Исследование уровня цитокинов у больных с гнойно-воспалительными заболеваниями

Во время инкубации с субстратной смесью происходит окрашивание раствора в лунках. Степень окраски прямо пропорциональна количеству связавшихся меченых антител. После измерения оптической плотности раствора в лунках на основании калибровочной кривой рассчитывается концентрация IL-4 в определяемых образцах.

Подготовка реагентов к анализу

· Калибровочные пробы. Во флаконы с калибровочными пробами добавить по 1,0 мл дистиллированной воды, выдержать в течение 20мин. И затем тщательно перемешать до полного растворения, избегая пенообразования. Хранить при температуре +4...6° С в течение трех суток; при возможности более длительного хранения разлить по 220 мкл (чтобы избежать повторного оседания) и хранить при температуре -20° С не более месяца.

· Стрипы. Вскрыть и установить на рамку необходимое количество стрипов. Оставшиеся стрипы хранить в герметично закрытом пакете из фольгированного полиэтилена при температуре

· Сывороточный буфер. В стакан с 480 мл дистиллированной воды добавить содержимое флакона с маркировкой"Буфер Р". Тщательно перемешать, избегая пенообразования. Xранить промывочный буфер при температуре +2…8°С.

· Буфер А. Готов к использованию. Хранить закрытым при температуре +2…6° С.

· Набор антител анти-IL-4-биотин. В зависимости от количества используемых стрипов подготовить необходимый объем однократного раствора антител путем смешивания 40 мкл концентрированного антител с 1 мл промывочного буфера из расчета на один стрип. Однократный раствор антител должен быть использован в течение часа, длительному хрипению не подлежит.

· Конъюгат Е. авидин-пероксидаза. В зависимости от количества используемых стрипов подготовить необходимый объем однократного раствора конъюгата путем смешивания 40 мкл концентрированного конъюгата Е с 1 мл промывочного буфера из расчета на один стрип. Однократный раствор конъюгата Е должен быть использован в течение часа, длительному хранению не подлежит.

· Субстратная смесь приготовляется непосредственно перед употреблением.

· "Стоп-реагент" готов к использованию.

Проведение анализа:



1	Внести во все лунки по 0,1 мл "Буфер А". Расход реагентов в табл.1
2	В соответствующие лунки по 0,1 мл калибровочных проб или исследуемой сыворотки, внесение образцов не должно занимать более 15 мин
3	Инкубировать стрипы при температуре 37°С в течение 2 ч со встряхиванием
4	Удалить содержимое лунок декантированием и промыть лунки три раза. При промывке во все лунки добавить по 0,25 мл промывочного буфера
5	На шейкере в течение 5-10 сек с последующим декантированием. При каждом декантировании тщательно удалять остатки жидкости из лунок постукиванием рамки со стрипами в положении по фильтровальной бумаге
6	Внести во все лунки по 0,1 мл раствора антител
7	Инкубировать стрипы при температуре 37°С в течение 1 часа со встряхиванием
8	Лунки промыть
9	Внести во все лунки по 0,1 мл раствора конъюгата Е
10	Инкубировать стрипы при температуре 37°С в течение 30 минут со встряхиванием
11	Лунки промыть
12	Перед окраской стрипы сполоснуть дистиллированной водой для более полного удаления не связавшего конъюгата
13	Внести во все лунки по 0,1 мл субстратной смеси и инкубировать стрипы в темноте в течение 15-20 мин в зависимости от степени развития окраски
14	Добавить во все лунки с той же скоростью и в той же последовательности, как и субстратную смесь, по 0,05 мл "Стоп-реагента" для остановки ферментной реакции, встряхивать на шейкере 5мин
15	Измерить оптическую плотность в лунках при длине волны 450 нм
16	Построить для калибровочных проб график зависимости оптической плотности в единицах оптической плотности (ОП) от концентрации IL-4 в пг\мл.
17	Определить содержание IL-4 в пробах по калибровочному графику

Таблица 2. Расход реагентов для проведения анализа

Количество используемых стрипов шт	Буфер А мл	Раствор антител мл	Конъюгат мл	Буфер Р мл	Субстратная смесь
					Раствор ТМБ мл	Буфер С мл
2	2	2	2	50	0,4	2
3	3	3	3	75	0,6	3
4	4	4	4	100	0,8	4
5	5	5	5	125	1,0	5
6	6	6	6	150	1,2	6
7	7	7	7	175	1,4	7
8	8	8	8	200	1,6	8
9	9	9	9	225	1,8	9
10	10	10	10	250	2,0	10
11,12	12	12	12	300	2,0	10

Пример калибровочных кривых для каждого конкретного набора приводиться в Паспорте контроля качества (Рис. 6).

Рис. 6. Калибровочная кривая (ОБРАЗЕЦ) для определения ИЛ-4

2.2.2. Метод определения уровня гамма-интерферона в сыворотке крови

Для определения уровня гамма-интерферона использовался метод твердофазного иммуноферментного анализа‚ с использованием набора реактивов "ИФА-IFN-gamma" фирмы ВЕКТОР-БЕСТ. Набор "ИФА-IFN-gamma" предназначен для определения концентрации гИФН в сыворотке крови в клинических, диагностических и научно-исследовательских лабораториях.

Состав набора:

¦ комплект из двенадцати восьмилуночных стрипов с рамкой с иммобилизованными на внутренней поверхности лунок моноклональными антителами к интерлейкину-4, маркирован "Стрипы с моноклональными антителами";

¦ 7 калибровочных проб, содержащих известные количества гамма-интерферона - 0; 50; 100; 300; 500; 1000 и 2000пг\мл, лиофилизованные препараты;

¦ аналитический буферный раствор, маркирован "Буфер А", 1 флакон;

¦ концентрированный раствор антител IFN-gamma-биотин, маркирован "Антитела", 1 флакон;

¦ концентрированный раствор конъюгата авидин-пероксидаза, маркирован "Конъюгат Е", 1 флакон;

¦ концентрированный буферный раствор для промывок лунок, маркирован "Буфер Р", 1 флакон;

¦ субстратный буфер, маркирован "Буфер С", 1 флакон;

¦ 10% кислота, маркирована "Стоп-реагент", 1 флакон;

¦ раствор тетраметилбензидина, маркирован " ТМБ";

Дополнительные материалы и оборудование:

¦ автоматические одноканальные пипетки с изменяемым объемом отбора жидкостей: от 0,005 до 0,01 мл; от 0,05 до 0,25 мл; от 0,2 до 1 мл; от 1 до 5 мл;

¦ одноканальная полуавтоматическая пипетка, позволяющая отбирать объемы жидкости до 0,3 мл.

¦ прибор для встряхивания рамки со стрипами (шейкер), позволяющий производить встряхивание с амплитудой колебания 3-4мм и частотой 4-6 Гц при комнатной температуре (+16-25°С), либо статируемый шейкер, позволяющий производить встряхивание в том же режиме при температуре +37°С;

¦ спектрофотометр, позволяющий измерить оптическую плотность раствора в стрипах при длине волны 450нм;

¦ цилиндры, позволяющие отмерять 10 и 100 мл;

¦ два стеклянных стакана емкостью 20 мл и один - 150 мл;

¦ дистиллированная вода.

Принцип работы набора.

В наборе "ИФА-IFN-gamma " использован "сэндвич" вариант твердофазного иммуноферментного анализа. Для реализации этого варианта использованы два моноклональных антитела с различной эпитопной специфичностью к гамма-интерферону. Одно из них иммобилизовано на твердой фазе (внутренняя поверхность лунок), второе конъюгировано с биотином. На первой стадии анализа гИФН, содержащийся в калибровочных и исследуемых пробах связывается с антителами, иммобилизованными на внутренней поверхности лунок. На второй стадии анализа иммобилизованный гИФН взаимодействует с конъюгатом вторых антител - биотин. Количество связавшегося конъюгата прямо пропорционально количеству гИФН в исследуемом образце. На последней стадии анализа в лунки вносят авидин-пероксидазу.

Во время инкубации с субстратной смесью происходит окрашивание раствора в лунках. Степень окраски прямо пропорциональна количеству связавшихся меченых антител. После измерения оптической плотности раствора в лунках на основании калибровочной кривой рассчитывается концентрация гИФН в определяемых образцах.

Подготовка реагентов к анализу

· Калибровочные пробы. Во флаконы с калибровочными пробами добавить по 1,0 мл дистиллированной воды, выдержать в течение 20мин. И затем тщательно перемешать до полного растворения, избегая пенообразования. Хранить при температуре +4...6° С в течение трех суток; при возможности более длительного хранения разлить по 220 мкл (чтобы избежать повторного оседания) и хранить при температуре -20° С не более месяца.

· Стрипы. Вскрыть и установить на рамку необходимое количество стрипов. Оставшиеся стрипы хранить в герметично закрытом пакете из фольгированного полиэтилена при температуре

· Сывороточный буфер. В стакан с 480 мл дистиллированной воды добавить содержимое флакона с маркировкой"Буфер Р". Тщательно перемешать, избегая пенообразования. Xранить промывочный буфер при температуре +2…8°С.

· Буфер А. Готов к использованию. Хранить закрытым при температуре +2…6° С.

· Набор антител анти- гИФН-биотин. В зависимости от количества используемых стрипов подготовить необходимый объем однократного раствора антител путем смешивания 40 мкл концентрированного антител с 1 мл промывочного буфера из расчета на один стрип. Однократный раствор антител должен быть использован в течение часа, длительному хрипению не подлежит.

· Конъюгат Е. авидин-пероксидаза. В зависимости от количества используемых стрипов подготовить необходимый объем однократного раствора конъюгата путем смешивания 40 мкл концентрированного конъюгата Е с 1 мл промывочного буфера из расчета на один стрип. Однократный раствор конъюгата Е должен быть использован в течение часа, длительному хранению не подлежит.

· Субстратная смесь приготовляется непосредственно перед употреблением.

· "Стоп-реагент" готов к использованию.

Проведение анализа:

1	Внести во все лунки по 0,1 мл "Буфер А". Расход реагентов в табл.1
2	В соответствующие лунки по 0,1 мл калибровочных проб или исследуемой сыворотки, внесение образцов не должно занимать более 15 мин
3	Инкубировать стрипы при температуре 37°С в течение 2 ч со встряхиванием
4	Удалить содержимое лунок декантированием и промыть лунки три раза. При промывке во все лунки добавить по 0,25 мл промывочного буфера
5	На шейкере в течение 5-10 сек с последующим декантированием. При каждом декантировании тщательно удалять остатки жидкости из лунок постукиванием рамки со стрипами в положении по фильтровальной бумаге
6	Внести во все лунки по 0,1 мл раствора антител
7	Инкубировать стрипы при температуре 37°С в течение 1 часа со встряхиванием
8	Лунки промыть
9	Внести во все лунки по 0,1 мл раствора конъюгата Е
10	Инкубировать стрипы при температуре 37°С в течение 30 минут со встряхиванием
11	Лунки промыть
12	Перед окраской стрипы сполоснуть дистиллированной водой для более полного удаления не связавшего конъюгата
13	Внести во все лунки по 0,1 мл субстратной смеси и инкубировать стрипы в темноте в течение 15-20 мин в зависимости от степени развития окраски
14	Добавить во все лунки с той же скоростью и в той же последовательности, как и субстратную смесь, по 0,05 мл "Стоп-реагента" для остановки ферментной реакции, встряхивать на шейкере 5мин
15	Измерить оптическую плотность в лунках при длине волны 450 нм
16	Построить для калибровочных проб график зависимости оптической плотности в единицах оптической плотности (ОП) от концентрации гИФН в пг\мл.
17	Определить содержание гИФН в пробах по калибровочному графику

Таблица 3. Расход реагентов для проведения анализа

Количество используемых стрипов шт	Буфер А мл	Раствор антител мл	Конъюгат мл	Буфер Р мл	Субстратная смесь
					Раствор ТМБ мл	Буфер С мл
2	2	2	2	50	0,4	2
3	3	3	3	75	0,6	3
4	4	4	4	100	0,8	4
5	5	5	5	125	1,0	5
6	6	6	6	150	1,2	6
7	7	7	7	175	1,4	7
8	8	8	8	200	1,6	8
9	9	9	9	225	1,8	9
10	10	10	10	250	2,0	10
11,12	12	12	12	300	2,0	10

Пример калибровочных кривых для каждого конкретного набора приводиться в Паспорте контроля качества (Рис. Б).

Рис. 7. Калибровочная кривая (ОБРАЗЕЦ) для определения гИФН

2.2.3. Статистическая обработка результатов исследования

Результаты подвергали статистической обработке с использованием t-критерия Стьюдента, различия считали достоверными при p<0,05 [Лакин Г.Ф. Биометрия. М.: Высшая школа,1990.352с.].

ГЛАВА 3. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

До недавнего времени в России изучением цитокинов занимались немногочисленные группы исследователей, так как биологические методы исследования очень трудоёмки, а импортные иммунохимические наборы весьма дороги. С появлением доступных отечественных иммуноферментных наборов все больший интерес к изучению цитокинового профиля проявляют практикующие врачи.

В настоящий момент диагностическая значимость оценки уровня цитокинов заключается в констатации самого факта повышения или понижения их концентрации у данного больного с конкретным заболеванием. Причём для оценки тяжести и прогнозирования течения заболевания целесообразно определять концентрацию как противо-, так и провоспалительных цитокинов.

Известно‚ что цитокинам принадлежит важная роль в генезе развития воспалительной реакции при ГВЗ. В частности‚ ИЛ-4 - антивоспалительный цитокин - ингибирует цитотоксическую активность Т-лимфоцитов, макрофагов‚ участвует в переключении синтеза IgG1 на синтез IgG4 и IgE. Совместно с другими цитокинами ИЛ-4 способствует пролиферации тканевых базофилов. Антагонистом ИЛ-4 является гамма-интерферон - важнейший фактор, активирующий макрофаги; он способствует более эффективному уничтожению макрофагами внутриклеточных микроорганизмов, запуская поврежденные ранее микробицидные механизмы макрофагов и вызывая гибель внутриклеточных микроорганизмов.

Маркером течения ГВЗ считается изменение уровня иммуноглобулина Е [Перетня Н. Н.‚ Сенькова Л. В.‚ Добродеев К. Г. Капутин С. Л. и др. К вопросу о роли IgE// Объединённый иммунологический форум: Тезисы. - Екатеринбург.- 2004.-С. 119]. В частности клинически неблагоприятным показателем является повышение уровня IgE при ГВЗ . В связи с этим‚ интересным представляется исследование корреляционных взаимосвязей уровней интерлейкина 4 и гамма-интерферона с показателями общего иммуноглобулина Е в сыворотке крови больных с ГВЗ.

3.1. Результаты исследования уровня интерлейкина-4 и гамма-интерферона в сыворотке крови больных с различным уровнем иммуноглобулина Е при хроническом рецидивирующем фурункулезе

Бактериальные инфекции кожи являются важной клинической проблемой ввиду их распространенности во всем мире и недостаточной эффективности терапии этих заболеваний. Наиболее часто встречающиеся инфекционные заболевания кожи включают фолликулиты, фурункулы и карбункулы. Факторами предрасположенности к возникновению рецидивирующего фурункулеза (РФ) являются инфицированные раны, нарушение правил гигиены, диабет, алкоголизм, окклюзивная косметика, тесная одежда, общее ослабление организма, потертости, перегрев, контакт с химическими агентами, неадекватное лечение кожных повреждений, использование стероидных гормонов. Причины развития ХРФ не всегда понятны. Как правило при изучении особенностей рецидивирующего фурункулеза, отмечается наличие аллергического компонента в воспалении при фурункулезе у лиц старшего возраста, что сопровождается повышением общего IgE. Кроме того‚ при ХРФ, как при всякой рецидивирующей инфекции, можно предположить наличие нарушений иммунологической реактивности.

В нашей работе обследовано 34 пациента с ХРФ. Эти пациенты были сформированы в 2 группы‚ в зависимости от уровня IgE: первую группу составили 14 больных с повышенным уровнем IgE, вторую - 20 пациентов с нормальными значениями указанного иммуноглобулина. За дискриминационный уровень принимались показатели иммуноглобулина Е - 130-150 МЕ/мл. Контрольную группу составили 10 человек - доноры без ГВЗ.

3.1.1. Результаты исследования уровня интерлейкина-4 в сыворотке крови у больных с хроническим рецидивирующим фурункулезом

Результаты исследования уровня интерлейкина-4 в сыворотке крови у больных с хроническим рецидивирующим фурункулезом приведены на рис. 8 и табл. 1 (Приложение 1).

Согласно полученным результатам достоверное повышение уровня ИЛ-4‚ по сравнению с контрольной группой‚ отмечалось как у больных с повышенными‚ так и нормальными значениями общего иммуноглобулина Е.

Концентрация ИЛ-4 у больных с высокими значениями общего иммуноглобулина Е (выше 150 МЕ/мл) превышала показатели контрольной группы в 10 раз (р< 0,05). Концентрация ИЛ-4 у больных с нормальными значениями сывороточного иммуноглобулина Е (130 МЕ/мл) превышала показатели контрольной группы в 7 раз (р< 0,01). Полученные результаты свидетельствуют о вовлечении ИЛ-4 в формирование иммунного ответа при развитии ХРФ. Однако‚ эти изменения не зависели от показателей общего иммуноглобулина Е в обследуемой группе больных с ХРФ.

3.1.2. Результаты исследования уровня гамма-интерферона в сыворотке крови у больных с хроническим рецидивирующим фурункулезом

Результаты исследования уровня гамма-интерферона в сыворотке крови у больных с хроническим рецидивирующим фурункулезом приведены на рис. 9 и табл. 1 (Приложение 1).

Полученные результаты показали‚ что изменения уровня ИФНг как у больных с повышенными‚ так и нормальными значениями общего иммуноглобулина Е‚ достоверно не отличались от показателей концентрации гамма-интерферона контрольной группы.

Вероятно‚ полученные результаты свидетельствуют‚ что гамма-интерферон не участвует в формировании ответной реакции организма при развитии ХРФ. Кроме того‚ показатели концентрации гамма-интерферона в обследуемой группе больных с ХРФ не зависели от уровня сывороточного иммуноглобулина Е.

3.2. Результаты исследования уровня интерлейкина-4 и гамма-интерферона в сыворотке крови больных с различным уровнем иммуноглобулина Е при хроническом остеомиелите

Характер и специфика иммунологической реактивности при хронических остеомиелитах‚ определяется морфологической деструкцией кости и окружающих мягких тканей в зоне воспаления, приобретающих на определенном этапе воспаления свойства аутоантигенов. Развивающиеся в этих условиях иммунодефицит и дисбаланс компонентов иммунного ответа снижают возможности специфической и неспецифической защиты, что способствует персистенции микробных агентов и развитию порочного круга, обусловливающего поддержание патологического процесса. Известно, что некоторые бактерии способны выключать процессы антителообразования как прямым, так и опосредованным (через индукцию факторов, препятствующих активации Т-клеток) путем, и тем самым снижать общий уровень иммунного ответа. Немаловажную роль при этом играют цитокины, которые, будучи медиаторами иммунитета, способны менять характер течения гнойно-воспалительного процесса. Естественно, что при таком сложном механизме иммунорегуляции течение гнойного процесса зависит не только от иммуногенного потенциала инфицирующих микроорганизмов, но и от исходного иммунного статуса организма хозяина [Белохвостикова Т.С., Кирдей Л.Е., Гаврилова Е.Ю., Промтов М.В., Леонова С.Н., Кирдей Е.Г. Коррекция вторичных нарушений иммунной системы при хроническом посттравматическом остеомиелите./Медицинская иммунология, 2002, т.4, №2, с.228-229.].

В нашей работе обследовано 15 пациентов с хроническим остеомиелитом. Эти пациенты были сформированы в 2 группы‚ в зависимости от уровня IgE: первую группу составили 10 больных с повышенным уровнем IgE (выше 150МЕ/мл), вторую - 5 пациентов с нормальными значениями указанного иммуноглобулина (130 МЕ/мл). За дискриминационный уровень принимались показатели иммуноглобулина Е - 130-150 МЕ/мл. Контрольную группу составили 10 человек - доноры без ГВЗ.

3.2.1. Результаты исследования уровня интерлейкина-4 в сыворотке крови у больных с хроническим остеомиелитом

Результаты исследования уровня интерлейкина-4 в сыворотке крови у больных с хроническим остеомиелитом приведены на рис. 10 и табл. 2 (Приложение 2).

Согласно полученным результатам достоверное повышение уровня ИЛ-4‚ по сравнению с контрольной группой‚ отмечалось как у больных с повышенными‚ так и нормальными значениями общего иммуноглобулина Е.

Концентрация ИЛ-4 у больных с высокими значениями общего иммуноглобулина Е (выше 150 МЕ/мл) превышала показатели контрольной группы в 8 раз (р<0,01). Концентрация ИЛ-4 у больных с нормальными значениями сывороточного иммуноглобулина Е (до 130 МЕ/мл) превышала показатели контрольной группы в 8,7 раз (р<0,05). Полученные результаты свидетельствуют о вовлечении ИЛ-4 в формирование иммунного ответа при развитии хронического остеомиелита. Однако‚ эти изменения не зависели от показателей общего иммуноглобулина Е в обследуемой группе больных с хроническим остеомиелитом.

3.2.2. Результаты исследования уровня гамма-интерферона в сыворотке крови у больных с хроническим остеомиелитом

Результаты исследования уровня гамма-интерферона в сыворотке крови у больных с хроническим остеомиелитом приведены на рис. 11 и табл. 2 (Приложение 2).

Согласно полученным результатам достоверное повышение уровня ИФНг‚ по сравнению с контрольной группой‚ отмечалось как у больных с повышенными‚ так и нормальными значениями общего иммуноглобулина Е.

Концентрация гамма-интерферона у больных с высокими значениями общего иммуноглобулина Е (выше 150 МЕ/мл) превышала показатели контрольной группы в 3,5 раза (р<0,05). Концентрация гамма-интерферона у больных с нормальными значениями сывороточного иммуноглобулина Е (до 130 МЕ/мл) превышала показатели контрольной группы в 3 раза (р<0,05). Полученные результаты свидетельствуют о вовлечении гамма-интерферона в формирование иммунного ответа при развитии хронического остеомиелита. Однако‚ эти изменения не зависели от показателей общего иммуноглобулина Е в обследуемой группе больных с хроническим остеомиелитом.

ГЛАВА 4. ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ ИССЛЕДОВАНИЯ

Гнойно-воспалительные заболевания остаются актуальной проблемой современной медицины. При многочисленных клинико-лабораторных наблюдениях выявлено, что при ГВЗ происходят изменения в иммунологической системе организма. [Панченко М. К., Вертигора И.П., Грицай Н. П. Комплексное лечение больных с хроническим остеомиелитом с применением костной пластики // Вестн. хир. - 1988. -№10. -С.42-46 Пинегин Б. Ф., Юдина Т. И., Карсанова М. И. Общие вопросы иммунитета, иммунодиагностики и иммунотерапии на модели хирургических инфекций // Современные проблемы аллергологии, клинической иммунологии и иммунофармакологии. -М.,1998. -С 10-178 Хаитов Р. М., Пинегин Б. В. Вторичные иммунодефициты: клиника, диагностика, лечение // Иммунология.-1999. -№2. -С.14-17 ]

В последние годы, благодаря развитию методов количественного определения уровней продукции цитокинов, был достигнут значительный прогресс в понимании роли некоторых цитокинов в норме и при патологии. Наиболее оптимальными для оценки уровней цитокинов являются иммуноферментные методы, которые высокоспецифичны, просты и быстры в исполнении. Применение диагностических иммуноферментных тест-систем для оценки цитокинового статуса, как на местном, так и на системном уровнях при различных патологиях является существенным дополнением к пониманию патогенеза заболеваний. Изучение уровней цитокинов позволяет получить информацию о функциональной активности различных типов иммунокомпетентных клеток; о тяжести воспалительного процесса, его переходе на системный уровень и прогнозе, о соотношении процессов активации Т-хелперов 1 и 2-типов, о стадии развития ряда аллергических и аутоиммунных заболеваний. Оценка уровней цитокинов, в частности, с использованием иммуноферментных диагностических тест-систем позволяет по-новому подойти к изучению состояния иммунной системы организма в клинической практике. Сейчас практически невозможно назвать патологию, которая не была бы предметом изучения цитокинов. [Демьянов А.В., Котов А.Ю., Симбирцев А.С. Диагностическая ценность исследования уровней цитокинов в клинической практике // Цитокины и воспаление, 2003, Т. 2, № 3, с. 20-35)]

Цитокинам принадлежит важная роль в развитии и течении заболеваний различных органов и систем.

В настоящее время идентифицировано более 100 цитокинов (Приложение 3), и их число продолжает увеличиваться.

Цитокины обеспечивают передачу сигнала, обмен информацией между клетками внутри одного органа, связь между органами и системами, как в физиологических условиях, так и действии различных патогенных факторов - инфекционных микроорганизмов, механических, термических, химических травм. У здоровых людей содержание цитокинов минимально, они выявляются лишь в следовых количествах.

При патологических состояниях общее число и содержание отдельных цитокинов резко возрастает.

Индукторами повышенного синтеза цитокинов являются инфекционные микроорганизмы (вирусы, бактерии), продукты их жизнедеятельности, токсины, метаболиты, а также измененные, модифицированные клетки собственного организма, некоторые белки растительного происхождения, пищевые, лекарственные аллергены и др.

[Симбирцев А.С. Цитокины - новая система регуляции защитных реакций организма //Цитокины и воспаление, 2002, № 1]

Цитокины могут быть выделены в новую самостоятельную систему регуляции основных функций организма, существующую наряду с нервной и эндокринной системами регуляции и связанную в первую очередь с поддержанием гомеостаза при внедрении патогенов и нарушении целостности тканей.

4.1. Интерлейкин-4 и гамма-интерферон при хроническом

рецидивирующем фурункулезе

Бактериальные инфекции кожи являются важной клинической проблемой ввиду их распространенности во всем мире и недостаточной эффективности терапии этих заболеваний.

ХРФ - множественное и рецидивирующее появление фурункулов, острое гнойно-некротическое воспаление волосяного фолликула, являющееся бактериальной инфекцией.

При иммунологическом обследовании больных ХРФ обнаруживаются изменения в иммунной системе:

- нарушение фагоцитарного звена (снижение фагоцитарного индекса, снижение бактерицидности нейтрофилов);

- нарушение гуморального звена (гипогаммаглобулинемия, снижение аффинности анти-ОАД-антител, нарушение цитокинового баланса);

- нарушение клеточного звена (лейкопения, снижение CD3+, CD4+, CD21+-лимфоцитов).

Именно цитокиновому дисбалансу, по нашему мнению, отводится одна из ключевых ролей в генезе формирования хронизации патологии кожных инфекций.

Содержание цитокинов в периферической крови определяли в группе 29 пациентов с ХРФ. В зависимости от уровня IgE сформированы 2 группы: первую группу составили 12 больных с повышенным уровнем IgE, вторую - 17 пациентов с нормальными значениями указанного иммуноглобулина. Контрольную группу составили 10 доноров, без ГВЗ сопоставимых по полу и возрасту. Клиническое обследование больных включало тщательный сбор аллергоанамнеза.

При изучении уровня сывороточного IgE у больных с ХРФ получены следующие результаты: концентрация IgE была выше верхней границы нормы (130МЕ/мл) в 41% случаев. Разброс показателей повышенного уровня IgE составил от 150 МЕ/мл до значений, превышающих 1000МЕ/мл.

Известно, что повышенный уровень общего IgE является маркером аллергических реакций или причиной его повышения являются внешние воздействия - паразитарные инфекции. При клиническом обследовании пациентов с ХРФ и повышенным уровнем IgE сопутствующая аллергопатология была выявлена в 44% случаев. При этом в 7,5% был выявлен поллиноз, в 13% - аллергодерматозы, в 5,5% - респираторные аллергозы, в 3,7% - крапивница, в 11% - лекарственная сенсибилизация. Неотягощенный аллергоанамнез отмечен в 58% случаев.

Также в сыворотке крови больных ХРФ с повышенным уровнем IgE обнаружены антитела к следующим гельминтам: описторхисам, трихинеллам, токсокарам и эхинококку.

Таким образом, можно считать, что были установлены этиологические факторы повышения сывороточного IgE.

В настоящий момент диагностическая значимость оценки уровня цитокинов заключается в констатации самого факта повышения или понижения их концентрации у данного больного с конкретным заболеванием. Причём для оценки тяжести и прогнозирования течения заболевания целесообразно определять концентрацию как противо-, так и провоспалительных цитокинов в динамике развития патологии. Например, содержание цитокинов в периферической крови определяется сроками обострения, отражает динамику патологического процесса‚ в частности при ГВЗ.

В нашей работе мы определяли концентрацию двух цитокинов - интерлейкина-4 и гамма-интерферона - с помощью твердофазного иммуноферментного. Оба исследуемых цитокина участвуют в активации и развитии иммунного реагирования при инфекционно-воспалительных заболеваниях бактериальной природы. Эти цитокины являются антагонистами по механизму действия. По современным данным, ИЛ-4 в комплексе с гамма - интерфероном является ключевым фактором, определяющим тип иммунитета [Кетлинский С.А. // Роль Т-хелперов типов 1и 2 в регуляции клеточного и гуморального иммунитета / Иммунология, 2002. - том. 23. - № 2. - С.77 - 79. ]

Интерлейкин-4 - цитокин, отвечающий за активность гуморального звена. Он участвует не только в развитии провоспалительных реакций, но и играет значительную роль в процессах хронизации. [Пекарева Н. А., Чупрова А. В., Шваюк А. П., Горбенко О. М., Обухова О. О., Трунов А. Н. Сравнительный анализ баланса цитокинов в сыворотке крови и моче у детей с хроническим пиелонефритом в стадии клинической ремиссии // Аллергология и иммунология, том 8, №1, 2007, С. 132-133]

В наших исследованиях при анализе уровня сывороточного ИЛ-4 было выявлено повышение концентрации при ХРФ в группах больных как с повышенным уровнем иммуноглобулина Е (выше 150 МЕ/мл), так и с нормальным уровнем (130 МЕ/мл) указанного иммуноглобулина. Результаты исследования уровня интерлейкина-4 в сыворотке крови у больных с хроническим рецидивирующим фурункулезом приведены на рис. 8 и табл. 1 (Приложение 1).

Нами был сделан вывод, что повышение уровня интерлейкина-4 во время ХРФ отражает участие этого цитокина в процессе воспаления.

Известно‚ что ведущими изменениями иммунной системы при ХРФ являются дефекты фагоцитарного и гуморального звеньев иммунитета.[А.С. Манько, Н.Х. Сетдикова, Т.В. Латышева, Ю.А. Горностаева, О.М. Котова, Н.М. Голубева «Клинико-иммунологическая эффективность серамида у больных хроническим рецидивирующим фурункулезом» //Российский Аллергологический Журнал, №5, 2005г]. Вероятно‚ что обнаруженное повышение концентрации ИЛ-4 является свидетельством уменьшения антигенпрезентирующую и цитокинпродуцирующую активность макрофагов при ХРФ.

Вместе с тем в обеих группах больных не выявлено корреляции уровня сывороточного IL4 с уровнем общего IgE. Вероятно, отсутствие корреляции обусловлено межклеточным характером действия IL4 и различной кинетикой синтеза указанных субстанций.

Не исключено‚ что обнаруженное в нашем исследовании повышение уровня сывороточного ИЛ-4 при ХРФ может способствовать подавлению освобождения цитокинов воспаления (ИЛ-1, ИЛ-8), а также продукции цитокинов ТН-1-лимфоцитами (ИЛ-2, гамма-ИНФ и др.).

ТН-1-лимфоциты - это‚ клекти-продуценты гамма-ИНФ. ИФНг -важнейший эндогенный иммуномодулятор, способный активировать Т-клеточное звено иммунной системы и клеточную цитотоксичность. Повышение уровня ИФНг может способствовать повышению возможностей специфической и неспецифической защиты организма‚ и‚ ограничению развития воспаления при ХРФ.

В ходе исследования было выявлено, что изменения уровня ИФНг как у больных с повышенными‚ так и нормальными значениями общего иммуноглобулина Е при ХРФ‚ достоверно не отличались от показателей концентрации гамма-интерферона контрольной группы (рис. 9 и табл. 1 (Приложение 1). Поскольку известно‚ что продукция ИФНг подавляется ИЛ-4‚ то‚ вероятно‚ что обнаруженный в обследуемой группе пациентов с ХРФ низкий уровень сывороточного ИФНг‚ является следствием повышенного уровня ИЛ-4.

Показатели концентрации гамма-интерферона в обследуемой группе больных с ХРФ не зависели от уровня сывороточного иммуноглобулина Е. Таким образом, определение уровня ИФНг, ответственного за ингибирование синтеза IgE в сыворотке крови, не имеет диагностического значения для выявления механизмов повышения IgE при ХРФ.

Кроме того‚ анализ полученных позволил сделать вывод о необходимости формирования групп больных, в первую очередь, в зависимости от остроты процесса при ХРФ (ремиссия, подострый период, обострение). Нам представляется, что оценка уровня ИЛ-4 и ИФНг в период обострения позволит получить большую информацию о характере иммунного ответа при ХРФ.

4.2. Интерлейкин-4 и гамма-интерферон при хроническом остеомиелите

Остеомиелит - гнойное воспаление костного мозга, распространяющееся на близлежащие ткани. Возникает в результате заражения организма бактериями гноеродной природы на фоне сниженной иммунной реактивности.

Результаты многочисленных клинико-лабораторных наблюдений показывают, что при О. происходят изменения в иммунной системе организма. [Панченко М. К., Вертигора И.П., Грицай Н. П. Комплексное лечение больных с хроническим остеомиелитом с применением костной пластики // Вестн. хир. - 1988. -№10. -С.42-46 Пинегин Б. Ф., Юдина Т. И., Карсанова М. И. Общие вопросы иммунитета, иммунодиагностики и иммунотерапии на модели хирургических инфекций // Современные проблемы аллергологии, клинической иммунологии и иммунофармакологии. -М.,1998. -С 10-178 Хаитов Р. М., Пинегин Б. В. Вторичные иммунодефициты: клиника, диагностика, лечение // Иммунология.-1999. -№2. -С.14-17 ] В зависимости от типа микроорганизма и состояния макроорганизма (выраженности системного воспалительного ответа, длительности заболевания, эндотоксемии и т.д.) при О. возникают различные нарушения клеточного и гуморального иммунитета, которые характеризуются снижением фагоцитарной активности, изменением синтеза компонентов комплемента, отсутствием или снижением цитотоксичности лимфоцитов и макрофагов, изменением цитокинового статуса организма [Вишневский А. А., Тиходеев С. А., Андрианова Т. Р. Белки острой фазы, молекулы низкой и средней массы в оценке эндотоксемии при остеомиелите позвоночника // Труды городской многопрофильной бльницы №2. - СПб.: Ольга, 2001.-С.4-11 Тиходеев С. А., Вишневский А. А. Неспецифический остеомиелит позвоночника. -СПб.:Изд.дом СПбМАПО, 2004. -250с]

Течение воспалительных заболеваний зависит от состояния иммунной системы и от степени выраженности воспалительного ответа. В этой связи ранняя иммунодиагностика и оценка стадии заболевания является неотъемлемым комплексом в лечении пациентов, позволяет не только прогнозировать течение заболевания, но и дает возможность подобрать патогенетическую терапию. [Вишневский А. А., Орлов А. Б., Тиходеев С. А. Выбор иммуномодулирующей терапии при неспецифическом остеомиелите позвоночника // Вестн. хир. Т.165.-№2.-2006.-С.32-36]

Исследование уровня цитокинов у здоровых людей и больных О. поможет понять роль этих молекул в течении заболевания, что можно будет использовать для ранней диагностики и лечении препаратами цитокинов.

Результаты исследования содержания интерлейкина-4 показывают достоверное повышение уровня ИЛ-4‚ по сравнению с контрольной группой‚ как у больных с повышенными‚ так и нормальными значениями общего иммуноглобулина Е. Результаты исследования уровня интерлейкина-4 в сыворотке крови у больных с хроническим остеомиелитом приведены на рис. 10 и табл. 2 (Приложение 2).

Повышение уровня ИЛ-4 в сыворотке крови больных свидетельствуют о вовлечении этого цитокина в процесс воспаления при хроническом остеомиелите. Известно, что некоторые бактерии способны выключать процессы антителообразования через индукцию факторов, препятствующих активации Т-клеток [Белохвостикова Т.С., Кирдей Л.Е., Гаврилова Е.Ю., Промтов М.В., Леонова С.Н., Кирдей Е.Г. Коррекция вторичных нарушений иммунной системы при хроническом посттравматическом остеомиелите./Медицинская иммунология, 2002, т.4, №2, с.228-229.]. Не исключено‚ что повышение уровня ИЛ-4 является одним из звеньев в цепочке иммунного ответа, приводящего к отсутствию или снижению цитотоксичности Т-лимфоцитов и макрофагов при хроническом остеомиелите. Наши данные согласуются с данными ряда авторов о ингибировании цитотоксической активности Т-лимфоцитов и макрофагов при остеомиелите [Вишневский А. А., Тиходеев С. А., Андрианова Т. Р. Белки острой фазы, молекулы низкой и средней массы в оценке эндотоксемии при остеомиелите позвоночника // Труды городской многопрофильной бльницы №2. - СПб.: Ольга, 2001.-С.4-11 Тиходеев С. А., Вишневский А. А. Неспецифический остеомиелит позвоночника. -СПб.:Изд.дом СПбМАПО, 2004. -250с]. Вероятно‚ ИЛ-4 стимулирует пролиферацию тимоцитов и Т-клеток и вызывает рост тучных клеток при развитии и течении воспаления при хроническом остеомиелите‚ и таким образом, играет центральную роль в модуляции иммунного ответа.

Как видно из результатов нашего исследования‚ в обеих группах пациентов (с повышенным уровнем и нормальными значениями IgЕ) не выявлено корреляции уровня сывороточного ИЛ-4 с уровнем общего IgE. Вероятно‚ что отсутствие статистически значимых отличий в этих группах обусловлено межклеточным характером действия ИЛ-4 и различной кинетикой синтеза указанных субстанций. Таким образом, определение уровня ИЛ-4‚ как цитокина‚ ответственного за выработку IgE в сыворотке крови‚ не имеет диагностического значения для выявления механизмов повышения IgE при хроническом остеомиелите.

В ходе изучения уровня гамма-интерферона установлено достоверное повышение уровня ИФНг‚ по сравнению с контрольной группой‚ как у больных с повышенными‚ так и нормальными значениями общего иммуноглобулина Е. Результаты исследования уровня гамма-интерферона в сыворотке крови у больных с хроническим остеомиелитом приведены на рис. 11 и табл. 2 (Приложение 2).

Известно‚ что гамма-интерферон способствует более эффективному уничтожению макрофагами внутриклеточных микроорганизмов[Holter W., Grunow R., Stockinger H., et al.//J.Immunol.-1986.- V.136.-N.6.-P.2171.]‚ т.е. ИФНг является мощным активатором макрофагов. Однако‚ нарушения в клеточном и гуморальном иммунитете при остеомиелите приводят к снижению фагоцитарной активности. Вероятно‚ что повышение уровня ИФНг в обследованной группе больных с хроническим остеомиелитом‚ является специфической реакцией организма‚ приводящей к активации макрофагов. Не исключено‚ что повышение концентрации ИФНг является одним из этапов в каскаде реакций‚ ведущих к повышению возможностей специфической и неспецифической защиты организма‚ и‚ ограничивающих развитие воспаления при хроническом остеомиелите.

Как видно из результатов нашего исследования‚ в обеих группах пациентов (с повышенным уровнем и нормальными значениями IgЕ) не выявлено коррелятивных связей сывороточного ИФНг с уровнем общего IgE. Таким образом, определение уровня ИФНг‚ как цитокина‚ ответственного за ингибирование синтеза IgE в сыворотке крови‚ не имеет диагностического значения для выявления механизмов повышения IgE при хроническом остеомиелите.

Так же как и при анализе данных об уровне цитокинов при ХРФ был сделан вывод‚ что при хроническом остеомиелите необходимо формировать группы больных, в зависимости от остроты процесса (ремиссия, подострый период, обострение).

Таким образом, в настоящее время не вызывает сомнения, что цитокины являются важнейшими факторами иммунопатогенеза. А изучение уровня цитокинов - медиаторов иммунитета - позволяет получить информацию о функциональной активности различных типов иммунокомпетентных клеток и делать вывод о характере течения гнойно-воспалительного процесса.

Безусловно‚ уровень цитокинов целесообразнее измерять в соответствующих тканях после экстракции тканевых протеинов из биоптатов соответствующих органов или в естественных жидкостях‚ поскольку цитокины являются локальными медиаторами. Подобные исследования будут являться предметом нашего дальнейшего изучения иммунных механизмов в патогенезе больных с ГВЗ.

ВЫВОДЫ

1. Обнаружено достоверное повышение (по сравнению с контрольной группой) концентрации интерлейкина-4 в сыворотке крови больных с хроническим рецидивирующим фурункулёзом‚ и на фоне повышенного и на фоне нормального уровня общего иммуноглобулина Е.

2. Показатели концентрации гамма-интерферона в сыворотке крови больных с повышенным и нормальным уровнем общего иммуноглобулина Е при хроническом рецидивирующем фурункулёзе достоверно не отличались от показателей концентрации гамма-интерферона контрольной группы.

3. Обнаружено достоверное повышение (по сравнению с контрольной группой) концентрации интерлейкина 4 в сыворотке крови больных с хроническим остеомиелитом‚ и на фоне повышенного и на фоне нормального уровня общего иммуноглобулина Е.

4. Обнаружено достоверное повышение (по сравнению с контрольной группой) концентрации гамма-интерферона в сыворотке крови больных с хроническим остеомиелитом‚ и на фоне повышенного и на фоне нормального уровня общего иммуноглобулина Е.

5. Показатели концентрации интерлейкина 4 в группах пациентов с повышенным и нормальным показателем общего иммуноглобулина Е при хроническом рецидивирующем фурункулёзе и хроническом остеомиелите‚ достоверно не отличались друг от друга.

6. Показатели концентрации гамма-интерферона не зависели от показателей общего иммуноглобулина Е в обследуемых группах больных с хроническим рецидивирующим фурункулёзом и хроническим остеомиелитом.

ЛИТЕРАТУРА

1. Ашмарин Ю. Я., Креинин В. М. Фурункулез. М.,1974. 12-23 с.

2. Белохвостикова Т. С., Кирдей Л. Е., Гаврилова Е. Ю., Промтов М. В., Леонова С. Н., Кирдей Е. Г. Коррекция вторичных нарушений иммунной системы при хроническом посттравматическом остеомиелите // Медицинская иммунология. 2002. т.4. №2. С. 228-229.

3. Борисов Л.Б. Медицинская микробиология, вирусология и иммунология. М.: Медицина, 1994г. 485-487 с.

4. Вишневский А. А., Орлов А. М. К вопросу об оценке иммунологического статуса у больных с неспецифическим остеомиелитом позвоночника // Вестн. хир. 2004. №5. С. 73-78.

5. Вишневский А. А., Орлов А. Б., Тиходеев С. А. Выбор иммуномодулирующей терапии при неспецифическом остеомиелите позвоночника // Вестн. хир. 2006. Т.165. №2. С. 32-36.

6. Вишневский А. А., Тиходеев С. А., Андрианова Т. Р. Белки острой фазы, молекулы низкой и средней массы в оценке эндотоксемии при остеомиелите позвоночника // Труды городской многопрофильной бльницы №2. СПб.: Ольга, 2001. С.4-11.

7. Вишневский А. А., Тиходеев С. А. К вопросу об особенностях течения остеомиелита и его диагностика // Современные направления в диагностике, лечении и профилактике заболеваний: Труды городской многопрофильной больницы №2. СПб: Ольга, 2002. С.91-98.

8. Демьянов А. В., Котов А. Ю., Симбирцев А. С. Диагностическая ценность исследования уровней цитокинов в клинической практике // Цитокины и воспаление. 2003. Т. 2. № 3. С. 20-35.

9. Дранник Г. Н. Клиническая иммунология и аллергология. МИА. М. 2003г. 98-109 с.

10. Завьялов В. П. Структурно-функциональная классификация и эволюция цитокинов // Вестник РАМН. 1993. №2. С. 8 - 10.

11. Кашкин К. П. Цитокины иммуной системы: основные свойства и иммунобиологическая активность // Клиническая лабораторная диагностика. 1998. №11. С. 21 - 32.

12. Керко О. В., Гусева В. Н., Потапенко Е. И., Якунова О. А. и др. Роль иммунологических показателей при туберкулезе и остеомиелите позвоночника // Медицинская иммунология. 2005. №2-3. С.243-244.

13. Кожные болезни // Под ред. Кубанова А. А. М.:ГЭОТАР Медицина, 1999г. 175-184с.

14. Кольман Я., Рём К. - Г. Наглядная биохимия. «Мир», 378-379с.

15. Лакин Г. Ф. Биометрия. М.: Высшая школа, 1990. 352с.

16. Манько А. С.,. Сетдикова Н. Х., Латышева Т. В.,. Горностаева Ю. А., Котова О. М., Голубева Н. М. «Клинико-иммунологическая эффективность серамида у больных хроническим рецидивирующим фурункулезом» // Российский Аллергологический Журнал. 2005г. №5. С. 34-36.

17. Панченко М. К., Вертигора И.П., Грицай Н. П. Комплексное лечение больных с хроническим остеомиелитом с применением костной пластики // Вестн. хир. 1988. №10. С. 42-46.

18. Пекарева Н. А., Чупрова А. В., Шваюк А. П., Горбенко О. М., Обухова О. О., Трунов А. Н. Сравнительный анализ баланса цитокинов в сыворотке крови и моче у детей с хроническим пиелонефритом в стадии клинической ремиссии // Аллергология и иммунология. 2007. том 8. №1. С. 132-133.

19. Перетня Н. Н.‚ Сенькова Л. В.‚ Добродеев К. Г., Капутин С. Л. и др. К вопросу о роли IgE // Объединённый иммунологический форум: Тезисы. Екатеринбург. 2004. С. 119.

20. Перцева Т. А., Конопкина Л. И. Интерфероны и их индукторы // Український хіміотерапевтичний журнал. 2001. №2. С. 62-67.

21. Пинегин Б. Ф., Юдина Т. И., Карсанова М. И. Общие вопросы иммунитета, иммунодиагностики и иммунотерапии на модели хирургических инфекций // Современные проблемы аллергологии, клинической иммунологии и иммунофармакологии. М. 1998. С 10-178.

22. Сетдикова Н. Х., Латышева Т. В. Комплексные механизмы развития хронического рецидивирующего фурункулеза и пути их коррекции // Иммунология. 2000. №3. С. 48-50.

23. Симбирцев А. С. Цитокины - новая система регуляции защитных реакций организма // Цитокины и воспаление. 2002. № 1. С. 9-16.

24. Тиходеев С. А., Вишневский А. А. Неспецифический остеомиелит позвоночника. СПб.: СПбМАПО, 2004. 250с.

25. Хаитов Р. М., Игнатьева Г. А., Сидорович И. Р. Иммунология: учебник. М.: Медицина, 2000. 186-189с.

26. Хаитов Р. М., Пинегин Б. В. Вторичные иммунодефициты: клиника, диагностика, лечение // Иммунология. 1999. №2. С. 14-17.

27. Agui T. Stimulation of interleukin-6 production by endothelin in rat bone marrow-derived stromal cells. // Blood. 1994. Vol. 84. P. 25-31.

28. Anliytsky W., Schuler M,, Peschel C. // Drugs. 1994. V. 48. P. 667.

29. Becker S., Groner B. & Muller C.W. Three-dimentional structure of the Stat3b homodimer bound to DNA Nature, 394, 1998 Р. 145-151.

30. Brisce J. et al. JAKs and STATs branch out Trends in Cell Biology. 1996. Р. 336 - 340.

31. Holter W., Grunow R., Stockinger H., et al.//J.Immunol.-1986. V.136. N.6. P.21-71.

32. Keegan A., Nelms K., Wang L., Pierce J., Paul W. // Immunol. Today. 1994. V. 15. P. 423.

33. Paul W. // Blood. 1991. V. 77. P. 18-59.

34. Paul W.E., Seder R.A. Lymphocyte responses and cytokines Cell. 76. Р. 241-251.

35. Young H.A. // Seminars in Virology. 1995. V. 6. P. 175-180.

ПРИЛОЖЕНИЕ

Приложение 1. Интерлейкин-4 (IL4) и г -интерферон (IFNг) у больных с хроническим рецидивирующим фурункулезом

Таблица 1. Содержание интерлейкина-4 (IL4) и г -интерферона (IFNг) в сыворотке крови больных с хроническим рецидивирующим фурункулезом в зависимости от уровня IgE

Цитокины	Контрольная группа (n=10)	Концентрация цитокинов у больных с повышенным уровнем сывороточного IgE‚ пг/мл (n=14)	Концентрация цитокинов у больных с нормальными значениями сывороточного IgE‚ пг/мл (n=20)
Интерлейкин-4 (IL4)	1,13 ± 0,5	10,5 ± 2,4*	7,0 ± 1,7**
г -интерферон (IFNг)	15,5 ± 8,5	21,2 ± 7,65	24,6 ± 13,1

Примечание. * - достоверно по сравнению с контролем, р< 0,05

** - достоверно по сравнению с контролем, р< 0,01



Приложение 2. Интерлейкин-4 (IL4) и г -интерферон (IFNг) у больных с хроническим остеомиелитом

Таблица 2. Содержание интерлейкина-4 (IL4) и г -интерферона (IFNг) в сыворотке крови больных с хроническим остеомиелитом в зависимости от уровня IgE

Цитокины	Контрольная группа (n=10)	Концентрация цитокинов у больных с повышенным уровнем сывороточного IgE‚ пг/мл‚ (n=10)	Концентрация цитокинов у больных с нормальными значениями сывороточного IgE‚ пг/мл‚ (n=5)
Интерлейкин-4 (IL4)	1,13 ± 0,5	9,2 ± 2,52**	9,8 ± 2,74*
г -интерферон (IFNг)	15,5 ± 8,5	54,94 ± 35,7*	46,13 ± 28,3*

Примечание. * - достоверно по сравнению с контролем, р<0,05

** - достоверно по сравнению с контролем, р<0,01

Приложение 3.

Таблица 3. Цитокины человека

Цитокин	Аббревиатура цитокина
Aggrecan / Protoglycan
Amyloid beta 1-42
Amyloid beta 1-42 (N)
Amyloid beta 1-42 N3pE
GRO a / MGSA human
GRO b human
RANTES
RANTES
Serum Amyloid A	SAA
Антагонист рецептора интерлейкина-1	IL-1RA
Антитела к интерферону-a
Интерлейкин-1a	IL-1a
Интерлейкин-1b	IL-1b
Интерлейкин-1b (ультрачувствит.)	IL-1b
Интерлейкин-2	IL-2
Интерлейкин-3	IL-3
Интерлейкин-3	IL-3
Интерлейкин-4	IL-4
Интерлейкин-4 (ультрачувствит.)	IL-4
Интерлейкин-5	IL-5
Интерлейкин-6	IL-6
Интерлейкин-6 (ультрачувствит.)	IL-6
Интерлейкин-7	IL-7
Интерлейкин-8	IL-8
Интерлейкин-8 (ультрачувствит.)	IL-8
Интерлейкин-10	IL-10
Интерлейкин-10 (ультрачувствит.)	IL-10
Интерлейкин-12 (ультрачувствит.)	IL-12
Интерлейкин-12 + p40	IL-12 + p40
Интерлейкин-13	IL-13
Интерлейкин-15	IL-15
Интерлейкин-16	IL-16
Интерлейкин-17	IL-17
Интерлейкин-18	IL-18
Интерферон-a	IFN-a
Интерферон-b	IFN-b
Интерферон-g	IFN-g
Интерферон-g	IFN-g
Маркеры апоптоза APO-1 / FAS	CD95
Макрофагальный белок воспаления	MIP-1a
Макрофагальный белок воспаления	MIP-1b
Макрофагальный белок воспаления	MIP-4
Макрофагальный белок воспаления	MIP-5
Молекула адгезии сосудистого эндотелия 1 типа

Подобные документы

• Цитокины. Определение. Основные характеристики. Роль цитокинов в индукции и регуляции иммунного ответа

  Определение цитокинов, их свойства, функции, особенности, виды. Регуляторная роль цитокинов в организме. Механизм действия на клетки. Образование "микроэндокринной системы" (взаимодействие клеток иммунной, кроветворной, нервной и эндокринной систем).
  
  презентация [1,9 M], добавлен 18.09.2016
  

• Цитокины. Общее описание

  Понятие и внутренняя структура цитокинов как важного элемента при взаимодействии разных лимфоцитов между собой и с фагоцитами. Оценка их биологической роли, характеристика и значение в организме. Варианты проявления действия цитокинов, иммунный ответ.
  
  презентация [168,9 K], добавлен 22.10.2015
  

• Основные группы цитокинов, их характеристика. Понятие цитокиновой сети

  Исследование свойств, функций и механизма действия цитокинов, гормоноподобных медиаторов межклеточного взаимодействия. Аутокринно-паракринная регуляция иммунного ответа. Характеристика цитокиновой сети воспалительного ответа. Факторы некроза опухоли.
  
  презентация [1,9 M], добавлен 27.05.2014
  

• Роль цитокинов в женском половом цикле

  Общие свойства цитокинов. Овариально-менструальный цикл. Процессы реализации механизмов специфического иммунитета. Отторжение функционального слоя эндометрия. Специфические изменения в эпителии эндометрия и эндотелии в течение менструального цикла.
  
  презентация [524,9 K], добавлен 28.12.2013
  

• Активность карбоксипептидазы N и ангиотензинпревращающего фермента в сыворотке крови у онкологических больных при химиотерапевтическом воздействии

  Механизм образования активных форм регуляторных пептидов. Метод определения активности ангиотензинпревращающего фермента. Исследование активности карбоксипептидазы N в сыворотке крови онкологических больных при химиотерапевтическом воздействии.
  
  дипломная работа [74,0 K], добавлен 25.06.2009
  

• Стволовые клетки и искусственные органы

  Изучение принципа действия биопринтера, способного из клеток создавать любой орган, нанося клетки слой за слоем. Анализ технологии выращивания искусственных органов на основе стволовых клеток. Исследование механизма быстрого самообновления клеток крови.
  
  реферат [1,8 M], добавлен 25.06.2011
  

• Механизмы реализации путей гибели клетки

  Основные функции крови. Структурно-функциональная организация крови. Межклеточное вещество (плазма), форменные элементы крови (клетки). Гранулярные и агранулярные лейкоциты, постклеточные структуры. Эритроциты и тромбоциты, стволовые клетки крови.
  
  контрольная работа [2,9 M], добавлен 06.02.2011
  

• Морфология и физиология крови

  Анализ регуляторной, терморегуляторной, дыхательной, гомеостатической, питательной и защитной функций крови. Исследование форменных элементов крови. Химический состав тромбоцитов. Характеристика сферы действия лейкоцитов. Место лимфоцитов в системе крови.
  
  презентация [630,7 K], добавлен 27.01.2016
  

• Ионные механизмы потенциала действия

  Количественное описание механизмов, участвующих в генерации потенциала действия. Натриевые и калиевые токи, соотношение натрия и калия на фазе роста потенциала клетки. Положительная и отрицательная обратная связь во время изменений проводимости.
  
  контрольная работа [27,7 K], добавлен 26.10.2009
  

• Влияние радиоактивности на клетку

  Необратимость действия ионизирующей радиации на организм. Биохимические изменения в облученной клетке. Хромосомные аберрации (перестройки) как проявление лучевого поражения клеток. Продвижение клетки по циклу, задержка деления под влиянием радиации.
  
  реферат [32,9 K], добавлен 27.06.2011
  

• главная
• рубрики
• по алфавиту
• вернуться в начало страницы
• вернуться к началу текста
• вернуться к подобным работам