Зверобой. Итоги и перспективы создания лекарственных средств

Самарский государственный медицинский университет

Кафедра фармакогнозии с ботаникой

КУРСОВАЯ РАБОТА

ЗВЕРОБОЙ. ИТОГИ И ПЕРСПЕКТИВЫ СОЗДАНИЯ ЛЕКАРСТВЕННЫХ СРЕДСТВ

Самара 2010

Содержание

Введение

Глава 1. Морфолого-анатомическое описание некоторых представителей рода HYPERICUM L

1.1 Ботаническое описание видов рода HYPERICUM L

1.2 Анатомо-морфологическая характеристика сырья "Зверобоя трава"

1.3 Заготовка сырья "Зверобоя трава"

Глава 2. Исследование химического состава зверобоя травы

2.1 Основные биологически активные соединения зверобоя травы

2.2 Выделение биологически активных соединений из травы зверобоя продырявленного методом колоночной хроматографии

Глава 3. Фармакологические свойства травы и препаратов зверобоя

3.1 Фармакологические свойства препаратов на основе травы зверобоя

3.2 Характеристика основных лекарственных средств травы зверобоя

Глава 4. Современные проблемы стандартизации зверобоя травы

4.1 Исследование качественного состава травы и препаратов зверобоя

4.2 Количественный анализ зверобоя травы

4.2.1 Анализ суммы флавоноидов зверобоя травы

4.2.2 Анализ суммы антраценпроизводных зверобоя травы

4.3 Методика количественного определения суммы флавоноидов в траве зверобоя продырявленного

4.4 Методика количественного определения суммы антраценпроизводных в траве зверобоя продырявленного

4.5 Исследование суммы дубильных веществ в траве и препаратах зверобоя

Глава 5. Исследование различных видов сырья зверобоя

5.1 Исследование различных видов сырья зверобоя продырявленного

5.2 Исследование травы зверобоя в зависимости от длины стебля

5.3 Исследование динамики накопления биологически активных соединений в траве зверобоя

5.4 Исследование степени измельченности сырья, используемого для анализа

5.5 Сравнительное исследование сырья различных видов рода зверобой (HYPERICUM L..)

Глава 6. Актуальные вопросы создания новых лекарственных средств на основе травы зверобоя

6.1 Оптимизация способа получения препарата "Зверобоя настойка"

6.2 Методика количественного определения суммы флавоноидов и антраценпроизводных в препарате "Зверобоя настойка"

6.3 Исследование по разработке препарата "Зверобоя экстракт жидкий".

6.4 Исследования по разработке препарата "Зверобоя экстракт сухой".

6.5 Анализ препарата "Зверобоя экстракт жидкий"

6.6 Анализ препарата "Зверобоя экстракт сухой"

Заключение

Литература

Введение

Зверобой продырявленный (Нуреricum perforatum L., сем. Зверобойные -- Нурeriсасеае) является одним из самых популярных и загадочных лекарственных растений, применяемых в научной и народной медицине с глубокой древности. Многие известные авторы прошлых лет не просто рекомендовали применять зверобой при лечении различных заболеваний, а считали его незаменимым лекарственным средством. Народные названия зверобоя "Трава от девяноста девяти болезней", "Трава Иоанна Крестителя", "Целитель ран", "Saint-John's wort" только подчеркивают его уникальность. На основе травы зверобоя были получены самые различные лекарственные препараты, представляющие собой водные, спиртовые и масляные извлечения, причем последние готовятся в одних случаях с использованием свежей, а в других -- высушенной травы. Препараты из травы зверобоя предназначены как для наружного, так и для внутреннего применения. В Российской Федерации отечественные препараты зверобоя применяется в основном в качестве противовоспалительных, антимикробных, ранозаживляющих, вяжущих средств, хотя известны и многие другие фармакологические свойства.

В настоящее время трава зверобоя в основном используется для приготовления настоя, а также в составе различных сборов, самыми популярными из которых являются "Бруснивер" и "Арфазетин". Широко применяется также настойка зверобоя, приготовленная на 40 % этиловом спирте. Несмотря на свою широкую популярность, до недавнего времени трава зверобоя считалась лишь антимикробным и противовоспалительным средством преимущественно для наружного применения. Положение изменилось, когда на отечественный фармацевтический рынок стали поступать лекарственные средства из-за рубежа, полученные на основе травы зверобоя и предназначенные для борьбы с депрессиями. Наиболее известными антидепрессантными препаратами, разрешенными для применения на территории Российской Федерации в качестве лекарственных средств, являются "Деприм", "Негрустин" и "Гелариум. Гиперикум". Кроме того, трава зверобоя входит в популярное лекарственное средство седативного действия "Ново-Пассит". Данные о нейротропной активности травы зверобоя были известны уже давно, однако разные авторы трактуют ее неоднозначно, называя и антидепрессантным, и седативным, а в некоторых случаях даже стимулирующим ЦНС эффектом. Дело осложняется тем, что, несмотря на многочисленные попытки изучения химического состава травы зверобоя продырявленного, в настоящее время неясно, какая же именно группа действующих веществ оказывает нейротропное действие. Видимо, это и является одной из причин того обстоятельства, что в настоящее время в РФ не производят антидепрессантных лекарственных средств на растительной основе.

Причины сложившейся ситуации кроются также в противоречии трактовки ведущей группы действующих веществ травы зверобоя из-за сложного химического состава сырья данного растения. Это создает определенные трудности в стандартизации сырья зверобоя и его препаратов. Кроме того, отсутствие унифицированного подхода к стандартизации сырья и препаратов зверобоя является препятствием для создания новых отечественных эффективных лекарственных средств на основе сырья данного растения.

Глава 1. Морфолого-анатомическое описание некоторых представителей рода HYPERICUM L

1.1 Ботаническое описание видов рода HYPERICUM L

Зверобой продырявленный [Нуреricum perforatum L., сем. Нурeriсасеае (Guttiferaе)] представляет собой многолетнее травянистое растение (рис. 1). Это растение имеет множество народных названий -- зверобой пронзеннолистный, зверобой обыкновенный, заячья кровь, божья кровь, кровавник, трава святого Иоанна, кровяная трава, жесткое сено, плакун трава, трава иисусовых ран, раневая трава и др.

Все вышеперечисленные народные названия говорят о широком применении этого уникального растения в медицинской практике. Считается, что русское слово "зверобой" происходит от казахского названия этого растения "джербай" -- целитель ран. Морфологические признаки зверобоя продырявленного удивительны по своей красоте и загадочности. Стебель у данного растения прямой с двумя гранями, наверху ветвистый, от 30 см достигает иногда 1 м в высоту. Листья овальные, эллиптические, продолговато яйцевидные или продолговатые, 0,7--З см длиной и 0,3--1,5 см шириной. Они почти всегда туповатые, плоские по краю более менее завернутые вниз, с многочисленными просвечивающимися светлыми и редкими черными точечными железками. Цветки многочисленные, собранные в широко метельчатое, почти щитковидное соцветие (тирс) 7--11 см длиной, 5--11 см шириной. Прицветники ланцетные, острые 0,5 см длиной. Чашечка глубоко раздельная, 5 мм длиной, почти в 2--3 раза короче венчика. Чашелистики ланцетные или узко ланцетные. Они также острые или тонко заостренные, с редкими железистыми черными большей частью овальными точками, по краю ровные или немного зубчатые. Лепестки продолговатые или продолговато эллиптические, неравнобокие, 1,2--1,5 см длиной, 0,5--0,6 см шириной, по краям и верхней части с многочисленными черными железками в виде черных точек и черточек и на поверхности с многими желтыми светлыми точечными и в виде тонких черточек и полосок железками или без черных точек. Тычинки многочисленные в 3 пучках, завязь яйцевидная, 3--5 мм длиной. Корневища короткое, вертикальное, корни слабоветвистые, неглубоко погруженные в почву. Семена мелкие -- 1 мм длиной, цилиндрические, коричневые, продольно мелко ячеистые. Известно, что на одном побеге может созревать около 23000 семян

Растение легко размножается семенами, поэтому может являться злостным сорняком для пастбищ. Цветет зверобой продырявленный в июне-августе. Плоды созревают в сентябре-октябре. При скашивании зверобоя в годы влажной второй половины лета в августе-сентябре наблюдается его отрастание и вторичное цветение. Свое название "продырявленный" или "пронзеннолистный" этот вид зверобоя получил за наличие большого количества вместилищ с эфирным маслом, расположенных по всей поверхности листа этого растения: если смотреть на листья зверобоя сквозь свет, то можно видеть большое количество прозрачных точек (рис. 2). Таким образом выглядят эфирномасличные вместилища на листьях зверобоя продырявленного. Зверобой продырявленный произрастает в светлых лиственных и смешанных лесах, среди кустарников, на луговых степях, лугах, каменистых склонах. Встречается на суходольных, реже пойменных лугах, лесных опушках и полянах, в разреженных лесах, по склонам балок и речных долин, в горах до 2300 м, по предгорьям, лесам и субальпийским лугам. Может встречаться как сорное растение по насыпям, около дорог, по окраинам полей и среди посевов. Зверобой продырявленный может образовывать разреженные заросли на площади в несколько гектаров. Встречается на всей территории Европейской части РФ, на Кавказе, в Западной и Восточной Сибири (за исключением северных районов), а также в горах Средней Азии. В районах дальнего Востока и Приморья зверобой продырявленный является заносным видом. Для этих районов типичными видами являются зверобой большой, зверобой прямой, зверобой оттянутый, а также зверобой Геблера.

Трава зверобоя может вызывать заболевания животных при поедании растений в больших количествах на пастбищах. В основном, это проявляется в случае овец с белой шерстью. Это связано с фотосенсибилизирующим действием антраценпроизводных, входящих в состав травы зверобоя.

Как известно, животные с белой шерстью особенно к ним чувствительны. Причем заболевание более выражено, если животные съедали траву зверобоя в жаркий солнечный день. Считается, что действие гиперицина подобно гемотопорфирину, искусственному продукту расщепления гемоглобина. Заболевания проявляется в виде длительно незаживающих, кровоточащих язв и ран на коже и слизистых оболочках животных. Поэтому зверобой нежелательный компонент на пастбищах и считается небезопасным для животных. В то же время зверобой является хорошим медоносом и перганосом.

Зверобой пятнистый (четырехгранный) (Нуреricum таculatит Crantz., (синонимы Нуреricum quadrangulum L .) сем. Нурeriсасеае) отличается лишь наличием четырехгранного стебля и листьев с редкими просвечивающимися и темными железками (рис. 3, 4).

Данный вид имеет химический состав такой же, как и у зверобоя продырявленного, поэтому применяется и заготавливается наряду с ним. Некоторые авторы считают зверобой пятнистый самостоятельным видом, некоторые -- подвидом зверобоя продырявленного, отличающегося от него, кроме того, по условиям обитания. Этот вид зверобоя в большей степени мезофит, и произрастает по опушкам хвойных и смешанных лесов, Отсюда и его меньшие размеры по сравнению со зверобоем продырявленным. Длительное время этот вид зверобоя считался примесным и не подлежал заготовке, однако большинство современных авторов не видят существенной разницы в химическом составе зверобоя продырявленного и зверобоя пятнистого.

Примесями для зверобоя продырявленного могут служить другие виды зверобоя, произрастающие в аналогичных фитоценозах -- зверобой жестковолосистый и зверобой изящный, характеристика которых приведена ниже. Зверобой изящный (Нуреricum elegans Steph.) представляет собой многолетнее растение, высотой 30--50 см (рис. 5-7). На его стебле имеются 2 узких боковых ребра. Чашелистики усажены по краям темными железками на ножках, видимые в лупу.

Это растение произрастает по склонам холмов, по степям, а также в подлеске, среди зарослей кустарников. В народной медицине используется аналогично зверобою продырявленному. Данное растение является редким и охраняемым видом в Самарской области, занесено в Красную книгу. Зверобой жестковолосистый (зверобой волосистый, зверобой шершавый) (Нуреricum hirsutum L.) отличается цилиндрическим пушистым стеблем, покрытым видимыми невооруженным глазом волосками (рис. 8-10). Чашелистики по краям усажены черными железками, хорошо заметными в лупу. В народной медицине применяется при лечении удушья и как жаропонижающее средство.

Кроме того, многие виды зверобоя выращивают в нашей стране в культуре как декоративные виды, а именно: зверобой большой, зверобой олимпийский и зверобой красивый.

Зверобой большой (Нуреricum ascyron L.) представляет собой травянистое растение высотой до 120 см с крупными листьями и цветками (рис. 11). Этот вид зверобоя произрастает в Восточной Сибири, на Дальнем Востоке и в Приамурье. Трава этого растения используется в тибетской и китайской медицине в качестве средства от головной боли, а также как мочегонное и противосудорожное средство. В Японии корни и семена этого растения использовали для лечения нарушений менструального цикла, а также в качестве противоядия при отравлениях.

Зверобой олимпийский (Нуреricum оiутрiсит L.) -- травянистое растение высотой до 35 см, имеющее одиночные цветки на верхушках побегов (рис. 12). Этот вид произрастает в странах Средиземноморья, в Российской Федерации культивируется в качестве декоративного растения.

Зверобой красивый (красильный) (Нуреricum аndrosaemum L.) является полукустарником до 1 м высотой с крупными цветками, кожистыми листьями и ягодообразными плодами (рис. 13). Данный вид произрастает на Кавказе и применяется в народной медицине как средство при лечении туберкулеза и дизентерии. Зверобой красивый используется также как декоративное растение при оформлении букетов.

1.2 Анатомо-морфологическая характеристика сырья "Зверобоя трава"

В качестве лекарственного растительного сырья используют траву, представляющую собой верхушки стеблей с цветками, листьями, бутонами и частично с недозрелыми плодами.

Цельное сырье. Верхние части стеблей с листьями, цветками, бутонами и недозрелыми плодами. Стебли полые, цилиндрические, длиной до 30 см, с двумя (у зверобоя продырявленного) или четырьмя (у зверобоя пятнистого) продольными ребрами. Листья супротивные, сидячие, продолговатые или продольно-овальные, цельнокрайние, голые, до 3,5 см, шириной до 1,4 см. У зверобоя продырявленного листья с многочисленными просвечивающимися вместилищами в виде светлых точек.

Цветки многочисленные около 1--1,5 см в диаметре, собраны в щитковидную метелку. Чашечка сростнолистная, глубокопятираздельная, чашелистики ланцетовидные, тонко заостренные (у зверобоя продырявленного) или продолговато-овальные с притупленной верхушкой (у зверобоя пятнистого). Венчик раздельнолепестной, в 2--З раза длиннее чашечки, лепестков пять. На лепестках, особенно с нижней стороны, хорошо заметен черный рисунок в виде полосочек, а ближе к верхушке в виде точек. Тычинки многочисленные, сросшиеся у основания нитями в три пучка. Плод -- трехгнездная многосемянная коробочка. Цвет стеблей -- от зеленовато-желтого до серовато-зеленого, иногда розовато-фиолетовый; листьев -- от серовато-зеленого до темно-зеленого; лепестков -- ярко-желтый или желтый с черными точками, хорошо заметными под лупой; плодов -- зеленовато-коричневый. Запах слабый, своеобразный. Вкус горьковатый, слегка вяжущий. Измельченное сырье. Кусочки стеблей, листьев (серовато-зеленого цвета), цветков (желтого цвета) различной формы и недоразвитых плодов, проходящих сквозь сито с отверстиями диаметром 7 мм. Запах слабый, своеобразный. Вкус горьковатый, слегка вяжущий.

В соответствии с требованиями Государственной Фармакопеи СССР ХI издания сырье, представляющее собой траву, для микроскопии должно быть подготовлено следующим образом. Сырье кипятят в 2--3 % растворе едкого натра в течение 1--2 минут, затем жидкость сливают. Возможно также кипячение сырья в растворе хлоралгидрата в соотношении 1:1. Сырье промывают водой, помещают в глицерин и используют для приготовления микропрепаратов. Кипячением в растворе щелочи добиваются просветления микропрепарата лекарственного растительного сырья. Однако нами установлено, что кипячение в щелочи данного вида сырья не приводит к желаемому просветлению препарата, но даже усиливает окраску препарата. Данное усиление окраски объясняется наличием большого количества фенольных соединений, реагирующих с раствором щелочи. В этой связи, необходимо осуществлять кипячение травы зверобоя с целью получения микропрепарата в очищенной воде в течение 1--2 минут. Сырье, заготовленное от других видов зверобоя имеет характерные отличия, позволяющие обнаружить примесные виды. Диагностическим признаком травы зверобоя волосистого (жестковолосистого) (наиболее частая примесь) является наличие в эпидермисе простых одно- и многоклеточных волосков, а по краю чашелистиков -- железок с окрашенным содержимым, видимых и невооруженным глазом. Такие же железки по краю чашелистиков имеются и у другого вида -- зверобоя изящного.

1.3 Заготовка сырья "Зверобоя трава"

Зверобой продырявленный является редким и охраняемым растением во многих областях РФ, поэтому сбор травы ограничен или запрещен. Так, в Ростовской области плотность запаса зверобоя лежит в пределах 12,2 ± 1,5 до 58,5 ± 5,1 г/м². Некоторые авторы отмечают, что зверобой продырявленный является одним из наиболее уязвимых при антропогенном воздействии, в частности, к реакреационным нагрузкам. В Самарской области промышленные заготовки травы зверобоя запрещены, так как это растение относится к числу редких и охраняемых растений. В то же время, ряд авторов сомневается в этом утверждении и считает этот вид пригодным для заготовки в Самарской области. В последние годы некоторые авторы отмечают увеличение природных запасов травы зверобоя продырявленного. Это связано с тем обстоятельством, что зверобой произрастает на участках земли, которые несколько лет не использовались для сельскохозяйственных целей.

Отмечено, что плотность запаса воздушно-сухого сырья травы зверобоя в северных районах данного региона составляет 83,0 ± 6,2 - 319,1 ± 26,1 кг/га, а в западных лежит в пределах 36,1 ± 0,2 - 865,2 ± 36,4 кг/га. Зверобой продырявленный поддается введению в культуру. В настоящее время выведены различные сорта этого растения. Заготавливают надземную часть зверобоя в фазе цветения (июнь-август), до появления незрелых плодов. Считается, что оптимальным временем сбора для травы зверобоя в средней полосе РФ является первая половина июля. При заготовке ножами или серпами срезают облиственные верхушки длиной до 25--30 см, без грубых оснований стеблей. Не допускается вырывание растений с корнями, так как это ведет к уничтожению зарослей и снижению качества сырья. Собранную траву раскладывают без уплотнения в мешки или кузов автомашины и немедленно отправляют на сушку, так как сырье легко согревается, а после этого темнеет при сушке. Сушат траву зверобоя на чердаках, под навесами или в помещениях с хорошей вентиляцией, разложив тонким слоем (5 - 7 см) на бумаге, ткани или на проволочных сетках и периодически перемешивая. Лучше всего сушить в сушилках с искусственным обогревом при температуре нагрева обезвоженного материала не выше 40 ⁰С. В хорошую погоду сырье высыхает за 4--5 дней, а в сушилках за 1- 2 дня. Окончание сушки определяется по степени ломкости стеблей (в высушенном состоянии они не сгибаются, а ломаются). Сырье упаковывают в мешки или тюки по 50--70 кг. Хранят в сухом, хорошо вентилируемом помещении, старясь не допускать измельчения цельного сырья.

Следует отметить, что режим сушки травы зверобоя, предусматривающий температуру не выше 40 ⁰С, способствует сохранению в сырье прежде всего эфирного масла. Однако, для сохранения фенольных компонентов травы зверобоя можно использовать и более высокую температуру сушки. Было исследовано влияние температуры сушки травы зверобоя при различных температурных режимах. Качество сушки оценивалось по содержанию в сырье двух основных групп действующих веществ -- флавоноидов и антраценпроизводных. Было установлено, что температура сушки существенно не оказывает влияние на содержание этих двух групп веществ в сырье, однако необходимо отметить, что наибольшие результаты были получены при использовании температуры сушки 60--90 ⁰С. Это обстоятельство можно объяснить тем, что сушка при высокой температуре быстрее инактивирует ферменты растения, способные разрушать фенольные вещества травы зверобоя.

Глава 2. Исследование химического состава зверобоя травы

2.1 Основные биологически активные соединения зверобоя травы

Во всех литературных источниках отмечается высокий уровень флавоноидов в надземной части зверобоя, среди них присутствуют рутин, гиперозид (гиперин), кверцетин, кверцитрин, изокверцитрин мирицетин, антоцианы, лейкоантоцианидины, катехины: (+)-катехин, (-)-эпикатехим. Некоторые авторы указывают на обнаружение кверцетин-3-О- галакторамнозида. В последнее время в зарубежной литературе стали упоминать о выделении из травы зверобоя продырявленною и исследовании химических свойств нового компонента -- 3,8^II -бисапигенина. Фенилпропаноиды представлены кислотами и их производными: кофейная кислота (0,1%), хлорогеновая кислота. Обнаружены также кумарины и дубильные вещества. Дубильные вещества зверобоя большинство авторов относят к типу конденсированных дубильных веществ. В то же время, есть мнение что в траве зверобоя содержатся и конденсированные, и гидролизуемые дубильные вещества. Отмечают также содержание в траве зверобоя ксантонов и ксантонолигнанов. В траве присутствуют также антраценпроизводные: гиперицин, псевдогиперицин, протопсевдогиперицин, гиперкодегидродиантрон, франгулаэмодинантронол (последние три считаются предшественниками первых двух названных антраценпроизводных и содержатся в незначительных количествах). Производные флороглюцинов представлены гиперфорином. Трава зверобоя продырявленного содержит эфирное масло 0,0 1-1,25%, в состав которого входят -пинен, -пинен, мирцен, цинеол. Среди стероидных компонентов выделен -ситостерин. Обнаружены также тритерпеновые сапонины, алкалоиды и другие азотсодержащие соединения, например холин. Присутствуют также витамины, в частности, аскорбиновая кислота и витамин Е. Среди высших алифатических углеводородов можно отметить октакозан, триаконтан, присутствуют также высшие алифатические спирты. Кроме того, в траве зверобоя содержатся каротиноиды.

2.2 Выделение биологически активных соединений из травы зверобоя продырявленного методом колоночной хроматографии

Несмотря на то, что из травы зверобоя выделен целый ряд веществ, химический состав сырья данного растения до сих пор остается изученным не в полной мере. Для подробного изучения химического состава травы зверобоя необходимо проведение глубоких многолетних исследований. Большое разнообразие веществ травы зверобоя создает сложности для химического анализа сырья этого растения. Следствием этого является тот факт, что до сих пор остается нерешенным в полной мере вопрос стандартизации как для сырья, так и препаратов зверобоя. Поэтому для решения проблемы создания новых препаратов и изучения вопросов анализа уже имеющихся препаратов необходимо детальное исследование химического состава травы зверобоя методом препаративной колоночной хроматографии. Для этих целей с помощью 90% этилового спирта было получено извлечение из травы зверобоя продырявленного, заготовленной в Самарской области в 2006 г. Полученное извлечение упаривали под вакуумом и наносили на силикагель L 100/160. Разделение веществ осуществляли методом колоночной хроматографии на силикагеле, где в качестве элюентов использовали хлороформ, спирто-хлороформные смеси в различных сочетаниях и спирт этиловый. Элюаты делили на фракции, примерно одинакового объема (по 200 мл), затем упаривали под вакуумом. Таким образом нами был получен ряд фракций (более 50), которые в дальнейшем использовали для выделения индивидуальных веществ. Индивидуальные вещества получали методом рехроматографии на колонках, где в качестве сорбента использовали полиамид и сефадекс LН-20. Контроль за разделением веществ осуществлялся с помощью метода тонкослойной хроматографии (ТСХ) на пластинках "Silufol UV 254" и "Сорбфил ПТСХ-П-А-УФ" в системе хлороформ-спирт (2:1), а также в специально разработанной системе хлороформ-этанол-вода (26:16:3). Выделенные вещества были исследованы с помощью УФ-, ¹Н-ЯМР-спектроскопии, масс-спектрометрии, различных химических превращений, ТСХ. Таким образом, были выделены следующие компоненты: 3,8¹¹- бисапигенин, кверцетин, 6,8¹¹ -дикверцетин, гиперозид, рутин (флавоноиды), хлорогеновая кислота (фенилпропаноид) и гиперфорин (флороглюцин), имеющие следующие физико-химические и спектральные характеристики: 3,8¹¹ -Бисапигенин. Светло-желтое аморфное вещество состава С₃₀Н₁₈О₁₀с т.пл. 233-235⁰С, М302 (100 %), УФ-спектр: 270,330 нм. ¹Н-ЯМР-спектр в дейтероацетоне (д, м.д.): 13,15 (с, 5-ОН), 12,99 (с, 5¹¹-ОН), 7,71 (д, 9 Гц, 2Н, Н-2¹,6¹), 7,51 (д, 9 Гц, 2Н, Н-2¹¹¹,6¹¹¹),), 6,90 (д, 9 Гц, 2Н, Н-3¹,5¹), 7,79 (д, 9 Гц, 2Н, Н-3¹¹¹,5¹¹¹), 6,61 (с, Н-3¹¹), 6,60 (д, 2,5 Гц, Н-8), 6,35 (д, 2,5 Гц, Н-6), 6,34 (с, Н-6¹¹).

Кверцетин. Светло-желтое аморфное вещество состава С₁₅Н₁₀О₇с т.пл. 312-314 ⁰С, М 302 (100 %), УФ-спектр в этаноле: 257, 268 пл, 372 нм. ¹Н-ЯМР-спектр в дейтероацетоне (д, м.д.): 12,20 (с, 5-ОН), 7,83 (д, 9 Гц, Н-2'), 7,70 (дд, 2 и 9 Гц, Н-6'), 6,99 (д, 9 Гц, Н-5'), 6,53 (д, 2,5 Гц, Н-8), 6,26 (д, 2,5 Гц, Н-6).

6,8¹¹-Дикверцетин. Желтое аморфное вещество состава С₃₀Н₁₈0₁₄, УФ-спектр в этаноле: 257, 268 пл, 374 нм. ¹Н-ЯМР- спектр н дейтероацетоне (д, м.д.): 7,83 (д, 9 Гц, Н-2¹), 7,70 (дд, 2 и 9 Гц, Н-6¹), 7,53 (д, 9 гц, Н-2¹¹¹), 7,48 (дд, 2 и 9 Гц, Н-6¹¹¹), 6,98 (д, 9 Гц, Н-5¹), 6,89 (д, 9 Гц, Н-5¹¹¹), 6,53 (уш. с, Н-8), 6,27 (уш. с, Н-6).

Гиперозид. Светло-желтое кристаллическое вещество состава С₂₁Н₂₀0₁₂ с т.пл. 233-235⁰С (водный ацетон); УФ-спектр в этаноле: 258, 266 пл, 362 нм. ¹Н-ЯМР-спектр в смеси дейтероацетона и дейтероводы (д, м.д.): 12,30 (с, 5-ОН), 7,92 (д, 2,5 Гц, Н-2¹), 7,55 (дд, 2,5 и 9 Гц, Н- 6¹), 6,88 (д, 9 Гц, Н-5¹), 6,45 (д, 2,5 Гц, Н-8), 6,21 (д, 2,5 Гц, Н-6), 5,20 (д, 7,5 Гц, Н-1¹¹ галактозы), 3,5-4,0 (м, 6Н галактозы).

Рутин. Зеленовато-желтое кристаллическое вещество состава С₂₇Н₃₀О₁₆ ; т.пл. 192-194 ⁰С (водный спирт) УФ-спектр: 258, 266 пл, 362 пм. ¹Н-ЯМР-спектр в смеси дейтероацетона и дейтероводы, 2:1 (д, м.д.): 7,74 (д 9 Гц, Н-2¹), 7,68 (дд, 2,5 и 9 Гц, Н-6¹), 6,94 (д, 9 Гц, Н-5¹), 6,50 (д, 2,5 Гц, Н-8), 6,27 (д, 2,5 Гц, Н-6), 5,13 (д, 7 Гц, Н-1¹¹ глюкозы), 4,55 (д, 2 Гц, Н-1¹¹¹ рамнозы), 3,70-3,25 (м, 6Н глюкозы + 4Н рамнозы), 1,08 (д, 6 Гц, 3Н, СН₃ рамнозы).

Хлорогеновая кислота С₁₆Н₁₈О₉. Т. пл. 203-205^О (вода). УФ- спектр в спирте этиловом: 243, 300 пл, 330 нм. ¹Н-ЯМР-спектр в ДМСО-d₆ (100 МГц, м.д.): 7.45 (д, 16 Гц, Н-7), 7.06 (д, 2 Гц, Н-2¹), 7.01 (дд, 2 и 8 Гц, Н-6¹), 6.80 (д, 8 Гц, Н-5¹), 6.18 (д, 16 гц, Н-8), 5.10 (дт, 5 и 9 Гц, Н-5), 4.00 (кв, 3 Гц, Н-3), 3.62 (дд, 3 и 9 Гц, Н-4).

Гиперфорин. Светло-желтое сиропообразное вещество состава С₃₅Н₅₄0₄ ; УФ-спектр в этаноле: 275 нм. ¹Н-ЯМР-спектр в дейтерохлороформе (д, м.д.): 4,8-5,3 (м, 4Н, Н-15, Н-22, Н-27, Н-32), 4,2-4,3 (м, 2Н, Н-14), 3,20 (м, ¹Н, Н-11), 1,8-2,5 (м, 10Н, Н-6, Н-7, 2Н-19, 2Н-21, 2Н-26, 2Н-31), 1,5-1,8 (м, 28Н, СН₃-17, 18, 24, 25,29, 30,34, 35), 1,20 (с, 6Н, СН₃-12, СН₃-13), 1,00 (с, 3Н, СН₃-20).

Следует отметить, что 3,8¹¹-бисапигенин впервые выделен из травы зверобоя продырявленного, произрастающего в РФ. Вещество, выделенное в минорном количестве и предварительно идентифицированное как 6,8¹¹ -дикверцетин, впервые описано для рода Нуреricum. Гиперфорин также выделен из лекарственного растительного сырья впервые в РФ, хотя об исследовании этого вещества сообщалось ранее. Таким образом, установлено, что ведущей группой действующих веществ травы зверобоя продырявленного являются флавоноиды, среди которых доминируют рутин, гиперозид и бисапигенин. Рутин и гиперозид представляют собой гликозиды кверцетина которые достаточно распространены в растительном мире. Бисапигенин является димером флавоноидов и его содержание отмечается лишь в растениях рода Нуреricum L. Следует отметить, что рутин и гиперозид достаточно широко распространены в растительном сырье, поэтому обнаружение в ходе анализа только этих компонентом не позволит надежно идентифицировать сырье и препараты зверобоя. При этом достаточно уникальными компонентами травы зверобоя являются антраценпроизводные. Однако нет достаточных оснований утверждать, что именно этими веществами обусловлен антидепрессантный эффект, присущий препаратам зверобоя.

Глава 3. Фармакологические свойства травы и препаратов зверобоя

3.1 Фармакологические свойства препаратов на основе травы зверобоя

История применения травы зверобоя уходит корнями в глубокое прошлое. Первые сведения об использовании есть у Гиппократа (460--377 гг. до н. э.). Лекарственные свойства травы зверобоя отмечали Диоскорид и Авиценна. Парацельс сообщал об успешном применении зверобоя при лечении ран, контузий, нарывов, переломах костей и др. заболеваниях. В России зверобой продырявленный называли "травой от 99 болезней" и высоко ценили его лечебный свойства. Во Франции трава зверобоя продырявленного применяется в качестве средства, стимулирующего деятельность сердца и регенерацию тканей, а также как диуретическое и антимикробное и противовоспалительное средство. В Польше зверобой используется как ранозаживляющее и гемостатическое средство, а также при неврастении и невралгии. В Великобритании зверобой применяется при лечении кожных заболеваний и в качестве антигельминтного средства. В Чехии был разработан препарат "Флористен" для лечения гинекологических заболеваний. В настоящее время большой популярностью пользуется препарат "Ново-пассит", предназначенный для приема внутрь в качестве успокаивающего средства (ранее существовал препарат "Пассит"). В Словении выпускается еще один популярный в настоящее время препарат "Деприм", применяемый в качестве антидепрессантного средства и для лечения разнообразных психоэмоциональных расстройств. В Болгарии разработан препарат "Пефлавит", обладающий Р-витаминной активностью и уменьшающий проницаемость сосудов. Отвар зверобоя применяется при язве желудка с повышенной кислотностью желудочного сока, а также при лечении подагры, суставов, геморроя, при энурезе у детей, диарее, нервных заболеваниях. В Италии трава зверобоя входит в состав препаратов для лечения желчекаменной болезни. В Германии на основе зверобоя готовят тонизирующие препараты, а также препараты для лечения депрессивных состояний, бессонницы, беспокойства и страха, такие как "Негрустин" и "Гелариум Гиперикум", разрешенных к применению и в России. В Индии трава зверобоя применяется для лечения укусов змей. В Канаде зверобой используют в качестве консерванта для пищевых продуктов. В США трава зверобоя (трава святого Джона -- Saint-John's wort herb) применяется в качестве антимикробного и антидепрессантного средства.

Следует отметить, что большинство литературных источников в нашей стране относят зверобой к антимикробным, противовоспалительным и ранозаживляющим средствам, преимущественно наружного применения. Некоторые отмечают его фотосенсибилизирующий эффект при приеме внутрь. При этом почти нигде не отмечается его нейротропное действие. Некоторые источники указывают на спазмолитическое, общеукрепляющее и кровоостанавливающее действие препаратов зверобоя. Изредка упоминается и некоторое андрогеноподобное действие. Именно поэтому, принимая во внимание противовоспалительный и антимикробный эффекты зверобоя, некоторые авторы считают целесообразными применение его препаратов при лечении заболеваний репродуктивной системы у мужчин (простатиты). Другие авторы отмечают у травы зверобоя некоторое гестагенное действие и считают целесообразным применение зверобоя при лечении бесплодия у женщин, применяя его во второй фазе менструального цикла. Нарушения гормонального фона, как отмечают некоторые авторы, может привести к развитию остеопороза. Следовательно, применение фитопрепаратов, стимулирующих выработку половых гормонов, может осуществлять своего рода профилактику этого заболевания.

В нашей стране зверобоя трава нашла научное применение лишь после Великой Отечественной войны. Клинические испытания препаратов из травы зверобоя были одобрены лишь в 1944 г. Основные заготовки травы зверобоя продырявленного проводились на Украине. В СССР на основе травы зверобоя продырявленного разработан препараты "Иманин" и позднее -- "Новоиманин" для наружного применения в качестве антимикробного средства при лечении инфицированных ран, ожогов, флегмон, абсцессов, язв, пиодермии, маститов, ринитов, фарингитов. Создатели этих препаратов, представляющих собой ацетоновое извлечение из травы зверобоя ("Новоиманин"), указывают, что основным действующим веществом является гиперфорин. Данные авторы называют это вещество растительным антибиотиком. Несмотря на то, что данные препараты фактически отсутствуют на фармацевтическом рынке в РФ, в последнее время появляются новые сведения о фармакологических эффектах гиперфорина. Некоторые зарубежные исследователи отмечают его антидепрессантные и противораковые свойства. Есть данные о применении "Новоиманина" в форме аэрозолей для лечения пневмоний и пиопневмоторакса, туберкулеза легких, ларингита. Он был эффективен также при лечении холецисто-ангиохолитов с помощью электрофореза. Отмечается, что препараты зверобоя стимулируют иммуногенез в организме. Некоторые исследователи отмечают сравнительно высокую антирадикальную активность водных извлечений из травы зверобоя, обусловленную, преимущественно, содержанием флавоноидов, дубильных веществ и витаминов. В настоящее время применяется отечественный препарат "Зверобоя настойка", а также используются настой, отвар и сборы с травой зверобоя в качестве антимикробных, противовоспалительных и ранозаживляющих средств. Эффективность препаратов основана на подавлении роста в основном грамположительных микроорганизмов (золотистого стафилококка, стрептококков и др.), иногда не поддающихся лечению антибиотиками. Отмечается капилляроукрепляющее действие флавоноидов зверобоя (рутина и гиперозида). Препараты применяются в основном при лечении заболеваний сердца, легких, желудочно-кишечного тракта, геморроя, меноррагии, венерических и кожных заболеваний, при лечении полости рта. Причем некоторые авторы отмечают положительное действие препаратов зверобоя при лечении заболеваний печени и почек, объясняя это желчегонным и мочегонным действием. С другой стороны, есть сведения, что при передозировке и длительном применении препаратов зверобоя возможны нарушения функции печени, сопровождающееся появлением чувства горечи во рту и болями в правом подреберье. Замечено, что препараты зверобоя могут в некоторых случаях повышать кровяное давление, оказывать психостимулирующее действие. Некоторые источники считают возможным применение травы зверобоя в качестве противоглистного средства для лечения аскаридоза и инвазий карликовым цепнем. Имеются сведения о положительном действии препаратов зверобоя при лечении подагры и ревматизма. В настоящее время разрабатываются вагинальные таблетки с сухим экстрактом зверобоя.

Доклинические фармакологические испытания как препаратов, так и индивидуальных веществ зверобоя были проведены на белых беспородных крысах и мышах обоего пола. В работе использовались стандартные поведенческие методики по выявлению нейротропной активности.

Настойка зверобоя сокращает тиопенталовый сон на 37 % в дозе 100 мг/кг (Р?0, 05). В тесте открытое поле на 42% увеличивается наиболее значимый показатель преодоления страха в незнакомой обстановке -- выходы во внутренние квадраты поля. В условиях ПКЛ более чем в 2 раза увеличивается продолжительность пребывания и число выходов в открытые рукава. В тесте отчаяния время имобилизации сокращается на 20 %. Число наказуемых взятий воды из поилки увеличивается на 55 %. Результаты последних двух экспериментов свидетельствуют об антидепрессивных свойствах настойки зверобоя. Анализ полученных данных не показал наличия адаптогенного действия препарата, что лишний раз подтверждает селективность нейротропной активности. Спустя 2 часа после обучения УРПИ и последующего воздействия электрошока (ЭШ) число контрольных крыс, остающихся на платформе в течение двух мин составляет 20%. Предварительное введение настойки зверобоя в дозе 100 мг/кг ослабляет амнестическое действие ЭШ, увеличивая число животных с навыком УРПИ до 50%. Данный факт можно расценивать как проявление умеренной ноотропной активности. Полученные результаты свидетельствуют о несомненном влиянии настойки зверобоя на ЦНС.

Кроме того, проводились исследования индивидуальных биологически активных соединений травы зверобоя. Было проанализировано действие гиперозида, кверцетина, рутина, а также флороглюцина гиперфорина. Существует мнение, что гиперфорин отвечает за антидепрессивные свойства препаратов зверобоя. Выяснилось, что рутин не влияет на продолжительность сна животных. Хлоралгидратный сон мышей сокращается при введении кверцетина в дозе 1 мг/кг на 38,3%, гиперозида в дозе 10 мг/кг на 18,8%, гиперфорина в дозе 100 мг/кг на 38,6%. Последний укорачивает время тиопенталового сна в опыте на крысах на 42% по сравнению с контролем. Противоположное действие у кверцетина наблюдается в дозе 10 мг/кг, у гиперозида в дозе 100 мг/кг, сон удлиняется на 43,2% и 43,9% соответственно. Действие гиперфорина в меньших дозах не проявляется.

Фотосенсибилизирующее действие препаратов зверобоя объясняется содержащимися в траве антраценпроизводными (гиперицин и псевдогиперицин). Оказывая фотосенсибилизирующий эффект, антраценпроизводные вызывают выработку мелатонина, недостаток которого и приводит в некоторых случаях к депрессиям. Однако в последнее время все чаще исследователи склоняются к мысли, что антидепрессантный эффект препаратов зверобоя обусловлен содержанием флавоноидов, среди которых доминирует рутин, хотя, как известно, для рутина этот нейротропный эффект до сих пор не выявлен. Интересно, что действие, которое оказывают препараты зверобоя, считают похожим на действие трициклических антидепрессантов и ингибиторов серотониновых рецепторов.

Имеются сведения народной медицины о целесообразности применения травы зверобоя при лечении рака печени и желудка, бронхиальной астмы, нарушений щитовидной железы, при простудных за6олеваниях, при лечении язвы желудка и двенадцатиперстной кишки, нарушений кровяного давления, для профилактики цинги, при хронических колитах, гингивитах и стоматитах. Препараты травы зверобоя часто используют как мочегонное, утеротонизирующее средство. Имеются также сведения о противосудорожном действии. В народной медицине широко используется масляное извлечение из травы зверобоя. Ранозаживляющий эффект, характерный для масла зверобоя, объясняется содержанием хлорофилла и каротиноидов. Применяется зверобой и в гомеопатии. Так, гомеопатические препараты зверобоя в Германии назначаются при лечении последствий сотрясения мозга, депрессивных состояниях и нервных болях после травм. Его используют при лечении воспалительных и травматических поражений периферических нервов.

Используется отвар зверобоя и в ветеринарии в качестве антигельминтного (внутрь) и антимикробного средства (наружно). Трава зверобоя применяется в ликеро-водочной промышленности, входит в состав горьких настоек "Зверобой", "Ерофеич", разнообразных бальзамов, вина "Вермут" и др. Сырье зверобоя входит в состав безалкогольных напитков тонизирующего действия, используется как консервант для рыбных консервов и в качестве суррогата чая.

3.2 Характеристика основных лекарственных средств травы зверобоя

Зверобоя трава (Нуреrici herba): ГФ СССР ХI издания, ст. 52.

Трава зверобоя используется для получения настоя. Для этой цели можно использовать траву зверобоя, расфасованную в пачки по 75 или 100 г, или фильтр-пакеты по 1,5 г, а также брикеты (круглые) по 7,5 г. Траву зверобоя заваривают обычным способом из расчета 1--2 ст. ложки сырья на стакан воды, процеживают. Применяют внутрь и наружно в качестве антимикробного, противовоспалительного, ранозаживляющего, вяжущего и фотосенсибилизирующего средства. Внутрь в виде настоя (10,0:200,0) по 1/3 стакана за 30 мин до еды 3 раза в день, наружно -- для полоскания рта для профилактики и лечения стоматита и гингивита. Готовый настой хранят в прохладном месте не более 2 суток. Следует отметить, что трава зверобоя входит в разнообразные сборы.

Зверобоя настойка (Нуреrici tinctura): ФС 42-1889-95.

Для получения этого препарата траву зверобоя продырявленного или пятнистого настаивают 40% этиловым спиртом в соотношении 1:5. Настойку применяют внутрь по 40--50 капель (иногда рекомендуют принимать по 1--3 чайной ложки) до еды 3--4 раза в день в качестве вяжущего и противовоспалительного (при колитах), реже в качестве фотосенсибилизирующего средства. Но чаще применяют наружно для полоскания слизистой рта и горла из расчета 30--40 капель на Ѕ стакана воды. Препарат выпускается во флаконах по 25 и 100 мл.

Зверобоя продырявленного травы настойка гомеопатическая: ВФС 42-3628-01.

Представляет собой монокомпонентное гомеопатическое средство, оказывающее анальгезирующее действие. Предназначено для наружного применения в комплексной терапии невритов и невралгий (у взрослых в качестве вспомогательного анальгезирующего средства).

Масляное извлечение из травы зверобоя

Измельченную траву, а в некоторых случаях свежие цветки зверобоя заливают оливковым или подсолнечным маслом в соотношении 1:5. Настаивают в течение двух недель при постоянном помешивании. Используют наружно в качестве противовоспалительного, ранозаживляющего и антимикробного средства внутрь и наружно. В литературе встречается разнообразные способы приготовления масляного извлечения из травы зверобоя как в домашних условиях,так и промышленным способом. Вместе с тем, в настоящее время масло зверобоя не зарегистрировано как лекарственное средство. В то же время, оно служит компонентом косметической продукции.

Иманин (Iтапiпит)

Препарат представляет собой сухой экстракт, полученный путем извлечения из травы зверобоя, кипячением с 0,5% раствором натрия гидроксида, в соотношении 1:10. Применялось ранее наружно в качестве антисептического средства в виде 1% водно-щелочного раствора.

Новоиманин (Novoiтапinит)

Препарат представляет собой извлечение, полученное из травы зверобоя с помощью ацетона с последующим удалением из экстракта хлорофилла и других пигментов активированным углем и высушивании под вакуумом. В аптечную сеть "Новоиманин" поступает в виде 1% раствора. Применяется наружно для влажных повязок, промывания полостей, электрофореза и ингаляций после разведения изотоническим раствором или дистиллированной водой.

Деприм (Dерrim)

Таблетированный лекарственный препарат и микстура, содержащая экстракт зверобоя, с 0,3 мг чистого гиперицина. Показан при легких формах депрессий, тревожных состояний, астении, в период менопаузы и повышенной метеочувствительности. Применяется у взрослых по 1 таблетке 3 раза в день (до еды) 2--4 недели. Детям старше 7 лет -- по 1 таблетке 1--2 раза в день. В период применения препарата не рекомендуется загорать на солнце и в солярии. Препарат выпускается в Словении.

Негрустин (Negrustin)

Препарат представляет собой сухой экстракт из травы зверобоя продырявленного, помещенный в желатиновые капсулы или микстуру. В одной капсуле содержится 425 мг сухого экстракта зверобоя. "Негрустин" предназначен для употребления внутрь при лечении психовегетативных расстройств, депрессивных состояний легкой и средней тяжести, состояниях страха и тревоги. Взрослым обычно назначают по 1 капсуле 1--2 раза в день. Гелариум Гиперикум (Gelarium Hypericum)

Препарат представляет собой драже, содержащее 285 мг сухого экстракта зверобоя. Применяется у взрослых по 1 драже 3раза в день. Показанием к применению являются разнообразные депрессии.

Ново-пассит (Novo-passit)

Препарат представляет собой микстуру или таблетированную лекарственную форму, содержащие жидкие экстракты пассифлоры, зверобоя, валерианы, бузины, хмеля, мелиссы лекарственной и гвайафенезин. Применяется внутрь по 5 мл 3 раза в день в качестве успокаивающего и анксиолитического средства. "Ново-Пассит" выпускается во флаконах по 100 мл (производство Чехии).

Демидовский эликсир (Elixir "Demidovskii"): ФСП 42-0056-4065-03.

Представляет собой водно-спиртовое извлечение из корней женьшеня, травы душицы, плодов бадьяна, травы зверобоя, корневищ аира, корней солодки, травы тысячелистника, листьев черники, ореха кедрового, яблочного сока и меда. Является желчегонным и спазмолитическим средством растительного происхождения, стимулирует ЖКТ. Предназначен для приема внутрь, по 10--15 мл на 100 мл воды 2 раза в сутки за 10--15 мин до еды. Больные старше 60 лет -- по 5--10 мл на 250 мл 2 раза в сутки.

Демидовский сироп (Syrypys "Demidovskii"): ФСП 42-0056-0112-00.

Представляет собой растительное средство, в сосав которого входят экстракты корневищ аира, корневищ бадана, почек березы, плодов боярышника, коры дуба, травы душицы обыкновенной, корней женьшеня, травы зверобоя, кедровых орехов, плодов кориандра, корневищ с корнями лапчатки, листьев мяты перечной, цветков ромашки, корней солодки, травы тысячелистника, плодов черники и плодов шиповника.

Эликсир "Эвалар" (Elixir Еvalar").

Представляет собой водно-спиртовое извлечение из корневищ с корнями элеутерококка, корневищ левзеи сафлоровидной, корней солодки, травы зверобоя, слоевищ ламинарии, цветков бессмертника песчаного, плодов боярышника, цветков ромашки аптечной, листьев подорожника большого, травы тысячелистника, листьев мяты перечной, корневищ с корнями родиолы розовой, плодов рябины обыкновенной, плодов шиповника, плодов кориандра, семян сосны кедровой сибирской, семян каштана конского, плодов клюквы, пантокрина, меда, сахара, эликсирного колера. Это общеукрепляющее средство предназначено для увеличения физической и умственной работоспособности. Принимается внутрь по 2--3 чайной ложки на 100 мл жидкости за 10--15 минут до еды 2 раза в день.

Эликсир "Алтайский" (Elixir "Altayskii").

Представляет собой водно-спиртовое извлечение из корневищ с корнями родиолы розовой, корней солодки голой, корневищ с корнями левзеи, корневищ бадана, травы полыни горькой, травы тысячелистника, цветки ромашки аптечной, листьев шалфея, травы душицы, листьев толокнянки, корневищ лапчатки, травы зверобоя, листьев подорожника большого, корневищ с корнями пиона уклоняющегося, листьев брусники, цветков боярышника, плодов боярышника, плодов кориандра, плодов аронии черноплодной, семян кедра сибирского, плодов шиповника, плодов черемухи обыкновенной, корневища с корнями элеутерококка колючего, чаги. Применяется как адаптогенное, тонизирующее и общеукрепляющее средство внутрь по 2--3 чайные ложки, разведенные в 100 мл воды в течение 5--7 дней.

Эликсир "Виватон" (Elixir "Vivaton").

Представляет собой водно-спиртовое извлечение из корневищ с корнями валерианы, корневищ с корнями кровохлебки, корневищ с корнями девясила, корней одуванчика, травы зверобоя, цветков ромашки аптечной, цветков ноготков, травы сушеницы топяной, цветков бессмертника песчаного, травы чабреца, травы душицы, травы пустырника, травы золототысячника, цвет- ков липы, травы тысячелистника, листьев шалфея, листьев мать и-мачехи, листьев крапивы, травы череды, листьев подорожника большого, листьев эвкалипта прутовидного, листьев мяты перечной, листьев сены, почек сосны, почек березы, плодов тмина. Применяется как противовоспалительное и спазмолитическое средство внутрь по 1 чайной ложке на 0,5 стакана воды 2 раза в день в течение 30 дней.