При наличии индикации о положительном результате необходимо открыть указанный ящик; нажать клавишу под иконкой "извлечь положительные пробирки"; извлечь пробирку из указанной прибором ячейки; считать штрих-код извлеченной пробирки.

Следует просмотреть пробирку и визуально определить наличие роста микобактерий. Обычно в жидкой среде микобактерии растут в виде своеобразной "зернистости" или белых хлопьев, при этом прозрачность среды может почти не меняться. Как правило, рост микобактерий сосредоточен на дне пробирки. Сильное помутнение среды может свидетельствовать о наличии контаминации посторонней флорой.

Максимальное время инкубации пробирок в приборе MGIT - 42 дня. Пробирки, в которых размножение микобактерий не зафиксировано прибором в течение указанного времени, идентифицируются системой как отрицательные. В этом случае прибор сообщает появлением зеленой индикации на наружной панели соответствующего ящика и звуковым сигналом.

Для того чтобы извлечь "отрицательные" пробирки, необходимо открыть соответствующий ящик и нажать клавишу под иконкой "извлечь положительные пробирки" - прибор укажет зеленым световым сигналом на те пробирки, которые необходимо удалить. Необходимо извлечь пробирку из ячейки и отсканировать штрих-код, а также просмотреть пробирку, пытаясь визуально определить наличие возможного роста микобактерий и контаминации (мутность, дисперсность и т.д.).

При наличии сомнений в правильности отрицательного результата (наличие мутности, зернистости и т.д.), следует приготовить мазки для микроскопического исследования и произвести посев материала на кровяной агар для контроля контаминации и на среду Левенштейна.

2.2.4 Определение лекарственной чувствительности МБТ к препаратам первого ряда на плотных средах

Приготовление растворов противотуберкулезных препаратов.

Для приготовления растворов ПТП должны использоваться только химически чистые субстанции противотуберкулезных препаратов. Лекарственные формы препаратов для определения лекарственной чувствительности микобактерий непригодны. Для приготовления навесок ПТП необходимо использовать аналитические весы или другие равного класса точности. Концентрации рабочих растворов должны учитывать содержание активного начала препарата в используемой химической субстанции, а также фактор разбавления раствора ПТП в питательной среде.

Стрептомицина сульфат 10 мкг/мл

Для определения лекарственной чувствительности к стрептомицину используют порошковидную форму химически чистого вещества стрептомицина сульфата. Содержание активного препарата - 1000 мг в 1 г.

10 мг стрептомицина сульфата растворяют в 10 мл стерильной дистиллированной воды. Концентрация стрептомицина в полученном растворе составляет 1000 мкг/мл.

Рабочее разведение стрептомицина добавляют в среду Левенштейна-Йенсена перед свертыванием в соотношении 1 мл раствора к 99 мл среды.

Изониазид 1 мкг/мл

Для определения лекарственной чувствительности к изониазиду используют порошковидную форму химически чистого вещества изоникотиновой кислоты гидразида. Содержание активного начала препарата - не менее 990 мг в 1 г.

10 мг изониазида растворяют в 1 мл этилового спирта, затем добавляют 9 мл стерильной дистиллированной воды. Концентрация изониазида в полученном растворе составляет 1000 мкг/мл.

К 1 мл раствора 1 добавляют 9 мл стерильной дистиллированной воды. Концентрация изониазида в полученном растворе составляет 100 мкг/мл.

Рабочее разведение изониазида добавляют в среду Левенштейна-Йенсена перед свертыванием в соотношении 1мл раствора изониазида к 99 мл среды.

Рифампицин 40 мкг/мл

Для определения лекарственной чувствительности к рифампицину используют порошковидную форму химически чистого вещества рифампицина. Содержание активного начала препарата - не менее 950 мг в 1 г.

Рифампицин не растворим в дистиллированной воде. Навеску препарата растворяют в этиловом спирте.

21 мг рифампицина растворяют в 5 мл этилового спирта. Концентрация рифампицина в полученном растворе составляет 4000 мкг/мл.

Рабочее разведение рифампицина добавляют в среду Левенштейна-Йенсена перед свертыванием в соотношении 1 мл раствора к 99 мл среды.

Этамбутол 2 мкг/мл

Для определения лекарственной чувствительности к этамбутолу используют порошковидную форму химически чистого вещества этамбутола гидрохлорида. Содержание активного начала препарата - 1000 мг в 1 г.

5 мг этамбутола дигидрохлорида растворяют в 10 мл стерильной дистиллированной воды. Концентрация этамбутола в полученном растворе составляет 500 мкг/мл.

К 2 мл раствора 1 добавляют 3 мл стерильной дистиллированной воды. Концентрация этамбутола в полученном растворе составляет 200 мкг/мл.

Рабочее разведение этамбутола добавляют в среду Левенштейна-Йенсена перед свертыванием в соотношении 1 мл раствора к 99 мл среды.

Приготовление суспензии микобактерий, её стандартизация, инокуляция, инкубирование посевов.

Выросшую на плотной питательной среде культуру микобактерий (обязательно несколько колоний) снимают стерильной платиновой лопаткой, переносят в стерильную пробирку и растирают стерильной стеклянной палочкой на стенках пробирки, не касаясь дна, в течение 1 минуты. Затем в пробирку добавляют 3 мл стерильного физраствора, аккуратно (чтобы не замочить пробку) встряхивают несколько раз до получения однородной суспензии. Суспензию оставляют на 10 минут для осаждения крупных конгломератов. Полученную суспензию вносят пипеткой по каплям в пробирку с 5 мл стерильного физраствора до достижения концентрации микобактерий 500 млн клеток/мл по оптическому стандарту мутности с последующим разведением стерильным физраствором в 10 раз. Инокуляция не стандартизованной смеси дает отклонение от истинного результата. Необходимо микроскопически контролировать приготовленную суспензию в мазке по Цилю-Нильсену для оценки качества дезинтеграции колоний и исключения наличия плотной среды во взвеси.

Засевают 0,2 мл суспензии на пробирку. В пробирке должно быть небольшое количество конденсационной жидкости. Если ее нет, то допустимо при соблюдении правил стерильности добавить в каждую пробирку несколько капель физиологического раствора.

После посева пробирки помещают в термостат при 37°С в наклонном положении, так, чтобы поверхность среды располагалась горизонтально, для того, чтобы равномерно распределить суспензию микобактерий по поверхности среды. Через 2-3 суток инкубации пробирки закрывают резиновыми пробками и переводят в вертикальное положение.

Учет и интерпретация результатов.

Пробирки с посевами инкубируют в течение 3-4 недель, еженедельно просматривая, отмечают время появления видимого роста, обильность роста в контрольных и опытных пробирках, контаминацию пробирок и т.д. Учет результатов определения лекарственной чувствительности проводят после 3 недель инкубирования. Поскольку сроки выделения возбудителя на яичных питательных средах составляют не менее 1 - 1,5 месяца, результат определения лекарственной чувствительности МБТ указанным методом обычно получают не ранее чем через 2 - 2,5 месяца после посева.

Штамм микобактерий считается чувствительным к препарату в случае присутствия в популяции менее 1% резистентных микобактерий, то есть роста 20 колоний и менее на среде с препаратом при обильном росте в контроле. Штамм микобактерий считается устойчивым к препарату в случае присутствия в популяции более 1% резистентных микобактерий, то есть роста более 20 колоний на среде с препаратом при обильном росте в контроле. В случае скудного роста в контроле исследование необходимо повторить.

2.2.5 Определение лекарственной чувствительности МБТ к препаратам первого ряда с использованием автоматизированной системы BACTEC MGIT 960

В состав набора BACTEC MGIT 960 SIRE Kit для критически допустимых концентраций входят указанные ниже препараты в лиофилизированной форме. Каждый набор содержит по одному флакону S, I, R и E (стрептомицин - S, изониазид - I, рифампицин - R, этамбутол - E), а также 8 флаконов ростовой добавки MGIT 960 SIRE.

Лекарственные препараты

стрептомицин: 332мг

изониазид: 33.2 мг

рифампицин: 332 мг

этамбутол: 1660 мг

Методика исследования

a. Разведение лиофилизированных лекарственных препаратов

Все процедуры по растворению и добавлению препаратов необходимо выполнять в ламинарном боксе II-класса защиты!

Для получения указанных концентраций следует разводить лиофилизированные лекарственные препараты 4 мл стерильной деионизированной или дистиллированной воды.

b. Добавление лекарственного препарата в пробирку со средой

При помощи автоматической пипетки со стерильным наконечником добавляется по 100 мкл (0,1 мл) раствора препарата в соответственно промаркированные пробирки MGIT.

Содержание препаратов в питательной среде (критические концентрации):

Стрептомицин (STR) 1,0 мкг/мл пит. среды

Изониазид (INH) 0,1 мкг/мл пит. среды

Рифампицин (RIF) 1,0 мкг/мл пит. среды

Этамбутол (EMB) 5,0 мкг/мл пит. среды

c. Подготовка инокулята. Посев и инкубация

Приготовление микобактериальной суспензии из положительной пробирки MGIT.

Для правильного определения лекарственной чувствительности концентрация МБТ в инокуляте должна находиться в определенных пределах. Поэтому важным фактором является "возраст" культуры в днях, прошедших от момента индикации "положительной" пробирки в системе MGIT.

1. День, в который данная культура была впервые определена системой как положительная, считается "НУЛЕВЫМ" ("день 0").

2. Для получения культуры, пригодной к дальнейшим тестам на ЛУ, пробирку необходимо инкубировать в системе BACTEC по меньшей мере еще сутки (т.е. до "дня 1 "). Если прибор загружен и дополнительное время сдерживает

его производительность, пробирка может быть удалена из системы после "дня 0" и культивироваться в последующие дни в термостате при температуре 37°С.

3. Культура является пригодной для посева на ЛУ в течение 5 дней, следующих за "днем 0" (т.е. в течение дней: от 1 до 5). Если культура инкубировалась в системе или термостате более 5 дней после сообщения о положительном результате (т.е. начиная с "дня 6" и далее), она непригодна к проведению теста на лекарственную чувствительность в системе MGIT, ее необходимо субкультивировать, т.е.0,5 мл этой культуры посеять в новую пробирку MGIT.

Процедуры подготовки суспензии для постановки теста на лекарственную чувствительность различаются в зависимости от "возраста" культуры.

Для культуры в "возрасте" 1-2 дня

1. Энергично встряхнуть пробирку для гомогенизации и измельчения имеющихся сгустков (скоплений микобактерий).

2. Оставить пробирку на 5-10 мин для осаждения крупных частиц.

3. Использовать надосадочную жидкость для инокуляции пробирок с препаратами.

Для культур в "возрасте" 3, 4, 5 дней со дня положительной индикации роста

1. Энергично встряхнуть пробирку для гомогенизации и измельчения имеющихся сгустков (скоплений микобактерий).

2. Оставить пробирку в вертикальном положении на 5-10 минут для осаждения крупных частиц.

3. В отдельную стерильную пробирку поместить 1 мл надосадочной жидкости и развести ее 4 мл стерильного изотонического раствора NaCl, получив таким образом разведение 1: 5.

4. Использовать его для инокуляции в пробирке с препаратами.

Приготовление микобактериальной суспензии из культуры выращенной на плотной питательной среде

Для постановки теста на лекарственную чувствительность используется культура с плотной питательной средой Левенштейна-Йенсена не "старше" 15 дней с момента появления роста микроколоний микобактерий. Более "старые", как и совсем "молодые" культуры, снижают достоверность результатов определения лекарственной чувствительности МБТ.

Подготовка суспензии культуры МБТ для посева в пробирки MGIT с препаратами.

1. В стерильную стеклянную пробирку добавить 4 мл среды BBL Middlebrook 7H9 (или 4 мл физ. раствора) и поместить также 8-10 бусин из боросиликатного стекла диаметром 3 мм.

2. С помощью микробиологической петли (можно использовать стерильный шпатель или деревянный аппликатор) собрать как можно больше колоний с поверхности среды. Избегать снятия самой среды.

3. Перенести собранные колонии в пробирку с питательной средой (физраствором) и стеклянными бусинами. Плотно закрыть пробку и ресуспендировать на "Вортексе" в течение 1 - 3 минут для полного измельчения сгустков.

4. Проконтролировать мутность суспензии по стандарту мутности McFarland (мутность суспензии должна быть более 1,0).

5. Оставить пробирку с суспензией на столе на 20 минут для осаждения крупных частиц.

6. Аккуратно перенести надосадочную жидкость пипеткой в другую стерильную пробирку, не касаясь осадка на дне пробирки. Оставить пробирку с надосадочной жидкостью в вертикальном положении на 15 минут для осаждения всех оставшихся крупных частиц.

7. Аккуратно перенести надосадочную жидкость в следующую стерильную пробирку, не касаясь осадка.

8. Проконтролировать мутность полученной суспензии по стандарту мутности McFarland (она должна быть больше 0,5 ед.). Довести мутность суспензии точно до 0,5 ед путем добавления в пробирку стерильного физраствора.

9. Развести полученную суспензию в соотношении 1: 5 стерильным физраствором. Для этого перенести 1 мл полученной микобактериальной суспензии в пробирку с 4 мл стерильного физраствора и ресуспендировать. Использовать полученное разведение (1: 5) для инокуляции в пробирки MGIT с препаратами.

Посев и инкубация

1. Пронумеровать 5 пробирок MGIT: 1 - контроль (GC), 2 - стрептомицин (STR), 3 - изониазид (INH), 4 - рифампицин (RIF), 5 - этамбутол (EMB).

2. В асептических условиях (ламинарный бокс II-класса защиты) внести в каждую пробирку 0,8 мл обогатительной добавки BACTEC 960 SIRE.

3. Добавить по 0,1 мл разведенного лекарственного препарата в соответствующую пробирку при помощи автоматической пипетки, пользуясь отдельным стерильным наконечником для каждого препарата.

4. Внести 0,5 мл микобактериальной суспензии, приготовленной одним из способов, в пробирки, содержащие лекарственные препараты, используя стерильную одноразовую пипетку. Не инокулировать контрольную пробирку!

5. Для посева в контрольную пробирку, использовать разведение тестовой суспензии 1: 100. Для этого 0,1 мл тестовой суспензии развести в 10 мл стерильного физраствора, закрыть крышку и перемешать содержимое, переворачивая пробирку 5-6 раз.0,5 мл полученной суспензии внести в контрольную пробирку.

6. Плотно закрутить крышки пробирок, перевернуть каждую пробирку несколько раз (чтобы перемешать содержимое) и оставить на некоторое время.

7. Поместить засеянные пробирки на специальные держатели для постановки лекарственной чувствительности в строгой последовательности: GC, STR, INH, RIF, EMB.

8. Далее открыть секцию прибора BACTEC MGIT 960, нажать клавишу под иконкой "внести пробирки", считать штрих-код держателя и установить пробирки вместе с держателем в станции, которые укажет прибор зеленым свечением.

Не перемещать пробирки во время тестирования.

9. Проверить чистоту инокулята, сделав посев каплей культурной суспензии на чашку с кровяным агаром. При отсутствии чашки с кровяным агаром использовать шоколадный агар BHI. Инкубировать и проверить рост через 48 часов. Если на чашке с посевом заметны следы роста, прервать тест на чувствительность и не использовать его результаты. Повторить тест после получения чистой культуры.

Глава 3. Результаты собственных исследований

3.1 Сравнительная характеристика высеваемости МБТ на плотной среде и на BACTEC MGIT 960

Для исследования были отобраны 622 пробы мокроты. Данные пробы парно высевались на плотную и жидкую среду в один и тот же день или с разницей в одни сутки. Получены следующие результаты:

из 622 исследованных проб мокроты по данным BACTEC MGIT 960 было выдано 379 положительных результатов и 245 отрицательных;

из 622 исследованных проб мокроты по данным посевов на плотную питательную среду было выдано 295 положительных и 327 отрицательных результатов.

Таблица 1. Результаты микробиологического исследования

	Плотная среда	BACTEC MGIT 960	Совпадения
Отрицательные результаты	327 (53%)	245 (39%)	228 (46%)
Положительные результаты	295 (47%)	379 (61%)	273 (54%)
Всего	622 (100%)	622 (100%)	501 (81%)

Из данных таблицы 1 можно сделать следующие выводы:

Культивирование МБТ при помощи BACTEC MGIT 960 является более чувствительным методом по сравнению с культивированием на плотной среде, поскольку дает большее количество положительных результатов (на 14%);

Но BACTEC MGIT 960 нельзя использовать как самостоятельный диагностический тест для выявления туберкулеза, так как совпадение результатов исследования на обеих средах наблюдается только в 81% случаев.

Таблица 2. Продолжительность микробиологического исследования

	Плотная среда	BACTEC MGIT 960
Положительные результаты	295	379
Средняя продолжительность одного исследования	38±4,2 дней	16± 2,5 дней

Из данных таблицы 2 следует, что микробиологическое исследование с использованием BACTEC MGIT 960 занимает в 2,4 меньше времени, чем аналогичное исследование на плотной питательной среде. Это имеет немаловажное значение при постановке диагноза и своевременном начале лечения.

3.2 Сравнительная характеристика определения лекарственной чувствительности МБТ на плотной среде и на BACTEC MGIT 960

Для исследования были отобраны 69 проб. Это парные пробы (мокрота от одного больного одновременно засевается на плотную и жидкую питательную среду). Затем было проведено сравнение на совпадение результатов высеваемости на обеих средах. Результаты отражены в таблицах 3 и 4.

Таблица 3. Сравнение результатов, полученных методом абсолютных концентраций на среде Левенштейна-Йенсена и на системе BACTEC MGIT 960

ПТП	Количество исследований	Плотная среда	BACTEC MGIT 960	Совпадения
		Отрицательные результаты*	Положительные результаты*	Отрицательные результаты*	Положительные результаты*
Изониазид	69	11	58	7	62	60 (87%)
Стрептомицин	69	13	56	8	61	62 (90%)
Рифампицин	57	17	40	10	47	49 (86%)
Этамбутол	69	31	38	17	52	48 (70%)

Примечание: Отрицательные результаты* - МБТ чувствительна к данному ПТП; Положительные результаты* - МБТ устойчива к данному ПТП.

Рисунок 4. Результаты определения лекарственной чувствительности на плотной среде

Примечание: I - изониазид; S - стрептомицин; R - рифампицин; E - этамбутол.

Рисунок 5. Результаты определения лекарственной чувствительности на BACTEC MGIT 960

Примечание: I - изониазид; S - стрептомицин; R - рифампицин; E - этамбутол.

Таблица 4. Сравнительная характеристика определения лекарственной чувствительности на BACTEC MGIT 960 с международным стандартом

ПТП	Совпадения результатов на плотной среде и BACTEC MGIT 960	Международный стандарт
Изониазид	60 (87%)	86-100%
Стрептомицин	62 (90%)	82-100%
Рифампицин	49 (86%)	73-98%
Этамбутол	48 (70%)	59-93%

Международный стандарт является индикатором качества определения лекарственной устойчивости МБТ на BACTEC MGIT 960. Исходя из данных, приведенных выше, можно сделать вывод, что BACTEC MGIT 960 можно использовать в качестве диагностического теста на чувствительность МБТ к ПТП, поскольку его результаты являются весьма достоверными.

3.3 Сравнительная характеристика контаминации проб на плотной и жидкой питательных средах

Для исследования были отобраны 86 (из 708 исследованных) контаминированных проб. Пробы парные и были взяты в один день. Получены следующие результаты:

на жидкой среде контаминировано 49 проб (7%);

на плотной среде контаминировано 37 проб (5%)

Таким образом установлено, что жидкая среда контаминируется чаще плотной. Это связано с тем, что жидкая среда обладает лучшими культуральными свойствами по сравнению с плотной средой. Но это одновременно является и ее недостатком, поскольку диагностические пробы чаще являются непригодными для исследования в связи с их загрязнением посторонней микрофлорой.

Заключение

Проанализировав данные, приведенные выше в результатах собственных исследований, можно сделать следующие выводы:

1. При микробиологическом исследовании мокроты от больных с подозрением на туберкулез легких более высокая высеваемость МБТ наблюдается на жидких средах, чем на плотных. Кроме того, период тестирования образца на автоматизированной системе BACTEC MGIT 960 занимает значительно меньше времени, чем на среде Левенштейна-Йенсена (в среднем 16 дней вместо 38 дней в случае положительного результата; и 42 дня вместо 10 недель в случае отрицательного результата). Но имеются и недостатки в использовании BACTEC MGIT 960 - результаты исследований на обеих средах совпадают лишь на 81%.

2. Современные бактериологические способы определения чувствительности микобактерий к противотуберкулезным препаратам на жидкой среде с помощью автоматизированной системы ВАСТЕС 960 дают возможность получить результаты, хорошо сопоставимые с традиционными методами абсолютных концентраций на среде Левенштейна-Йенсена. Наибольшая согласованность данных наблюдалась для изониазида (87%), рифампицина (86%) и стрептомицина (90%), а наименьшая - для этамбутола (70%). Высокая степень совпадения двух методов по определению лекарственной чувствительности микобактерий к препаратам первого ряда позволяет рассматривать их как взаимозаменяемые и отдавать предпочтение автоматизированному как более объективному, стандартизованному и ускоренному.

3. Успех культурального исследования в значительной степени зависит от качества пробоподготовки. Поступающий в лабораторию диагностический материал должен быть преобразован в гомогенную взвесь, в которой максимально уничтожена любая другая микрофлора, кроме микобактерий. Иначе исследование придется повторить. Особенно данное условие актуально по отношению к жидкой среде, поскольку она чаще подвергается контаминации по сравнению с плотной (7% и 5% соответственно. А это, бесспорно отрицательно сказывается на качестве микробиологического исследования.

Сравнение эффективности использования автоматизированных систем для выявления и определения лекарственной чувствительности МБТ с традиционными методами на плотных средах демонстрирует более высокие диагностические качества. Однако ВАСТЕС 960 также имеет свои недостатки и не может полностью заменить собой применение плотных питательных сред. Метод необходим для составления ориентировочного плана лечения больного с учетом лекарственной чувствительности МБТ к противотуберкулезным препаратам. Поэтому более целесообразно его использование в качестве дополнительного метода в диагностике туберкулеза наряду с традиционными методами.

Список литературы

1. Голышевская В.И. Современная лабораторная диагностика туберкулеза органов дыхания. / В.И. Голышевская // Пульмонология. - 1999. - №4. - с.89-94.

2. Гуревич Г. Отразить удар палочки Коха/ Г. Гуревич // БЕЛТА [Электронный ресурс]. - 2010. - Режим доступа: http://www.belta. by/ru/actualinterviev? id=503474. - Дата доступа: 22.04.2010.

3. Инструкция по организации определения лекарственной чувствительности микобактерии туберкулёза: утв. Министерством здравоохранения Республики Беларусь от 29 августа 2007 г № 787 // Нац. реестр правовых актов Респ. Беларусь. - 2007. - 2 октября (№ 79) - С.26-34.

4. Итруганова О.А. Современные возможности микобактериологической лаборатории. /О.А. Итруганова // Клиническая лабораторная диагностика. - 2006. - №1. - с.21-35.

5. Лекарственно-устойчивые формы туберкулеза: клинико-эпидемиологическое значение, профилактика и методика антибактериальной терапии: Методические рекомендации / НИИ пульмонологии и фтизиатрии МЗ РБ; Сост.: Гуревич Г.Л., Борщевский В.В., Богомазаова А.В. и др. - Минск, 1999. - 62с.

6. Ломако М.Н. Руководство по фтизиатрии // М.Н. Ломако, С.И. Судник, С.А. Соболь; под ред. М.Н. Ломако. - Минск: Выш. Школа, 1978. - 336 с.

7. Микробиологическая диагностика туберкулеза/ В.И. Голышевская [и др.] // Вестник Рос АМН. - 1995. - №7. - с.16-18.

8. Мороз А. Биочипы для решения задач диагностики туберкулеза/ А. Мороз // Здоровье Украины [Электронный ресурс]. - 2010. - Режим доступа:

http://www.health-ua.org/article/health/2158.html. - Дата доступа: 22.04.2010.

9. Пилипчук Н.С. Туберкулез/ Н.С. Пилипчук. - Киев: Вища школа, 1987. - 285 с.

10. Поздеев О.К. Медицинская микробиология/ О.К. Поздеев; под ред.В.И. Покровского. - Москва.: ГЭОТАР-МЕД, 2002. - 768 с.

11. Разработка критериев оценки качества и эффективности микробиологических исследований в учреждениях противотуберкулезной службы и общелечебной сети/ Севастьянова Э.В. [и др.] // Проблемы туберкулеза и болезней легких. - 2009. - №1. - с.53-60.

12. Суркова Л.К. Основные пути оптимизации микробиологической диагностики туберкулеза в современных условиях/ Л.К. Суркова // Медицинские новости. - 2001. - №8. - с.10-16.

13. Ускоренная культуральная диагностика туберкулеза с использованием автоматизированных систем BACTEC MGIT 960 и MB/BacT: Методические рекомендации/ Комитет здравоохранения Москвы; Сост.: Итруганова И.А., Смирнова Н.С., Мороз А.М. и др. - Москва, 2001. - 15 с.

14. Хомченко А.Г. Основы диагностики туберкулеза легких/ А.Г. Хомченко // Проблемы туберкулеза. - 1995. - №2 - с.27-30

15. Хомченко А.Г. Туберкулез органов дыхания: руководство для врачей/ А.Г. Хомченко. - Минск: Медицина, 1981. - 560 с.

16. Черноусова Л. Современные тенденции и способности микробиологической диагностики туберкулеза/ Л. Черноусова // Журнал справочник medasia.ru [Электронный ресурс]. - 2009. - Режим доступа: http://www.

Размещено на Allbest.ru