Почвенные микроорганизмы-антагонисты, активные в отношении фитопатогенных грибов р. Fusarium и р. Bipolaris

Большинство актиномицетов растет и развивается при температуре в пределах от плюс 25 до плюс 30єС (мезофиллы). Встречаются термофильные организмы с температурным оптимумом роста от плюс 45 до плюс 60єС. Термотолерантные актиномицеты выдерживают нагревание до плюс 60 и плюс 70єС в течении часа. Наблюдается повышенная устойчивость к нагреванию у спор мезофильных актиномицетов. Оптимальная среда для нормального роста лучистых грибков нейтральная или слабо щелочная (рН 7-7,2).

Актиномицеты хорошо переносят высушивание. Так, некоторые культуры актиномицетов после девятилетнего пребывания в сухом виде, в лабораторных условиях не потеряли своей жизнеспособности.

Лучистые грибки могут развиваться при низкой влажности субстрата. Показано, что оптимальной влажностью для актиномицетов является 60% от ПВ. При 23-30% - преобладают над прочими микроорганизмами, а при 8-10% остаются единственными растущими представителями почвенной микрофлоры [36].

Следует добавить, что актиномицеты по количественному составу и разнообразию продуцируемых антибиотиков занимают первое место среди микроорганизмов [83]. Они являются, очевидно, самой экологически пластичной и эволюционно продвинутой группой грибов [110].

Таким образом, можно сказать, что благодаря своим особенностям актиномицеты могут успешно конкурировать с фитопатогенными микроорганизмами в почве. В некоторых почвах можно обнаружить сравнительно небольшое количество актиномицетов, но почти все они оказываются антагонистами.

В литературных источниках активно изучается возможность использования в защите растений синергического действия бактериальных культур на ростостимуляцию и антагонистическую активность. Ряд авторов изучали и продемонстрировали успешные сочетания соединений нескольких бактериальных штаммов [137, 139, 145, 147, 154, 162]. В проведенных исследованиях показано, что наиболее эффективно развитие заболеваний контролирует смесь, включающая большинство бактериальных видов, обитающих в ризосфере растения-хозяина. Однако, производство препарата, содержащего в себе большое количество бактериальных видов коммерчески не выгодно (подбор среды и оптимальных условий для каждого вида бактерий, стабилизация готового аппарата и т. д.), поэтому авторы данных работ приходят к выводу о том, что наиболее оптимальным является поиск и внедрение двухкомпонентных биофунгицидов [162].

1.3.3 Грибы-антагонисты

Важную роль в подавлении развития болезней растений играют грибы-антагонисты. Среди их представителей внимание исследователей и практиков привлекают грибы р. Trichoderma [15, 16]. Продуцируя антибиотические вещества, они угнетают многие фитопатогены (преимущественно почвенные - грибов из р. Fusarium, Pythium, Phoma, Phytophthora, Alternaria и др.) и одновременно являются стимуляторами роста растений [59, 65, 151, 92]. Приминение грибов р. Trichoderma давало обнадеживающие результаты в борьбе с болезнями плодовых, овощных и зерновых культур [4, 68]. Так, исследования показали, что внесение антагониста Т. harzianum в почву снижает численность фитопатогенных микромицетов, стимулирует рост и развитие растений [27].

Грибы р. Trichoderma характеризуются бесцветным мицелием, образующим белые, желтые, чаще зеленые или темно-зеленые колонии. Конидии одноклеточные, почти шаровидные (2,5-3,7 мкм), собраны в головки по 10-20 штук на концах разветвленных конидиеносцев. Гриб образует шаровидные хламидоспоры размером 7,5-15 мкм. Штаммы этих грибов устойчивы к низким температурам (выдерживают температуру от минус 2 до минус 4єС), оптимальное значение рH 4 - 6 [15].

В работах многих исследователей приведены факты успешного приминения грибов-антагонистов из р. Penicillium для подавления развития возбудителей болезней сельскохозяйственных культур. Так, обработка семян ячменя перед посевом культуральной жидкостью грибов Penicillium verrucosum var. cyclopium S., S. et. H. (= P. martensii) и P. bilai снижала поражение растений каменной головней ячменя в 2-3 раза по сравнению с контролем; обработка семян яровой пшеницы культуральной жидкостью P. Multicolor - в 4 раза уменьшала поражение растений пыльной головней, а в варианте с P. Cyclopium болезнь совсем не развивалась [19]. P. cyclpium принадлежит к одним из самых сильных токсинообразователей в почве. P. nigricans образует антигрибной антибиотик гризеофульвин, который показал хорошие результаты в борьбе с некоторыми болезнями растений [36]. Использование продуктов обмена веществ пенициллов далеко не исчерпано, и дальнейшие изучение, без сомнения, откроет новые возможности их применения в борьбе с болезнями сельскохозяйственных культур.

В последние годы круг грибных антагонистов, используемых в защите растений, значительно расширился. Показана высокая эффективность использования гриба Gliocladium virens Miller et ai., а также грибов р. Chaetomium против корневых гнилей [16]. Давно выделены и испытаны на антагонистическую активность циклические олигопептиды из Metarrhizium anisopliae и Beauveria bassiana (деструксин и боверицин) [124].

Имеющиеся данные позволяют считать перспективным использование микробного антагонизма в защите злаковых культур. В ХХI в. биологическая защита растений должна занять лидирующее положение, что не означает отказ от других методов. Биологический метод в сочетании с другими средствами и приемами являются компонентами интегрированной защиты растений, способной решить задачу сохранения как урожая, так и природной среды.

2. Объекты и методы исследования

2.1 Объекты исследования

В качестве тест-объектов исследования были использованы пять штаммов фитопатогенных грибов р. Fusarium, предоставленных д.б.н., проф. Т.И. Громовых (рисунок 2.1 - 2.7), а также штамм р. Bipolaris (рисунок 2.8), выделенных из пахотных почв Красноярского края.

Рисунок 2.1 - р. Fusarium штамм T2EC (конидиеносец) (фото автора)

Рисунок 2.2 - р. Fusarium штамм Y7ес (мицелий) (фото автора)

Рисунок 2.3 - р. Fusarium штамм T13M (конидиеносцы) (фото автора)

Рисунок 2.4 - р. Fusarium штамм T13M (конидии) (фото автора)

Рисунок 2.5 - р. Fusarium штамм Z2-04 (конидии) (фото автора)



Рисунок 2.6 - р. Fusarium штамм TIG6 (мицелий, конидии) (фото автора)

Рисунок 2.7 - р. Fusarium штамм Z2-04 (конидии) (фото автора)

Рис. 2.8 - р. Bipolaris (конидии) (фото автора)

В качестве объектов исследования были использованы образцы почв, взятые в районе Ветлужанки, с поля, засеянного пшеницей Тулунская-12, садово-огородной почвы Емельяновского района и из-под комнатных растений.

2.2 Методы исследования

Культивирование фитопатогенных грибов р. Fusarium и р. Bipolaris,а также выделение почвенных микроорганизмов проводили на среде Чапека следующего состава: сахароза - 30 г/л, NaNo3 - 2 г/л, K2HPO4 - 1 г/л, MgSO4 Ч 7 H2O - 0,5 г/л, KCl - 0,5 г/л, FeSO4 Ч 7 H2O - 0,01 г/л, агар - 20 г/л. [3, 33].

Первичный скрининг перспективных штаммов антагонистов проводили методом совместного культивирования (рисунок 2.9).

Рисунок 2.9 - Первичный скрининг перспективных штаммов микроорганизмов-антагонистов фитопатогенных грибов р. Bipolaris и р. Fusarium

Высев из почвенной суспензии осуществляли на поверхность агаризованной среды соответствующего состава, предварительно засеянной конидиями определенного штамма грибов р. Fusarium и р. Bipolaris. Рассев проводили микробиологическим шпателем последовательно в четыре чашки Петри. Культивирование проводили в термостате при температуре плюс 28°С в течение двух недель. В процессе культивирования отмечали бактериальные колонии, вокруг которых наблюдалась зона отсутствия роста гриба.

Проверку антагонистической активности выделенных изолятов проводили методом перпендикулярных штрихов (рисунок 2.10).

Выделение чистых культур проводили на среде исходного состава методом истощающего штриха.

Количественную оценку антибиотической активности проводили по прорастанию конидий грибов р. Fusarium и р. Bipolaris в культуральном фильтрате выделенных микроорганизмов-антагонистов.

Фотографирование чашек проводили методом прямого сканирования на сканере Genius ColorPage-HR6 V2 с разрешением 300 dpi.

Рисунок 2.10 - Проверка антагонистической активности выделенных микроорганизмов-антагонистов методом перпендикулярного штриха

Фотографирование микроорганизмов проводили с помощью микрофотонасадки на фотопленку Kodak-100, а также цифрового фотоаппарата с использованием объективов х40 и х90, с использованием фазового контраста.

Обработку фотоизображений проводили с использованием графических редакторов Microsoft Photo Editor 3.0.2.3 и Adobe Photoshop 7.0.

Математическую обработку результатов исследования проводили стандартными статистическими методами с использованием пакета анализа MS Excel, StatSoft Statistica 6.0, а также оригинального программного обеспечения, разработанного С.В. Хижняком.

3. Результаты исследования

В результате предварительного скрининга из исследуемых культур почвенных грибов для дальнейшего исследования были отобраны четыре изолята (А-1, А-1(1), А-2, А-5), проявившие антибиотическую активность в отношении фитопатогенных грибов как р. Fusarium так и р. Bipolaris.

Изучение влияния культурального фильтрата выделенных антагонистов на прорастание конидий грибов р. Fusarium (штамм Т2ес) (приложение А) показало, что метаболиты всех штаммов антагонистов ингибируют прорастание конидий данного штамма. Наибольший токсический эффект проявил антагонист А-2 и А-5, наименьший - антагонист А-1(1) и А-1 (рисунок 3.1, 3.2).

Рисунок 3.1 - Влияние культурального фильтрата антагонистов на прорастание конидий грибов р. Fusarium (штамм Т2ес)

Рисунок 3.2 - Влияние культурального фильтрата антагонистов на прорастание конидий грибов р. Fusarium (штамм Т2ес). (фото автора)

Дисперсионный анализ подтвердил достоверность ингибирующего влияния культурального фильтрата на всхожесть конидий грибов р. Fusarium (штамм Т2ес) на уровне значимости p<0,05.

Изучение влияния культурального фильтрата выделенных антагонистов на прорастание конидий грибов р. Fusarium (штамм TIG6) показало, что метаболиты всех штаммов антагонистов, также как у штамма Т2ес, ингибируют прорастание конидий у этого штамма (TIG6). Наибольший токсический эффект проявил антагонист А-2, наименьший - антагонист А-1(1) (рисунок 3.3).

Дисперсионный анализ подтвердил достоверность ингибирующего влияния культурального фильтрата на всхожесть конидий грибов р. Fusarium (штамм TIG6) на уровне значимости p<0,05.

Изучение влияния культурального фильтрата выделенных антагонистов на прорастание конидий грибов р. Fusarium (штамм Т13m) показало, что метаболиты всех штаммов антагонистов ингибируют прорастание конидий данного штамма. Наибольший токсический эффект проявил антагонисты А-5 и А-2, наименьшие - антагонисты А-1(1) и А-1 (рисунок 3.4).

Рисунок 3.3 - Влияние культурального фильтрата антагонистов на прорастание конидий грибов р. Fusarium (штамм TIG6)

Рисунок 3.4 - Влияние культурального фильтрата антагонистов на прорастание конидий грибов р. Fusarium (штамм T13m)

Дисперсионный анализ подтвердил достоверность ингибирующего влияния культурального фильтрата на всхожесть конидий грибов р. Fusarium (штамм T13m) на уровне значимости p<0,05.

Изучение влияния культурального фильтрата выделенных антагонистов на прорастание конидий грибов р. Fusarium (штамм Z2-04) показало, что метаболиты всех штаммов антагонистов ингибируют прорастание конидий данного штамма. Наибольший токсический эффект проявил антагонисты А-2 и А-1, наименьший - антагонист А-1(1) (рисунок 3.5, 3.6).

Рисунок 3.5- Влияние культурального фильтрата антагонистов на прорастание конидий грибов р. Fusarium (штамм Z2-04)

Рисунок 3.6 - Влияние культурального фильтрата антагонистов на прорастание конидий грибов р. Fusarium (штамм Z2-04) (фото автора)

Дисперсионный анализ подтвердил достоверность ингибирующего влияния культурального фильтрата на всхожесть конидий грибов р. Fusarium (штамм Z2-04) на уровне значимости p<0,05.

Изучение влияния культурального фильтрата выделенных антагонистов на прорастание конидий гриба р. Bipolaris показало, что метаболиты всех штаммов антагонистов ингибируют прорастание конидий данного штамма. Наибольший токсический эффект проявил антагонист А-2, наименьший - антагонист А-1(1) (рисунок 3.7).

Дисперсионный анализ подтвердил достоверность ингибирующего влияния культурального фильтрата на всхожесть конидий гриба р. Bipolaris на уровне значимости p<0,05.

Анализ спектра действия изучаемых антагонистов на тест-культуры по критерию хи-квадрат (приложение Б) показал, что чувствительность различных тест-культур к отдельным штаммам антагонистов различается на уровне значимости р<0,001. Так, штамм А-1 проявляет повышенную антимикробную активность в отношении тест-культур Z2-04 и TIG6 и пониженную - в отношении T13m и гриба р. Bipolaris. Штамм А-1(1) проявляет повышенную антимикробную активность в отношении тест-культуры T2ec и пониженную в отношении остальных (TIG6, T13m, Z2-04, гриба р. Bipolaris). Штамм А-5 - наиблее повышенную в отношении T2ec, повышенную в отношении гриба р. Bipolaris, T13m, TIG6, пониженную - Z2-04. Штамм А-2 проявляет практически ко всем исследуемым тест-культурам повышенную антимикробную активность (TIG6, T2ec, гриб р. Bipolaris, Z2-04), кроме T13m.

Рисунок 3.7 - Влияние культурального фильтрата антагонистов на прорастание конидий гриба р. Bipolaris

Кластерный анализ показал, что по действию на тест-культуры (TIG6, T13m, Z2-04, T2ес, гриб р. Bipolaris) выделенные нами антагонисты разделяются на две группы. В первую группу входят штаммы A-1 и A-1(1) (р. Aspergillus). Во вторую группу входят штаммы А-2 и А-5 (р. Penicilium) (рисунок 3.8).

Рисунок 3.8 - Группировка выделенных антагонистов по токсическому действию на тест-культуры (TIG6, T13m, Z2-04, T2ес, гриб р. Bipolaris)

В целом, штаммы А-2 и А-5 обладают существенно более высокой токсичностью для всех изученных тест-культур.

Сравнительный анализ тест-культур по чувствительности к культуральному фильтрату изучаемых антагонистов показал, что минимальной чувствительностью обладает штамм T13m, наибольшей - штаммы TIG6 и Z2-04 (рисунок 3.9).



Рисунок 3.9 - Группировка тест-культур по чувствительности к токсическому действию культурального фильтрата антагонистов

Эксперимент с разведением культурального фильтрата антагониста А-2 (приложение В) показал, что при уменьшении его концентрации прорастание конидий гриба р. Bipolaris заметно увеличилось. Это говорит о том, что токсический эффект антагониста А-2 теряется при разведении его культурального фильтрата (рисунок 3.10).



Рисунок 3.10 - Влияние концентрации культурального фильтрата антагониста А-2 на прорастание конидий гриба р. Bipolaris

Влияние концентрации культурального фильтрата антагониста А-1 на прорастание конидий гриба р. Bipolaris показало, что при разведении 1 : 1 число проросших конидий уменьшилось, а при разведении 1 : 3 и 1 : 7 - значительно увеличилось. Это говорит о том, что, возможно, данный штамм помимо токсических веществ выделяет рост-стимулирующие вещества, котроые способсбсвуют прорастанию конидий гриба р. Bipolaris (Рисунок 3.11).

Рисунок 3.11 - Влияние концентрации культурального фильтрата антагониста А-1 на прорастание конидий гриба р. Bipolaris

Разведение культурального фильтрата антагониста А-5 показало, что при разведении 1 : 1 число проросших конидий уменьшилось, а при разведении 1 : 3 и 1 : 7 повышенное прорастание конидий гриба р. Bipolaris (рисунок 3.12, 3.13).



Рисунок 3.12 - Влияние концентрации культурального фильтрата антагониста А-5 на прорастание конидий гриба р. Bipolaris

Рисунок 3.13 - Конидии гриба р. Bipolaris (сверху - в контроле; снизу - в культуральном фильтрате выделенных грибов-антагонистов) (фото автора)

Влияние концентрации культурального фильтрата антагониста А-1(1) на прорастание гриба р. Bipolaris показывает, что данный антагонист слабо оказывает токсический эффект. При разведении 1 : 1 число проросших конидий практически сравнялось с контролем (рисунок 3.14).

Рисунок 3.14 - Влияние концентрации культурального фильтрата антагониста А-1(1) на прорастание конидий гриба р. Bipolaris [62, 63].

С учетом того, что многие почвенные грибы при промышленном применении могут представлять угрозу здоровью человека, основное внимание в работе было уделено поиску бактериальных антагонистов.

Изучение влияния культурального фильтрата выделенных бактерий- антагонистов на прорастание конидий грибов р. Fusarium (штамм Т2ес, TIG6, Y7ес) и гриба р. Bipolaris показало, что из 54 протестированных нами изолятов типичных почвенных бактерий 26 достоверно проявляют антагонистическую активность по отношению к Bipolaris, 27 по отношению к Fusarium (TIG6), 36 по отношению к Fusarium (Y7ес), 40 по отношению к Fusarium (Т2ес), что подтверждается результатами статистической обработки полученных данных (приложение Г).

Предварительная идентификация почвенных бактерий-антагонистов показала, что большинство из них являются предствителями группы коринеформных бактерий, в том числе - р. Arthrobacter и р. Micobacterium, группы актиномицетов (р. Streptomyces). Обнаружены также представители р. Bacillus и р. Pseudomonas.

Изучение влияния культурального фильтрата бактерий-антагонистов, выделенных с поля засеянного пшеницей Тулунская 12, на прорастание конидий гриба р. Bipolaris показало, что наибольшую активность проявляют изоляты: Т2, Т4, Т11. Наименее активными оказались изоляты Т7, Т8, Т6, Т5, Т3, Т1, Т15, Т10, Т9, Т12. (рисунок. 3.15).

Рисунок 3.15 - Изучение влияния культурального фильтрата бактерий-антагонистов, выделенных с поля засеянного пшеницей Тулунская 12, на прорастание конидий гриба р. Bipolaris

Различия между изолятами по антагонистической активности подтверждаются результатами дисперсионного анализа на уровне значимости p<0,01.

Изучение влияния культурального фильтрата бактерий-антагонистов, выделенных из садово-огородных почв Емельяновского района, на прорастание конидий грибов р. Bipolaris показало, что наибольший токсический эффект проявили антагонисты: Д13, Д4, Д2, Д26, Д14, Д16, Д23. Наименее активными оказались изоляты Д1, Д15, Д18, Д21, Д20, Д17, Д22, Д25, Д11. Культуральный фильтрат изолятов Д24, Д19, Д16 оказал стимулирующее действие на прорастание конидий возбудителя (рисунок 3.16).

Рисунок 3.16 - Изучение влияния культурального фильтрата бактерий-антагонистов, выделенных с садово-огородных почв Емельяновского района, на прорастание конидий гриба р. Bipolaris

Различия между изолятами по антагонистической активности подтверждаются результатами дисперсионного анализа на уровне значимости p<0,01.

Изучение влияния культурального фильтрата бактерий-антагонистов, выделенных из почвы р. Ветлужанки, на прорастание конидий гриба р. Bipolaris показало, что наибольшую активность проявляют изоляты: В1, В11, В5, В10, В7. Наименее активными оказались изоляты В4, В6, В9, В12. Культуральный фильтрат изолятов В8, В3, В2 оказал стимулирующее действие на прорастание конидий возбудителя (рисунок 3.17).



Рисунок 3.17 - Изучение влияния культурального фильтрата бактерий-антагонистов, выделенных из почвы р. Ветлужанки, на прорастание конидий гриба р. Bipolaris

Различия между изолятами по антагонистической активности подтверждаются результатами дисперсионного анализа на уровне значимости p<0,01.

Изучение влияния культурального фильтрата бактерий-антагонистов, выделенных из почвы под комнатными растениями, на прорастание конидий грибов р. Bipolaris показало, что наибольший токсический эффект проявили антагонисты: Ц2, Ц7, Ц1. Наименее активными оказались изоляты Ц3, Ц6, Ц5, Ц4, Ц8. (рисунок 3.18).

Рисунок 3.18 - Изучение влияния культурального фильтрата бактерий-антагонистов, выделенных из почвы под комнатными растениями, на прорастание конидий гриба р. Bipolaris

Различия между изолятами по антагонистической активности подтверждаются результатами дисперсионного анализа на уровне значимости p<0,01.

Изучение влияния культурального фильтрата бактерий-антагонистов, выделенных с поля засеянного пшеницей Тулунская 12, на прорастание конидий гриба р. Fusarium (TIG6) показало, что наибольшую активность проявляют изоляты: Т1, Т9, Т12. Наименее активными оказались изоляты Т8, Т6, Т5, Т3, Т2, Т15, Т16, Т10, Т11. Культуральный фильтрат изолятов Т7, Т4 оказал стимулирующее действие на прорастание конидий возбудителя (рисунок 3.19).

Рисунок 3.19 - Изучение влияния культурального фильтрата бактерий-антагонистов, выделенных с поля засеянного пшеницей Тулунская 12, на прорастание конидий гриба р. Fusarium (TIG6)

Различия между изолятами по антагонистической активности подтверждаются результатами дисперсионного анализа на уровне значимости p<0,01.

Изучение влияния культурального фильтрата бактерий-антагонистов, выделенных с садово-огородных почв Емельяновского района, на прорастание конидий гриба р. Fusarium (TIG6) показало, что наибольший токсический эффект проявили антагонисты: Д 24, Д14, Д15, Д20, Д16, Д23, Д11. Наименее активными оказались изоляты Д13, Д1, Д19, Д18, Д21, Д23, Д16. Культуральный фильтрат изолятов Д4, Д2, Д26, Д17, Д22, Д25 оказал стимулирующее действие на прорастание конидий возбудителя (рисунок 3.20).

Рисунок 3.20 - Изучение влияния культурального фильтрата бактерий-антагонистов, с садово-огородных почв Емельяновского района, на прорастание конидий гриба р. Fusarium (TIG6)

Различия между изолятами по антагонистической активности подтверждаются результатами дисперсионного анализа на уровне значимости p<0,01.

Изучение влияния культурального фильтрата бактерий-антагонистов, выделенных из почвы района Ветлужанки, на прорастание конидий гриба р. Fusarium (TIG6) показало, что наибольший токсический эффект проявили антагонисты: В2, В4, В7, В6, В12. Наименее активными оказались изоляты В1, В11, В9. Культуральный фильтрат изолятов В8, В3, В5, В10 оказал стимулирующее действие на прорастание конидий возбудителя (рисунок 3.21).



Рисунок 3.21 - Изучение влияния культурального фильтрата бактерий-антагонистов, выделенных из почвы района Ветлужанки, на прорастание конидий гриба р. Fusarium (TIG6).

Различия между изолятами по антагонистической активности подтверждаются результатами дисперсионного анализа на уровне значимости p<0,01.

Изучение влияния культурального фильтрата бактерий-антагонистов, выделенных из почвы под комнатными растениями, на прорастание конидий гриба р. Fusarium (TIG6) показало, что наибольшую активность проявляют изоляты: Ц7, Ц4, Ц1, Ц8. Наименее активными оказались изоляты Ц3, Ц2, Ц7, Ц5. Культуральный фильтрат изолята Ц6 оказал стимулирующее действие на прорастание конидий возбудителя (рисунок 3.22).



Рисунок 3.22 - Влияние культурального фильтрата антагонистов, выделенных из почвы под комнатными растениями, на прорастание конидий гриба р. Fusarium (TIG6)

Различия между изолятами по антагонистической активности подтверждаются результатами дисперсионного анализа на уровне значимости p<0,01.

Изучение влияния культурального фильтрата бактерий-антагонистов, выделенных с поля засеянного пшеницей Тулунская 12, на прорастание конидий гриба р. Fusarium (Y7ес) показало, что наибольшую активность проявляют изоляты: Т8, Т6, Т3, Т1, Т4, Т15, Т9. Наименее активными оказались изоляты Т7, Т5, Т2, Т16, Т11. Культуральный фильтрат изолята Т10 оказал стимулирующее действие на прорастание конидий возбудителя (рисунок 3.23).



Рисунок 3.23 - Изучение влияния культурального фильтрата бактерий-антагонистов, выделенных с поля засеянного пшеницей Тулунская 12, на прорастание конидий гриба р. Fusarium (Y7ес)

Различия между изолятами по антагонистической активности подтверждаются результатами дисперсионного анализа на уровне значимости p<0,01.

Изучение влияния культурального фильтрата бактерий-антагонистов, выделенных с садово-огородных почв Емельяновского района, на прорастание конидий гриба р. Fusarium (Y7ес) показало, что наибольший токсический эффект проявили антагонисты: Д1, Д14, Д15, Д19, Д18, Д17, Д16. Наименее активными оказались изоляты Д13, Д4, Д2, Д26, Д24, Д21, Д20, Д22, Д23, Д25, Д11, Д16 (рисунок 3.24).



Рисунок 3.24 - Изучение влияния культурального фильтрата бактерий-антагонистов, выделенных с садово-огородных почв Емельяновского района, на прорастание конидий гриба р. Fusarium (Y7ес)

Различия между изолятами по антагонистической активности подтверждаются результатами дисперсионного анализа на уровне значимости p<0,01.

Изучение влияния культурального фильтрата бактерий-антагонистов, выделенных из почвы района Ветлужанки, на прорастание конидий гриба р. Fusarium (Y7ес) показало, что наибольший токсический эффект проявили антагонисты: В1, В8, В2, В11, В4. Наименее активными оказались изоляты В3, В5, В10, В6, В9, В12. Культуральный фильтрат изолята В7 оказал стимулирующее действие на прорастание конидий возбудителя (рисунок 3.25).



Рисунок 3.25 - Изучение влияния культурального фильтрата бактерий-антагонистов, выделенных из почвы района Ветлужанки, на прорастание конидий гриба р. Fusarium (Y7ес)

Различия между изолятами по антагонистической активности подтверждаются результатами дисперсионного анализа на уровне значимости p<0,01.

Изучение влияния культурального фильтрата бактерий-антагонистов, выделенных из почвы под комнатными растениями, на прорастание конидий гриба р. Fusarium (Y7ес) показало, что наибольшую активность проявляют изоляты: Ц3, Ц2, Ц7, Ц5, Ц4, Ц8. Наименее активными оказались изоляты Ц6, Ц1 (рисунок 3.26).



Рисунок 3.26 - Изучение влияния культурального фильтрата бактерий-антагонистов, выделенных из почвы под комнатными растениями, на прорастание конидий гриба р. Fusarium (Y7ес)

Различия между изолятами по антагонистической активности подтверждаются результатами дисперсионного анализа на уровне значимости p<0,01.

Изучение влияния культурального фильтрата бактерий-антагонистов, выделенных с поля засеянного пшеницей Тулунская 12, на прорастание конидий гриба р. Fusarium (Т2ес) показало, что наибольшую активность проявляют изоляты: Т1, Т3, Т4, Т10, Т9. Наименее активными оказались изоляты Т7, Т8, Т6, Т4, Т2, Т 15, Т16, Т11, Т12. Культуральный фильтрат изолята Т5 оказал стимулирующее действие на прорастание конидий возбудителя (рисунок 3.27).



Рисунок 3.27 - Изучение влияния культурального фильтрата бактерий-антагонистов, выделенных с поля засеянного пшеницей Тулунская 12, на прорастание конидий гриба р. Fusarium (Т2ес)

Различия между изолятами по антагонистической активности подтверждаются результатами дисперсионного анализа на уровне значимости p<0,01.

Изучение влияния культурального фильтрата бактерий-антагонистов, выделенных с садово-огородных почв Емельяновского района, на прорастание конидий гриба р. Fusarium (Т2ес) показало, что наибольший токсический эффект проявили антагонисты: Д2, Д26, Д24 , Д14, Д19, Д18, Д20, Д17, Д16, Д23, Д11. Наименее активными оказались изоляты Д13, Д4, Д15, Д21, Д22, Д25. Культуральный фильтрат изолята Д1 оказал стимулирующее действие на прорастание конидий возбудителя (рисунок 3.28).



Рисунок 3.28 - Изучение влияния культурального фильтрата бактерий-антагонистов, выделенных с садово-огородных почв Емельяновского района, на прорастание конидий гриба р. Fusarium (Т2ес)

Различия между изолятами по антагонистической активности подтверждаются результатами дисперсионного анализа на уровне значимости p<0,01.

Изучение влияния культурального фильтрата бактерий-антагонистов, выделенных из почвы района Ветлужанки, на прорастание конидий гриба р. Fusarium (Т2ес) показало, что наибольший токсический эффект проявили антагонисты: В8, В2, В11, В4, В10, В7, В6, В9. Наименее активными оказались изоляты В1, В3, В5, В12 (рисунок 3.29).



Рисунок 3.29 - Изучение влияния культурального фильтрата бактерий-антагонистов, выделенных из почвы района Ветлужанки, на прорастание конидий гриба р. Fusarium (Т2ес)

Различия между изолятами по антагонистической активности подтверждаются результатами дисперсионного анализа на уровне значимости p<0,01.

Изучение влияния культурального фильтрата бактерий-антагонистов, выделенных из почвы под комнатными растениями, на прорастание конидий гриба р. Fusarium (Т2ес) показало, что наибольшую активность проявляют изоляты: Ц6, Ц5, Ц1, Ц8. Наименее активными оказались изоляты Ц3, Ц2, Ц7, Ц4 (рисунок 3.30).



Рисунок 3.30 - Изучение влияния культурального фильтрата бактерий-антагонистов, выделенных из почвы под комнатными растениями, на прорастание конидий гриба р. Fusarium (Т2ес)

Различия между изолятами по антагонистической активности подтверждаются результатами дисперсионного анализа на уровне значимости p<0,01.

Для выяснения влияния места отбора почвенных образцов на антагонистическую активность в отношении изучаемых тест-культур была проанализирована частота встречаемости антагонистов в различных почвенных образцах. Как видно из представленных данных, наибольшее число антагонистов, активных в отношении грибов р. Bipolaris выделилось из почвы, взятой с поля, засеянного пшеницей Тулунская-12 (рисунок 3.31).



Рисунок 3.31 - Встречаемость бактерий, проявляющих антагонистическую активность в отношении грибов р. Bipolaris, в различных почвах (% от общего числа выделенных из данной почвы изолятов): Тул.12 - почва, отобранная с поля, засеянного пшеницей Тулунская 12; Сад.-ог. - садово-огородная почва Емельяновского района; Ветл. - почва из района Ветлужанки; Ком. - почва под комнатными растениями

Рисунок 3.32 - Встречаемость бактерий, проявляющих антагонистическую активность в отношении грибов р. Fusarium штамм Y7ес, в различных почвах (% от общего числа выделенных из данной почвы изолятов): Тул.12 - почва, отобранная с поля, засеянного пшеницей Тулунская 12; Сад.-ог. - садово-огородная почва Емельяновского района; Ветл. - почва из района Ветлужанки; Ком. - почва под комнатными растениями

Наибольшее число антагонистов, активных в отношении грибов р. Fusarium штамм TIG6, выделилось из почвы под комнатными растениями (рисунок 3.33).

Рисунок 3.33 - Встречаемость бактерий, проявляющих антагонистическую активность в отношении грибов р. Fusarium штамм TIG6, в различных почвах (% от общего числа выделенных из данной почвы изолятов): Тул.12 - почва, отобранная с поля, засеянного пшеницей Тулунская 12; Сад.-ог. - садово-огородная почва Емельяновского района; Ветл. - почва из района Ветлужанки; Ком. - почва под комнатными растениями

Наибольшее число антагонистов, активных в отношении грибов р. Fusarium штамм Т2ес, выделилось из почвы, взятой в районе Ветлужанки (рисунок 3.34).

Рисунок 3.34 - Встречаемость бактерий, проявляющих антагонистическую активность в отношении грибов р. Fusarium штамм Т2ес, в различных почвах (% от общего числа выделенных из данной почвы изолятов): обозначения места взятия почвенных образцов смотри в рисунке 3.33

Тем не менее, дисперсионный анализ не выявил статистически достоверных различий между различными почвами по частоте встречаемости антагонистов в отношении использованных тест-культур.

Был также проведен сравнительный анализ биологической активности антагонистов, выделенных из различных почв. В анализ были включены только те штаммы, которые статистически достоверно подавляли прорастание конидий соответствующих тест-культур (приложение Г).

Не обнаружено статистически достоверных различий между средней активностью антагонистов, выделенных из различных почв, в отношении гриба р. Bipolaris. (таблица 3.1, рисунок 3.35).

Таблица 3.1 - Результаты однофакторного дисперсионного анализа влияния места отбора почвенных обрзцов на антагонистическую активность в отношении гриба р. Bipolaris

Источник вариации	SS	df	MS	F	P-Значение	F критическое
Между группами	3684,32	3	1228,10	1,77	0,1807964	3,04912362
Внутри групп	15197,69	22	690,80
Итого	18882,01	25

Рисунок 3.35 - Средняя активность антагонистов, выделенных из различных почв, в отношении гриба р. Bipolaris: обозначения места взятия почвенных образцов см. в рисунке 3.33

Не обнаружено статистически достоверных различий между средней активностью антагонистов, выделенных из различных почв, в отношении гриба р. Fusarium (TIG6) (таблица 3.2, рисунок 3.36).

Таблица 3.2 - Результаты однофакторного дисперсионного анализа влияния места отбора почвенных обрзцов на антагонистическую активность в отношении гриба р. Fusarium (TIG6)

Источник вариации	SS	df	MS	F	P-Значение	F критическое
Между группами	1273,18	3	424,39	0,62584	0,6050223	2,9912428
Внутри групп	16952,77	25	678,11
Итого	18225,96	28

Рисунок 3.36 - Средняя активность антагонистов, выделенных из различных почв, в отношении гриба р. Fusarium (TIG6): обозначения места взятия почвенных образцов см. в рисунке 3.33

Не обнаружено статистически достоверных различий между средней активностью антагонистов, выделенных из различных почв, в отношении гриба р. Fusarium (Т2ес) (таблица 3.3, рисунок 3.37).

Таблица 3.3 - Результаты однофакторного дисперсионного анализа влияния места отбора почвенных обрзцов на антагонистическую активность в отношении гриба р. Fusarium (Т2ес)

Источник вариации	SS	df	MS	F	P-Значение	F критическое
Между группами	127,03	3	42,34623	0,050522	0,9847537	2,85879
Внутри групп	31011,9	37	838,1605
Итого	31138,9	40

Рисунок 3.37 - Средняя активность антагонистов, выделенных из различных почв, в отношении гриба р. Fusarium (Т2ес): обозначения места взятия почвенных образцов см. в рисунке 3.33

Исключение составляют антагонисты, активные в отношении штамма Y7ес. Наибольшую активность проявили изоляты, выделенные из почвы из почвы под комнатными растениями, что статистически достоверно на уровне значимости р=0,001 (таблица 3.4, рисунок 3.38).

Таблица 3.4 - Результаты однофакторного дисперсионного анализа влияния места отбора почвенных обрзцов на антагонистическую активность в отношении гриба р. Fusarium (Y7ес)

Источник вариации	SS	df	MS	F	P-Значение	F критическое
Между группами	5349,27	3	1783,092	3,10066	0,039933978	2,891567874
Внутри групп	18977,23	33	575,0675
Итого	24326,5	36

Рисунок 3.38 - Средняя активность антагонистов, выделенных из различных почв, в отношении гриба р. Fusarium (Y7ес): обозначения места взятия почвенных образцов см. в рисунке 3.33

В настоящее время коллекция выделенных антагонистов передана на кафедру экологической генетики и биотехнологии для дальнейших исследований.

Выводы

1. В результате проведенных исследований выделено 49 штаммов микроорганизмов, проявляющих антагонистическую активность в отношении фитопатогенных грибов р. Fusarium и р. Bipolaris

2. Среди грибов наибольшую антагонистическую активность в отношении тест-культур проявили представители р. Penicillium (2 изолята) и р. Aspergillus (2 изолята). Среди бактерий-антагонистов преобладают предствители коринеформных бактерий, в том числе - р. Arthrobacter и р. Micobacterium, и актиномицеты. Обнаружены также представители р. Bacillus и р. Pseudomonas.

3. Обнаружены статистически достоверные различия между тест-культурами как по общей чувствительности к метаболитам выделенных антагонистов, так и по индивидуальной чувствительности к метаболитам отдельных штаммов антагонистов. Наибольшей чувствительностью к грибам-антагонистам обладают штаммы р. Fusarium TIG6, Z2-04, наименьшей - р. Fusarium T13m. Наибольшей чувствительностью к бактериям-антагонистам обладают штаммы р. Fusarium Y7ес и Т2ес, наименьшей - р. Bipolaris.

4. Среди грибов-антагонистов наибольший практический интерес представляет изолят А-5, эффективно подавляющий прорастание конидий всех тест-культур даже при разведении культурального фильтрата 1:7. Среди бактерий-антагонистов наибольший практический интерес представляют штаммы Т2, Т4, Т11, обладающие высокой активностью в отношении грибов р. Bipolaris, а также изоляты Т1 и Т9, высоко активные в отношении всех штаммов р. Fusarium.

5. Не обнаружено статистически достоверных различий между различными почвами по частоте встречаемости антагонистов в отношении использованных тест-культур, а также статистически достоверных различий между средней активностью антагонистов, выделенных из различных почв. Исключение составляют антагонисты, активные в отношении штамма Y7ес. Наибольшую активность в отношении данного штамма проявили изоляты, выделенные из почвы под комнатными растениями, что статистически достоверно на уровне значимости р=0,001.

Библиографический список

1. Абеленцев, В. И. Ассортимент протравителей - спектр фунгицидного действия, биологическая эффективность, проблемы, выбор препарата / В. И. Абеленцев // Достижения науки и техники АПК. -2006. -№ 9. - С . 48.

2. Айзенман, Б. Е. Антибиотичесике свойства бактерий / Б. Е. Айзенман. - Киев : Наукова думка, 1973. - 183 с.

3. Аникиев, В. В. Руководство к практическим занятиям по микробиологии / В. В. Аникиев, К. А. Лукомская. - М. : Просвещение, 1977. - 255 с.

4. Барахтянская, Н. Г. Биологические препараты для защиты зерновых / Н. Г. Барахтянская, Н. Г. Зубов // Защита растений. - 1986. - № 3. - С. 13.

5. Бартошевич, Ю. Э. Дифференциация микроорганизмов и биосинтез антибиотиков / Ю. Э. Бартошевич, П. Л. Заславская // Успехи микробиологии. - 1983. - Вып. 18. - С. 50-76.

6. Бенкен, А. А. Упрощенный способ диагностики гельминтоспориозной корневой гнили злаковых колосовых культур/ А. А. Бенкен, С. Д. Гришечкина, Л. К. Хацкевич // Микология и фитопатология. - 1988. - Т. 22. - Вып. 2. - С. 153-156.

7. Бенкен, А. А. Формирование почвенной инфекции обыкновенной корневой гнили ячменя / А. А. Бенкен, С. Д. Гришечкина, Л. К. Хацкевич // Микология и фитопатология. - 1990. - Т. 24. - Вып. 4. - С. 336-343.

8. Березова, Е. Ф. Миколитические бактерии в корневой системе растений / Е. Ф. Березова, А. Н. Наумова // Микробиология. - 1939. - Т. 8. - С. 695.

9. Билай, В. И. Ядовитые грибы на зерне хлебных злаков / В. И. Билай. - Киев :АН УССР, 1953. - 90 с.

10. Билай, В. И. Токсинообразующие микроскопические грибы и вызываемые ими заболевания человека и животных / В. И. Билай, Н. М. Пидопличко. - Киев : Наукова думка, 1970. - 298 с.

11. Билай, В. И. Исследования по физиологии фузариев / В. И. Билай, И. П. Брюхина, Л. А. Богомолова // Метаболиты почвенных микромицетов : сб. науч. тр. / Ин-т микробиологии и вирусологии им. акад. Д. К. Заболотного. - Киев, 1971. - С. 3-42.

12. Билай, В. И. Фузарии / В. И. Билай. - Киев : Наукова думка, 1977. -434 с.

13. Билай, В. И. Методы экспериментальной микологии / В. И. Билай. - Киев : Наукова думка, 1982. - 550 с.

14. Билай, В. И. Основы общей микологии / В. И. Билай. - Киев : Головное изд-во, 1986. - 392 с.

15. Биологическая защита растений / И. Т. Король, В. И. Сидляревич, Н. А. Таран. - Минск : Ураджай, 2000. - 414 с.

16. Биологическая защита растений / М. В. Штерншис, Ф. С. Джалилов. - М. : Колос, 2004. - 264 с.

17. Биологические и биорациональные средства защиты растений: Краткий справочник / В. Ф. Кобзарь. - Краснодар, 1995. - 42 с.

18. Бондаренко, А. И. Биологический метод защиты растений от заболеваний / А. И. Бондаренико, Л. Д. Буймистру, С. И. Николаева // Приминение биологических методов защиты растений в сельскохозяйственном производстве: Сборник научных трудов. - 1988. - С. 44-50.

19. Бондаренко, Н. В. Биологическая защита растений / Н. В. Бондаренко. - М. : Агропромиздат. 1986. - 276 с.

20. Буга, С. Ф. Защита зерновых культур от болезней в Белоруссии / С. Ф. Буга // Защита и карантин растений. - 2005. - № 2. - С. 18-20.

21. Бучнева, Г. Н. Грибы рода Fusarium на пшенице в Центрально-черноземном регионе России / Г. Н. Бучнева // Вестник защиты растений. -2004. - Вып. 3. - С. 46-50.

22. Ведров, Н. Г. Селекция и семеноводство яровой пшеницы в экстремальных условиях / Н. Г. Ведров. - Красноярск. : Изд-во Краснояр. гос. ун-та, 1984. - 240 с.

23. Гешеле, Э. Э. Болезни зерновых культур в Сибири / Э. Э. Гешеле. М. : Сельхозгиз, 1956. - 123 с.

24. Горленко, М. В. Сельскохозяйственная фитопатология / М. В. Горленко. - М. : Высшая школа, 1968. - 434 с.

25. Горьковенко, В. С. Гриб Bipolaris sorokiniana (Saac.) Shoem. в полевом севообороте / В. С. Горьковенко // Защита и карантин растений. - 2005 - № 8. - С. 32-33.

26. Гришечкина, С. Д. Фунгистическая активность различных подвидов Bacillus Thuringiensis / С. Д. Гришечкина // Микология и фитопатология. - 2002. - Вып. 1. - С. 58-65.

27. Громовых, Т. И. Trichoderma Harzianum Rifal Addr. Как фактор повышения устойчивости томатов к возбудителям корневой гнили / Т. И. Громовых, В. М. Гукасян, Т. И. Голованова // Микология и фитопатология. - 1990. - Т. 32. - Вып. 2. - С. 73-78.

28. Гукасян, В. М. Отношение непарного шелкопряда к криссталлоносным микроорганизмам / В. М. Гукасян // Биология и культивирования микроорганизмов : сб. науч. тр. / Ин-т леса и древесины СО АН СССР, Краснояр. отделение Всесоюзного микробиологического общества АН СССР, Ин-т физики СО АН СССР. - Красноярск, 1969. - С. 155-158.

29. Гутина, В. Н. Николай Александрович Красильников (1896-1973) / В. Н. Гутина. - М. : Наука, 1982. - 215 с.

30. Добрецов, А. Н. Борьба с головней и корневыми гнилями зерновых культур / А. Н. Добрецов. - Красноярск : Краснояр. книжное изд-во, 1960. - 35 с.

31. Дурынина, Е. П., и др. Почвенные фитопатогенные грибы / Е. П. Дурынина, Л. Л. Великанов. - М. : Изд-во МГУ, 1984. - 107 с.

32. Егоров, Н. С. Основы учения об антибиотиках / Н. С. Егоров. - М. : Высшая школа, 1969. - 479 с.

33. Егоров, Н. С. Руководство к практическим занятиям по сельскохозяйственной микробиологии / Н. С. Егоров. - М. : Изд-во МГУ, 1995. - 234 с.

34. . Егорова, Л. Н. Почвенные грибы Дальнего Востока: Гифомицеты / Л. Н. Егорова. - Ленинград : Наука, 1986. - 192 с.

35. Емцев, В. Т. Микробиология / В. Т. Емцев. - М. : Дрофа, 2005. - 445 с.

36. Жизнь растений. В 6 т. Т. 1. Бактерии и актиномицеты / Н. А. Красильников. - М. : Просвещение, 1974. - 474 с.

37. Жизнь растений. В 6 т. Т. 2. Грибы / М. В. Горленко. - М. : Просвещение, 1976. - 479 с.

38. Иващенко, В. Г. Экологический мониторинг возбудителей фузариоза семян зерновых культур на северо-западе России / В. Г. Иващенко, Н. П. Шипилова, И. Ю. Кирцидели // Микология и фитопатология. - 1997. - Вып. 2. - С. 64-69.

39. Игнатова, С. И., и др. Антагонисты патогенных микроорганизмов филлосферы / С. И. Игнатова, С. Ф. Багирова // Защита и карантин растений. - 1998. - № 2. - С. 62.

40. Исмаилов, В. Я. Биологический метод: прошлое, настоящее, будущее / В. Я. Исмаилов, В. Г. Коваленков, В. Д. Надыкта // Защита и карантин растений. - 2002. - № 3. - С. 13-16.

41. Калинина, К. В. Особенности микробных сукцессий в почве в зависимости от уровня влажности / К. В. Калинина, П. А. Кожевин, Д. Г. Звягинцев // Почвоведение. - 1997. - № 4. - С. 518-521.

42. Калько, Г. В. Ингибирование микробами-антагонистами фитопатогенного гриба Fusarium Oxysporum в торфогрунте / Г. В. Калько, Н. И. Воробьев, Т. М. Лагутина // Микология и фитопатология. - 2001. - Вып. 2. - С. 66-75.

43. Караджова, Л. В. Фузариозы полевых культур / Л. В. Караджова. - Кишинев : Штиинца, 1989. - 255 с.

44. Кипрушкина, Е. И. Биологическая защита сельскохозяйственной // Вестник защиты растений. - 2003. - Вып . 3. - С . 17-24.

45. Коваль, С. Ф. Влияние корневой гнили на чувствительность пшеницы к неблагоприятным абиотическим факторам / С. Ф. Коваль, В. З. Рогинский // Сиб. Вестник с.-х. науки. - 1977. - Вып. 3. - С. 44-51.

46. Козловская Н. В. Выделение и идентификация культур рода Mycobacterium - антагонистов фитопатогенной микрофлоры / Н. В. Козловская, И. О. Обгольцева, Е. П. Яковлева // Антибиотики и химиотерапия. - 1998. - N6. - С. 20-23.

47. Коробова, Л. Н. Приминение бактофита: и прибавка урожая, и оздоровление почвы / Л. Н. Коробова, Т. В. Гаврилец // Защита и карантин растений. - 2006. - № 4. - С. 47-48.

48. Коротяев, А. И. Физиологическая роль антибиотиков и механизм их антимикробного действия / А. И. Коротяев, А. А. Астапов, Э. В. Карасева // Успехи микробиологии. - 1970. - Вып. 6. - С. 199-210.

49. Коршунова, А. Ф. Вредная микрофлора корневой системы злаков / А. Ф. Коршунова // Тр. ВНИИЗР. - 1972. - Вып. 33. - С. 145-148.

50. Коршунова, А. Ф. Основные и вторичные возбудители корневых гнилей пшеницы / А. Ф. Коршунова // Бюлл. СибНИИХим. - 1973. - Вып. 8. - С. 6-8.

51. Коршунова, А. Ф. Корневые гнили зерновых в Сибири / А. Ф. Коршунова. - Ленинград : Колос, 1974. - 125 с.

52. Коршунова, А. Ф. Корневые гнили яровой пшеницы / А. Ф. Коршунова, С. М. Тупеневич, Г. А. Краева. - Ленинград : Колос, 1974. - 63 с.

53. Коршунова, А. Ф. Защита пшеницы от корневых гнилей / А. Ф. Коршунова, А. Е. Чумаков, Р. И. Щекочихина. - Ленинград : Колос, 1976. - 184 с.

54. Красильников, Н. А. О влиянии микроорганизмов на рост растений / Н. А. Красильников // Микробиология. - 1940. - Т. 9. - С. 412.

55. Красильников, Н. А. Актиномицеты-антагонисты и антибиотичесике вещества / Н. А. Красильников. - М. : Изд-во АН СССР, 1950. - 303 с.

56. Красильников, Н. А. О внутри- и межвидовом антагонизме у микроорганизмов / Н. А. Красильников. - М. : Изд-во АН СССР, 1951. - 77 с.

57. Красильников, Н. А. Микробы-антагонисты и антибиотические вещества в растениеводстве / Н. А. Красильников. - М. : Изд-во АН СССР, 1953. - 49 с.

58. Красильников, Н. А. Микробы, стимулирующие рост растения / Н. А. Красильников // Вестник с.- х.н. - 1958. - №7. - С. 52-62.

59. Красильников, Н. А. Современное состояние вопроса о применении антибиотиков и других метаболитов микробов в растениеводстве / Н. А. Красильников // Применение антибиотиков в растениеводстве: Тр. 1 Всессоюз. конф. по изучению и применению антибиотиков в растениеводстве. - Ереван, 1961. - С. 7-19.

60. Кузьмина, Л. Ю. Колонизация ризосферы яровой пшеницы бактериями рода Bacillus Cohn при бактеризации семян / Л. Ю. Кузьмина, А. И. Мелентьев // Микробиология. - 2003. - №2. - С. 268-274.

61. Кулдыбаев, М. М. Условия биосинтеза антибиотиков некоторыми актиномицетами-антагонистами грибов рода Fusarium / М. М. Кулдыбаев, Г. Ш. Сейкетов // Антибиотики, витамины и стимуляторы микробного происхождения : сб. науч. тр. / Ин-т микробиологии и вирусологии. - Алма-ата, 1974. - С. 51-56.

62. Ланкина, Е. П. Выделение почвенных грибов-антагонистов и анализ их антибиотической активности в отношении фитопатогенных грибов р. Fusarium и р. Bipolaris / Е. П. Ланкина // Современные тенденции развития АПК в России : мат-лы V Междунар. науч.-практ. конф. молодых ученых Сибирского федерального округа / Краснояр. гос. аграр. ун-т. - Красноярск, 2007. - С. 166-170.

63. Ланкина, Е. П. Выделение почвенных грибов-антагонистов и анализ их антибиотической активности в отношении фитопатогенных грибов р. Fusarium и р. Bipolaris / Е. П. Ланкина // Студенческая наука - взгляд в будущее: мат-лы Всероссийской студенческой научной конф. посвященной 55-летию ФГОУ ВПО «КрасГАУ» : состоялась 28.03.07. / Краснояр. гос. аграр. ун-т. - Красноярск, 2007.

64. Ланкина, Е. П. Скрининг почвенных бактерий-антагонистов к возбудителям гельминтоспориозной и фузариозной корневых гнилей / Е. П. Ланкина, С. В. Драчева // Студенческая наука - взгляд в будущее: мат-лы Всероссийской студенческой научной конф. посвященной 55-летию ФГОУ ВПО «КрасГАУ» : состоялась 28.03.07. / Краснояр. гос. аграр. ун-т. - Красноярск, 2007.

65. Лысак, Л. В. Микроорганизмы - стимуляторы и ингибиторы роста растений и животных / Л. В. Лысак // Микробиология. - 1990. - Т. 59. - Вып. 4. - С. 715.

66. Мазунина, В. И. Образование витаминов и стимулирующих веществ актиномицетами ризосферы кукурузы / В. И. Мазунина // Антибиотики, витамины и стимуляторы микробного происхождения : сб. науч. тр. / Ин-т микробиологии и вирусологии. - Алма-ата, 1974. - С. 134-137.

67. Мазунина, В. И. Стимулирующее действие культуральной жидкости актиномицета штамма 912 и витаминов группы В на рост сельскохозяйственных растений / В. И. Мазунина // Антибиотики, витамины и стимуляторы микробного происхождения : сб. науч. тр. / Ин-т микробиологии и вирусологии. - Алма-ата, 1974. - С. 138-141.

68. Мелентьев, А. И. Использование микроорганизмов для защиты сельскохозяйственных растений от болезней / А. И. Мелентьев, А. П. Кочемасова, Н. Ф. Галимзянова // Актуальные вопросы биотехнологии. - Уфа, 1990. - С. 4-13.

69. Мелентьев, А. И. Влияние температуры и влажности почвы на колонизацию ризосферы пшеницы бактериями Bacillus Cohn., антагонистами фитопатогенов / А. И. Мелентьев, Л. Ю. Кузьмина, Н. Ф. Галимзянова // Микробиология. - 2000. - № 3. - С. 426- 432.

70. Микробиологическая защита растений: Справочник / И. Т. Король. - М. Колос, 1993. - 79 с.

71. Минаева, О. М. Антагонистическое действие на фитопатогенные грибы и стимулирующее влияние на рост и развитие формальдегидутилизирующих бактерий Pseudomonas sp. B-6798 и их применение: Автореферат дис. … канд. биол. наук / О. М. Минаева. - Томск, 2007. - 23 с.

72. Мишустин, Е. Н. Химизация земледелия и задачи микробиологии / Е. Н. Мишустин // Успехи микробиологии. - 1971. - Вып. 7. - С. 186-195.

73. Монастырский, О. А. Разработка биопрепаратов для борьбы с токсигенными грибами / О. А. Монастырский // Защита и карантин растений. - 2004. - № 9. - С. 26-28.

74. Монастырский, О. А. Токсины фитопатогенных грибов / О. А. Монастырский // Защита и карантин растений. - 1996. - № 3. - С. 12-14.

75. Нахимовская, М. И. Антагонизм между актиномицетами и почвенными бактериями / М. И. Нахимовская // Микробиология. - 1937. - Т. 6. - С. 131.

76. Нахимовская, М. И. Антагонизм у бактерий / М. И. Нахимовская // Микробиология. - 1939. - Т. 8. - С. 1014.

77. Нефелова, М. В. Спорообразование и биосинтез антибиотиков полипептидов / М. В. Нефелова // Успехи микробиологии. - 1982. - Вып. 17. - С. 177-189.

78. Никуленко, Т. Ф. Токсины фитопатогенных грибов и их роль в развитии болезней растений / Т. Ф. Никуленко, Д. И. Чкаников. - М. : Изд-во ВНИИТЭИ, 1987. - 52 с.

79. Новикова, И. И. Испытание новых биопрепаратов в борьбе с фузариозом колоса / И. И. Новикова; В. Г.Иващенко // Микология и фитопатология. - 2001. - Т. 28. - Вып. 2. - С. 70-75.

80. Новогрудский Д. М. Использование микробов в борьбе с грибковыми заболеваниями культурных растений / Д. М. Новогрудский. - АН СССР, 1936. - С. 277.

81. Пересыпкин, В. Ф. Система мероприятий против болезней, вредителей и сорняков // Проблемы защиты растений от вредителей, болезней и сорняков / В. Ф. Пересыпкин, А. В. Воеводин, А. Е. Чумаков. - М. : Колос, 1979. - С. 79-84.

82. Полозова, И. А. Вредоносность гельминтоспориозно - фузариозной корневой гнили зерновых культур в Ленинградской облости / И. А. Полозова // Труды ЛСХИ. - Ленинград, 1981. - С. 53-55.

83. Попкова, К. В. Общая фитопатология / К. В. Попкова. - М. : Агропромиздат, 1979. - С. 210.

84. Потлайчук, В. И. Микрофлора семян яровой пшеницы и риса в различных условиях выращивания / В. И. Потлайчук, А. Я. Семенов // Бюл. ВНИИ защиты растений, 1977. - Вып. 40. - С. 40-44.

85. Пузырь, А. П. Особенности строения колоний Bacillus subtilis 2335 / А. П. Пузырь, О. А. Могильная, Т. Ю. Крылова // Микробиология. - 2000. - № 1. - С. 66-74.

86. Рогинский, В. З. К вопросу о физиологии яровой пшеницы, пораженной обыкновенной корневой гнилью / В. З. Рогинский, Р. А. Башмаков // Сибирский вестник с.-х. науки. - 1974. - Вып. 3. - С. 59-62.