки образуется осадок. Культура издает своеобразный запах жженого рога. На МПА полупрозрачные колонии с отростками.

Далее делаем мазок, окрашиваем по Грамму. Техника выполнения представлена ранее.

МИКРОКАРТИНА: тонкие палочки с закруглёнными концами, подвижны, встречаются клетки со жгутиками, споры, располагающиеся терминально - вид барабанной палочки, граммположительные. Предварительный ответ - столбняк.

Следующим этапом полученную культуру мы пересеваем на среду Китта-Тароцци и на глюкозо-кровяной агар Цейслера с целью получения чистой культуры.

Осуществим мы это методом пластического посева.

Суть метода: каждая колония развивается в результате размножения одной микробной клетки, поэтому посев одной изолированной колонии в пробирку с питательной средой позволяет выделить чистую культуру.

Техника выполнения:

1. Берём четыре-пять стерильных чашек Петри с МПА, чашку Петри делим на четыре-пять ровных участка (карандашом по дну), нумируют участки.

2. Каплю исследуемого материала петлёй берём, наносим на поверхность агара (участок 1) и равномерно распределяют её, не заходя за границы участка. Этой же петлёй не обжигая её, засевают остальные участки.

3. Вверх дном помещаем в термостат на 48 ч.

2.1 Учёт результатов

В последнем участке чашки на поверхности МПА вырастают изолированные колонии бактерий. На глюкозо-кровяном агаре в анаэробных условиях вырастают нежные беловато-серые колонии с отростками или в виде капельки росы. Колонии окружены слабой зоной гемолиза, при комнатной температуре зона гемолиза увеличивается.

Делаем мазок, окрашиваем по Грамму. (методика описана ранее)

МИКРОКАРТИНА: тонкие палочки с закруглёнными концами, подвижны, встречаются клетки со жгутиками, споры, располагающиеся терминально - вид барабанной палочки, граммположительные.

Производим подкожное заражение белых мышей. Для этого культуру для накопления токсина выдерживаем при 37-38?С в термостате 6…10 суток, затем фильтруем (можно центрифугировать) и вводим в дозе 0,3…0,5 мл двум белым мышам.

Наблюдение за животными: Через 48 часов после заражения у мышей уже начинают проявляться некоторые симптомы : затруднение в приёме и пережевывании пищи, что объясняется судорогами жевательных мышц, напряжённая походка животного, неподвижность ушных раковин и выпадение третьего века. Через некоторое время появились резкие судорожные сокращения мускулатуры всего тела, дыхание затруднено, ноздри расширены, пульс частый и твёрдый, наблюдается синюшность слизистых оболочек.

Результаты микроскопических исследований и постановка биопробы дают право нам говорить о том, что предварительный диагноз, поставленный ветеринарным врачом хозяйства, верный. Жеребёнок пал от столбняка.

2.2 Документы, которые регламентируют ход исследований

1. Правила работы и охраны труда в ветеринарных лабораториях. (Утверждены Министерством сельского хозяйства СССР 14 января1975г.Согласованы с ЦК профсоюза рабочих и служащих сельского хозяйства и заготовки 10 января 1975г.)

2. Правила взятия патологического материала, крови, кормов и пересылки их для лабораторного исследования. (Утверждены Главным управлением ветеринарии Министерства сельского хозяйства СССР 24 июня 1971г., взамен Правил, утверждённых 4 июля 1958г.)

3. Методические указания по проведению обязательного минимума исследований в ветеринарных лабораториях при диагностике болезней животных. (Утверждены Главным управлением ветеринарии Министерства с/х СССР 24 июня 1971г.)

Заключение

Проведя бактериологическое исследование состоящее из:

1)выделения чистой культуры возбудителя путем культивирования на питательные среды:

- Китта-Тароцци - интенсивное равномерное помутнение с незначительным газообразованием, затем рыхлый осадок, запах жженого рога;

- ГКА - нежные беловато-серые колонии с отростками и приподнятым центром.

2)изучение ее морфологических свойств по изготовленному из культуры и окрашенного по Грамму мазку:

МИКРОКАРТИНА: тонкие палочки с закруглёнными концами, подвижны, встречаются клетки со жгутиками, споры, располагающиеся терминально - вид барабанной палочки, грамположительные.

3) определения патогенности выделенных культур путем заражения выделенной микробной культурой белых мышей:

гибель белых мышей в течение 2 дней.

Выделен возбудитель столбняка.

столбняк инфекционный патогенность возбудитель

Список используемой литературы

1) Антонов Б.И., Борисова В.В., Волкова П.М. Справочник "Лабораторные исследования в ветеринарии "- М.: Агропромиздат 1986г.

2) А.Ф. Карышев, С.В. Карышев. " Инфекционные болезни животных. " Кишинев "Кортя Молдовеняскэ"

3) А.А. Конопаткин, Б.Т. Артемов, И.А. Бакулов, под редакцией профессора А.А. Конопаткина " Эпизоотология и инфекционные болезни " - М.; "Колос" 1993г.

4) Колычев Н.М., Госманов Р.Г. Ветеринарная микробиология и иммунология - М.: Колос 2003г

5) Костенко Т.С., Родионов В.Б., Скородумов Д.И. Практикум по ветеринарной микробиологии и иммунологии - М.: "Колос" 2001г

6) Мишанин Ю.Ф. Справочник по инфекционным болезням - Ростов-на-Дону "МарТ" 2002г

7) Н.А. Радчук, Г.В.Дунаев, Н.М.Колычев и др.; под редакцией Н.А. Радчука Ветеринарная микробиология и иммунология - М.: Агропромиздат, 1991г

8) Скрябин К.И. Ветеринарная энциклопедия. Издательство "Советская энциклопедия" М.1975г.

ПРИЛОЖЕНИЕ

В Областную Вет. Бак.

Лабораторию

СОПРОВОДИТЕЛЬНАЯ

При этом направляется на исследование __________________

Патологический материал _________________________________

Взятый от __________________________

Принадлежащий хозяйству _____________________

Клинические признаки_____________________

Данные пат вскрытия _________________

Прошу исследовать __________________

Дата

Должность: Подпись:

Экспертиза №

Дата поступления материала________________________

Адрес и название хозяйства_____________________________

Что прислано на исследование_________________

В каком состоянии принял материал_______________

На что исследовать_______________________

Ход исследования

Патологоанатомические и органолептические данные____________

Микроскопические исследования исходного материала________

(метод окраски) (морфология микробов)_______

Микроскопия культуры _______________

(метод окраски) (морфология микробов)_______

Пересев___________________________________________________

(на элективные среды, дробный посев, чашки, дата)__________



Дата исслдования	Наименование органов материи	Лактоза	Манит	Индол	Сероводород	Расщепление мочевины	Реакция с метилротом	Реакция Фогеса- Проскауэра

Биохимические свойства

Биологические исследования

Животное	Дата заражения	Методика	Результат
Белые мыши		Внутрибрюшинно 500 млн микробных клеток	Гибель двух белых мышей в течение 2-х дней

Результаты исследования

Бактериологическим исследованием выделена энтеропатогенная бактерия E. Coli (возбудитель колибактериоза) серотип А-20, чувствительный к цефотоксину, гентамицину, левомицитину, неомецину, тетрациклину, пенициллину.

Рекомендации

Проводить мероприятия против колибактериоза согласно инструкции

Дата________ Врач-бактериолог__________

Размещено на Allbest.ru