Из приведённых данных видно, что незначительное понижение селенового статуса ведёт к тяжелым нарушениям сердечно-сосудистой системы. В экспериментах показано, что процент постишемического восстановления механической функции сердца в группе с добавлением селена выше, а показатели дегенерации ткани вследствие ишемии ниже по сравнению с контролем.

30-летние исследования А.Н. Кудрина и соавт. убедительно доказывают, что селенит натрия можно рассматривать в качестве регуляторного элемента жизнедеятельности клеток. Авторами показана выраженная эффективность селенита натрия при инфаркте миокарда. Наибольшее торможение ПОЛ и протекторное действие на мембраны кардиомиоцитов обнаружила комбинация селенита натрия и б-токоферола вследствие потенцирования эффектов. Под влиянием этих ингибиторов ПОЛ динамика выздоровления ускорялась при уменьшенных размерах рубца за счёт ограничения поражения миокарда в околоинфарктной зоне. Кроме того Кудриным и соавторами получены данные согласно которым селенит натрия и органические соединения селена способны устранять различные формы аритмий и смертельную фибрилляцию сердца, вызаваемую хлоридом кальция и гистамином. Авторы делают заключение, что селенит натрия, б-токоферол, убихинон и особенно их комбинации являются главной антиоксидантной системой организма, защищающей его от мембранной патологии при ишемии, гипоксии, ионизирующем излучении, интоксикации ССl₄, дистрофии [4, 138, 139].

По данным С.М. Николаева селенит натрия предохраняет миокардиальные клетки от разрушения, ограничивает периинфарктную зону, уменьшает размеры рубцов [3]. М.Д. Савиной и А.Н. Кудриным выявлен антиаритмический эффект селенита натрия на экспериментальных моделях аритмий [4]. Т.А. Венцславская и д.р. изучали эффекты препарата пипередин-этил-селенофена при экспериментальной аритмии сердца. Антиаритмическая активность сравнивалась с изотином (верапамил). Выявлено противоаритмическое действие вещества. Было установлено, что изоптин и пипередин-этил-селенофен, применённые в дозе 1 мг/кг для лечения нарушений ритма сердца, вызванных кальция хлоридом в дозе 125 мг/кг, вызывают во всех случаях лечебный эффект. При этом пиперидин-этил-селенофен восстанавливает ритм и его регуляторные механизмы значительно быстрее, чем изоптин. Выявлено кардиопротекторное действие селена на модели хронической нагрузки железом у мышей [140].

В эпидемиологических исследованиях отмечена обратная корреляция между уровнем селена в плазме и риском развития коронарной болезни сердца и атеросклероза. Снижение уровня селена в плазме коррелировало с увеличением свертываемости крови и повышением синтеза предшественников агрегации - эйкозаноидов, таких как тромбоксан А₂ и лейкотриены [141].

Селен оказывает влияние на биосинтез простагландинов. Отмечено значительное увеличение времени свертывания крови у людей, потреблявших ежедневно 700 мкг селена в виде селенита натрия в течение 6 недель [142]. Другой аспект влияния селена на метаболизм простагландинов - защита простагландиндегидрогеназы, ключевого фермента деградации простагландинов. При нормобарической гипероксии, активность этого фермента снижается, благодаря чему наблюдается сосудосуживающий эффект. Такая защита может быть осуществлена введением в диету крыс витамина Е в дозе 600 МЕ/кг (сохраняется около 50% активности простагландиндегидрогеназы ткани лёгких при кислородной экспозиции) или селена в дозе 100 мкг/кг массы тела [143].

Показано, что эндотелиальные клетки с высоким содержанием селена не ингибируют агрегацию тромбоцитов в присутствии ацетилсалициловой кислоты [144].

Б.И. Левшин выявил нормализующее влияние селенита натрия, селенофена 5, селенофена 6, на изофермент ЛДГ₅ и общую активность ЛДГ сыворотки крови. Препараты селена оказывают положительное влияние на показатели белкового, жирового и углеводного обмена при токсическом гепатите. Лечебно-профилактическое введение селенита натрия способствует некоторому ускорению регенерационных процессов в печени после её прижизненной частичной экстирпации, о чём свидетельствует более быстрое нарастание и увеличение содержания гликогена в печени [139, 145, 146, 147]. К.О. Шарипов выявил влияние органических производных селена в регуляции антиокислительных процессов в печени при экспериментальном токсическом гепатите [148].

Установлено, что при острых инфекционных заболеваниях уровень селена в сыворотке крови снижен. При этом отмечено, что максимальное снижение уровня селена отмечается у больных в тяжёлом клиническом состоянии [81, 149]. Показано, что одновременное обогащение рациона животных селенсодержащими дрожжами и витамином Е оказало стимулирующий эффект на В-систему иммунитета, выражающийся в увеличении количества антителобразующих клеток, и на митогенную активность Т-лимфоцитов. Иммуномодулирующий эффект соединений селена относят за счёт функции глутатионпероксидаз, которые обеспечивают восстановление гидроперекисей и других продуктов свободнорадикальных реакций и регулируют выход липоксигеназных и циклооксигеназных метаболитов арахидоновой кислоты [150, 151, 152].

Селен оказывает влияние на репродуктивную функцию. У всех изученных видов животных дефицит селена вызывает нарушение воспроизводительной функции. При дефиците селена самки крыс приносят всего 1-2 нежизнеспособных детёныша. Из всех органов яички содержат наибольшее количество селена. У сельскохозяйственных животных при применении добавок селенита натрия увеличивается рождаемость, улучшается выживаемость молодняка, снижается частота бесплодия. При дефиците селена течка, овуляция, оплодотворение и раннее развитие плода у овец протекают нормально, но на 3-4 неделе суягности эмбрионы погибают [153, 154, 155, 156].

Установлено, что половые гормоны, СТГ и эритропоэтин влияют на распределение селена в элементах крови. Процесс перераспределения селена под действием половых гормонов сопровождается изменениями иммунологических показателей крови [81, 156, 157, 158].

У селена описано радиопротекторное действие. Снижение уровня селена в сыворотке крови является характерной реакцией организма на облучение. Дополнительное введение неорганических соединений селена, в частности селенита натрия, с водой животным, подвергнутым облучению, приводило к увеличению средней продолжительности жизни и в значительной степени уменьшало частоту возникновения радиационно-индуцированных опухолей по сравнению с таковой у облучённых животных, не получавших селен [129, 130, 131, 132].

Препарат «Селена», получаемый из дрожжей и содержащий селен 100 мкг/таб. используется в качестве радиозащитного средства. Он обладает способностью уменьшать стимулирующее действие CCl₄ на перекисное окисление липидов, снижает достоверно перекисное окисление липидов в 1,5 раза, одновременно повышает уровень активности супероксиддисмутазы в 3 раза, статистически достоверно не изменяет уровень активности каталазы, повышает уровень селена в печени [159].

Роль селена при онкологических заболеваниях значительна. Противоопухолевая активность соединений селена пропорциональна их каталитической активности. Установлено, что в ряду различных соединении селена наибольшая активность наблюдается у селенотрисульфида глутатиона. Это соединение было запатентовано в качестве канцеростатического препарата в связи с его высокой цитотоксической активностью по отношению к клеткам карциномы лёгких, аденокарциномы ободочной кишки, меланомы, аденокарциномы молочной железы, глиомы, медуллобластомы, опухольтрансформированных фибробластов и кератиноцитов [160]. Вторым по активности соединением является селенит. Значительное количество работ посвящено изучению антимутагенности селенита натрия [161, 162]. Было сделано предположение, что высокие уровни селена в рационе животных могут стимулировать репарацию повреждённой ДНК, вызываемую канцерогеном [163, 164, 165].

Также есть данные об антиканцерогенном действии фармакологических доз селена. В сороковых годах 20 в была установлена его защитная роль в отношении химически индуцированных опухолевых клеток [166, 167], а в шестидесятых годах появились первые результаты, свидетельствующие об обратной связи между уровнем обеспеченности селеном населения и показателями смертности от онкологических заболеваний. Специфической особенностью онкологических заболеваний является накопление селена опухолью за счёт уменьшения его концентрации в мозге, сердце и мышцах. Расчёт коэффициента корреляции между величиной смертности и уровнем селена в сыворотке крови показал наличие обратной корреляции для лимфом, рака желудочно-кишечного тракта, лёгких, молочной железы, толстой и прямой кишки, печени. В большинстве исследований отмечалось, что высокие дозы селена снижают частоту развития опухолей в значительном числе случаев более чем на 35%. Клинические исследования в США показали, что у пожилых людей потребление селена снижает риск раковых заболеваний на 65% [168, 169, 170].

По расчётам ряда авторов, контингент людей, с низким содержанием селена (1,63 мкмоль/л) имеет в 2 раза больший риск заболеть раком, чем люди с высоким уровнем селена в организме (норма 1,72 мкмоль/л) [171, 171].

Показано, что селен стимулирует апоптоз - программируемая клеточная смерть. Это может предотвратить закрепление мутаций в последующих поколениях клеток. Этот эффект наблюдается при применении высоких доз селена и связан с хемозащитным действием микроэлемента [173, 174].

Противоопухолевое действие селена нельзя объяснить исключительно его участием в антиоксидантной системе GPX. Исключение предраковых генетически повреждённых клеток за счёт апоптоза представляется более эффективным в предотвращении рака, чем подавление пролиферации. Клинический эффект химических препаратов, большинство из которых ингибирует пролиферацию клеток, прекращается при отмене приёма лекарства. Агенты, индуцирующие апоптоз, такие как селен, могут обеспечивать более быструю защиту с меньшей токсичностью [81].

Известен ряд эффектов взаимодействия селена с витаминами и микроэлементами. Предполагают, что витамин С восстанавливает селенит до элементарного селена, а элементарная сера и селен легко соединяются, образуя сульфиды и селениды, содержащие два и более атомов серы или Se. Предполагается также, что Sec, посредством переноса электронов может соединяться с элементарным селеном с образованием селенсодержащих связей [81, 172].

Степень абсорбции селена зависит также в значительной степени от потребления в-каротина и, по-видимому, других жирорастворимых витаминов, аккумулирование которых организмом происходит в тонкой кишке [175].

Витамин Е является сильным антиоксидантом, однако для подавления перекисного окисления путём использования только витамина Е является недостаточным для ингибирования образования опухоли. В исследованиях было показано, что совместное применение витамина Е и селена более адекватно. Так при приёме в диете 2,5 мг/кг селена снижает общее число опухолей на 45% у животных, находящихся на адекватной по витамину Е диете и только на 24% при дефиците витамина Е. Высказываются предположения о том, что витамин Е и селен совместно обеспечивают антиоксидантную защиту по какому-то другому пути. Взаимосвязь между селеном и витамином Е так же объясняется их воздействием на различные этапы образования органических перекисей [81, 172].

Л.А. Кудрявцева (1964-1969) показала, что селен и витамин Е являются необходимыми компонентами обмена веществ у животных. Но витамин Е фармакологически менее активен, он только в больших дозах 100 мг/кг вызывает эффекты, сходные с таковыми при малых дозах селенита натрия 100мкг/кг. Это соотношение варьирует в отдельных случаях. Например, при экссудативном диатезе цыплят 1 молекула селена способна заменить 700-1000 молекул витамина Е. Также отмечено, что Se замедляет распад витаминов А и Е. А при недостатке селена снижается и общее содержание микроэлементов в организме. Селенит натрия в дозе, составляющей 1% от хронической токсической дозы (300-400 мкг/ 100г рациона), в 500 раз активнее витамина Е и в 250000 активнее б-цистеина при некротической дегенерации печени [176, 177].

Описано положительное действие селена в отношении ряда ксенобиотиков. Описано протективное действие в отношении нитратов. Так, у животных получавшие селен и нитраты в рационе отмечено увеличение концентрации селена в сыворотке крови при снижении концентрации метгемоглобина [177, 178, 179, 180, 181].

Выявлено защитное действие селена в отношении тяжёлых металлов. H₂Se способен вступать в реакцию с металлами, образуя нерастворимые комплексы, понижающие биологическую доступность селена и металла. Это взаимодействие лежит в основе снижения токсичности металлов повышенными дозами селена [182].

Селен проявляет защитное действие в отношении органических и неорганических соединений ртути. Так селенит натрия предотвращает некроз почек и снижает смертность, связанные с воздействием хлорида ртути и метилртути [183, 184]. Селен обеспечивает защиту от токсического действия кадмия, он полностью снимает его тератогенный эффект [185, 186].

Описано взаимодействие селена с мышьяком, который является антагонистом селена [187, 188]. В связи с тем, что свинец, олово, теллур имеют сходные структуры, они обладают аффинностью по отношению к соединениям серы и взаимодействуют с селеном. Экспериментальные данные указывают на возможность конкурентного действия селена и меди [189].

Образование биологически недоступных соединений селена с металлами объясняется способность серебра, кадмия и др. вызывать у животных вторичную недостаточность селена и блокировать синтез глутатионпероксидазы даже при рационах, содержащих адекватное количество селена [81].

В настоящее время всё большее количество работ посвящено исследованию взаимосвязи различных элементов в организме. Показано, что медь, цинк, селен и молибден вовлечены в значительное количество биохимических процессов [190]. Отмечено, что содержание крыс на полусинтетическом аминокислотном рационе с низким содержанием селена сопровождалось резким понижением уровня других микроэлементов, например цинка в клетках панкреатических отростков, в паренхиме почек и в клетках сперматогенного эпителия [153, 191].

Известно, что интенсивная физическая нагрузка определяет ускорение метаболических процессов, приводя к значительному оксидантному стрессу. Это состояние может быть нивелировано добавлением селена.

Изучение влияния препаратов селена на выносливость организма при физических нагрузках позволило выявить существование температурного эффекта действия селена. Так, при высоких температурах у животных получавших селен, выносливость была ниже на 35-38% (р<0,05), чем при низких температурах - увеличивалась почти на 200%. (р<0,05) по сравнению с контролем.

Явление селеновой активации работоспособности при низких температурах имеет особое значение в связи с известными данными о высоком уровне антиоксидантной защиты именно у полярных животных (северный медведь, тюлени, моржи и д.р.), в организме которых в пищевой метаболизм активно включены жиры, а также о повышенном метаболизме жиров у местного населения Севера (эскимосы, чукчи). Высокий уровень селена в сыворотке крови этих народов позволяет предполагать тесную взаимосвязь между указанными явлениями. Вероятно, что положительный эффект от приёма селена следует ожидать, когда организм с чисто углеводного обеспечения мышечных усилий переходит на более долговременные источники энергетического снабжения мускульных сокращений, т.е. в условиях переохлаждения и длительных мышечных перегрузок [81].

Таким образом, анализ литературных данных, посвящённый селенсодержащим соединениям, демонстрирует их разностороннем фармакологическом влияние на организм. Экспериментальные исследования и клинические наблюдения показали, что селениты благоприятно влияют на антиоксидантный статус организма, обладают кардиопротекторной, гепатопротекторной, радиопротекторной активностью, предотвращают или тормозят развитие опухолевых процессов, а также целого ряда заболеваний связанных с дефицитом селена. Однако действие селенитов на мозговой кровоток, динамику развития постишемических феноменов и психоневрологический статус остаётся неизученным.

Указанные обстоятельства и послужили основанием для сравнительного изучения влияния селенита натрия и селенита цинка на системную гемодинамику и мозговой кровоток в условиях нормы и при патологических состояниях.

ГЛАВА 2 МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

2.1 Изучение острой токсичности

Определение острой токсичности проводили на беспородных белых мышах обоего пола массой 20-25 г. Животные прошли карантин в течение 14 дней. Исследуемые вещества вводили внутрибрюшинно. Наблюдение за поведением и состоянием подопытных животных проводилось в течение 14 суток, при этом отмечали внешний вид, поведенческие реакции и количество погибших животных [192].

Классифицировали группу токсичности согласно К.К. Сидорову [193].

2.2 Регистрация мозгового кровотока методом водородного клиренса

Объемную скорость мозгового кровотока регистрировали методом водородного клиренса с помощью вживленного платинового электрода, расположенного на поверхности сагиттального синуса в области стока синусов.

Метод основан на скорости вымывания предварительно введенного водорода из мозговой ткани и позволяет определить объемную скорость мозгового кровотока. Положительными сторонами метода являются отсутствие травматизации сосудов мозга, стабильность показателей, индифферентность используемого газа.

На основе водородного клиренса регистрировали мозговой кровоток на наркотизированных крысах. Результаты оценивались по кривой изменения напряжения водорода на электроде полярографическим способом [10, 30, 59, 194, 195].

2.3 Регистрации параметров кардиогемодинамики с помощью компью-терной программы «Bioshell» на бодрствующих животных

Опыты проводились на белых крысах. Предварительно за 24 часа до начала эксперимента (хлоралгидрат 300 мг/кг, внутрибрюшинно) имплантировали полиэтиленовый катетер через правую сонную артерию [196]. Периферический конец катетера подкожно выводили на холку животного и фиксировали. Регистрацию данных производили с использованием одноразовых датчиков SP-01 (США) и компьютерной программы «Bioshell» в реальном масштабе времени на базе персональных компьютеров IBM AT 486 и Pentium-133 [197]. Анализировали следующие параметры кардиогемодинамики:

- артериальное давление

- частоту сердечных сокращений.

2.4 Методика оценки поведения животного в тесте «открытое поле»

Оценку влияния исследуемых соединений на ориентировочно исследовательскую и двигательную активность животных проводили в тесте «открытое поле». Предложенный Холлом метод "открытого поля" широко применяется в различных экспериментальных исследованиях, связанных с изучением поведения, психофармакологией.

Установка представляет собой круг диаметром 80 см, с бортиком 20 см, разделённый на 8 радиальных секторов и одним в центре. Тестируемое животное помещали в центральный сектор, спиной к экспериментатору. В течение 3 минут наблюдения регистрировали число пересечённых секторов (двигательная активность), вставание на задние лапы и число пересечённых центральных секторов (ориентировочно-исследовательская активность), количество стереотипных движений (груминг), эмоциональную активность (дефекация, уринация) [192, 198, 199, 200, 201].

2.5 Оценка координации движений

Координацию движений крыс оценивали в тесте вращающегося стержня. Крыс помещали на горизонтальный стержень диаметром 4 см, вращающийся со скоростью 3 об/мин. Неспособность животных удерживать равновесие на стержне в течение трёх минут рассматривали как проявление нарушения координации движений [192, 202].

2.6 Методика условного рефлекса пассивного избегания (УРПИ)

Данная модель предназначена для изучения процессов связанных с воспроизведением памятного следа. Оценку антиамнестического эффекта проводили по измерению латентного периода захода животного в тёмный отсек при воспроизведении навыка УРПИ. Выработку условной реакции пассивного избегания затемнённого отсека производили в экспериментальной камере, которая состояла из двух смежных отсеков, большого освещенного 60 на 60 см, и малого затемнённого (15х15см), снабжённого электродным полом.

Отсеки сообщались между собой с помощью четырёхугольного отверстия (8х8см). Крысу помещали на середину площадки светлого отсека, хвостом к тёмному отсеку и в течение трёх минут регистрировали латентный период первого захода в тёмный отсек. Животных, не заходивших в тёмную камеру, по истечение трёх минут из опыта исключали.

В тёмном отсеке животное получало через электрический пол однократное электроболевое раздражение электрическим током (40 в), состоящее из трёх импульсов длительностью 1 сек, следующих с интервалом 0,5 сек. Крыса считалась обученной, если в течение 30 сек после сеанса обучения она не заходила в тёмный отсек экспериментальной камеры. Тест на воспроизведение УРПИ осуществляли через 24 часа после обучения при повторном помещении животных в светлый отсек камеры и регистрации в течение трёх минут латентного периода первого захода в тёмный отсек, количества заходов и общего времени пребывания в тёмном отсеке. В модификации Буреш, Бурешова выработку условной реакции пассивного избегания затемнённого отсека также производили однократным электроболевым раздражением электрическим током (40 в), состоящим из 12 импульсов длительностью 1 сек, следующих с интервалом 5 сек. в течение минуты. Модификация Буреш, Бурешова позволяет судить о влияния исследуемых соединений на процесс фиксации обучения и консолидацию памяти (переход кратковременной памяти в долговременную) поскольку обучение проводили после ишемии, а также о степени неврологических нарушений, животных перенесших тотальную ишемию мозга, т.к. способ обучения не требует абсолютной выработки рефлекса избегания [192, 203].

2.7 Методы изучения противогипоксической активности

Для создания патологического фона, на котором изучалась эффективность исследуемых соединений, использовались различные модели циркуляторных гипоксий.

Нормобарическая гипоксия с гиперкапнией (т.н. «баночная гипоксия») является наиболее простым методом оценки антигипоксической активности. Животных одинакового веса (разброс не более 2 г на группу) помещали в герметически закрытые (крышки смазывали вазелином) банки 750 см³. Во всех случаях регистрировали время выживания (смерти) животных [202].

Циркуляторную гипоксию воспроизводили путём перевязки двух передних общих сонных артерий. Операция проводилась в асептических условиях с использованием наркоза хлоралгидрат, внутрибрюшинно, 300 мг/кг массы тела. За оперированными животными наблюдали в течение 3 суток с регистрацией числа выживших животных в опыте и контроле [192].

Следующую модель ишемии мозга создавали критическими гравитационными перегрузками в кранио-каудальном положении животных. Известно, что продольные гравитационные перегрузки, создаваемые центрифугой, вызывают нарушения кровоснабжения головного мозга, степень и характер которых зависит от величины и вектора ускорения.

Крысы помещались в отдельные продольные ячейки, объём ячеек соответствовал размеру животных и не давал возможности самопроизвольно отклоняться от заданного вектора ускорения.

Центрифуга представляет собой мотор с приводом установленный на станине. К приводу сверху крепится коромысло длиной 2,0 м, по краям которого расположены камеры для животных. Также имеется пульт управления, позволяющий контролировать число оборотов, градиент нарастания и спада перегрузок [204].

2.8 Методика воспроизведения постишемических цереброваскулярных феноменов

Для оценки действия исследуемых препаратов на динамику развития постишемических цереброваскулярных феноменов воспроизводили ишемию мозга путем двухсторонней окклюзии сонных артерий в течение 10-12 мин. при снижении САД до 40 мм рт.ст. После ишемии и реинфузии крови в артериальную систему животного осуществляли регистрацию скорости МК методом клиренса водорода [10, 30, 59, 194, 195].

2.9 Условия экспериментальных исследований

Экспериментальные исследования проведены на 236 крысах массой 200 -250 г обоего пола и 154 белых мышах массой 20-25г обоего пола. Исследовали неорганические производные селена: селенит натрия, селенит цинка.

В связи с тем, что селенит натрия и селенит цинка легкорастворим в воде в экспериментах использовали водные растворы. Растворы веществ готовили добавлением при перемешивании физиологического раствора (0,9% раствор натрия хлорида).

2.10 Статистическая обработка данных

В таблицах диссертации данные представлены в виде средних арифметических и ошибки среднеквадратичного отклонения. Исходные данные приведены в абсолютных значениях, а изменения, которые произошли после введения препаратов, приведены в процентном отношении к исходным показателям. Статистическую обработку полученных результатов производили по критерию Стьюдента [192]. Различия считались достоверными при уровне значимости р<0,05, р<0,01 для парных выборок по критерию Стьюдента.

ГЛАВА 3 ВЛИЯНИЕ СЕЛЕНИТА НАТРИЯ И СЕЛЕНИТА ЦИНКА НА ЦЕРЕБРАЛЬНУЮ ГЕМОДИНАМИКУ, СИСТЕМНОЕ АРТЕРИАЛЬНОЕ ДАВЛЕНИЕ И ЧАСТОТУ СЕРДЕЧНЫХ СОКРАЩЕНИЙ УСЛОВИЯХ ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОЙ НОРМЫ

Острые опыты проведены на 90 мышах массой 20 - 22 г и 48 крысах массой 200 - 250 г. Регистрацию объёмной скорости мозгового кровотока осуществляли методом водородного клиренса. Системное артериальное давление и частоту сердечных сокращений у бодрствующих животных проводили с использованием одноразовых датчиков SP-01 (США) и компьютерной программы Bioshell. Исследуемые вещества вводили в дозах 30, 50, 100 мкг/кг внутрибрюшинно.

3.1 Изучение острой токсичности исследуемых соединений

Определение острой токсичности селенита натрия, селенита цинка и расчёты LD₅₀ проводили по методу Кербера. Белым мышам (90 особей) массой 20-22 г, обоего пола селенит натрия и селенит цинка вводили в 0,5 мл изотонического раствора внутрибрюшинно в дозах 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8 мг/кг. Наблюдение за поведением и состоянием подопытных животных проводилось в течение 7 суток, при этом отмечали изменение внешнего вида, поведенческих реакций и количество погибших животных. Контрольной группе животных (10 особей) вводили физиологический раствор в эквивалентном объеме.

LD50 рассчитывали по формуле:

LD₅₀ = LD₁₀₀ - У (Z*D)/m, где

У - сумма.

Z - половина суммы числа животных павших от двух последующих доз;

D - интервал между каждыми двумя последующими дозами;

m - число животных на каждую дозу;

За время наблюдения в контрольной группе не погибло ни одного животного, а также не наблюдалось особых изменений во внешнем виде и поведении мышей.

В опытных группах количество погибших животных в зависимости от дозы приведено в таблицах 1 и 2.

Таблица 1 - Влияние различных доз селенита натрия на выживаемость животных

Доза селенита натрия мг/кг	Общее число животных в группе	Число павших животных	Z	D	Z*D
1	6	0	-	-	-
2	6	0	0	1	0
3	6	2	1	1	1
4	6	3	3.5	1	3.5
5	6	3	4.5	1	4.5
6	6	5	5.5	1	5.5
7	6	5	7.5	1	7.5
8	6	6	8	1	8

Отсюда LD50 составила:

LD₅₀ = 8 - (1,0+3,5+4,5+5,5+7,5+8,0) / 6 = 3 мг/кг

Результаты проведённых исследований показали, что согласно требованиям табуляции классов токсичности селенит натрия относится ко второму классу токсичности. LD50 составила 3 мг/кг.

Таблица 2 - Влияние различных доз селенита цинка на выживаемость животных

Доза селенита натрия мг/кг	Общее число животных в группе	Число павших животных	Z	D	Z*D
1	6	0	-	-	-
2	6	0	0	1	0
3	6	0	0	1	0
4	6	2	1	1	1
5	6	4	4	1	4
6	6	4	6	1	6
7	6	5	6.5	1	6.5
8	6	6	8	1	8

Отсюда LD50 составила:

LD₅₀ = 8 - (1,0+4,0+6,0+6,5+8,0) / 6 = 3,75 мг/кг

Результаты проведённых исследований показали, что согласно требованиям табуляции классов токсичности селенит цинка относится ко второму классу токсичности. LD50 составила 3,75мг/кг.

3.2 Влияние селенита натрия и селенита цинка на мозговой кровоток

Эксперименты проведены на 40 белых беспородных крысах, выращенных в стандартных условиях вивария, массой 200,0-230,0 г. В качестве наркоза использовали хлоралгидрат в дозе 300 мг/кг. Вещества вводили внутрибрюшинно, однократно, в виде изотонического раствора в дозах 100, 50 и 30 мкг/кг. МК регистрировали методом водородного клиренса. Полученные результаты сравнивали с исходными значениями МК.

Внутрибрюшинное введение селенита натрия в дозе 30 мкг/кг (6 опытов) вызывало достоверное снижение МК с первых минут эксперимента. Так, на 5 минуте наблюдения степень снижение МК составила 25%, а на 15 минуте - 41,2% по отношению к исходному уровню. В дальнейшем МК продолжал снижаться и на 60 минуте был ниже исходного уровня на 53,7±15,8% (таблица 3).

Таблица 3 - Динамика изменения скорости мозгового кровотока (МК) у белых крыс при введении селенита натрия в дозе 30 мкг/кг, (M±m, n=6, %)

Исходные данные	МК мл/100г/мин 153,0±66,3
Время после введения физиологического раствора	% от исходных данных
Через 5 мин	-25,0±19,4*
15 мин	-41,2±17,1*
30 мин	-46,0±10,6*
45 мин	-52,1±13,7*
60 мин	-53,7±15,8*

Примечание - достоверно относительно исходных данных, * р?0,05

Аналогично изменялся МК после введения селенита натрия в дозе 50 мкг/кг (6 опытов), однако степень его снижения была менее выраженной. На 5 минуте наблюдения МК был ниже исходного уровня на 28,1±13,1%, а к концу наблюдения - на 41,3±10,5% (таблица 4).

Таблица 4 - Динамика изменения скорости мозгового кровотока (МК) у белых крыс при введении селенита натрия в дозе 50 мкг/кг, (M±m, n=6, %)

Исходные данные	МК мл/100г/мин 114,4±30,4
Время после введения физиологического раствора	% от исходных данных
Через 5 мин	-28,1±13,1*
15 мин	-28,4±13,7
30 мин	-25,3±24,6
45 мин	-32,0±8,1*
60 мин	-41,3±10,5*

Примечание - достоверно относительно исходных данных, * р?0,05

При введении селенита натрия в дозе 100 мкг/кг (8 опытов) эффект также наступал с первых минут наблюдения, при этом снижение МК было достоверно ниже чем при введении селенита натрия в дозах 30 и 50 мкг/кг. Так, в ранние сроки наблюдения мозговой кровоток уменьшался незначительно (на 6-14%). К концу экспериментов на 60 минуте МК был меньше исходного уровня на 20,5±12,7% (таблица 5).

Таблица 5 - Динамика изменения скорости мозгового кровотока (МК) у белых крыс при введении селенита натрия в дозе 100 мкг/кг, (M±m, n=8, %)

Исходные данные	МК мл/100г/мин 184,6±59,6
Время после введения физиологического раствора	% от исходных данных
Через 5 мин	-6,6±4,6*
15 мин	-13,4±6,6*
30 мин	-16,2±15,9
45 мин	-22,0±11,1*
60 мин	-20,5±12,7*

Примечание - достоверно относительно исходных данных, * р?0,05

Суммарные результаты опытов представлены на рисунке 1.



Рисунок 1 - Динамика изменения МК у белых крыс при введении селенита натрия в дозах 30 мкг/кг, 50 мкг/кг, 100 мкг/кг

Примечание - достоверно относительно исходных данных, * р?0,05

По оси абсцисс - время наблюдения в минутах; по оси ординат - изменение мозгового кровотока в процентах от исходного уровня

Внутрибрюшинное введение селенита цинка в дозе 30 мкг/кг (6 опытов) вызывало достоверное снижение МК с первых минут эксперимента. Так, на 5 минуте наблюдения степень снижения МК составила 18,3%, по отношению к исходному уровню. В дальнейшем МК также сохранял тенденцию к снижению. К 30 минуте наблюдения МК был ниже исходного уровня в среднем на 39,8%. К 45 минуте МК опытных животных стабилизировался. Снижение по отношению к исходному уровню составило 38,6%. На 60 минуте наблюдения МК остался ниже исходного уровня на 39,9% (таблица 6).

Таблица 6 - Динамика изменения скорости мозгового кровотока (МК) у белых крыс при введении селенита цинка в дозе 30 мкг/кг, (M±m, n=6, %)

Исходные данные	МК мл/100г/мин 149,9±27,1
Время после введения физиологического раствора	% от исходных данных
Через 5 мин	-18,3±17,3*
15 мин	-24,3±10,9*
30 мин	-39,8±9,8*
45 мин	-38,6±15,3*
60 мин	-39,9±22,2*

Примечание - достоверно относительно исходных данных, * р?0,05

В опытах с внутрибрюшинным введением селенита цинка в дозе 50 мкг/кг также отмечалась тенденция к снижению МК. Однако достоверно МК снижался только на 45 минуте, степень его снижения составила в среднем 38,2% (таблица 7).

Таблица 7 - Динамика изменения скорости мозгового кровотока (МК) у белых крыс при введении селенита цинка в дозе 50 мкг/кг, (M±m, n=6, %)

Исходные данные	МК мл/100г/мин 86,7±19,1
Время после введения физиологического раствора	% от исходных данных
Через 5 мин	-14,6±22,4
15 мин	-29,5±21,2
30 мин	-32,1±27,2
45 мин	-38,2±21,5*
60 мин	-39,8±27,5

Примечание - достоверно относительно исходных данных, * р?0,05

При введении селенита цинка в дозе 100 мкг/кг (8 опытов) выраженный вазоконстрикторный эффект наступал с первых минут наблюдения, при этом степень снижения МК к концу наблюдения была ниже, чем при введении селенита цинка в дозах 30 и 50 мкг/кг. Так, на 5 минуте наблюдения отмечалось достоверное снижение МК на 24,0±18,3%. Наиболее выраженная вазоконстрикторная реакция наблюдалась на 15 минуте, когда МК был в среднем на 30,7% ниже исходного уровня. В дальнейшем величина МК не изменялась (таблица 8).

Таблица 8 - Динамика изменения скорости мозгового кровотока (МК) у белых крыс при введении селенита цинка в дозе 100 мкг/кг, (M±m, n=8, %)

Исходные данные	МК мл/100г/мин 101,2±22,3
Время после введения физиологического раствора	% от исходных данных
Через 5 мин	-24,0±18,3*
15 мин	-30,7±17,1*
30 мин	-29,1±13,2*
45 мин	-25,4±17,3*
60 мин	-27,4±15,0*

Примечание - достоверно относительно исходных данных, * р?0,05

Данные о влиянии различных доз селенита цинка на мозговой кровоток представлены на рисунке 2.



Примечание - достоверно относительно исходных данных, * - р?0,05

По оси абсцисс - время наблюдения в минутах; по оси ординат - изменение мозгового кровотока в процентах от исходного уровня

Рисунок 2 - Динамика изменения МК у белых крыс при введении селенита цинка в дозах 30мкг/кг, 50 мкг/кг, 100 мкг/кг

3.3 Влияние селенита натрия и селенита цинка на артериальное давление и частоту сердечных сокращений у бодрствующих крыс

Известно, что снижение уровня артериального давления, а следовательно, и перфузионнного давления у больных с ишемическим инсультом, вызывает дальнейшее ухудшение ишемизированных областей мозга. Поэтому нейропротекторы не должны обладать выраженным гипотензивным эффектом и не вызывать существенного изменения ЧСС. В связи с этим следующим этапом нашей работы было изучение влияния исследуемых веществ на САД и ЧСС.

Эксперименты проведены на 12 бодрствующих нормотензивных крысах обоего пола, массой 220 - 250г. Предварительно за 24 - 48 часов до начала эксперимента под хлоралгидратным наркозом (300 мг/кг, внутрибрюшинно) имплантировали полиэтиленовый катетер в сонную артерию. Регистрацию данных у бодрствующих крыс производили с использованием одноразовых датчиков SP-01 (США) и компьютерной программы “Bioshell 1.00” в реальном масштабе времени на базе персонального компьютера IBM AT 486 [202]. Длительность регистрации показателей составляла 60 минут с момента введения исследуемого вещества. Исследуемые соединения вводили внутрибрюшинно, однократно в дозе 100 мкг/кг, поскольку в этой дозе в меньшей степени снижался мозговой кровоток.

Внутрибрюшинное введение селенита натрия и селенита цинка в дозе 100 мкг/кг (6 опытов) не вызывало достоверного изменения АД по сравнению с исходным уровнем у бодрствующих животных в течение всего срока наблюдения. Однако необходимо отметить, что при введении селенита натрия отмечалась некоторая тенденция к снижению АД на 6%, а при введении селенита цинка - незначительное увеличение АД в среднем на 6%.

Результаты экспериментов представлены на рисунке 3 и в таблицах 9, 10.

Примечание - достоверно относительно исходных данных, * - р?0,05

По оси абсцисс - время наблюдения в минутах; по оси ординат - артериального давления в процентах от исходного уровня

Рисунок 3 - Влияние селенита натрия и селенита цинка (100 мкг/кг) на системное АД у бодрствующих крыс (M±m, n=6, %)

Таблица 9 - Динамика изменения АД у белых крыс при введении селенита натрия в дозе 100 мкг/кг, (M±m, n=6, %) в бодрствующем состоянии

Исходные данные мм. рт. ст.	108,7±13,6
Время после введения вещества	% от исходных данных	Абсолютные значения
Через 5 мин	1,2±6,7	110,0±18,6
10 мин	0,0±5,7	108,7±24,1
15 мин	-1,1±5,9	107,5±27,6
20 мин	-2,3±7,1	106,2±21,1
25 мин	-4,2±6,9	104,2±20,7
30 мин	-4,0±7,3	104,3±24,2
35 мин	-2,8±7,6	105,7±30,1
40 мин	-3,4±9,5	105,0±26,8
45 мин	-5,1±10,8	103,2±20,1
50 мин	-6,0±11,6	102,2±22,9
55 мин	-7,1±11,6	101,0±18,1
60 мин	-6,0±13,8	102,2±18,5

Примечание - достоверно относительно исходных данных, *- р?0,05

Таблица 10 - Динамика изменения АД у белых крыс при введении селенита цинка в дозе 100 мкг/кг, (M±m, n=6, %) в бодрствующем состоянии

Исходные данные мм. рт. ст.	92,0±20,8
Время после введения вещества	% от исходных данных	Абсолютные значения
Через 5 мин	6,0±19,1	97,5±18,6
10 мин	3,8±25,2	95,5±24,1
15 мин	4,0±28,9	95,7±27,6
20 мин	5,4±21,7	97,0±21,1
25 мин	7,2±20,9	98,7±20,7
30 мин	0,4±26,2	92,3±24,2
35 мин	0,5±32,6	92,5±30,1
40 мин	-4,2±30,4	88,2±26,8
45 мин	4,0±21,0	95,7±20,1
50 мин	1,3±24,6	93,2±22,9
55 мин	8,9±18,0	100,2±18,1
60 мин	6,3±19,0	97,8±18,5

Примечание - достоверно относительно исходных данных, * - р?0,05

Внутрибрюшинное введение селенита натрия и селенита цинка в дозе 100 мкг/кг (6 опытов) не вызывало достоверного изменения ЧСС по сравнению с исходным уровнем у бодрствующих животных в течение всего срока наблюдения. Однако необходимо отметить, что при введении селенитов отмечалась тенденция к некоторому увеличению ЧСС в среднем на 6%.

Результаты экспериментов представлены в таблицах 11, 12.

Таблица 11 - Динамика изменения ЧСС у белых бодрствующих крыс при введении селенита натрия в дозе 100 мкг/кг, (M±m, n=6, %)

Исходные данные уд/мин	392,3±39,5
Время после введения вещества	% от исходных данных	Абсолютные значения
Через 5 мин	2,1±11,2	400,5±45,0
10 мин	2,6±11,0	402,3±44,1
15 мин	1,3±10,6	397,5±42,1
20 мин	5,7±10,3	414,7±42,8
25 мин	4,6±9,8	410,5±40,4
30 мин	6,1±11,1	416,2±46,0
35 мин	5,1±10,9	412,3±44,9
40 мин	3,3±10,4	405,2±42,2
45 мин	4,3±9,9	409,0±40,4
50 мин	4,0±10,2	408,2±41,7
55 мин	5,0±9,2	411,8±37,8
60 мин	2,8±10,6	403,3±42,7

Примечание - достоверно относительно исходных данных, * - р?0,05

Таблица 12 - Динамика изменения ЧСС у белых бодрствующих крыс при введении селенита цинка в дозе 100 мкг/кг, (M±m, n=6, %)

Исходные данные уд/мин	363,0±52,3
Время после введения вещества	% от исходных данных	Абсолютные значения
Через 5 мин	4,5±11,9	379,5±45,1
10 мин	6,9±12,6	388,0±49,1
15 мин	8,2±10,1	392,8±39,7
20 мин	5,7±6,6	383,8±25,3
25 мин	11,0±12,6	402,8±50,8
30 мин	5,6±15,9	383,3±60,9
35 мин	0,4±18,7	364,5±68,2
40 мин	2,2±15,2	370,8±56,2
45 мин	5,9±13,4	384,3±51,3
50 мин	4,0±11,8	377,7±44,4
55 мин	3,9±5,7	377,2±21,5
60 мин	6,1±7,4	385,0±28,7

Примечание - достоверно относительно исходных данных, * - р?0,05

Выводы по главе 3:

1. Результаты изучения острой токсичности показали, что селенит натрия при введении в брюшную полость по К.К. Сидорову относится ко второму классу токсичности.

2. Селенит цинка по классификации токсичности веществ при введении в брюшную полость по К.К. Сидорову относится ко второму классу токсичности.

3. Селенит натрия и селенит цинка в дозах 30 мкг/кг, 50 мкг/кг и 100 мкг/кг достоверно снижают уровень МК у наркотизированных интактных крыс. С увеличением дозы исследуемых соединений степень снижения МК уменьшается.

4. Селенит натрия и селенит цинка не оказывают существенного влияния на АД и ЧСС бодрствующих белых крыс в дозе 100 мкг/кг.

ГЛАВА 4 ВЛИЯНИЕ СЕЛЕНИТА НАТРИЯ И СЕЛЕНИТА ЦИНКА НА ПСИХОНЕВРОЛОГИЧЕСКИЙ СТАТУС ЖИВОТНЫХ В УСЛОВИЯХ ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОЙ НОРМЫ

Одним из проявлений сосудистой патологии мозга является нарушение психоневрологического статуса. Для его восстановления используют ноотропные препараты. Однако вещества применяемые в настоящее время для лечения неврологического дефицита, имеют ряд ограничений и недостатков. Поэтому весьма актуальным представляется изучить вопрос о возможности коррекции нарушений поведения, памяти, эмоционального статуса, тревожных расстройств с помощью селенита натрия и селенита цинка. На первом этапе исследования изучали ориентировочно-исследовательскую, двигательную и эмоциональную активность, мнестические функции и координацию движений у интактных животных.

4.1 Изучение влияния селенита натрия и селенита цинка на познавательную, двигательную и эмоциональную активность

Опыты выполнены на 18 белых крысах обоего пола массой 200 - 250 г. Селенит натрия и селенит цинка вводили в виде изотонического раствора внутрибрюшинно за 50 - 60 минут до проведения эксперимента в дозе 100 мкг/кг. В контрольных опытах, в тех же условиях, вводили физиологический раствор. В каждой группе животных проводилось тестирование психоневрологического статуса. В течение 3-х минут пребывания крысы в «открытом поле» регистрировали двигательную активность (число пересечённых секторов), ориентировочно-исследовательскую активность (вставание на задние лапы) и эмоциональный статус (количество стереотипных движений - груминг, фекальных болюсов).

Исследование проводили на 2, 4 и затем на 7 сутки после первой инъекции исследуемых веществ. Это позволило следить за динамикой изменений психоневрологического статуса ишемизированных животных. Эсперименталь-ные данные статически обработаны и представлены в таблицах 13 - 15.

Таблица 13 - Показатели психоневрологического статуса животных в контрольной серии опытов

Время эксперимента (сутки)	Исследуемые вещества	Кол-во пройденных секторов	Кол-во стоек	Дефекация	Число уринаций	Груминг	Кол-во пройденных центральных секторов
2 день	контроль	16,0 ± 1,6	6,8 ± 1,2	3,7 ± 1,4	0,3 ± 0,3	0,5 ± 0,5	0,7 ± 0,3
4 день	контроль	13,5 ± 2,4	4,3 ± 1,0	2,0 ± 1,4	0,5 ± 0,3	1,8 ± 0,5	0,3 ± 0,3
7 день	контроль	15,7 ± 2,0	6,8 ± 1,1	1,5 ± 1,0	0,0 ± 0,0	1,7 ± 0,6	0,7 ± 0,2

Таблица 14 - Показатели психоневрологического статуса в группе животных с предварительным введением селенита натрия в дозе 100 мкг/кг

Время эксперимента (сутки)	Исследуемые вещества	Кол-во пройденных секторов	Кол-во стоек	Дефекация	Число уринаций	Груминг	Кол-во пройденных центральных секторов
2 день	Селенит натрия	15,7 ± 1,2	5,2 ± 0,6	2,7 ± 0,6	0,5 ± 0,3	1,0 ± 0,4	0,3 ± 0,2
4 день	Селенит натрия	14,8 ± 1,2	4,7 ± 1,1	2,5 ± 0,8	0,3 ± 0,2	0,8 ± 0,4	0,5 ± 0,3
7 день	Селенит натрия	16,2 ± 1,1	5,7 ± 0,9	1,8 ± 0,7	0,3 ± 0,2	1,3 ± 0,6	0,3 ± 0,2

Примечание - достоверно относительно контрольных данных, * р?0,05

Таблица 15 - Показатели психоневрологического статуса животных с предварительным введением селенита цинка в дозе 100 мкг/кг

Время эксперимента (сутки)	Исследуемые вещества	Кол-во пройденных секторов	Кол-во стоек	Дефекация	Число уринаций	Груминг	Кол-во пройденных центральных секторов
2 день	Селенит цинка	15,8 ± 1,6	7,0 ± 0,9	3,3 ± 0,6	0,8 ± 0,3	1,5 ± 0,6	0,7 ± 0,4
4 день	Селенит цинка	15,0 ± 1,9	4,5 ± 1,0	2,3 ± 0,8	0,5 ± 0,3	1,2 ± 0,5	0,7 ± 0,3
7 день	Селенит цинка	16,0 ± 2,1	6,3 ± 0,8	2,0 ± 0,6	0,2 ± 0,2	0,8 ± 0,3	0,7 ± 0,3

Примечание - достоверно относительно контрольных данных, * р?0,05

Результаты проведённых исследований не выявили существенных отличий между данными контрольной серии опытов и в тестах с предварительным введением селенита натрия и селенита цинка. В динамике изменений во всех экспериментальных группах отмечается тенденция к снижению уровня эмоциональной тревожности, при этом уровень двигательной и познавательной активности варьировал незначительно, однако также несколько снижался. Данный эффект по-видимому связан с привыканием животных к обстановке эксперимента.

4.2 Изучение влияния исследуемых соединений на процессы памяти и обучения

Опыты проведены на 18 белых крысах обоего пола массой 200 - 250 г. Селенит натрия и селенит цинка вводили внутрибрюшинно за 50 - 60 минут до проведения эксперимента в дозе 100 мкг/кг. В контрольных опытах в тех же условиях вводили физиологический раствор. Обучение животных проводили за 24 часа до первой инъекции исследуемых веществ. В каждой группе из 6 животных проводили тест на воспроизведение УРПИ. При помещении животных в экспериментальную установку регистрировали латентный период захода (ЛПЗ) крысы в тёмную камеру и время пребывания в этой камере в течение 3 минут. Для изучения влияния селенита натрия и селенита цинка на мнестические функции в динамике исследование проводили на 2, 4 и затем на 7 сутки после первой инъекции исследуемых веществ. Полученные экспериментальные данные статически обработаны и представлены в таблицах 16 и 17.

Таблица 16 - Оценка ЛПЗ у белых крыс

Исследуемые вещества	Дозы, мкг/кг	Кол-во животных	Латентный период первого захода крыс в тёмный отсек в сек.
			2 день	4 день	7 день
Физ. раствор	6	128,3±21,7	115,0±18,3	120,8±15,8
Селенит натрия	100	6	122,5±20,0	117,5±28,3	124,2±37,2
Селенит цинка	100	6	119,2±22,8	120,2±17,5	117,5±25,8

Примечание - достоверно относительно контрольных данных, * р?0,05

Таблица 17 - Оценка времени пребывания белых крыс в тёмном отсеке

Исследуемые вещества	Дозы, мкг/кг	Кол-во животных	Время пребывания крыс в тёмном отсеке в сек.
			2 день	4 день	7 день
Физ. раствор	6	19,2±7,5	20,8±7,8	16,7±8,3
Селенит натрия	100	6	18,3±8,3	20,0±11,7	15,0±11,7
Селенит цинка	100	6	20,0±11,7	20,8±11,1	17,5±10,0

Примечание - достоверно относительно контрольных данных, * р?0,05

Полученные результаты свидетельствуют о том, что исследуемые соединения в условиях экспериментальной нормы не оказывают существенного влияния на процессы памяти и обучения белых крыс.

4.3 Влияние селенита натрия и селенита цинка на координацию движений

В эксперименте были использованы белые крысы обоего пола массой 200 - 250 г. Селенит натрия и селенит цинка вводили внутрибрюшинно в дозе 100 мкг/кг за 60 минут до проведения эксперимента. В контрольных опытах в тех же условиях вводили физиологический раствор. В каждой группе животных проводилась оценка координации движений.

Крыс помещали на горизонтальный стержень диаметром 4 см, вращающийся со скоростью 3 об/мин. Неспособность животных удерживать равновесие на стержне в течение трёх минут рассматривали как проявление нарушения координации движений. Для изучения координации движений в динамике исследование проводили на 2, 4 и затем на 7 сутки после первой инъекции исследуемых веществ.

Полученные экспериментальные данные статически обработаны и представлены в таблице 18.

Таблица 18 - Влияние селенита натрия и селенита цинка (100 мкг/кг) на координацию движений белых крыс

Исследуемые вещества	Дозы, мкг/кг	Кол-во животных	Кол-во животных оставшихся на стержне
			2 день	4 день	7 день
			Абс.	%	Абс.	%	Абс.	%
Физ. раствор	8	4	50,0	5	62,5	5	62,5
Селенит натрия	100	8	5	62,5	6	75,0	6	75,0
Селенит цинка	100	8	4	50,0	5	62,5	5	62,5

Примечание - достоверно относительно контрольных данных, * р?0,05

Результаты проведённых исследований показали, что селенит натрия и селенит цинка не оказывают существенного влияния на координацию движений интактных животных.

Выводы по главе 4

В тесте «открытое поле» селенит натрия и селенит цинка не вызывают существенных изменений двигательной, ориентировочно-исследовательской и эмоциональной активности животных.

В условиях теста УРПИ установлено, что изучаемые соединения не влияют на процессы обучения и памяти у интактных животных.

Селенит натрия и селенит цинка не влияют на координацию движений белых крыс в условиях экспериментальной нормы.

ГЛАВА 5 ИЗУЧЕНИЕ ПРОТИВОГИПОКСИЧЕСКОЙ АКТИВНОСТИ ИССЛЕДУЕМЫХ СОЕДИНЕНИЙ И ИХ ЭФФЕКТИВНОСТИ В УСЛОВИЯХ ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНЫХ ЦЕРЕБРОВАСКУЛЯРНЫХ РАССТРОЙСТВ

В патогенезе органических повреждений головного мозга ведущее значение принадлежит циркуляторным расстройствам. При ишемии головного мозга вследствие уменьшения кровотока ограничивается поступление в ткань кислорода. Происходит нарушение дыхательной цепи митохондрий с повышением уровня восстановленности её компонентов. При этом резко возрастает поток свободных электронов, приводящий к образованию АКФ. В дальнейшем при углублении ишемии нарушаются все жизненно важные функции клетки, усиливаются процессы свободнорадикального окисления, развивается состояние «оксидантного стресса».

Представляло интерес изучить влияние исследуемых соединений на выживаемость животных в условиях нормобарической гипоксии с гиперкапнией, а также на устойчивость белых крыс к циркуляторной гипоксии, вызванной билатеральной окклюзией общих сонных артерий и критическими гравитационными перегрузками.

Учитывая наличие выраженного антиоксидантного действия у селенитов следующим этапом нашего исследования было изучение влияния исследуемых соединений на динамику развития постишемических цереброваскулярных феноменов.

5.1 Влияние селенита натрия и селенита цинка на устойчивость животных к гипоксической гипоксии

Эксперименты проведены на 70 белых беспородных мышах обоего пола массой 23 - 25 г, выращенных в стандартных условиях вивария. Критерием эффективности антигипоксического действия была продолжительность жизни животных. Исследуемые вещества вводили однократно внутрибрюшинно за 10 - 15 минут до начала эксперимента в дозах 30, 50 и 100 мкг/кг. Контролем служил физиологический раствор, вводимый в эквивалентном объеме. Статистика проводилась с помощью «критерия ранговых знаков Уилкоксона» и подтверждена статистикой «критерием знаков» (таблица 19).

Таблица 19 - Влияние селенита натрия и селенита цинка на продолжительность жизни мышей в условиях нормобарической гипоксии (M±m, %)

Исследуемые вещества	Дозы, мкг/кг	Кол-во животных	Среднее время жизни
			минуты	% от контроля
Физ. раствор	10	57,0±9,0	---
Селенит натрия	30	10	69,5±22,3*	+21,9%*
	50	10	64,5±8,5**	+13,2%**
	100	10	58,5±7,5	+2,6%
Селенит цинка	30	10	81,5±24,8*	+43,0%**
	50	10	67,5±17,0*	+18,4%*
	100	10	59,0±8,8	+3,5%

Примечание

1 * - достоверно относительно физ. раствора; р?0,05

2 ** - достоверно относительно физ. раствора; р?0,01

Полученные результаты исследований позволяют утверждать, что селенит натрия и селенит цинка достоверно увеличивают продолжительность жизни животных в условиях нормобарической гипоксии в сравнении с контролем в дозах 30 мкг/кг и 50мкг/кг. Так, при предварительном введении селенита натрия в дозе 30 мкг/кг средняя продолжительность жизни мышей увеличилась на 21,9% по отношению к контролю. В дозе 50 мкг/кг время жизни возросло на 13,2%.При введении селенита натрия в дозе 100 мкг/кг продолжительность жизни белых мышей достоверно не изменялась по сравнению с животным контрольной группы. Более выраженный антигипоксический эффект оказывал селенит цинка. Введение селенита цинка в дозе 30 мкг/кг увеличивало продолжительность жизни животных на 43%. С увеличением дозы антигипоксический эффект селенита цинка уменьшался. Продолжительность жизни белых мышей увеличивалась на 18, 4% при введении селенита цинка в дозе 50 мкг/кг и практически не изменялась при его введении в дозе 100 мкг/кг (рисунок 4).