Клиническое исследование животного

Исследование крови.

Кровь у животного берут из подкожной вены предплечья. Место взятия крови выстригают, кожу протирают ватой, смоченной спиртом. Предварительно пережимают вену на середине предплечья большим пальцем левой руки. Стерильную кровопускательную иглу вводят в вену под углом 45°. Кровь набирают в пробирку, направляя струю по стенке, чтобы избежать образования пены. После взятия крови иглу извлекают из вены, а кожу на месте вкола иглы смазывают спиртовым раствором йода.

Чтобы избежать свертывания крови, к ней прибавляю антикоагулянт 1%-ный водный раствор гепарина из расчета две капли на 10 мл крови.

На сухое подготовленное предметное стекло наносят мазок крови следующим образом. На стекло ближе к короткой стороне наносят стеклянной палочкой небольшую каплю крови. Оставляют стекло в горизонтальном положении и размазывают каплю крови по стеклу с помощью чистого шлифованного стекла, помещая его под углом 45°; коротким ребром, подождав, пока вся кровь расплывется по нему, быстро проводят по предметному стеклу.

Высохший фиксированный мазок помещается в кювету с рабочим раствором краски (готовый краситель Романовского-Гимзе из расчета 1 капля краски на 1 мл дистиллированной воды) на 40 минут.

Краситель состоит из щелочной части (азур II - ярко-синий цвет), и кислой части (эозин - розово-красный цвет).

· Ядра клеток - красно-фиолетовые;

· Эозинофильные гранулы - красновато-коричневые;

· Базофильные гранулы - синие;

· Нейтрофильные гранулы - фиолетовые;

· Цитоплазма лимфоцитов - голубая;

· Эритроциты - бледно-красные;

· Тромбоциты - наружная часть синяя (более светлая); внутренняя - фиолетовая (более темная).

Подсчет эритроцитов в счетной камере.

Подсчет эритроцитов производят в счетной камере Горяева. Принцип метода основан на том, сто в строго определенном объеме камеры подсчитывают под микроскопом клеточные элементы и затем производят перерасчет полученного результата на 1мкл крови.

При подсчете эритроцитов кровь разводят в пробирках Флоринского, для чего в предварительно высушенную пробирку беру 44 мл 3%-ного раствора хлорида натрия. Капиллярной пипеткой от гемометра Сали набираю 0,02 мл крови и выдувают осторожно в пробирку с раствором хлорида натрия, промываю этой же жидкостью капилляр. Пробирку закрывают резиновой пробкой и тщательно перемешивают, получается разведение крови 1:200.

После этого концом стеклянной палочки отбираю из пробирки каплю крови и заполняют камеру так, чтобы вся поверхность, на которую нанесена сетка. была заполнена жидкостью без затекания ее в бороздки и без образования пузырьков воздуха. После заполнения камеру оставляют на 1 мин в покое до оседания форменных элементов. Затем подсчитывают эритроциты под микроскопом в пяти больших квадратах, расположенных по диагонали, начиная в левом верхнем большом квадрате, разделенном на 16 маленьких квадратиков. В большом квадрате клетки начинают считать с левого верхнего маленького квадратика, а далее перехожу во второй, третий, четвертый. После верхнего ряда эритроциты считают в нижнем, начиная с первого правого квадратика.

Количество эритроцитов определяют по формуле:

Х = А ? 4000 ? В/Б,

где Х - количество эритроцитов, сочтенных в 1 мкл крови;

А - количество эритроцитов, сосчитанных в 5 больших квадратах;

Б - количество малых квадратиков в 5 больших (5 * 16 = 80);

В - степень разведения крови;

4000 коэффициент, характеризующий объем жидкости над одним маленьким квадратиком.

Подсчет лейкоцитов в счетной камере.

Предварительно вносят в пробирку 0,4 мл жидкости Тюрка. Микропипеткой набираю 0,02 мл крови, вытираю ее кончик ватой и вношу кровь в пробирку с разбавителем. Не вынимая микропипетки из пробирки, промываю ее несколько раз верхней частью раствора. Пробирку закрываю пробкой и оставляю на 4 мин, при этом слегка встряхивая. Из этой пробирки с помощью пипетки беру 2 капли жидкости и вношу в счетную камеру Горяева.

Расчет общего количества лейкоцитов провожу по формуле:

Х - А ? 4000 ? 20 /1600,

Где Х - количество лейкоцитов в 1 мкл крови.

А - количество лейкоцитов в 100 больших квадратах.

4000 - множитель перевода к объему в 1 мкл крови.

20 - степень разведения крови.

1600 - количество малых квадратов.

Выведение лейкоцитарной формулы.

Т.к. у исследуемого животного кровь нейтрофильная, то в таком случае применяют способ подсчета, предложенный Шиллингом - четырехпольный метод Меандра. Он ведется так: близко к началу мазка, на его край, наставляют объектив микроскопа. Затем движутся от края вглубь мазка всего на 3-5 поля зрения, затем немного вбок и вновь возвращаются к краю, опять в бок и т.д. При этом все встречающиеся клетки отмечаются. Когда 25 клеток подсчитано, передвигаются несколько ближе к концу мазка, но не туда, где мазок уже слишком тонкий, и снова подсчитывают 25 клеток.

После подсчета каждого вида лейкоцитов в графе "Всего" должно быть в сумме 200 клеток.

Для выведения процента и определения лейкоцитарной формулы составляется пропорция. Количество подсчитанных клеток умножается на 100 и делится на 200.

Определение лейкоцитарного профиля.

Абсолютное содержание в 1 мкл крови представителей каждой из групп лейкоцитов.

Определение количества гемоглобина.

В градуированную пробирку гемометра до нижней метки наливают глазной пипеткой раствор соляной кислоты. Затем капилляром, приложенным к гемометру, набирают кровь несколько выше метки 20 мкл, ватой уравнивают столбик крови до отметки и отбирают наружную поверхность капилляра. После этого капилляр опускают ближе ко дну градуированной пробирки, осторожно выдувают кровь, не вспенивая содержимое. Капилляр промывают 2-3 раза, содержимое пробирки тщательно перемешивают и оставляют на 8-10 минут.

По истечении времени в пробирку глазной пипеткой добавляют дистиллированную воду до тех пор, пока цвет жидкости не будет совершенно одинаковым со стандартом.

Результат, после сравнения цвета жидкости со стандартом гемометра Сали, фиксируют по градуировке. Это и будет количество гемоглобина в 100 мл крови исследуемого животного в г. %, а при умножении на 10 полученных показателей - в г/л.

Список использованной литературы

1. И.М. Беляков, М.А. Фельдштейн "Пропедевтика внутренних незаразных болезней животных", 1984 г.

2. Беляков И.М., Обухов Л.М., Белов В.И. Методические рекомендации по лабораторным методам исследования мочи сельскохозяйственных животных. - М.: ВАСХНИЛ, 1980.

3. Е.С. Воронина "Практикум по клинической диагностике болезней животных". Москва "Колос", 2003г.

4. Внутренние незаразные болезни сельскохозяйственных животных: Учебник для вузов / Под ред. В.М. Данилевского. - М.: Агропромиздат, 1991.

5. Ионов П.С, Беляков И.М., Уша Б.В., Шайхаманов М.X., Шаптала И.П. Диагностическая и терапевтическая техника в ветеринарии. - М.: Колос, 1979.

6. Ю.Я. Кавардаков "Выполнение курсовой работы по клинической диагностике" - Абакан: Издательство ХГУ им. Н.Ф. Катанова, 1998. - 20.

7. Ю.Я. Кавардаков "Лабораторные исследования в ветеринарной диагностике" - Абакан: Издательство ХГУ им. Н.Ф. Катанова, 1998. - 128 с.

8. Д.Г. Карлсон, Д.М. Гиффин "Домашний ветеринарный справочник для владельцев кошек". Москва "Центрполиграф", 2004 г.

9. Кумсиев Ш.А. Методы обследования животных. - М.: Колос, 1970.

10. А. Линёва "Физиологические показания нормы животных". "Аквариум" ФГУИППВ, 2003 г.

11. Смирнов А.С, Конопелько П.Я., Беляков И.М. и др. Клиническая диагностика внутренних болезней сельскохозяйственных животных. - Л.: Колос, 1981.

12. Б.В. Уша, И.М. Беляков "Клиническая диагностика внутренних незаразных болезней животных" - Москва: "Колос", 2003 г.

13. Уша Б.В. Ветеринарная гепатология. - М.: Колос, 1979.

14. Уша Б.В., Фельдштейн М.А. Клиническое обследование животных. - М.: Агропромиздат, 1986.

15. И.В. Хрусталёв, Н.В. Михайлов "Анатомия домашних животных" Москва "Колос", 1997 г.

16. С.П. Шкиль, А.И. Попова "Клиническая диагностика. Методические указания по выполнению курсовой работы".

17. http://www.km.ru/referats/2AD9E33F16D34F12A66CA3338EB405D4

18. http://med-books.info/nevrologiya-neyrohirurgiya_760/metodyi-klinicheskogo-issledovaniya.html

19. http://www.bio-vet.ru/analiz-krovi-u-koshek

20. http://www.studfiles.ru/preview/1154203/

21. http://xreferat.ru/13/1188-1-polnoe-klinicheskoe-issledovanie-zhivotnogo.html

22. http://www.bkvet.ru/urine_analysis

Размещено на Allbest.ru