Гепатит С

Для выявления РНК HCV в печени, в сыворотке крови и лимфоцитах используют метод ПЦР. Определение РНК HCV позволяет уточнить, являются ли анти-HCV свидетельством активной или перенесенной в прошлом инфекции, и оценить результаты интерферонотерапии. Уровень сывороточной РНК HCV, определяемой через 1--3 недели после инфицирования методом ПЦР с разветвленной ДНК, коррелирует с тяжестью гистологических изменений в печени. После перенесенного острого ВГС анти-HCV в сыворотке крови сохраняются длительно, но не обладают защитными свойствами.

Вирусный гепатит D. Диагноз острого гепатита D ставят на основании повышенного титра анти-HDV IgG в сыворотке крови.

Коинфекцию диагностируют по наличию в сыворотке крови анти-HDV и высокого титра анти-HBc IgM. Эти маркеры появляются в течение 1-й недели болезни, а анти-HDV IgM исчезают к 5-й неделе, но могут обнаруживаться на протяжении трех месяцев. Когда анти-HDV IgM исчезают, в сыворотке начинают обнаруживаться анти-HDV IgG. Между исчезновением одного класса антител и появлением другого возможен некоторый промежуток («окно»). Исчезновение анти-HDV IgM свидетельствует об излечении от HDV-инфекции, а персистенция HDV IgM -- о хронизации заболевания. В дальнейшем отмечается снижение титра анти-HBc IgM.

Суперинфекция HDV у носителей HBV характерна ранним появлением анти-HDV IgM в сыворотке крови (почти одновременно с анти-HDV IgG) и персистенцией обоих классов антител. У этих больных анти-HBc IgM обычно отсутствуют или могут обнаруживаться в низких титрах. Чаще выявляют анти-HBc IgG и анти-HBc.

У больных с хронической HDV-инфекцией, страдающих активным хроническим гепатитом и циррозом, в сыворотке крови обычно определяют анти-HDV IgM.

При коинфекции и суперинфекции в сыворотке крови больных обнаруживают HBsAg, но часто в низких титрах; иногда HBsAg не выявляют. HDV-инфекция угнетает репликацию HBV, и у больных обычно отсутствуют HBcAg и ДНК HBV.

В сыворотке крови и печеночной ткани больных острой и хронической HDV-инфекцией с наличием анти-HDV гистохимически или с помощью полимеразной цепной реакции можно обнаружить РНК HDV.

Вирусные гепатиты Е и G. Учитывая эпидемиологические и клинические данные, окончательный диагноз должен быть установлен выявлением в сыворотке крови специфического маркера -- анти-HEV IgM в остром периоде заболевания. Методом ПЦР определяют РНК НEV. Анти-HEV IgG появляются гораздо позже и свидетельствуют о перенесенном заболевании.

Основным маркером ОВГG служит РНК HGV, выявляемая методом ПЦР. Анти-HGV появляются в поздние сроки, когда из крови исчезает РНК HGV, и служит маркером выздоровления.

Дифференциальную диагностику вирусных гепатитов следует проводить поэтапно, решая следующие задачи:

· исключить острые вирусные гепатиты А, В, С, D и искать другую причину заболевания;

· установить тип вирусного гепатита и определить стадию заболевания.

На первом этапе дифференциальной диагностики вирусных гепатитов необходимо решение следующих задач:

· исключение острых вирусных гепатитов (А, В, С, D);

· определение этиологии острого вирусного гепатита.

Минимальным объемом обследования больных следует считать определение серологических маркеров:

· вирусный гепатит А -- aнти-HAV IgM;

· вирусный гепатит В -- HBsAg, aнти-HBc IgM;

· вирусный гепатит С -- aнти-HCV IgM, aнти-HCV IgG.

В дальнейшей серологической диагностике нуждаются только больные вирусным гепатитом В. Это положение относится как к больным только вирусным гепатитом В, так и к больным с микст-инфекциями, потому что в случаях вирусных гепатитов А и С серологический диагноз определяется уже на первом этапе диагностики.

На втором этапе диагностики рекомендуется решение следующих задач:

· установление характера течения вирусного гепатита В и определение стадии болезни;

· выявление ко- или суперинфекции вируса гепатита D.

Второй этап проводится строго по клиническим показаниям. Показаниями для проведения второго этапа диагностики вирусных гепатитов являются:

· в случае положительных результатов на HBsAg и aнти-HBc IgM (полученных на I этапе диагностики) необходимо при тяжелом течении обследовать больного на наличие коинфекции HDV, т.е. провести определение aнти-HDV IgM;

· в случае положительного результата на HBsAg и отрицательного -- на a-HBc IgM необходимо установить стадию вирусного гепатита В, исключить хронический вирусный гепатит В и наличие HDV-инфекции; для решения этих задач проводят определение следующих маркеров: aнти-HBc IgG, HBeAg, aнти-HBe, aнти-HBs, aнти-HDV IgM, aнти-HDV IgG;

· в случае отрицательного результата на HBsAg и положительного результата на aнти-HBc IgM необходимо исключить суперинфекцию HDV, т.е. определить маркеры вирусного гепатита -- aнти-HDV IgM и aнти-HDV IgG.

Второй этап диагностики вирусных гепатитов дает возможность окончательно поставить серологический диагноз и определить стадию заболевания.

Другие вирусные гепатиты. При вирусном гепатите С дифференциальная диагностика проводится, как при ОВГА и ОВГВ.

ОВГD в первую очередь необходимо дифференцировать с ОВГВ и ОВГС, а также с другими вирусными гепатитами. ОВГD следует дифференцировать также с теми же заболеваниями, что и ОВГА.

Дифференциальная диагностика ОВГЕ проводится с другими острыми вирусными гепатитами и с заболеваниями, как при ОВГА.

1.2 Лечение и профилактика гепатитов

Лечение.

Вирусный гепатит А. Особенности лечения острых вирусных гепатитов определяются главным образом тяжестью течения заболевания. При различных этиологических формах острых вирусных гепатитов (А, В, С, D, E) существенных различий в лечебных мероприятиях пока не предложено, за исключением методов специфической профилактики.

В основе лечения больных с острым вирусным гепатитом А и другими вирусными гепатитами лежит принцип сдержанности терапии, который предполагает ограждение больной печени от дополнительных энергетических затрат, а также защиту от медикаментов с сомнительной или недоказанной эффективностью. В первую очередь необходимо исключить попадание в организм всех гепатотропных веществ, особенно алкоголя и гепатотоксических лекарств.

Больным назначают базисную терапию в следующем объеме:

· рациональный двигательный режим, соответствующий форме тяжести болезни (в период разгара заболевания больные должны находиться на полупостельном режиме, а при тяжелом течении -- на постельном; целесообразна госпитализация больных, хотя в ряде стран больных вирусным гепатитом А лечат в домашних условиях);

· лечебное питание -- стол № 5 или 5а;

· медикаментозная терапия в соответствии с формой тяжести заболевания (лекарственное лечение таких больных должно быть максимально ограниченно).

Другие вирусные гепатиты (В, С, D, E, G). Общие принципы лечения больных острым ВГВ такие же, как и у больных с острыми ВГА. Поскольку ВГВ, в отличие от ВГА, нередко протекает в тяжелой и злокачественной формах, а заболевание может заканчиваться формированием хронического гепатита и цирроза печени, рекомендации по лечению больных ВГВ должны быть более детализированы. Сроки всех ограничений у больных с ВГВ несколько удлиняют в полном соответствии с пролонгированным течением заболевания.

У больного ВГЕ используется такой же комплекс терапевтических мероприятий, как и у больных ОВГА. Лечение противовирусными препаратами не проводится.

При ВГG используют такой же комплекс лечебных мероприятий, как и при ВГА и ВГС.

Этиотропная терапия:

· применение интерферонов.

· рименение аналогов нуклеозидов.

Симптоматическая:

· гормоны,

· гепатопротекторы.

Цирроз, рак печени

Но самое тяжёлое течение гепатита вызывает сочетание двух и более вирусов, например В и D или B и С. Встречается даже B+D+C. В этом случае прогноз крайне неблагоприятный. Зачастую признаки хронического вирусного гепатита слабо выражены, что позволяет человеку до поры до времени не обращать внимание на болезнь. Нередко явные клинические проявления болезни обнаруживаются уже на стадии цирроза.

Цирроз возникает приблизительно у 20% больных вирусным гепатитом С. К этому осложнению могут также привести гепатит В в сочетании с гепатитом D или без него. Наличие циррозa создает препятствия для нормального кровотока в печени (повышение давления в портальной вене). Кровь вынуждена искать дополнительные обходные пути, что приводит к расширению кровеносных сосудов в области пищевода и желудка [7].

Эти расширенные кровеносные сосуды называются варикозными венами, они растягиваются и могут стать источником кровотечения, что требует неотложкой врачебной помощи. Вторым проявление повышения давления в портальной вене - асцит (выпот жидкости в брюшной полости), который внешне проявляется увеличением живота в размерах.

Исходом цирроза может быть развитие рака печени.

Морфологически переход гепатита в цирроз является уменьшение числа клеток гепатоцитов, и разростание соединительной ткани, то есть формирование фиброза печени. Диагностика состояния ткани печени в настоящее время возможно инструментально: проведение элакстографии, проведение инструментального забора биоптата печени с дальнейшим морфологическим изучением стекол.

Профилактика гепатитов

Чтобы уберечься от заражения гепатитами, необходимо соблюдать несложные правила.

Не следует употреблять некипячёную воду, всегда мыть фрукты и овощи, не пренебрегать термической обработкой продуктов. Так можно предотвратить заражение гепатитом А, передача которого связана с загрязнением пищи фекалиями больного человека. Великое правило «Мойте руки перед едой» - залог здоровья и в данном случае.

В целом, необходимо избегать контакта с биологическим жидкостями других людей. Для предохранения от гепатитов В и С - в первую очередь с кровью [10].

В микроскопических количествах кровь может остаться на бритвах, зубных щётках, ножницах для ногтей. Не стоит делить эти предметы с другими людьми.

В медицинских учреждениях принимают меры профилактики заражения гепатитами. Однако, если Вы делали эндоскопию или лечили зубы десять-пятнадцать лет назад, когда борьба с гепатитом ещё не была тщательно организована, необходимо провериться. Небольшой риск заражения есть и сегодня.

Никогда не пользуйтесь общими шприцами и иглами для приёма наркотиков. Никогда не делайте пирсинг и татуировки нестерильными приборами. Помните - вирус гепатита очень живуч и, в противоположность вирусу СПИДа, долго сохраняется во внешней среде (иногда - до нескольких недель). Невидимые следы крови могут остаться даже на соломинках, используемых при употреблении кокаина, так что и в данном случае следует опасаться заражения.

Половым путём чаще всего передаётся гепатит B, но возможно заражение и гепатитом С. Особенно тщательно необходимо принимать меры предосторожности при сексе во время месячных и анальных контактах, однако и оральный секс также может быть опасен.

Гепатит передаётся и так называемым «вертикальным» путём - от матери ребёнку при беременности, в родах, во время кормления грудью. При должной медицинской поддержке можно попытаться избежать инфицирования младенца - это потребует тщательного соблюдения гигиенических правил и приёма лекарств [12].

Однако, путь заражения гепатитом очень часто остаётся неизвестен. Чтобы быть совершенно спокойным, необходимо провести вакцинацию.

В настоящее время практика здравоохранения располагает эффективными вакцинами только против гепатитов А и В. Ведутся интенсивные исследования по разработке вакцины против гепатита С, но они находятся на начальном этапе, т.к. высокая изменчивость вируса и отсутствие эффективной ответной выработки защитных антител после перенесенного гепатита С затрудняют проведение этих исследований. В связи с этим, вовремя начатое лечение гепатита С может предотвратить развитие тяжелых прогрессирующих изменений в ткани печени, что безусловно повысит качество жизни пациента.

Обезопасить себя от заболевания гепатитом А несложно - одна прививка обеспечивает защиту на срок более 1 года. Вторая доза через 6 - 12 мес. после первичной обеспечивает долгосрочную защиту. Взрослым вакцину вводят в дозе 0,5 мл в дельтовидную мышцу. Курс - 3 прививки по схеме 0, 1 и 6 мес. Детям вводят 0,25 мл в дельтовидную мышцу дважды с интервалом 1 мес. Планово против гепатита А вакцинируют медицинских работников, персонал детских дошкольных учреждений, работников сферы обслуживания (прежде всего занятых в предприятиях общественно питания, на водопроводных и канализационных сооружениях); выезжающих в гиперэндемичные по гепатиту А регионы и страны (Ближний Восток, Африка, Латинская Америка, Индонезия); При возникновении аварий на водопроводных и канализационных сооружениях (попадание сточных вод в водопроводную сеть) вакцинации против гепатита А подлежит население, которое пользовалось данной водопроводной магистралью.

С 1981 года в мире использовано более 1 миллиарда доз вакцин против гепатит В при отличных показателях безопасности и эффективности, вакцина является 95% эффективной в предотвращении развития хронического носительства вируса гепатита В. Вакцина против гепатита В - первая противораковая вакцина, поскольку хронические носители вируса гепатита в подвержены высокому риску смертности в следствии цирроза и рака печени. Ввиду выдающейся важности вакцины против гепатита В Всемирная Ассамблея здравоохранения рекомендовала в 1992 году всем странам включить прививки против вируса гепатита В в национальные календари прививок. На сегодняшний день 100 стран ввели вакцинацию против гепатита В в национальные календари прививок. В дополнение, во многих индустриально развитых странах проводится вакцинация подростков. В некоторых штатах США поголовно вакцинируют новорожденных.

В национальный календарь профилактических прививок вакцина против гепатита В включена с 1996 года [9].

Согласно Национального календаря профилактических прививок первую вакцинацию против вирусного гепатита В проводят новорожденным в первые 12 часов жизни, вторую - в возрасте 1 мес, третью - в 6 мес.

Детям, родившимся от матерей, носителей вируса гепатита В или больных вирусным гепатитом В в третьем триместре беременности вакцинация против вирусного гепатита В проводится по схеме 0-1-2-12 месяцев.

Поствакцинальные реакции при применении вакцины редки. В 3,5-5% случаев возможны незначительная проходящая местная боль, эритема и уплотнение в месте инъекции, а также незначительное повышение температуры, жалобы на недомогание, усталость, боль в суставах, боль в мышцах, головную боль, головокружение, тошноту.

Глава 2. Материалы и методы исследования

2.1 Общая характеристика гепатита С

Гепатит С (ГС) - вирусный гепатит с парентеральным механизмом передачи. Характеризуется наклонностью к хронизации процесса, обусловленной способностью возбудителя перманентно изменять свою антигенную структуру.

Историческая справка. Вопрос о существовании посттрансфузионного вирусного гепатита, не связанного с гепатитом В, возник в 70-е годы. В то время стал проводиться тщательный контроль препаратов крови на маркеры ГВ, и это привело к его резкому сокращению. В то же время врачи стали регистрировать значительное число случаев посттрансфузионного гепатита другой, неизвестной этиологии. Детальный анализ ряда случаев посттрансфузионного гепатита, при которых не удавалось обнаружить маркеры HBV, позволил установить клинические и эпидемиологические особенности болезни, на основании которых, в свою очередь, стало возможным постулировать существование другой нозологической формы посттрансфузионного гепатита, названного гепатитом ни А ни В [11].

До последнего времени диагностика парентерального гепатита ни А ни В была основана на исключении маркеров известных гепатитов, особенностях клинической картины и эпидемиологии. Значительный прогресс в изучении гепатита ни А ни В был достигнут в 1989 г., когда появилась коммерческая тест-система для выявления анти-НСV-антител к вирусу гепатита С - так стали называть вирус парентерального гепатита ни А ни В. Эта тест-система стала широко использоваться во многих лабораториях мира для анализа крови доноров, больных хроническим гепатитом, а также пациентов с циррозом и первичным раком печени.

Накопленные к настоящему времени данные свидетельствуют о том, что ГС распространен в мире достаточно широко. При обследовании здорового населения наиболее часто анти-HCV выявлялись в Японии (1%) и странах Южной Европы: в Бельгии, Франции, Италии, Испании (0,9-1%). В Центральной и Северной Европе (Швейцария, Германия, Дания, Скандинавия, Англия) анти-HCV обнаруживается реже -у 0,23-0,48% здоровых лиц, приблизительно с такой же частотой, как в Канаде (0,39%) и США (0,6%). К неблагополучным по степени распространенности ГС регионам следует отнести страны Африки [13].

Частота выявления анти-HCV коррелирует с распространением на изучаемых территориях других парентеральных гепатитов, в частности ГВ. Наиболее широко HCV-инфекция распространена в странах Средней Азии: в Туркмении анти-HCV выявлены у 5,3%, в Таджикистане - у 3,9%, в Киргизии - у 9,2% здорового населения. Кроме того, достаточно широко ГС встречается в восточных регионах России: анти-HCV выявлены в Туве у 3%, а в Якутии - у 2,5% обследованных доноров. В Москве антитела к HCV обнаружены у 1,3%, в Сумах - у 3,1% здоровых лиц.

Этиология

HCV представляет собой мелкий вирус с однонитчатой линейной РНК. Вопрос о таксономической принадлежности его к тому или иному вирусному семейству в настоящее время нельзя считать окончательно решенным. Морфология вирусной частицы не изучена, так как до настоящего времени не получен препарат вируса.

Данные о размере и морфологии вириона гепатита С весьма неоднозначны, тем не менее определены некоторые физико-химические характеристики вируса. Так, диаметр HCV составляет 30-60 нм (по данным фильтрования через миллипоры).

Сегодня можно говорить лишь о части свойств HCV, по которым обычно классифицируют вирусы.

Опубликованы сведения о последовательности нескольких штаммов HCV, выделенных от различных вирусоносителей и экспериментально зараженных животных, и появилась возможность сравнить первичные структуры различных штаммов. Оказалось, что геном HCV значительно различается от штамма к штамму. По европейской классификации выделяют 1а, 1в, 1с, 2а, 2в, 2с, За, Зв, 4а, 5а, 6а варианты генома HCV. Возможно, генотип вируса определяет тяжесть заболевания и чувствительность к интерферонотерапии. Отличительной особенностью HCV является способность к длительной персистенции в организме, что обусловливает высокий уровень хронизации [14].

Эпидемиология

Источником возбудителя является человек, больной острым или хроническим ГС. Восприимчивость к данной инфекции различных людей неодинакова и в большой степени определяется инфицирующей дозой. Пути передачи разнообразны. ГС был выделен из группы поспрансфузионного гепатита ни А ни В, поэтому при данном заболевании следует ожидать те же пути и механизмы передачи, что и при других парентеральных гепатитах: с кровью и продуктами крови, инъекционный, половой, внутрисемейный. Группу риска представляют больные, имеющие гемотрансфузии в анамнезе, больные гемофилией, длительно получающие препараты крови (факторы VIII и IX), пациенты гемодиализных центров, медицинские работники, а также наркоманы, использующие парентеральный путь введения наркотиков, и лица, имеющие сексуальные контакты со многими партнерами. Инфицированность HCV наркоманов достигает 75-83%. Трансфузии крови и ее компонентов являются причиной развития 80-90% случаев посттранс-фузионного ГС, в 1% случаев заражение происходит при гемодиализе и трансплантации органов. Благодаря низкому уровню виремии непарентеральные механизмы передачи возбудителя (половой, бытовой) составляют 10%, профессиональный - 2-6%. Вертикальный путь передачи играет незначительную роль. В 40-50% спорадических случаев выявить путь заражения не удается.

Патогенез

Патогенез ГС изучен недостаточно, что обусловлено в первую очередь отсутствием в настоящее время выделенного вируса, а также сравнительно недавней идентификацией этого гепатита.

Развитие гепатита происходит после проникновения HCV в гепатоцит и начала его репликации. До последнего времени единственной возможностью изучения особенностей размножения HCV являлось заражение экспериментальных животных. Для изучения ранних событий, происходящих при инфицировании HCV, двум шимпанзе внутривенно вводили 0,5 мл неразведенной плазмы от больного острым вирусным гепатитом ни А ни В. Эксперимент показал, что репликация HCV начинается в первые дни после инфицирования. Появление обнаруживаемых количеств вирусной РНК зафиксировано на 3-4-й день после инфицирования, точное время пика репликации вируса неизвестно. Повышение активности АлАТ и АсАТ также наблюдали сравнительно рано - на 1-3-й неделе после заражения, причем как у экспериментально зараженных животных, так и при естественном течении инфекции у людей. Пик повышения активности ферментов совпадал по времени с максимальным синтезом РНК HCV [15].

В патогенезе поражения органов при ГС имеют значение прямое цитопатическое действие вируса и вызванные им иммунологические реакции, репликация вируса вне печени (например, в лейкоцитах). Репликация вируса в иммунокомпетентных клетках нарушает их функции.

Многие исследователи считают, что HCV-инфекция способна индуцировать аутоиммунные процессы в организме. В частности, предполагают, что развитие таких аутоиммунных заболеваний, как синдром Сьегрена, криоглобулинемия, красный плоский лишай, кожная порфи-рия, связаны с HCV-инфекцией. Возможно, что и в развитии ГС, особенно его хронических форм, определенная роль принадлежит аутоиммунным механизмам.

Особенностью HCV является способность ускользать из-под иммунного надзора вследствие перманентного изменения антигенной структуры и наличия в организме больного одновременно множества антигенных вариантов его. Данная особенность с успехом заменяет HCV-выживаемость путем интеграции с геномом гепатоцита, свойственную HBV и невозможную для HCV.

2.2 Исследование и его методы

Набор реагентов для иммуноферментного выявления

Набор реагентов «Ротавирус - антиген - ИФА - Бест» (далее по тексту - набор) предназначен для выявления антигена ротавируса человека методом твердофазного иммуноферментного анализа в вирусодержащих культуральных жидкостях при лабораторных исследованиях, в экстрактах фекалий при клинических исследованиях, в образцах питьевой и сточной воды, воды открытых водоемов.

Набор рассчитан на проведение 96 определений, включая контроли, или 12 независимых постановок по 8 анализов каждая, включая контроли [2].

Принцип метода

Специфическими компонентами набора являются моноклональные антитела к группоспецифическому антигену ротавирусов человека, иммобилизованные в лунках планшета; конъюгат поликлональных антител к ротавирусам с пероксидазой хрена и контрольный положительный образец.

Принцип метода заключается во взаимодействии антигена ротавируса с моноклональными антителами, иммобилизованными в лунках полистиролового планшета. Комплекс «антиген-антитело» выявляют с помощью иммуноферментного конъюгата.

После удаления избытка несвязавшегося комплекса и инкубации с раствором ТМБ, происходит окрашивание раствора в лунках. Интенсивность окрашивания пропорциональна концентрации антигена ротавируса в анализируемых образцах. Реакцию останавливают добавлением стоп-реагента и измеряют оптическую плотность растворов в лунках при длине волны 450 нм, референс-волне в диапазоне 620-655 нм.

Оборудование и материалы, необходимые при работе с набором

- спектрофотометр вертикального сканирования, позволяющий проводить измерения оптической плотности растворов лунках стрипов в двухволновом режиме: при основной длине волны 450 нм и длине волны сравнения в диапазоне 620-655 нм; или при длине волны 450 нм;

Способ применения

Для выявления антигена ротавируса в фекалиях предварительно готовят экстракт 20%-ной суспензии фекалий. Исследуют надосадочную жидкость.

Определение антигена ротавируса в экстрактах фекалий

Внести: по 100 мкл К+, К-;

По 100 мкл анализируемых образцов.

Внести: по 100 мкл рабочего раствора конъюгата.

Инкубировать: 30 мин, 37 С.

Промыть: промывочным раствором, 400 мкл (600-700 мкл в режиме переполнения), 5 раз.

Внести: по 100 мкл рабочего раствора тетраметилбензидина.

Инкубировать: 25 мин, 18-25 С, в темноте.

Внести: по 100 мкл стоп-реагента.

Измерить: ОП при 450 нм / референсная длина волны 620-655 м.

На основании получинных данных вычислить критическое значение оптическое плотности (ОПкрит) по формуле:

ОПкрит = ОПср(К?) + 0,2

Положительным, если ОПобр ? ОПкрит, где ОПобр - оптическая плотность исследуемого образца.

Результат анализа считают отрицательным, если ОПобр<ОПкрит

Набор реагентов для иммуноферментного выявления антигена аденовируса человека

Принцип метода

Специфическими компонентами набора являются моноклональные антитела к антигенам аденовируса человека, иммобилизованные в лунках планшета; конъюгат моноклональных антител к аденовирусу с пероксидазой хрена и контрольный положительный образец.

Принцип метода заключается во взаимодействии антигена аденовируса с моноклональными антителами, иммобилизованными в лунках полистиролового планшета. Комплекс «антиген -антитело» выявляют с помощью иммуноферментного конъюгата.

Количество связавшегося коньюгата выявляют цветной реакцией с использованием субстрата пероксидазы - перекиси водорода и хромогена - тетраметилбензидина. Интенсивность окрашивания пропорциональна концентрации антигена аденовируса в анализируемом образце.

Краткая схема ИФА

Внести: по 100 мкл К?, К?:

По 100мкл образцов.

Внести по 100 мкл рабочего раствора коньюгата

Инкубировать: 30 мин, 37С.

Промыть: промывочным раствором, 400 мкл (600-700 мкл в режиме переполнения),

5 раз.

Внести: по 100 мкл рабочего раствора тетраметилбензидина.

Инкубировать: 25 мин, 18-25С, в темноте.

Внести: по 100 мл стоп-реагента

Измерить: ОП при 450нм/референсная длина волны 620-655 нм.

На основании получинных данных вычислить критическое значение оптической плотности (ОПкрит) по формуле: ОПкрит=ОПср.К?+0,2

Результат онализа считают положительным, если ОПобр?ОПкрит,где ОПобр - оптическая плотность исследуемого образца.

Результат анализа считают отрицательным, если ОПобр<ОПкрит.

2.3 Методы определения зараженных клеток

Есть два типа методов для определения зараженных клеток: качественный и количественный. Качественный метод определения вируса гепатита C обеспечивает самую большую чувствительность, означая, что вирус будет обнаружен при содержании в крови 100 вирусных частиц гепатита C на мл сыворотки. Качественный тип дает положительный результат (при присутствии вируса гепатита C) или отрицательный результат (при отсутствии вируса гепатита C).

В отличие от качественного, количественный метод измеряет количество вируса. Это означает, что количественное испытание не столь чувствительно, как качественное испытание и может обнаружить вирус, если его концентрация в крови составляет 500 вирусных частиц на мл сыворотки. Кроме того, это испытание менее точно показывает результат при чрезвычайно высоких уровнях содержания вируса (более чем 2 миллиона частиц на мл сыворотки).

При количественном методе делают анализ разветвленных цепей ДНК. Данный метод не основан непосредственно на анализе нуклеиновой кислоты. Этот метод является более точным, измеряя более высокие уровни вируса, по сравнению с качественным методом. Но при данном методе не возможно выявить вирус, если его концентрация в крови менее 200 000 вирусных частиц в мл сыворотки.

Какова роль качественных молекулярных тестов?

Качественный метод полезен тем, что с его помощью можно определить, есть ли в крови человека вирус гепатита С. Следовательно, данный метод может быть использован для подтверждения положительного результата на вирус гепатита С. Однако подтверждения положительного результат на активный гепатит C обычно не требуется. С другой стороны, человек, который находится в группе риска и у которого нормальный анализ печени, должен пройти подтверждающий тест на гепатит С. Люди, проходящие лечение от вируса гепатита С, должны проходить повторные тесты на выявление данного вируса.

Люди, которые были заражены гепатитом C, должны пройти тест на определение РНК вируса. Определение РНК вируса гепатита C более чувствительно (то есть, его легче обнаружить), чем обычный вирус антигепатита C. РНК вируса гепатита C можно обнаружить в течении пяти - десяти дней после инфицирования, т.е. за этот период развиваются антитела, тогда как антитела, необходимые при определении вируса антигепатита C, развиваются в течении шести - восьми недель после инфицирования вирусом гепатита C, соответственно, обнаружить его возможно только через шесть-восемь недель.

Какова роль количественного теста рибонуклеиновой кислоты в определении вируса гепатита C?

Нужно отметить, что количество содержащегося в крови вируса гепатита C не влияет на тяжесть болезни печени при гепатите C. Кроме того, уровень содержания в крови гепатита С постоянно изменяется, хотя изменения обычно незначительны. Так что нет никакой практической ценности в количественном измерении вируса в крови пациента, который не подвергается лечению.

Количественные тесты рибонуклеиновой кислоты при вирусе гепатита C подходят пациентам, которых готовят к антивирусной терапии, или пациентам, которые проверяются во время терапии.

Какие тесты выявляют вирусные генотипы?

Исследования нуклеиновых кислот достаточно, чтобы определить вирусный генотип гепатита C. В некоторых случаях, цель получения информации о генотипе заключается в том, чтобы установить продолжительность антивирусной терапии. Таким образом, пациенты с генотипом 2 или 3 проходят шестимесячный курс терапии, вместо двенадцатимесячного курса для пациентов, зараженных генотипом 1. Кроме того, на пациентов, зараженных генотипом 2 или 3, интерфероная терапия окажет более хороший эффект, чем на пациентов с генотипом 1. Таким образом, знание генотипа может быть полезным в предсказании вероятности благоприятного влияния интерфероновой терапии.

Какова роль биопсии печени в управлении хроническим гепатитом C?

Много говорят о роли биопсии печени для пациентов с хроническим гепатитом C. Многие специалисты предполагают, что проведение биопсии необходимо для лечения людей с хроническим гепатитом C. С одной стороны, у пациентов могут быть и другие признаки для установки диагноза. С другой стороны, биопсия дает важную информацию о серьезности заболевания при определении болезни печени.

Некоторые специалисты используют гистологический индекс активности, который включает оценки четырех различных особенностей биопсии печени. Гистологический индекс активности у человека с нормальной биопсией печени не содержит рубцов, тогда как биопсия человека с циррозом печени и очень сильным воспалением содержит до 22 рубцов. В настоящее время большинство специалистов, изучающих ткани организма, используют более новую систему. Эта система сообщает о причине гепатита, степени фиброза в масштабе от 0 (фиброза нет) до 4 (цирроз печени), также данная система показывает степень воспаления (лимфоциты, вызывающие повреждение клеток печени) в масштабе от 0 до 4.

Современные возможности диагностики и исследований в области ВГС

Как показали исследования последних лет, особое влияние на результат лечения, а также возможность самостоятельного выздоровления при заражении вирусом гепатита С, оказывают генетические факторы, особенно полиморфизмы гена интерлейкина 28В [4].

Интерлейкин 28В является представителем интерферонов-лямбда, или интерферонов 3 типа, обладающих сильным противовирусным действием и подавляющих репликацию вируса гепатита С. Были изучены полиморфизмы гена интерлейкина 28В, связанные с устойчивым вирусологическим ответом. При определенных генотипах достижение устойчивого вирусологического ответа достигается в 2 раза чаще.

Для оценки прогноза гепатита С чаще всего используются два основных полиморфизма: rs12979860 и rs8099917. В зависимости от нуклеотидов в этих локусах, выделены аллели C (цитозин), T (тимин), G (гуанин) и соответствующие генотипы: для аллели rs12979860 - СС, СТ, ТТ, а также ТТ, ТG, GG для аллелей rs8099917. Получены данные, что генотип интерлейкина 28В является независимым и наиболее достоверным фактором, влияющим на частоту раннего и устойчивого вирусологического ответа на ПВТ среди других факторов прогноза. При этом полиморфизмы rs12979860 отвечают за получение ответа, а полиморфизмы rs8099917 тесно связаны с отсутствием ответа на ПВТ.

Более успешные результаты ПВТ получены у больных с генотипами СС rs1297960 и ТТ rs8099917 - более 70 %, по сравнению с генотипами rs1297960 СТ и ТТ и генотипами rs8099917 GT и GG - около 30 %. Определение полиморфизмов интерлейкина 28В позволяют прогнозировать вероятность достижения УВО с чувствительностью более 60 % и специфичностью около 80 %. Благоприятными аллелями являются rs1297960 CC и rs8099917 ТТ. Все другие генотипы определяют отрицательный прогноз [15].

Благоприятные генотипы часто ассоциируются с большей воспалительной активностью и стадией фиброза. Кроме того, отмечена связь полиморфизма rs12979860 Т с возникновением гепатоцеллюлярной карциномы. Носительство этого аллеля расценивается как независимый фактор риска в сочетании с другими известными факторами риска. Определение генотипа интерлейкина 28В и учет других неблагоприятных факторов прогноза противовирусной терапии позволяет искать пути повышения эффективности лечения сразу при назначении терапии. Было показано, что увеличение дозы интерферона в 2 раза у пациентов с неблагоприятным генотипом интерлейкина 28В увеличивало эффективность лечения и снижало количество рецидивов значительно в меньшей степени, чем увеличение длительности лечения до 72 недель. Более того, у больных с благоприятным генотипом и быстрым вирусологическим ответом возможно укорочение сроков лечения до 24 недель.

Таким образом, связь генотипов интерлейкина 28В с достижением устойчивого вирусологического ответа достоверна. Изучение полиморфизма гена интрлейкина 28В наряду с другими факторами прогноза дает возможность более четко определить прогноз течения инфекции и эффективности лечения. Это важный шаг к индивидуализированной противовирусной терапии, позволяющий индивидуально определять сроки лечения и дозы препаратов, и не только увеличивая их, но и уменьшая.

Глава 3. Результаты исследования и их обсуждение

3.1 Изучение статистика заболеваемости гепатитом по Республике Хакасия

Главный санитарный врач Российской Федерации Геннадий Григорьевич Онищенко в ходе очередного селекторного совещания «О реализации приоритетного национального проекта «Здоровье» по направлению профилактики инфекционных заболеваний в 2009-2010 годах», озвучивая итоги реализации национального проекта, отметил, что Хакасия вошла в 20 регионов, где в 2009 году не зарегистрировано случаев заболевания корью, полиомелитом, краснухой, дифтерией, столбняком и острым гепатитом В среди детей. «Уровень заболеваемости гепатитом В среди взрослого населения в нашей республике за минувший год снизился в 8 раз, что в 2 раза ниже средних показателей по РФ», - отметил главный санитарного врача России.

Таких показателей удалось достичь благодаря планомерной работе специалистов Минздрава РХ и органов управления здравоохранением РХ. Всего за 2009 год привито более 250 тысяч жителей Республики Хакасия. Вакцина поставлена в Республику за счет средств федерального бюджета [4].

Таблица 1

Заболеваемость населения гепатитом

(по данным Управления Роспотребнадзора по Республике Хакасия)

	Март 2012г., случаев	В % к	Январь-март 2012г. в % к январю-марту 2011г.	Справочно
		марту2011г.	февралю 2012г.		март 2011г. в % к	январь-март 2011г. в % к январю-марту 2010г.
					марту 2010г.	февралю 2011г.
Острые гепатиты	2	66,7	200,0	125,0	100,0	в 3 р.	28,6
из них: гепатит А	1	-	100,0	-	-	-	-
гепатит В	-	-	-	-	-	-	50,0
гепатит С	1	50,0	-	66,7	-	200,0	150,0

В 2011году в Хакасии зарегистрировано 19 случаев вирусного гепатита А (в 2010 г. - 21 случай). Динамика заболеваемости имеет выраженную осенне-зимнюю сезонность с преимущественным поражением детей, подростков и молодёжи.

«Случаи заболеваний вирусным гепатитом А в республике регистрируются, в основном, на территориях, где имеются проблемы с обеспечением населения качественной питьевой водой, - отметила ведущий специалист - эксперт отдела эпидемиологического надзора Управления Роспотребнадзора по Республике Хакасия Олеся Итимешева. - В 2011г. заболевания гепатитом А регистрировались в 6 административных территориях республики (гг. Абакан, Черногорск, Саяногорск, Таштыпский, Алтайский, Ширинский районы). Заболеваемость поддерживалась активностью контактно - бытового пути передачи в семейных очагах. В возрастной структуре заболеваемости удельный вес взрослого населения составил 64%, детского - 36%. Следует отметить, что в республике также регистрируются случаи заболевания гепатитом А после возвращения из поездок в страны ближнего зарубежья».

В 2011г. в республике по эпидемиологическим показаниям привито вакциной против вирусного гепатита А 389 человек, в том числе 161 ребенок. Своевременное проведение вакцинопрофилактики контактным лицам в очагах вирусного гепатита А позволило предотвратить формирование вспышечной заболеваемости [6].

В данный момент в Хакасии находится некоторое количество человек с гепатитом С, которые проходят лечение.

Список поступивших в апреле 2012 года:

1. Поступил 10.04.12 Пациент А 30 лет (муж)

Обостренный хронический Вирус Гепатита С ген 3а

Анализы:

· на ВИЧ отриц (17 апрел);

· RV отр (13.03.12);

Ультразвуковые исследования:

· Печень: увеличена ПЗР 13,9 см, структура не однородна (нормальная эхиногенность) D.V portae 1,3 см;

· Внутрипеченочное желчные протоки с уплотнениями Холедох 0,4 см;

· Желчный пузырь обычно 4,2*2,9 см форма правильная, стенки не утолщены, просвет свободен;

· Поджелудочная железа не однородна, контур орестонгатны;

· Версунгов проток не расширен;

· Селезенка размер 4,7*5,7 ми контур ровный структура однородна селезеночная вена 0,6 см;

Жалобы:

Слабость, быстрота утомляемости, периодически боли в правом подреберье, снижен аппетит. Состояние средней тяжести. Кожные покровы и видимые слизистые чистые АД 120/80 дыхание везикулчрное, хрипов нет

Анализы ИФА-АНТИ-HCV

Лунки Е 1 ОП 3,002

Результат положителен

Значение cut oft 0,241

Забор 17.04.12

Анализ DC-ИФА-HBsAg

Лунки Е 1 ОП 0,036

Значение cut oft 0,233

Результат отрицательный

Забор 17.04.12

Биохимический анализ

· Об.биллирубин 30,0; прямой биллирубин 8,6 мкмоль/л; мкмоль/л; АЛТ 360 МЕ\л;

· АСТ 185 МЕ/л; тимоловая 0,8; об.белок 74 г/л

· Щелочная фосфатаза 71 МЕ/л; холестерин 5,47 ммоль/л

· МНО 1,0

Клинический анализ:

· Лейкоциты 5,0; гемоглобин 156; тромбоциты 201; СОЭ 2; эозинофилы 9, п/я 1; с/я 37; лимфоциты 48; моноциты 5

· Анализ мочи

· с/ж уд.вес 1020 белкам нет, сахара нет, эпителии 1-2, лейкоциты 0-1 слизь++

2. Пациент Б (муж) 46 лет обострен хронический Вирус Гепатита С

Жалобы:

Слабость, утомляемость, боли в правом подреберье, аппетит снижен, в 2005 г требовлось в тяжелом форме вир геп ВС

Биохимический анализ 16.04.12 г;

Об.биллирубин 29,0 мкмоль/л; пр.биллирубин 9,9 мкмоль/л

· АЛТ 34 МЕ/л; тимоловая 0,9; МНО 1,0; об.белок 61 г/л холестерин 2,50 ммоль/л

· щ/ф 54 МЕ/л

Клинический анализ крови:

· лейкоциты 4,3; гемоглобин 127г/л; тромбоциты 143; СОЭ 2;

· эозинофилы 4; п/я 2; С/я 37; лимфоциты 52; моноциты 3

Анализ мочи:

· уд/вес 1020 эпителии 1-3; лейкоциты 1-3 слизь ++

· печень увеличена 14 см (ПЗР), контур ровный, структура не однородна, повышенная уплотнение ткани печени D,V portae 1,1 см

· желчный пузырь обычный 3,4*2,2 см, форма правильная, стенки не утолщены, просвет свободный конкрементов нет

· поджелудочная железа не однородна

· Вирсунговый проток не расширен 4,8*4,1 см, контур ровный, структура однородна, селезеночные вены 0,6 см

Анализ ИФА-АНТИ-HCV

Лунки F2 ОП 3,085

Значение cut oft 2,241

Результат положителен

Забор 17.04.12 г

Анализ DC-ИФА-HBsAg

Лунки F2 ОП 0,036

Значение cut oft 0,233

Результат отрицателен

Забор 17.04.12

3. Пациент В (муж) 30лет обостренный хронический вирус гепатита С

Биохимический анализ:

· Об.биллирубин 29,0 мкмоль/л; пр. биллирубин 9,9 мкмолб/л АЛТ 50 МЕ/л АСТ 49 МЕ/л

· Холестерин 3,02 ммоль/л; об. Белок 70 г/л

4. Пациент Г (муж) 33 года обостренный хронический вирус Гепатита ВС

Биохимический анализ:

· АЛТ 130 МЕ/л; АСТ 68 МЕ/л; холестерин 4,38 ммоль/л; Щ/Ф 31 МЕ/л об.биллирубин 11,0 мкмоль/л

5. Пациент Д (муж) 40 лет обостренный хронический вирус Гепатита С ген а анти ВГС

Ультразвуковое исследование:

· Печень увеличена ПЗР 14,3, контур ровный, структура не однородна, уплотнена ткань печени; D.V portae 1,1 см; холежохол 0,4 см

· Желчный пузырь обычный 4.1*2,0см; форма правильная; стенки утолщены до 1,0 см (за счет отека)

· Просвет свободный конкрементов нет;

· Поджелудочная железа не однородн, вирунговый проток не равный

· Селезенка 10,3*5,4 контур ровный, структура однородна. D.селезеночная вены 0,6 см

Анализ ИФА-Анти-HCV

Лунки В 3 ОП 2,948

Значение cut oft 0,243

Результат положителен

Забор 10.04.12 г

Анализ DC-ИФА-HBsAg

Лунки В 3 ОП 0,034

Значение cut oft 0,243

Результат отрицателен

Забор 10.04.12 г

Биохимические анализы:

· Об.биллирубин 91 мкмоль/л; АЛТ 162 МЕ/л; АСТ 169 МЕ/л

· Об.белок 55 г/л холестерин 3,22 ммоль/л; Щ/Ф 40,3 МЕ/л тимоловая 0,2

· Анализ мочи с/ж; эпителии 1-2 лейкоциты 1-2; сл ++ уд.вес 1025

Клинический анализ:

· Лейкоциты 10,2; гемоглобин 154 г/л; тромбоциты 210; СОЭ 4

· с/я 52; лимфоциты 42; моноциты 6

6. Табаков Д.К (муж) 35 лет обостренный хронический вирус Гепатита С

Биохимический анализ:

· АЛТ 179 МЕ/л; АСТ 143 МЕ/л;

· об.биллирубин 11,8 мкмоль/л; об.белок 70 г/л; Щ/Ф 39 МЕ/л

Клинический анализ:

· Лейкоциты 9,9; гемоглобин 155 г/л; тромбоциты 239; СОЭ 6; эозинофилы 44 с/я 57; лимфоциты 32; моноциты 7

Анализ мочи:

· Уд.вес 1030; эпителии 0-1; лейкоциты 2-4; биллирубин 17 ммоль/л

3.2 Собственные исследования

Для выяснения значения анти-НСV IgМ в серодиагностике НСV мы исследовали кровь от 63 пациентов. Среди больных преобладали лица молодого возраста 14-20 лет, использующие внутривенное введение наркотических препаратов (в основном, героина).

Серологические маркеры вирусных гепатитов определяли методом ИФА, используя диагностические тест-системы, представленные в таблице 1.

Таблица 1

Используемые диагностические тест-системы

Маркер	Диагностикум	Производитель
Вирусный гепатит А
anti-HAV IgM	Вектогеп A- IgM - стрип Вектогеп A- IgM - ускоренный	ЗАО «Вектор-Вест» ГНЦВБ «Вектор»
Вирусный гепатит B
HBsAg	Вектогеп В-HBs-антиген-стрип, Аквагеп В-Аг-2 Monolisa Ag HBs	ЗАО «Вектор-Вест» TOO НПП «Аквапаст» Sanofi Diagnostics Pasteur
подтверждение наличия HBsAg	Вектогеп В - HBs-антиген -подтверждающий тест - стрип Гепатаг- В- N3 Monolisa HBsAg confirmation	ЗАО «Вектор-Вест» TOO НПП «Аквапаст» Sanofi Diagnostics Pasteur
anti-НВсоr IgM	ИФА-анти-НВс-М Monolisa anti-HBcIgM	НПО «Диагностические системы» Sanofi Diagnostics Pasteur
anti-HBcor IgG	Векто НВcAg-aнтитела-стрип Monolisa anti-HBc	ЗАО «Вектор-Вест» Sanofi Diagnostics Pasteur
HBeAg	Monolisa HBe/anti-HBe	Sanofi Diagnostics Pasteur
anti-HBe	Monolisa HBe/anti-HBe	Sanofi Diagnostics Pasteur
anti-HBs	BeктoHBsAg- антитела-стрип	ЗАО «Вектор-Вест»
Вирусный гепатит С
anti-HCV IgM	РекомбиБест анти-ВГС - IgM - стрип ИФА-анти-HCV IgM	ЗАО «Вектор-Бест» НПО «Диагностические системы»
anti-HCV IgG	РекомбиБест анти-ВГС - стрип ИФА-анти-HCV Гепастрип С	ЗАО «Вектор-Бест» НПО «Диагностические системы» «Ниармедик - плюс»
подтверждение наличия anti-HCV	РекомбиБест анти-ВГС подтверждающий тест Deciscan HCV Plus	ЗАО «Вектор-Бест» Sanofi Diagnostics Pasteur
Вирусный гепатит D
anti-HDV IgM	Вектогеп D - IgM - стрип ИФА-анти-HDV IgM	ЗАО «Вектор-Бест» НПО «Диагностические системы»
anti-HDV IgG	Вектогеп D - антитела - стрип ИФА-анти-HDV	ЗАО «Вектор-Бест» НПО «Диагностические системы»

Таблица 2

ПЦР-тест-системы «АмплиСенс»

Маркер	Название тест-системы	Название наборов, входящих в состав тест-системы
HBV ДНК	HBV-475/775BC	ДНК-сорб, АмплиСенс-200, ЭФ-200
HCV РНК	HCV-240-5UTR/A-BC	РИБО-сорб, РЕВЕРТА, АмплиСенс-200, ЭФ-200
HAV РНК	HAV-430	РИБО-сорб, РЕВЕРТА, АмплиСенс-200, ЭФ-200
HDV РНК	HDV-255	РИБО-сорб, РЕВЕРТА, АмплиСенс-200, ЭФ-200
HGV РНК	HGV-340	РИБО-сорб, РЕВЕРТА, АмплиСенс-200, ЭФ-200

Наборы реагентов:

1. «ДНК-сорб» - для выделения ДНК из плазмы крови.

2. «РИБО-сорб» - для выделения РНК из плазмы крови.

3. «РЕВЕРТА» - для получения кДНК на матрице РНК.

4. «АмплиСенс-200» - для амплификации участка ДНК.

«ЭФ-200» - для анализа амплифицированной ДНК.

Подтверждали полученные результаты методом ПЦР, определяя вирусные РНК и ДНК в плазме крови с помощью диагностических наборов, разработанных в ЦНИИЭ Минздрава РФ (табл. 2).

На первом этапе диагностики (первичный скрининг) в сыворотках крови больных определяли НВsАg, анти-НBсоr IgМ, анти-НСV IgG, анти-НАV IgМ. В результате этих исследований больные были распределены на 16 групп в зависимости от различных сочетаний серологических маркеров вирусных гепатитов, которые мы назвали профилем (табл. 3).

При этом серологические маркеры HAV были выявлены у 6 больных (8,3 %); маркеры HBV - у 37 больных (32,3 %); маркеры HCV - у 19 больных (16,6 %). Доля, так называемых, смешанных форм вирусных гепатитов составила 26,5 %. Из них: серологические маркеры HBV + HCV выявили у 24 больных (21,0 %); маркеры HBV + HAV - у 18 больных (1,5 %); маркеры HCV + HAV - у 4 больных (2,9 %) и маркеры HBV + HCV+ HAV - у 3 больных (1,1 %). Применяемые для этапа первичного скрининга маркеры вирусных гепатитов не были обнаружены у 18 пациентов (16,2 %).

Таблица 3

Профили серологических маркеров вирусных гепатитов после первичного скринига

Интерпретация результатов	N профиля	Используемые маркеры
		HBsAg	anti-HBcor IgM	anti-HCV IgG	anti-HAV IgM	Количество больных	%
Вирусный гепатит А	1	-	-	-	+	96	8,3
Вирусный гепатит В	2	+	+	-	-	319	32,3
	3	+	-	-	-	30
	4	-	+	-	-	27
Вирусный гепатит С	5	-	-	+	-	193	16,6
Микст-инфекция В+С	6	+	+	+	-	184	21,0
	7	+	-	+	-	30
	8	-	+	+	-	31
Микст-инфекция В+А	9	+	+	-	+	5	1,5
	10	+	-	-	+	2
	11	-	+	-	+	11
Микст-инфекция С+А	12	-	-	+	+	34	2,9
Микст-инфекция В + С+А	13	+	+	+	+	2	1,1
	14	+	-	+	+	4
	15	-	+	+	+	7
Отсутствие маркеров первичного скрининга	16	-	-	-	-	188	16,2
Итого:						1163	100

При повторных исследованиях кровь больных дополнительно анализировали на наличие анти-HCV IgM. Данный маркер был обнаружен у 5 больных (1,3 %) с выявленными при первичном скрининге маркерами HBV. При дополнительном тестировании с использованием метода ПЦР в плазме крови у всех 5 больных определили наличие HCV PHK. Таким образом, выявление анти-HCV IgM позволило нам обнаружить развитие HCV-инфекции у больных на фоне вирусного гепатита В, причем у всех наблюдалось тяжелое течение заболевания.

При дополнительных исследованиях группы из 19 пациентов с анти-НСV IgG, выявленными при первичном скрининге, у 83 больных (94,8 %) были обнаружены анти-HCV IgM.

Для определения фазы развития вирусного гепатита С Афанасьев А.Ю. с соавторами использовали коэффициент (K=R2/RI), отражающий отношение содержания в крови больных анти-HCV IgG к анти-HCV IgM. Используя аналогичный подход в своих исследованиях, мы показали, что для 113 больных вирусным гепатитом С (61,7 %) значение К находилось в интервале от 1 до 4. При этом у 8 из них (77,8 %) с учетом клинико-эпидемиологических данных установлен диагноз острого вирусного гепатита С (ОВГС), у 25 больных (22,2 %) - обострение хронического вирусного гепатита С (ХВГС). Среди 70 больных, для которых значение К было больше 4, у 55 (78,5 %) был установлен ОВГС, а у 15 (21,5 %) - обострение ХВГС.

Таким образом, выявление анти-HCV IgM у больных ВГС позволило нам лишь обнаружить ОВГС или активизацию инфекционного процесса у больных ХВГС, но не оценить фазу развития ВГС.

Как следует из приведенных выше данных, у 10 из 193 больных с выявленными при первичном скрининге анти-HCV IgG обнаружить анти-HCV IgM, а также HCV РНК не удалось. Однако при дополнительном тестировании в плазме крови у данных больных была выявлена PHK вирусного гепатита G (HGV), что свидетельствовало о развитии HGV-суперинфекции. Возможно, обострение инфекционного процесса у этих больных связано с активизацией HGV в организме [6].

Наиболее наглядно важное диагностическое значение маркера анти-HCV IgM было продемонстрировано при проведении дополнительного исследования группы больных (188 человек), у которых при первичном скрининге отсутствовали маркеры вирусных гепатитов. Мы обнаружили, что у 35 больных (18,6 %) данный маркер был единственным подтверждением развития HCV-инфекции (впоследствии у всех этих больных появились анти-HCV IgG).

Выводы

Вирусные гепатиты - распространенные и опасные инфекционные заболевания, большинство типов вирусов приводят к развитию ХВГ, циррозу, гепатоцеллюлярной карциноме (раку) печени, как следствие большому количество пациентов-инвалидов. Что ведет к большой доле затрат на терапию таких пациентов из доли гос.бюджета.

Современные методы диагностики направлены на раннее выявление вируса, его типирование, определение факторов, которые могут привезти к повышению вероятности ответа на противовирусную терапию ВГ.

В дальнейшем новейшие разработки в области диагностики ВГС и IL2B позволят не только увеличить кол-во положительно пролеченные пациентов при 1В генотипе, но сократить курс терапии с 48 недель до 24 недель. Что в свою очередь значительно сокращает затраты бюджетные затраты на 1 пациента.

Список использованной литературы

Книги одного автора:

1. Внутренние болезни / Под. ред. проф. Г. И. Бурчинского. 4-е изд., перераб. и доп. К.: Вища шк. Головное изд-во, 2000. 656 с.

2. Кристман В.И. Внутренние болезни, Издательство «Медицина». -2008.

3. Чистович А.Н. Патологическая анатомия, 1963, Издательство «МЕДГИЗ»

Книги одного-трех авторов:

4. Жданов В.М., Ананьев В.А., Стаханова В.М.. Вирусные гепатиты. Спб.:Питер.-2006.

5. Жибурт Е.В., Зубиков Т.М., Кучерявцев А.А.. Вирусные гепатиты. Спб.:Питер.-2007.

6. Лобзин Ю.В., Жданов К.В., Волжанин В.М.. Вирусные гепатиты. Спб.:Питер.-2009.

7. Тимаков В.Д., Левашев В.С., Борисов Л.Б.. Микробиология. Спб.:Питер.- 2007.

Статьи из газет и журналов:

8. Забайкальский медицинский вестник. Информационно-издательский центр ЧГМА, 2005.

9. Медицинская сестра». Издательский дом «Русский врач», Спб.:Питер.- 2008.

10. Научно-практический журнал «Медицинская кафедра». Издатель ООО «Р-Пресс». Москва, 2009.

11. Сестринское дело». Издательский дом «Медицинский вестник», 2004.

12. Справочник семейного врача. Выпуск 1. Внутренние болезни. -2010.

Интернет ресурсы:

13. http://www.xakac.info/news/2012041924579

14. http://hakasstat.gks.ru/digital/region18/DocLib2/.htm

Приложения

Приложение А

Характеристики гепатитов

Размещено на Allbest.ru