Разработка проекта МВИ "Определение содержания фосфора в растительных маслах спектрофотометрическим методом"

Что касается количества (1,5-3,0 мл) раствора серной кислоты, оно соответствует известному положению о том, что для полного отсечения кислой водно-спиртовой фазы критический избыток водного раствора кислоты должен пятикратно превышать количество спирта в реакционной среде. Граничные условия определялись экспериментально.

Среди множества методов определения фосфора для более подробного изучения был избран спектрофотометрический метод, поскольку он позволяет осуществить оперативный контроль за качеством вырабатываемых масел и жиров. Этот метод обеспечивает упрощение и интенсификацию способа количественного определения массовой доли фосфора в растительных маслах за счет сокращения количества операций, продолжительности проведения анализа и количества используемых реагентов. Также он позволяет исключить применение специальных и дефицитных реагентов [6].



2. Разработка проекта МВИ

Методика выполнения измерений (МВИ) представляет собой установленную совокупность операций и правил (технологический процесс) проведения измерений, выполнение которых обеспечивает получение результатов измерений с известной погрешностью.

МВИ согласно ГОСТ 8.010 должна включать следующие структурные элементы:

Назначение МВИ

Метод измерений

Показатели точности МВИ

Требования к средствам измерений, вспомогательным устройствам, материалам, растворам

Условия выполнения измерений

Требования к обеспечению безопасности выполняемых работ

Требования к обеспечению экологической безопасности

Требования к квалификации операторов

Операции при подготовке к выполнению измерений

Операции при выполнении измерений

Операции обработки и вычислений результатов измерений

Алгоритм оценивания неопределенности измерения

Контроль лабораторного смещения

Контроль стабильности результатов измерений в лаборатории

Требования к оформлению результатов измерений

Приложения

1 Назначение МВИ

В этом разделе приводится характеристика определяемого параметра, перечень анализируемых объектов, на которые распространяется методика, а также интервал определяемых концентраций.

Например, настоящая методика устанавливает порядок выполнения процедур по определению содержания фосфора в животных и растительных маслах и жирах методом спектрофотометрии с использованием спектрофотометра.

Интервал определяемых концентраций составляет от 0 до 125 мг/кг.

Методика предназначена для технохимического контроля производства в масложировой промышленности.

2 Метод измерений

Приводиться характеристика и сущность метода с указанием особенностей его реализации.

Например, для определения содержания фосфора в растительных маслах используется спектрофотометрический метод, основанный на определении оптической плотности раствора, которая используется для расчета массовой доли фосфора.

Сущность метода заключается в проведении жидкость-жидкостной экстракции пробы масла спиртоэфирным раствором, кислотной обработки мисцеллы раствором серной кислоты, нагревании и нахождении искомой величины спектрофотометрическим измерением.

3 Показатели точности МВИ

Указываются конкретные значения показателей точности, установленные для данной методики экспериментально-расчетным путем.

4 Требования к средствам измерений, вспомогательным устройствам, материалам, растворам

4.1 Средства измерений

Приводится перечень необходимых для реализации методики средств измерений, с указанием действующих ТНПА и технических характеристик.

Например, спектрофотометр, подходящий для проведения измерений при длине волны 670 нм.

Кюветы спектрофотометра, шириной в 1см и 4 см, подходящие для измерений при длине волны 670 нм.

Весы лабораторные общего назначения по ГОСТ 24104-88 второго класса точности, с наибольшим пределом взвешивания 200 г (погрешность составляет 0,7500 мг).

Термометр с диапазоном измерения от 0єС до 100єС, с ценой деления 1єС по ГОСТ 28498-90.

Цилиндр мерный лабораторный 3-100-1 с допускаемой погрешностью не более ±0,5 см3 по ГОСТ 1770-74.

Пипетки исполнения 2, второго класса точности, вместимостью 5; 10; 50 см3 по ГОСТ 29227-91.

Секундомер.

Колбы конические вместимостью 100 см3 (погрешность составляет 0,15 мл); 250 см3 (погрешность составляет 0,2 мл) по ГОСТ 25336-82.

Пробирки вместимостью 10-15 см3 по ГОСТ 1770-74.

4.2 Вспомогательные устройства

Приводится перечень необходимых для реализации методики вспомогательных устройств, с указанием действующих ТНПА и технических характеристик.

Например, баня водяная или термостат, позволяющий поддерживать температуру в пределах от 20 до 80 єС с отклонением 0,5 єС от заданной.

4.3 Материалы и реактивы

Приводится перечень необходимых для реализации методики материалов и реактивов, с указанием действующих ТНПА и требуемой чистоты.

Например, серная кислота 25% ГОСТ 2184-77;

Спирт этиловый по СТБ 645-2004;

Эфир этиловый по ГОСТ 8981-78;

Аммоний молибденовокислый по ГОСТ 3765-78;

Вода дистиллированная по ГОСТ 6709-72;

Гидразин сернокислый по ГОСТ 5841-74.

4.4 Растворы

Описывается порядок приготовления всех видов и типов растворов (основные, рабочие, буферные и т.д.), используемых при реализации методики, а также условия и сроки их хранения.

Например, для приготовления спиртоэфирного раствора в пробирку вместимостью 10 см3 отбирают пипеткой 1,3 см3 этилового эфира и 0,6 см3 этилового спирта, затем раствор перемешивают.

5 Условия выполнения измерений

Указываются условия, которые должны поддерживаться при выполнении измерений по данной методике

Например, при выполнении измерений должны быть соблюдены следующие условия:

- температура воздуха (205) С;

- атмосферное давление 84,0-106,7 кПа (630-800 мм рт.ст.);

- влажность воздуха не более 80 % при температуре 20оС;

- напряжение питающей сети (22022) В;

При нагревании раствора температуру поддерживают в пределах 20-50оС.

6 Требования к обеспечению безопасности выполняемых работ

Указываются ссылки на инструкции и ТНПА, выполнение которых обязательно для соблюдения требований безопасности при реализации разрабатываемой методики.

Например, анализ по данной методике должен выполняться согласно инструкции «Основные правила безопасности работы в химических лабораториях» - М.: Химия, 1979 г. и инструкции по эксплуатации спектрофотометра. Следует руководствоваться установленными правилами работы с электрооборудованием. Требования электробезопасности - по ГОСТ 12.2.003-91, ГОСТ 12.2.007.0-75, ГОСТ 12.3.019-80.

Требования пожарной безопасности - по ГОСТ 12.1.004-91.

7 Требования к обеспечению экологической безопасности

Приводиться характеристика вредных для окружающей среды факторов, которые могут возникнуть при реализации методики.

Например, в процессе выполнения анализа по данной методике образуются выбросы и отходы, опасные для окружающей среды. Приготавливаемые анализируемые растворы являются токсичными и перед сливом в канализацию обрабатываются.

8 Требования к квалификации операторов

Указываются требования к образованию и специальной подготовки операторов.

Например, к выполнению измерений допускаются квалифицированные операторы, имеющие высшее или среднее специальное образование, изучившие настоящую методику, требования безопасности и эксплуатационную документацию на используемые средства измерений и вспомогательное оборудование, обученные практическому применению методики, прошедшие подготовку для работы в качестве оператора анализатора спектрофотометрического.

9 Операции при подготовке к выполнению измерений

Описывается порядок и сущность операций, выполняемых при подготовке к выполнению измерений по данной методике.

Типовой перечень подготовительных операций:

приготовление растворов;

подготовка измерительной аппаратуры;

установление градуировочной зависимости;

подготовка пробы.

Например, спектрофотометр готовят к работе согласно инструкции по эксплуатации.

Отбор проб растительного масла осуществляют по ГОСТ 5471-83.

10 Операции при выполнении измерений

Описывается порядок и сущность всех операций в процессе измерений.

Например, в пробирку вместимостью 10-15 мл на весах 2 класса точности взвешивают 1 -2 г масла с записью результата до второго десятичного знака. К содержимому пробирки последовательно приливают пипеткой 1-2 мл спиртоэфирного раствора из расчета 1:1 - 1:2 и 1,5 - 3,0 мл 10 N раствора серной кислоты. Пробирку плотно закрывают пробкой и интенсивно встряхивают в течение 30-90 сек.

Аликвотную часть экстракта осторожно переносят в другую пробирку и далее известными спектрофотометрическими методами в экстракте анализируют содержание фосфора.

11 Операции обработки и вычислений результатов измерений

Приводится последовательное изложение порядка всех расчетов, в том числе промежуточных.

Например, массовую долю фосфора (щ), в %, рассчитывают, используя установленную градуировочную зависимость (п. 9.3), по следующей формуле:

(6)

12 Алгоритм оценивания неопределенности измерения

Содержится ссылка на приложение к документу, где приведена методика оценивания неопределенности результатов измерения.

13 Контроль лабораторного смещения

Приводится описание порядка оценки лабораторного смещения и интерпретации полученных данных или ссылка на соответствующие документы (например, п. 5 СТБ 5725-4).

Обязательно указываются требования к образцу, используемому в качестве эталонного материала.

Например, оценка лабораторного смещения осуществляется по п. 5 СТБ 5725-4.

В качестве эталонного материала при оценке лабораторного смещения используются модельные образцы масел с известным содержанием фосфолипидов, установленным другим стандартным методом, имеющим характеристики точности не меньше, чем у методики, описанной в настоящем документе.

14 Контроль стабильности результатов измерений в лаборатории

Приводится описание процедур контроля стабильности повседневных результатов измерений в лаборатории и стабильности результатов измерений, полученных в условиях воспроизводимости, а также используемые для этих целей методы.

Возможна ссылка на соответствующие пункты СТБ 5725-6.

Например, контроль стабильности результатов измерений в лаборатории проводится по п. 6 СТБ 5725-6.

15 Требования к оформлению результатов измерений

Указывается форма представления результатов количественного химического анализа по данной методике.

Например, Результат количественного химического анализа по данной методике представляют по следующей формуле:

Х± 2• uc (7)

где Х - результат анализа, мг/100 г;

2 - коэффициент охвата для выбранного уровня доверия р=0,95;

uc - суммарная неопределенность, мг/100 г.

Значения содержания фосфора в пробе и суммарная неопределенность должны содержать одинаковое количество знаков после запятой.

Результат испытаний оформляют по форме, установленной действующей в лаборатории системой регистрации данных.

Результаты должны включать следующую информацию:

- наименование (шифр) пробы;

- дату проведения измерений;

- результаты измерений, включая все необходимые данные и промежуточные расчёты;

- результаты параллельных определений;

- окончательный результат измерений;

- значение приписанной или рассчитанной погрешности измерения;

- фамилию оператора.



Заключение

В ходе выполнения данной курсовой работы были изучены методы, применяемые в настоящее время для определения фосфора в продуктах питания, был проведен сравнительный анализ их характеристик и выбран спектрофотометрический метод анализа как наиболее подходящий для определения данного компонента в пищевых продуктах. Этот метод универсален и применим к многочисленному кругу объектов. Применение этого вида анализа в контроле качества продукции как пищевого, так и промышленного назначения самое широкое и разнообразное. Фотометрия используется для количественного определения таких компонентов продуктов питания как белки, сахара, жиры, нитриты и нитраты, токсичные элементы. Они используются при определении содержания многих компонентов разнообразных промышленных товаров. Широкое применение метода связано, в первую очередь, с доступностью, дешевизной и простотой обслуживания приборов, используемых для осуществления метода, - спектрофотометров. При этом аналитические характеристики метода достаточно высокие. Например, чувствительность большинства разработанных фотометрических методик достигает 10-5 моль/л, точность определения - 1-2 %. Метод в отношении многих определяемых компонентов отличается высокой универсальностью и избирательностью. Также была проанализирована имеющаяся литература с описанием применения различных методов для определения фосфора в продуктах питания и выбран наиболее актуальный продукт - растительные масла, которые в настоящее время играют важную роль в рационе питания человека. Для данного продукта была также приведена методика определения в нем фосфора с использованием спектрофотометрического метода.



Список использованных источников

1 Фосфор, недостаток в организме, суточная потребность, источники [Электронный ресурс]. - 2009. - Режим доступа: http: // e - pitanie. ru / mineralnie_veshchestva / fosfor. рhp. - Дата доступа: 15.03.2011.

2 Микроэлемент фосфор. Продукты, содержащие фосфор. Переизбыток и недостаток фосфора в организме. Как усваивается фосфор[Электронный ресурс]. - 2010. - Режим доступа: http: // inmoment. ru / beauty / health-body / phosphorus. html. - Дата доступа: 15.03.2011.

3 Фосфор Р - АНО «Центр биотической медицины» [Электронный ресурс]. - 2010. - Режим доступа: http: // microelements. ru / P. -Дата доступа: 15.03.2011.

4 Биологическое значение фосфора крови. Содержание элемента фосфора в продуктах [Электронный ресурс]. - 2009. - Режим доступа: http: // policlinica. ru / analiz 3-31. - Дата доступа: 15.03.2011.

5 Гонта, П.П. Определение содержания кальция и фосфора в молочном сырье атомно-эмиссионным методом / П.П. Гонта // Здоровье и окружающая среда. - 2007. - № 10. - С. 393-395.

6 Способ количественного определения фосфора в растительных маслах [Электронный ресурс]. - 2010. - Режим доступа: http: // ru - patent. info / 21/00-04 / 2103681.html. - Дата доступа: 05.04.2011.

7 Разработка проекта общей фармакопейной статьи «Определение фосфора» / С.В. Ковалева [и др.] // Фармация. - 2005. - № 2. - С. 3-7.

8 Глоба, И.И. Оптические методы и приборы контроля качества продукции: учеб.пособие / И.И.Глоба. - Минск: БГТУ, 2003. - 121с.

9 СТП БГТУ 002-2007 Проекты (работы) курсовые. Требования и порядок подготовки, представление к защите и защита.



Список использованных ТНПА

1 Точность (правильность и прецизионность) методов и результатов измерений. Часть 4. Основные методы определения правильности стандартного метода измерений: СТБ ИСО 5725-4-2002. - Введ. 01.07.2003. - Минск: Госстандарт: Белорус. гос. ин-т стандартизации и сертификации, 2000. -31 с.

2 Точность (правильность и прецизионность) методов и результатов измерений. Часть 6. Использование значений точности на практике: СТБ ИСО 5725-6-2002. - Введ. 01.07.2003. - Минск: Госстандарт: Белорус. гос. ин-т стандартизации и сертификации, 2000. - 50 с.

3 Государственная система обеспечения единства измерений. Методика выполнения измерений. Основные положения: ГОСТ 8.010-99. - Введ. 01.06.2001. - М.: Межгос. совет по стандартизации, метрологии и сертификации: Белорус. гос. ин-т стандартизации и сертификации, 1999. - 23 с.

4 Весы лабораторные. Общие технические требования: ГОСТ 24104-88. - Введ. 01.01.89. - Москва: ИПК Издательство стандартов, 1988. - 15 с.

5 Термометры жидкостные стеклянные. Общие технические требования. Методы испытаний: ГОСТ 28498-90. - Введ. 01.01.91. - Москва: Стандартинформ, 2007. - 10 с.

6 Посуда мерная лабораторная стеклянная. Цилиндры, мензурки, колбы, пробирки. Общие технические условия: ГОСТ 1770-74. - Введ. 01.01.76. - Москва: Стандартинформ, 2005. - 21 с.

7 Посуда лабораторная стеклянная. Пипетки градуированные. Часть 1. Общие требования: ГОСТ 29227-91. - Введ. 01.01.94. - Москва: Стандартинформ, 2006. - 10 с.

8 Посуда и оборудование лабораторные стеклянные. Типы, основные параметры и размеры: ГОСТ 25336-82. - Введ. 01.01.84. - Москва: Стандартинформ, 2004. - 102 с.

9 Кислота серная техническая. Технические условия: ГОСТ 2184-77. - Введ.01.07.78. - Москва: Стандартинформ, 2006. - 21 с.

10 Спирт этиловый денатурированный. Технические условия: СТБ 645-2004. - Введ. 01.07.2004. - Минск: БелГиСС, 2004. - 16 с.

11 Эфиры этиловый и нормальный бутиловый, уксусной кислоты технические. Технические условия: ГОСТ 8981-78. - Введ. 01.01.80. - Москва: Издательство стандартов, 1993. - 16 с.

12 Реактивы. Аммоний молибденовокислый. Технические условия: ГОСТ 3765-78. - Введ. 01.01.79. - Москва: ИПК Издательство стандартов, 1998. - 7 с.

13 Вода дистиллированная. Технические условия: ГОСТ 6709-72. - Введ. 01.01.74. - Москва: Стандартинформ, 2007. - 10 с.

14 Масла растительные. Правила приемки и методы отбора проб: ГОСТ 5471-83. - Введ. 01.01.84. - Москва:Стандартинформ, 2001. - 10 с.

15 Реактивы. Гидразин сернокислый: ГОСТ 5841-74. - Введ. 01.01.76. - М.: Государственный комитет стандартов Совета Министров СССР, 1976. - 5 с.



ПРИЛОЖЕНИЕ А

Методика определения содержания фосфора в растительных маслах

МВИ. ХХХХ - ХХ

РАЗРАБОТАНО

Учреждение образования

Белорусский Государственный

Технологический Университет

Заведующий кафедрой ФХМСП

________ Ветохин С.С.

«__» ___________ 2011г

студентка ТОВ-4-14

________ Палёха Н.В.

«__» ___________ 2011г

Минск 2011

1 Назначение МВИ

Настоящая методика устанавливает порядок выполнения процедур по определению содержания фосфора в животных и растительных маслах и жирах методом спектрофотометрии с использованием спектрофотометра, подходящего для проведения измерений при длине волны 670 нм.

Интервал определяемого содержания фосфора составляет 0,05 - 3,5 %.

Методика предназначена для технохимического контроля производства в масложировой промышленности, а именно для количественного определения фосфолипидов в растительных маслах.

2 Метод измерений

Для определения содержания фосфора в растительных маслах используется спектрофотометрический метод, основанный на определении оптической плотности раствора, которая используется для расчета массовой доли фосфора.

Сущность метода заключается в осуществлении жидкость-жидкостной экстракции пробы масла спиртоэфирным раствором в соотношении 1: 1 - 1:2 к массе пробы с последующей кислотной обработкой путем введения в полученную мисцеллу 1,5 - 3,0 мл 10 N раствора серной кислоты, причем нагревание ведут при температуре 20 - 50oC в течение 30 - 90 с.

3 Требования к средствам измерений, вспомогательным устройствам, материалам, растворам.

3.1 Средства измерений

Спектрофотометр, подходящий для проведения измерений при длине волны 670 нм.

Кюветы спектрофотометра, шириной в 1см и 4 см, подходящие для измерений при длине волны 670 нм.

Весы лабораторные общего назначения по ГОСТ 24104-88 второго класса точности, с наибольшим пределом взвешивания 200 г (погрешность составляет 0,7500 мг).

Термометр с диапазоном измерения от 0єС до 100єС, с ценой деления 1єС по ГОСТ 28498-90.

Цилиндр мерный лабораторный 3-100-1 с допускаемой погрешностью не более ±0,5 см3 по ГОСТ 1770-74.

Пипетки исполнения 2, второго класса точности, вместимостью 5; 10; 50 см3 по ГОСТ 29227-91.

Секундомер.

Колбы конические вместимостью 100 см3 (погрешность составляет 0,15 мл); 250 см3 (погрешность составляет 0,2 мл) по ГОСТ 25336-82.

Пробирки вместимостью 10-15 см3 по ГОСТ 1770-74.

Колбы мерные исполнения 2 вместимостью 100, 500 и 1000 см3 по ГОСТ 1770-74.

3.2 Вспомогательные устройства

Баня водяная или термостат, позволяющий поддерживать температуру в пределах от 20 до 80 єС с отклонением 0,5 єС от заданной.

3.3 Материалы и реактивы

Серная кислота 25% ГОСТ 2184-77;

Спирт этиловый по СТБ 645-2004;

Эфир этиловый по ГОСТ 8981-78;

Аммоний молибденовокислый по ГОСТ 3765-78;

Вода дистиллированная по ГОСТ 6709-72;

Гидразин сернокислый (сульфат гидразина) по ГОСТ 5841-74, раствор с массовой долей 1%.

3.4 Растворы

- спиртоэфирный раствор;

- раствор молибденовокислого аммония;

- раствор сравнения;

- раствор гидразинсульфата с массовой долей 1%;

- 10 N раствор серной кислоты.

4 Условия выполнения измерений

При выполнении измерений должны быть соблюдены следующие условия:

- температура воздуха (205) С;

- атмосферное давление 84,0-106,7 кПа (630-800 мм рт.ст.);

- влажность воздуха не более 80 % при температуре 20оС;

- напряжение питающей сети (22022) В;

При нагревании раствора температуру поддерживают в пределах 20-50оС.

5 Требования к обеспечению безопасности выполняемых работ

Анализ по данной методике должен выполняться согласно инструкции «Основные правила безопасности работы в химических лабораториях» - М.: Химия, 1979 г. и инструкции по эксплуатации спектрофотометра. Следует руководствоваться установленными правилами работы с электрооборудованием. Требования электробезопасности - по ГОСТ 12.2.003-91, ГОСТ 12.2.007.0-75, ГОСТ 12.3.019-80.

Требования пожарной безопасности - по ГОСТ 12.1.004-91.

6 Требования к обеспечению экологической безопасности

При выполнении определения содержания фосфора соблюдают следующие требования: условия окружающей среды, в которых проводят измерения, не должны отрицательно влиять на результаты и искажать точность измерений. Помещение для проведения измерения должно быть защищено от воздействия таких факторов, как повышенные температуры, пыль, влажность, пар, шум, вибрация, электромагнитные возмущения.

В процессе выполнения анализа по данной методике образуются выбросы и отходы, опасные для окружающей среды. Приготавливаемые анализируемые растворы являются токсичными и перед сливом в канализацию обрабатываются.

7 Требования к квалификации операторов

К подготовке образцов для проведения анализа, к выполнению измерений и обработке их результатов допускаются квалифицированные операторы, имеющие высшее или среднее специальное образование, изучившие настоящую методику, требования безопасности и эксплуатационную документацию на используемые средства измерений и вспомогательное оборудование, обученные практическому применению методики, прошедшие подготовку для работы в качестве оператора анализатора спектрофотометрического.

8 Операции при подготовке к выполнению измерений

8.1 Приготовление растворов

1. Приготовление спиртоэфирного раствора

Спиртоэфирный раствор содержит 2 части этилового эфира и 1 часть этилового спирта. Для приготовления спиртоэфирного раствора в пробирку вместимостью 10 см3 отбирают пипеткой 1,3 см3 этилового эфира и 0,6 см3 этилового спирта, затем раствор перемешивают.

2. Приготовление раствора молибденовокислого аммония

Раствор с массовой долей молибденовокислого аммония 5% готовят следующим образом: 50,0 г молибденовокислого аммония взвешивают (результат взвешивания записывают с точностью до первого десятичного знака), растворяют в 500 см3 воды, нагретой примерно до 50 °C. Раствор охлаждают, доливают водой до 1 дм3, перемешивают и фильтруют.

3. Приготовление раствора сравнения

Для приготовления раствора сравнения в пробирку вместимостью 10 см3 отбирают пипеткой 0,3 мл 10 N раствора серной кислоты, 0,3 мл 2,5% водного раствора молибденовокислого аммония, 0,5 мл 0,25% водного раствора гидразинсульфата, объем раствора доводят дистиллированной водой до 5 мл.

4. Приготовление раствора гидразинсульфата с массовой долей 1%

Навеску массой (5,0 ± 0,1) г гидразина сернокислого растворяют в 200 см3 подогретой до 40-50 єС дистиллированной воды, переносят в мерную колбу вместимостью 500 см3 и дововдят объем до метки водой.

5. Приготовление 10 N раствора серной кислоты

В стакан из термостойкого стекла отбирают пипеткой 1,5 мл дистиллированной воды, к ней добавляют 0,5 мл серной кислоты.

8.2 Подготовка измерительной аппаратуры

Спектрофотометр готовят к работе согласно инструкции по эксплуатации.

8.3 Установление градуировочной зависимости

Для установления градуировочной зависимости используют модельные образцы масел с известным содержанием фосфолипидов.

Для построения градуировочного графика готовят раствор сравнения: в пробирку вместимостью 10 см3 отбирают пипеткой 0,3 мл 10 N раствора серной кислоты, 0,3 мл 2,5% водного раствора молибденовокислого аммония, 0,5 мл 0,25% водного раствора гидразинсульфата, объем раствора доводят дистиллированной водой до 5 мл.

Затем в пробирку вместимостью 15 мл на весах 2 кл точности отвешивают 1 г образца масла с записью результата до второго десятичного знака.
К содержимому пробирки последовательно приливают пипеткой 1 мл спиртоэфирного раствора, что соответствует соотношению 1:1 и 1,5 мл 10 N раствора серной кислоты. Пробирку плотно закрывают пробкой и интенсивно встряхивают в течение 60 сек. После разделения фаз пробирку осторожно открывают и пипеткой отбирают 0,3 мл водно-спиртового раствора.

Аликвотную часть переносят в другую пробирку, добавляют пипеткой 0,3 мл 2,5% водного раствора молибденовокислого аммония, 0,5 мл 0,25% водного раствора гидразинсульфата и дистиллированную воду до метки 5 мл.

Смесь нагревают на кипящей водяной бане в течение 10 мин, охлаждают и измеряют ее оптическую плотность в кювете толщиной 1 см при длине волны 670 нм по отношению к контрольной пробе.

По полученным данным строят градуировочный график, откладывая на оси абсцисс величины концентрации фосфолипидов, а на оси ординат - соответствующие значения оптических плотностей.

Каждая точка градуировочного графика должна представлять собой среднеарифметическое значение результатов двух параллельных измерений.

Градуировочный график строят параллельно с проведением анализа. Он имеет вид прямой линии, с помощью которой по известному содержанию фосфолипидов и измеренной оптической плотности строят градуировочный график и определяют градуировочный коэффициент для постоянного объема колориметрируемого раствора. Далее расчеты ведутся по формуле (1).

8.4 Осуществление отбора проб

Проба, которую принимает лаборатория, не должна быть повреждена или изменена в процессе тестирования и хранения. Отобранные пробы хранят в стеклянных или полимерных бутылках.

Отбор проб осуществляют по ГОСТ 5471-83.

8.5 Подготовка испытуемой пробы

Если проба при комнатной температуре не является полностью жидкой, ее нагревают до температуры, не более чем на 10°C выше температуры плавления.

Если проба в жидком виде не является однородной, ее гомогенизируют путем тщательного перемешивания перед взятием навески для исследования. Существенно, чтобы любой осадок, который может быть обогащен фосфором, являлся включенным в гомогенизированный образец пробы.

9 Операции при выполнении измерений

В пробирку вместимостью 10-15 мл на весах 2 класса точности взвешивают 1 -2 г масла с записью результата до второго десятичного знака. К содержимому пробирки последовательно приливают пипеткой 1-2 мл спиртоэфирного раствора из расчета 1:1 - 1:2 и 1,5 - 3,0 мл 10 N раствора серной кислоты. Пробирку плотно закрывают пробкой и интенсивно встряхивают в течение 30-90 сек. При анализе твердых жиров пробирку помещают в водяную баню с температурой воды 40-50oC и при необходимости выдерживают в ней в течение 30-90 сек, периодически встряхивая содержимое пробирки. После разделения фаз пробирку осторожно открывают и пипеткой отбирают 0,3-0,6 мл водноспиртового раствора, предварительно отметив его общий объем, который должен быть в пределах 1,8-3,6 мл. Аликвотную часть экстракта осторожно переносят в другую пробирку, добавляют пипеткой 0,3 мл 2,5% водного раствора молибденовокислого аммония, 0,5 мл 0,25% водного раствора гидразинсульфата и дистиллированную воду до метки 5 мл.

Смесь нагревают на кипящей водяной бане в течение 10 мин, охлаждают и измеряют ее оптическую плотность в кювете толщиной 1 см при длине волны 670 нм по отношению к контрольной пробе.

Контрольная проба состоит из 0,3 мл 10 N раствора серной кислоты, 0,3 мл 2,5% водного раствора молибденовокислого аммония, 0,5 мл 0,25% водного раствора гидразинсульфата и дистиллированной воды, добавляемой до объема 5 мл.

10 Операции обработки и вычислений результатов измерений

Массовую долю фосфора (щ), в %, рассчитывают, используя установленную градуировочную зависимость (п. 9.3), по следующей формуле:

(6)

где K - градуировочный коэффициент для постоянного объема колориметрируемого раствора, г (для объема 5 мл K*100=0,055 г);

m - масса пробы масла, взятого для анализа, г;

d - оптическая плотность экстракта;

V - объем 10 N раствора H2SO4, взятый для экстракции;

V1 - аликвотная часть спиртоводной кислой фазы, взятой для проведения колориметрической реакции.

11 Контроль лабораторного смещения

Оценка лабораторного смещения осуществляется по п. 5 СТБ 5725-4.

В качестве эталонного материала при оценке лабораторного смещения используются модельные образцы масел с известным содержанием фосфолипидов, установленным другим стандартным методом, имеющим характеристики точности не меньше, чем у методики, описанной в настоящем документе.

12 Контроль стабильности результатов измерений в лаборатории

Проводится по п. 6 СТБ 5725-6.

13 Требования к оформлению результатов измерений

Результат количественного химического анализа по данной методике представляют по следующей формуле:



Х± 2• uc (7)

Где Х - результат анализа, мг/100 г;

2 - коэффициент охвата для выбранного уровня доверия р=0,95;

uc - суммарная неопределенность, мг/100 г.

Значения содержания фосфора в пробе и суммарная неопределенность должны содержать одинаковое количество знаков после запятой.

Результат испытаний оформляют по форме, установленной действующей в лаборатории системой регистрации данных.

Результаты должны включать следующую информацию:

- наименование (шифр) пробы;

- дату проведения измерений;

- результаты измерений, включая все необходимые данные и промежуточные расчёты;

- результаты параллельных определений;

- окончательный результат измерений;

- значение приписанной или рассчитанной погрешности измерения;

- фамилию оператора.

Размещено на Allbest.ru