Данные журналов клинических исследований отделения эндоскопии, методом мануального перелистывания с использованием системы естественного визуального контроля и портативной компьютерной техники, были сведены в таблицы Microsoft Exel 2010. Для установления сезонного биоритма нет необходимости учитывать пол и возраст пациента, так как корреляции между этими параметрами и свойствами H.pylori в пищевом тракте не отмечено [54]. Поэтому при составлении базы данных учитывались только данные эндоскопического и иммуноцитохимического исследования и дата проведения обследования. Эндоскопические диагнозы были разбиты на 4 группы в зависимости от степени воспаления СОЖ:

1. Хронические состояния: хронический гастрит, хронический диффузный гастрит, поверхностный диффузный гастрит, хронический антральный гастрит, очаговый гастрит, поверхностный гастрит, хронический дуоденит, хронический бульбит, культи желудка, полипы желудка и пищевода, хронический атрофический диффузный гастрит, зарубцевавшаяся язва, рубцевая деформация ЛДПК,

2. Уже не хронические, но еще и не эрозивные: катаральный бульбит, очаговый бульбит, поверхностный бульбит, рефлюкс-эзофагит, катаральный эзофагит, острый эзофагит, пищевод Баррета, ГЭРБ, хронический рефлюкс-гастрит, хронические эрозии.

3. Эрозивные состояния: эрозии желудка, эрозивный бульбит, эрозивный гастрит, эрозивный дуоденит, эрозивный эзофагит, эрозии 12-перстной кишки, острые эрозии желдка, острые эрозии 12-перстной кишки.

4. Язвенные состояния: язва желудка, язва 12-перстной кишки, язва ЛДПК, язва пилорического канала, язвы пищевода, острые язвы, рубцующиеся язвы.

В случае наличия нескольких эндоскопических диагнозов, группу выбирали по диагнозу, соответствующему большей степени воспаления (например, диагноз "эрозивный антральный гастрит, острые язвы антрального отдела" относится к 4 группе).

Впоследствии было введено понятие "кокковый индекс" - отношение числа пациентов, у которых было обнаружено значительное количество кокковых форм в СОЖ (по системе это "2" или "3"), к общему числу инфицированных H.pylori.

Графики и диаграммы сезонного изменения степени обсемененности СОЖ кокковыми формами H.pylori строились по данным исключительно 1 группы диагнозов. Это объясняется необходимостью рассмотреть динамику бациллярно-кокковой трансформации в условиях, максимально приближенных к естественным условиям жизни популяции, т.е. как минимум неотягощённых стрессом, связанным с иммунным ответом больного, сопряженного с высокой степенью воспаления в слизистой.

3.2.2 Методы статистической обработки

Достоверность различий данных определялась с помощью критерия Фишера (угловое преобразование Фишера). Этот критерий оценивает достоверность различий между процентными долями двух выборок, в которых зарегистрирован интересующий нас эффект. Суть углового преобразования Фишера состоит в переводе процентных долей в величины центрального угла, который измеряется в радианах. Большей процентной доле будет соответствовать больший угол ц, а меньшей доле - меньший угол, но соотношения здесь не линейные:

где P - процентная доля, выраженная в долях единицы, Где p и q - процентные доли выборок, в которых зарегестрирован интересующий эффект, М и N - объемы выборок [57]

При увеличении расхождения между углами ц1 и ц2 и увеличения численности выборок значение критерия возрастает. Чем больше величина ц_эмп, тем более вероятно, что различия достоверны. Критическое значение ц_эмп для уровня значимости 0,05 равно 1,64. То есть, если ц_эмп = 1,64: если ц_эмп < 1,64, то характеристики сравниваемых выборок совпадают на уровне значимости 0,05; а если ц_эмп > 1,64, то достоверность различий характеристик сравниваемых выборок составляет 95%.

3.2.3 Метод жидкостной иммуноцитохимии

Все гастробиоптаты СОЖ, полученные при выполнении фиброэзофагогастродуоденоскопии с прицельной многократной биопсией, помещались в одну пробирку со стерильным фосфатным буфером. Пробирку с содержимым интенсивно встряхивали несколько раз, а гастробиоптаты вынимали, гомогенизировали и помещали в другую пробирку с 2,5 мл свежего буфера. Полученную суспензию подвергали центрифугированию на роторной центрифуге в течение 10 минут со скоростью 1600 об/минуту, затем из надосадочной жидкости готовили концентрированные монослойные цитологические препараты с использованием цитоцентрифуги CytoFuge2. Для этого надосадочную жидкость в объеме 200 мкл помещали в фильтр-концентратор и центрифугировали в течение 10 на скорости 1600 об/минуту. Полученные монослойные цитологические препараты фиксировали смесью спирт: ацетон в соотношении 1:1 и затем окрашивали иммуноцитохимическим методом в авидин-биотиновом варианте, который включал следующие этапы:

· промывку в двух сменах трис- NаСL - буфера по 5 минут;

· блокировку эндогенной пероксидазы в 3% растворе перекиси водорода на метаноле в холодильнике при + 4єС в течение 30 минут;

· промывку в двух сменах трис-NaCL - буфера по 5 минут,

· инкубацию с нормальной сывороткой - 30 минут;

· инкубацию с первыми кроличьими поликлональными антителами к антигенам клеточной стенки H.pylori (DAKO) в течение одного часа при комнатной температуре;

· промывку в двух сменах трис-NaCL - буфера по 5 минут;

· инкубацию со вторыми антикроличьми мышиными антителами (DAKO) 30 минут во влажной камере;

· промывку в двух сменах трис-NaCL - буфера по 5 минут;

· инкубацию с авидин-биотиновым (DAKO) комплексом 30 минут;

· промывку в двух сменах трис-NaCL - буфера по 5 минут;

· проявление пероксидазы диаминобензидином (DAKO) (под контролем микроскопа);

· промывку дистиллированной воде 5 минут;

· докрашивание гематоксилином Майера 1 минуту.

3.3 Результаты исследований, их анализ и обсуждение

3.3.1 Результаты жидкостной иммуноцитохимии

Технологией жидкостной цитологии было обработано и окрашено иммуноцитохимическим методом 8 гастробиоптатов из антрального отдела желудка. Ввиду того, что у нас не стояло задачей количественное определение НР в СОЖ пациента, а лишь установление достоверности присутствия некоторого количества кокковых форм, все гастробиоптаты обрабатывались одновременно. В результате было получено 24 препаратов: 16 из гомогенизированных гастробиоптатов и 8 из смыва с гастробиоптатов. Во всех препаратах были выявлены бактериальные клетки, имеющие специфическое для H.pylori окрашивание.

После проведенной иммуноцитохимической реакции в препаратах, приготовленных из гомогенизированных гастробиоптатов, бактериальные клетки H.pylori (спиралевидные и кокковые формы) окрашивались диаминобензидином в цвета от темно-коричневого до насыщенного черного.

Размеры спиралевидных форм бактериальных клеток НР варьировали от 3-5 мкм в длину и составляли около 0.5 мкм в поперечнике. Нередко наблюдались спиралевидные формы, соединенные между собой последовательно образуя цепочку.

Кокковые формы НР имели размеры от 0.5 до 1мкм в диаметре, идеально округлую форму и окрашивались равномерно с несколько большей интенсивностью, чем спиралевидные формы НР.

Рисунок 13 - Бактериальные клетки Helicobacter pylori, выявленные иммуноцитохимическим методом, в препарате, приготовленном из гомогенизированного биоптата слизистой оболочки желудка методой ЖЦ. Стрелкой обозначена кокковая форма НР. Увеличение 1000х.

Рисунок 14 - Кокковая форма Helicobacter pylori, выявленная иммуноцитохимическим методом, в препарате, приготовленном из гомогенизированного биоптата слизистой оболочки желудка методой ЖЦ. Увеличение 1000х.

А в препаратах суспензий клетки выглядели менее четко, были заметно менее спиральными (рисунки 15-16). Возможно, это связано с изменениями в структуре пептидогликана, отвечающего за форму бактерии, при достаточно длительном контакте с фосфатным буфером.

Рисунок 15 - Бактериальные клетки Helicobacter pylori, выявленные иммуноцитохимическим методом, в препарате, приготовленном из смыва с биоптата слизистой оболочки желудка методом ЖЦ. Увеличение 1000х.

Рисунок 16 - Кокковая форма Helicobacter pylori, выявленная иммуноцитохимическим методом, в препарате, приготовленном из смыва с биоптата слизистой оболочки желудка методом ЖЦ. Увеличение 1000х.

Тем не менее, можно утверждать, что нам удалось выявить истинные кокковые формы НР и что частоты их встречаемости в цитоцентрифугатах после ЖЦ совпадают с частотами встречаемости кокковых форм в прямых цитологических препаратах - мазках-отпечатках СОЖ (3-5%).

3.3.2 Количественная и полуколичественная оценка степени обсемененности СОЖ кокковыми формами

В рамках данного дипломного проекта был выполнен анализ данных о пациентах, поступивших в клинику в 2008 году с диагнозом хронический HP-ассоциированный гастрит. Было установлено процентное содержание кокковых форм в 220 препаратах, полученных из антрального отдела желудка и окрашенных иммуноцитохимическим методом. В результате получены гистограммы, характеризующие частоту встречаемости кокковых и У-форм в СОЖ по количественной и полуколичественной шкале.

Рисунок 17 - Распределение H.pylori-инфицированных пациентов с диагнозом хронический гастрит по признаку "частота встречаемости кокковых форм в СОЖ". На круговой диаграмме изображено полуколичественное распределение пациентов по степени обсемененности СОЖ кокковыми формами НР

На рисунке 17 представлено распределение 220 пациентов с диагнозом "хронический гастрит" по показателю "частота встречаемости кокковых форм НР в СОЖ". Из представленной гистограммы видно, что существует один модальный класс, соответствующий содержанию кокковых форм 5-10%.

Отметим, что для оценки степени обсемененности СОЖ кокковыми формами НР была предложена, опубликована и используется по настоящее время полуколичественная шкала, содержащаяся в разделе 3.1.1.

В гистограмме (рисунок 17), мы попытались с помощью цветовой маркировки выделить пациентов, которые в случае их оценки по полуколичественной шкале соответствовали градациям:

Очевидно, что представленная гистограмма, которую можно рассматривать как количественную шкалу, вполне соответствует ранее принятой полуколичественной.

Однако, мы считаем, что в дальнейшем для количественной оценки бациллярно-кокковой трансформации H.pylori необходимо к кокковым формам причислять и U-формы, так как очевидно, что они являются неотъемлемой частью трансформации из спиральных форм в кокковые. Поэтому, если мы будем проводить анализ сезонных колебаний активности бациллярно-кокковой трансформации НР в СОЖ, то для точной ее оценки необходимо рассмотреть аналогичные распределения для пациентов, где показателем активности бациллярно-кокковой трансформации была бы частота встречаемости не только кокковых форм, но и добавленная к ним частота встречаемости переходных U-форм.

Рисунок 18 - Распределение H.pylori-инфицированных пациентов с диагнозом хронический гастрит по признаку "частота встречаемости кокковых и U-форм в СОЖ".

На круговой диаграмме изображено полуколичественное распределение пациентов по степени обсемененности СОЖ кокковыми и U-формами НР. Из рисунка 18, отражающего распределение H.pylori-инфицированных пациентов с диагнозом хронический гастрит по признаку "частота встречаемости кокковых и U-форм в СОЖ" видно, что характер распределения ассиметричный, двухвершинный, с асимметрией вправо и что среди НР-инфицированных существует модальный класс, соответствующих содержанию кокковых форм 5-8% и субмодальный класс - 12-22%. Мы так же можем утверждать, что практически все пациенты из этого класса (кокки + U-формы > 11%) соответствуют пациентам с максимальной полуколичественной оценкой "к +++". Поэтому именно по показателю "к +++" мы провели анализ сезонных колебаний бациллярно-кокковой трансофрмации. Учитывая, что в этом распределении учитывались так же и U-формы НР, которые не учитывались ранее, этот класс соответствует содержанию кокковых форм больше 10%. В базе данных за 2002-2009 годы среди H.pylori-инфиццированных пациентов с хроническим гастритом доли пациентов, относящихся к каждому классу, распределены следующим образом:

Рисунок 12 - Полуколичественное распределение пациентов по степени обсемененности СОЖ кокковыми формами НР за 2002-2009 годы.

3.3.3 Сезонный биоритм активности бациллярно-кокковой трансформации Н.pylori в слизистой оболочке желудка

Для выявления сезонного биоритма бациллярно-кокковой трансформации НР в СОЖ мы использовали частоту встречаемости пациентов с хроническим гастритом, оцененных по полуколичественной шкале как кокки +++, ежемесячно на протяжении 8 лет.

В исследование вошли только те пациенты (N=2145), которые имели эндоскопический диагноз хронический гастрит с поддтвержденным хеликобактерилеозом, и которых оказалось подавляющее большинство из всех обследованных НР-инфицированных пациентов.

Таблица 4 Данные иммуноцитохимических исследований, соответствующих степени обсемененности СОЖ кокковыми формами к +++, %

Графическое изображение, иллюстрирующее приведенные выше табличные данные, представлено на рисунке 13.

Рисунок 19 - Помесячное распределение данных иммуноцитохимических исследований, соответствующих степени обсемененности СОЖ кокковыми формами к +++ (%) в 2002-2009 годах

Из данного рисунка видно, что характер распределения данных имеет очевидный периодический колебательный характер, с резкими подъемами осенью и падениями в середине лета (июль).

Для установления достоверности сезонного биоритма, данные за 2002 год были исключены, так как в то время полуколичественная система определения H.pylori в ИЦХ окрашенном мазке еще отрабатывалась и стабилизировалась, и именно это могло дать столь отличные от всех остальных лет данные. 2009 год был так же исключен в связи со сменой исследователя, проводившего прямые бактериоскопические ИЦХ исследования, для исключения субъективного фактора на оценку полуколичественной шкалы степени обсемененности СОЖ бактериальными клетками.

Очевидная минимальная активность бациллярно-кокковой трансформации ежегодно наблюдалась в июле. На этот факт указывают графики с периодом в год, представленные на рисунке 14.

Рисунок 20 - Динамика интенсивной обсемененности СОЖ кокковыми формами H.pylori (кокки = 3, %)

Видно, что в практически во все годы наблюдается снижение активности бациллярно-кокковой трансформации в июле месяце. Отметим, что минимальная, практически нулевая, бациллярно-кокковая активность наблюдалась в течение 5 лет (за исключением 2003 года, который характеризовался вообще максимальной амплитудой колебания этого показателя).

Проведенный статистический анализ по критерию Фишера выявил высокодостоверные (достоверность 95%) различия по показателю "частота встречаемости значительного количества кокковых форм в СОЖ (к +++)", у пациентов, обследованных в июле с пациентами, обследованными в октябре и ноябре (значения эмпирического критерия Фишера >1,64 минимум за 4 года из 6).

Таблица 5 Сравнение данных пациентов, обследованных в июле с данными пациентов, обследованных в остальные месяцы, по статистическому критерию Фишера. Красным выделены данные за месяцы, удовлетворяющие условию "достоверность различия по статистическому критерию Фишера 95% минимум в 4 из 5 лет"

Таким образом, представленные в разделе 3.3.3 данные указывают на сезонный колебательный характер бациллярно-кокковой трансформации, минимальная активность которой приходится на середину лета (июль).

4 Выводы по работе

1. В когорте пациентов с хроническим гастритом (без выраженных клинических проявлений) выявлен субмодальный класс пациентов с активной бациллярно-кокковой трансформацией, соответствующей значительной степени обсемененности кокковыми формами НР (к +++).

2. Методами жидкостной цитологии и ИЦХ окрашивания определено присутствие переходных У форм и кокковых форм НР при абсолютном преобладании спиралевидных вегетативных форм в СОЖ антрального отдела. Частоты встречаемости кокковых форм НР в цитоцентрифугатах после ЖЦ совпадают с частотами встречаемости кокковых форм в прямых цитологических препаратах - мазках-отпечатках СОЖ.

3. Выявлен сезонный колебательный характер бациллярно-кокковой трансформации НР, главной отличительной особенностью которого является снижение степени обсемененности кокковыми формами НР в середине лета.

Практические рекомендации: с учетом выраженной сезонной активности бациллярно-кокковой трансформации НР и повышенной резистентности кокковых форм НР к антихеликобактерной антибиотикотерапии, курсы эрадикационной терапии рекомендовано проводить в летний период. Данная рекомендация может быть дана для пациентов с рецидивирующими НР-ассоциированными кислотозависимыми заболеваниями, находящихся на плановом лечении.

Список литературы

1. Chumpitaz, C.J. Isolation of helicobacter pylori in dental plaque in patients with gastritis at "Angamos" clinic / C.J. Chumpitaz, M.J. Gutierraz, A.R. Cordova, M.M. Sanchez, V.N. Vasquez, M.C. Rivadeira, B. Del Carpio, M.L. Solano, C.L. Marocho, C.F. Pareja, R.A. Huaman, B.E. Valencia // Review gastroenterology Peru. - 2006. - Vol. 26. - N 4. - P.373-376.

2. Dubois, A. Intracellular Helicobacter pylori and Gastric Carcinogenesis: An "Old" Frontier Worth Revisiting // Gastroenterology. -- 2011. -- Т. 132. -- № 3. -- С. 1177--1180.

3. Бардахчьян, Э.А. Роль Helicobacter pylori при развитии экстрагастродуоденальных заболеваний / Э.А. Бардахчьян С.Ю. Ломов, Н.Г. Харланова, Н.В. Камнева // Экспериментальная и клиническая гастроэнтерология, 2005, №3, с. 20-27.

4. Barry, J. Marshall Autobiography // Nobel Foundation - 2005

5. Stark, R. M. Biofilm formation by Helicobacter pylori. // Letters in applied microbiology. -- 1999. -- Т. 28. -- № 2. -- С. 121--126.

6. Аруин, Л.И. Helicobacter (campylobacter) pylori в этиологии и патогенезе гастрита и язвенной болезни // Арх. патологии. - 1990. - N 10. - С.3-8.

7. Жебрун, А.Б. Антигенность и связывание сывороточных белков клетками и экстрактами клеток Х. пилори // Акт.пробл.инф.патол., Ч. 1. Спб. - 1993. - с. 25.

8. Sidebothman, R.L. Hypothesis: Helicobacter pylori, urease, mucus, and gastric ulcer // Lancet. - 2010. - Vol.27, - P.193-195.

9. Olson, J. W. Molecular hydrogen as an energy source for Helicobacter pylori. // Science. -- 2011. -- Т. 298. -- № 5599. -- С. 1788--1790

10. Putsep, K.Antibacterial peptide from H. pylori.// Nature - 1999, 398:671-672.

11. Satin, B. The neutrophil-activating protein (HP-NAP) of Helicobacter pylori is a protective antigenand a major virulence factor.// J. Exp. Med.- 2000, 191:1467-1476.

12. Bylund, J. Proinflammatory activity of a cecropin-like antibacterial peptide from Helicobacter pylori.//Antimicrob. Agents Chemother - 2001, 45:1700-1704.

13. Blaser, M.J. Parasitism of "slow" bacterium Helicobacter pylori leads to altered gastric gomeostasis and neoplasia. //J. Clin.Invest. -1994. -Vol. 94 - P.4-8.

14. Rauws, E.A.J. Cure of duodenal ulcer associated with eradication of Helicobacter pylori // Lancet. - 1990. -Vol. 335, №8700 - P.1233-1235.

15. Довгаль, С.Г. Методы лабораторной диагностики хеликобактериоза // Акт.пробл.инф.патол., Ч. 1. Спб. - 1993. - с. 21.

16. Covacc, A. The cag pathogenicity island of Helicobacter pylori: origin, molecular biology and relevance to virulence In.// Pathogenesis and Host Response in Helicobacter pylori Infections Ed. By A. P. Moran C. A. O'Morain.--Galway.: National University of Irland.--1997.--P. 88-100

17. Ikenoue, T. Determination of Helicobacter pylori Virulence by Simpl Gene Analisis of the cag Pathogenicity Island // Clin. Diag. Lab. Immunol. -2001. - Vol. 8.№ 1. - Р. 181 - 186.

18. Suerbaum, S. Helicobacter pylori Infection // New Engl. J. Med. - 2002. - Vol. 347, № 15. - P. 1175 - 1186.

19. Covacci, A. // Pathogenesis and Host Response in Helicobacter pylori Infections /A.P.Moran, C.A.O'Morain. ~ Galway, 2007. -- P. 88 -100.

20. Mecsas, J. // Island Emerg. Infect. Dis. -- 1996.-V. 2.-P. 271.

21. Макаренко, Е.В. Клиническое значение факторов патогенности Helicobacter pylori // Рос. журн. гастроэнтерол., гепатол., колопроктол. - 2005. - Т. 15. № 3. - С. 22-27

22. Peek, R.M.J. Adherence to gastric epithelial cell induces expression of a Helicobacter pylori gene, iceA, that is associated with clinical outcom // Proc. Amer. Ass. Cancer Res. - 1998. - Vol. 110. - P. 531 - 544.

23. Louw, J.A. The Relationship Between Helicobacter pylori Infection, the Virulence Genotypes of the Infecting Strain and Gastric Cancer in the African Setting // Helicobacter. - 2001. - Vol. 6, № 4. - P. 268 - 273

24. Sidebothman, R.L. Hypothesis: Helicobacter pylori, urease, mucus, and gastric ulcer // Lancet. - 1990. - Vol.27, - P.193-195. (Atherton J.C. et al., 1995).

25. Atherton, J.C. Mosaicism in vacuolisating cytotoxin alleles of Helicobacter pylori . Association of specific vacA types with cytotoxin production and peptic ulceration // J.Biol. Chem. - 1995. - Vol. 270. - P. 17771 - 17777.

26. Исаков, В.А. Хеликобактериоз - Медпрактика-М - 2003. - 411с.

27. Guruge, J.L. Epithelial attachment alters the outcome of Helicobacter pylori infection // Proc.Nalt.Acad.Sci.USA. - 2010 - Vol. 95, №7 - P.

28. Negrini, R. Autoantibidies to gastric mucosa in Helicobacter pylori infection // Helicobacter. - 1997 . - Vol. 2, suppl 1. - P. 13 - 16

29. Покровский, В.И.//Журн. микро-биол. - 1995. -№3.--С. 32--36.

30. Домарадский, И.В. Helicobacter pylori и его роль в патологии. // Журнал микробиол.. - 2000. - № 4, Приложение. - С. 113 - 117.

31. Лаптев,а Е.С. Хеликобактерная инфицированность и структура гастродуоденальной слизистой оболочки у больных дуоденальными язвами с различными вариантами клинического течения. - Автореф. дисс. канд. мед. наук. - СПб, 1999. - 25 с.

32. Uemura, N. Helicobacter pylori infection and the development of gastric cancer.//N. Engl.J. Med. - 2001 - Vol. 345 - P.784-789.

33. Catrenich, C.E. Characterization of the morphologic conversion of Helicobacter pylori from bacillary to coccoid forms.//Scand J Gastroenterol -1991 - Vol. 181,suppl 1 - Р.58-64

34. Benaissa, M. Changes in Helicobacter pylori ultrastructure and antigens during conversion from the bacillary to the coccoid form.//Infect. Immun. - 1996 - Vol.64, № 6 -Р. 2331-5

35. Specht, M. Localization of FtsZ in Helicobacter pylori and consequences for cell division.//J Bacteriol - 2013 - 195(7):1411-20

36. Bumann D. , Habibi H., Kan B., Lack of Stage-Specific Proteins in Coccoid Helicobacter pylori Cells// Infection and Immunity. - 2004 - Vol. 72, №. 11 - Р. 6738-6742

37. Saito N, Konishi K, Kato M, Coccoid formation as a mechanism of species-preservation in Helicobacter pylori: an ultrastructural study//Hokkaido Igaku Zasshi - 2008, Sep83(5):291-5.

38. Roe IH, Son SH, Oh HT, Choi J, Shin JH, Lee JH, Hah YC.Changes in the evolution of the antigenic profiles and morphology during coccoid conversion of Helicobacter pylori.// Korean J Intern Med - 1999 - Vol. 14, №1 - Р.9-14

39. Saito N., Konishi K., Sato F., Kato M., Takeda H., Sugiyama T., Asaka M.Plural Transformation-Processes from Spiral to Coccoid Helicobacter pylori and its Viability // J. Infect. - 2003 - Vol. 46, №1 - P.49-55

40. Mizoguchi, H. Evidence for viability of coccoid forms of Helicobacter pylori.//J Gastroenterol - 1999 - Vol.34 Suppl 11 - P.32-6

41. Saito N, Konishi K., Sato F Coccoid Helicobacter pylori Can Directly Adhere and Invade in Agminated Formation to Human Gastric Epithelial Cells// Advances in Microbiology - Vol. 2 No. 2 - 2012, 112-116

42. Mizogushi, H. /Diversity in protein synthesis and viability of Helicobacter pylori coccoid forms in response to various stimuli. //Infect Immun. -1998. -v.66. -p.5555-60.

43. Хомерики, С.Г. Роль кокковых форм Helicobacter pylori в патогенетических механизмах и персистенции хеликобактерной инфекции // Рос. журнал гастроэнтерол., гепатол., колопроктол., 2011. -- T. XI. -- № 2. -- Прилож. № 13. -- С. 99.

44. She, F.F. Virulence of water-induced coccoid Helicobacter pylori and its experimental infection in mice. //World J. Gastroenterol. - 2003 - Vol. 9, № 3 - Р.516-20

45. Brenciaglia, M.I. Helicobacter pylori: cultivability and antibiotic susceptibility of coccoid forms. //Int. J. Antimicrob Agents - 2000 - Vol.13, № 4 - Р.237-41

46. Эллиниди, В.Н. Практическая иммуногистохимия (Методические рекомендации) - СПб.: ВЦЭРМ МЧС России, 2010, - стр. 36

47. Jakic-Razumovic, J. Histopathological features of gastritis before and after treatment for Helicobacter pylori.//Croat Med J - 2000 - Vol. 41, №2 - P. 159-62

48. Никитина, Л.В. Иммуноцитохимические исследования и жидкостная цитология в диагностике поражений желудка // WWW.MEDLINE.RU, ТОМ 13, ОНКОЛОГИЯ - Москва - 2012

49. Dowell, S.F. Seasonal Variation in Host Susceptibility and Cycles of Certain Infectious Diseases// Emerg Infect Dis. 2001 May-Jun;7(3):369-74.

50. Nelson, R. J. Seasonal patterns of stress, immune function & disease/ R. J. Nelson, G. E. Demas, S. L. Klein & L. J. Kriegsfeld; Cambridge University Press - 2002, 291

51. Sudha Xirasagar, J. Role of Meteorological Factors in Duodenal Ulcer Seasonality// Study Gen Intern Med - 2009 October; 22(10): 1439-1446.

52. Roberto Manfredini, Seasonal pattern of peptic ulcer hospitalizations: analysis of the hospital discharge data of the Emilia-Romagna region of Italy // BMC Gastroenterology - Italy, 2010, 10:37

53. Savarino, V Are duodenal ulcer seasonal fluctuations paralleled by seasonal changes in 24-hour gastric acidity and Helicobacter pilori infection?//J Clin Gastroenterol - 1996, 22(3):178-181.)

54. Raschka C, Schorr W, Koch HJ, Is there seasonal periodicity in the prevalence of Helicobacter pylori? // Chronobiol Int - 2009, 16(6):811-819.

55. G Buzбs, Б. Seasonal variation of Helicobacter Pylori eradication rates with standard triple therapies: A 11-year retrospective study (2000-2010) // G Buzбs, Б Premecz, I Barta, J Jуzan, J Nagy, Й Szilбgyi // Z Gastroenterol - Budapest - 2011; 49 - A8

56. Новиков, Д.А.Статистические методы в медико-биологическом эксперименте (типовые случаи) // Новиков Д.А., Новочадов В.В. // ВолГМУ - Волгоград, 2005 - с 60 - 63

Размещено на Allbest.ru