Лейкемоидные реакции. Ретикулоциты

Практическая работа №3

Проведите подсчет ретикулоцитов и расшифруйте результат

Ретикулоциты в мазке крови

Молодые ретикулоциты содержат небольшое количество гемоглобина и при окраске обычными гематологическими методами (например, по Романовскому-Гимзе) окрашиваются как кислыми, так и основными красителями и выглядят в мазке как полихроматофильные эритроциты.

Метод 1

Приготовленные в практической работе№2 мазки микроскопируют с иммерсионным объективом. Подсчитывают 1000 эритроцитов и отмечают среди них количество ретикулоцитов. Результат выражают в ‰.

Подсчет содержания ретикулоцитов в процентах производится по формуле

где: RET% -- содержание ретикулоцитов в %, А -- количество ретикулоцитов, выраженное в ‰, B -- количество подсчитанных эритроцитов (1000).

У здоровых людей число ретикулоцитов в крови составляет 2-12‰, или 0,2-1,2%

Метод 2

Для облегчения подсчета ретикулоцитов американские исследователи предлагают использовать калибровочный диск Миллера. Устройство размещается в одном окуляре микроскопа.

Диск Миллера представляет собой два квадрата; одна сторона малого квадрата (В) составляет 1/9 стороны большого (А). Указанная область используется для подсчета ретикулоцитов стандартным методом. Эритроциты подсчитываются в малом квадрате В, ретикулоциты подсчитываются в большом квадрате А в 20 полях зрения. Таким образом определяется число ретикулоцитов и эритроцитов.

Диск Миллера для подсчета количества ретикулоцитов

При использовании диска Миллера подсчет относительного количества ретикулоцитов производится по формуле

Показатель Retic # (абсолютное количество ретикулоцитов -- ARC) отражает количество ретикулоцитов в 1 л крови. Расчет производят по формуле

где: RET# -- абсолютное количество ретикулоцитов, RET% -- содержание ретикулоцитов в %, RBC -- количество эритроцитов у обследуемого пациента, выраженное в 10 12/л.

Референтные значения составляют от 10 до 110 х 10 9/л.

Эти параметры важны при мониторинге состояния эритропоэза при трансплантации костного мозга и проведении химиотерапии.

При выраженных колебаниях величины гематокрита рассчитывают показатель СRC (corrected reticulocyte count -- скорректированный счет ретикулоцитов) по формуле:

где: CRC -- скорректированный счет ретикулоцитов: RET(%) -- содержание ретикулоцитов в %, Hct -- величина гематокрита (л/л), 0,45 -- значение гематокрита при нормальных показателях крови.

В норме около 1% ретикулоцитов попадает в периферическую кровь за 1 день и там дозревает до эритроцитов также в течение одного дня. При стимуляции эритропоэтином сокращается время созревания эритробластов и ретикулоцитов костного мозга с 3,5 дней в норме до 1,5-1 дня. Как следствие увеличивается время циркуляции ретикулоцитов в периферической крови. Это обязательно должно быть учтено при определении индекса продукции ретикулоцитов -- RPI (reticulocyte production index) (схема 1).

Схема 1. Ретикулоцитарный индекс (RPI)

Величину данного индекса рассчитывают по формуле:

где: RPI -- индекс продукции ретикулоцитов, RET% -- содержание ретикулоцитов в%, Hct -- 0,45 -- величина гематокрита при нормальных показателях крови (л/л), время созревания ретикулоцитов (дни) (табл. 1).

Таблица 1. Время созревания ретикулоцитов при анемии в зависимости от величины гематокрита

Индекс продукции ретикулоцитов рассчитывается при выраженной анемии, что позволяет определить тип эритропоэза.

Снижение показателя ниже 2 свидетельствует о неэффективном эритропоэзе, увеличение более 3 -- о повышенной пролиферативной активности костного мозга.

Микроскопический метод является достаточно трудоемким, недостаточно стандартизирован, в значительной мере субъективен и далеко не всегда позволяет увидеть незначительное количество зернисто-сетчатой субстанции в клетках. Часто невысокое качество мазков крови, малое количество анализируемых клеток и методические ошибки при выполнении исследования приводят к значительным колебаниям величины коэффициента вариации от 25 до 50% и выше.

Интерпретация результатов исследования

Ретикулоцитарный индекс (РИ).

В норме РИ 1,0 - 3,0.

· РИ < 1 - указывает на гипопролиферативную форму анемии.

· РИ > 3 - указывает на активацию эритропоэза.

-- Единица измерения: %, х109/л

Референтные значения:

Возраст, пол	Ретикулоциты, %	Ретикулоциты, х109/л.
Дети:
до 1 мес.	0,2 - 2,0	6,0 - 108,0
2 - 12 мес.	0,2 - 1,5	7,6 - 75,0
1 - 14 лет	0,2 - 1,7	7,6 - 91,8
Взрослые (>14 лет):
женщины	0,5 - 2,1	19,5 - 111,3
мужчины	0,2 - 1,7	8,6 - 100,3

Повышение

· Кровопотеря или гемолиз эритроцитов.

· Гемолитическая анемия.

· Талассемия.

· Лечение В12-дефицитной анемии (ретикулоцитарный криз на 5-8 день терапии витамином B12).

· Малярия.

· Эффективная терапия железодефицитных анемий препаратами железа (8-12 день лечения).

· Острое кислородное голодание.

· Другие гематологические заболевания (метастазы рака в костный мозг, полицитемия).

Снижение

· Апластическая анемия.

· Нелеченная B12-дефицитная анемия.

· Метастазы рака в кости.

· Алкоголизм.

· Гипопластическая анемия.

· Заболевания почек.

· Микседема.

· Аутоиммунные заболевания системы кроветворения.

Задания для самостоятельной работы

Ситуационные задачи

Задача 1. У больной жалобы на общую слабость, желтушность кожных покровов

Результаты исследования крови:

Эритроциты - 2,9*10 12 / л

Гемоглобин - 80 г/л

Цветовой показатель - 0,8

Лейкоциты - 8,0*10 9 /л

СОЭ - 30 мм/час

Лейкоцитарная формула в пределах нормы.

Ретикулоциты - 48%

Тромбоциты - 200*10 9 /л

Морфология эритроцитов -

микросфероцитоз «1»

пойкилоцитоз «1»

Содержание непрямого билирубина в сыворотке крови - 24 мкмоль/л.

Реакция на уробилин в моче - «3»

Задания:

1. Какие изменения наблюдаются в общем анализе крови и дополнительных исследованиях?

2. Для какого состояния характерны данные изменения?

3. С какой целью произведен подсчет ретикулоцитов?

4. Перечислите особенности окраски мазка крови на ретикулоциты.

5. Назовите причины увеличения уробилина в моче и непрямого билирубина в сыворотке.

Ответ:

1. Гипохромная анемия, ретикулоцитоз, ускорение СОЭ, изменение морфологии эритроцитов. Увеличение содержания непрямого билирубина в сыворотке, уробилина в моче.

2. Данные изменения характерны для гемолитической анемии.

3. Для уточнения характера анемии, так как для гемолитических анемий характерен ретикулоцитоз.

4. Кровь на ретикулоциты окрашивают по методу Алексеева (реактивы азур I и азур II) или бриллиантовым крезиловым синим. Особенность окраски ретикулоцитов в том, что клетка воспринимает краску без фиксации, т.е. когда она, выведенная из кровеносного русла, еще жива. Такая окраска называется суправитальной.

5. При гемолитических состояниях наблюдается усиленный гемолиз эритроцитов, поэтому в сыворотке увеличивается общий билирубин за счет непрямого (связанного), а в моче увеличивается количество уробилина (моча цвета “чая”).

Задача 2: Больной К. 47 лет, рентгенотехник, поступил в клинику с подозрением на хроническую лучевую болезнь

Результаты общего анализа крови и дополнительных методов исследования:

Эритроцитов - 3, 5 * 1012/ л.

Гемоглобин - 116 г/л.

Цветовой показатель - 0, 95.

СОЭ - 25 мм/ч.

Лейкоцитов - 2,5 * 109/л.

Э П С Л М

1 5 39 50 5

Ретикулоциты - 0,7%.

Тромбоциты - 75 * 109/л.

Задания:

1. Какие изменения наблюдаются в результатах общего анализа крови и дополнительных исследованиях?

2. Возможны ли данные результаты при хронической лучевой болезни?

3. С какой целью выполнен подсчет количества ретикулоцитов?

4. Назовите особенности окраски мазка крови на тромбоциты.

Ответ:

1. Нормохромная анемия, лейкопения, увеличение СОЭ, тромбоцитопения, относительный лимфоцитоз, абсолютная нейтропения.

2. Да, так как при хронической лучевой болезни в ОАК наблюдается снижение показателей гемоглобина и эритроцитов, лейкоцитов. Нейтропения, относительный лимфоцитоз, увеличение СОЭ.

3. Для оценки регенераторной способности костного мозга (эритромиелоза).

4. Окрашивают краской Романовского в течение 1-2 часов.

Тесты

Вариант 1

1. Повышение уровня ретикулоцитов в крови характерно для:

а) хронической кровопотери

б) острой кровопотери

в) апластической анемии

г) все ответы верны

2. Если у больного имеется значительная эозинофилия, то можно думать о:

а) паразитарной инфекции

б) узелковом периартрите

в) эозинофильном лейкозе

г) все варианты верны

3. Лейкемоидные реакции

а) все ответы верны

б) могут быть миелоидного и лимфоцитарного типа

в) встречаются при септических состояниях

г) встречаются при иммунном гемолизе

4. В большинстве случаев миелограмма при инфекционном мононуклеозе

а) остается нормальной

б) наблюдается увеличение моноцитов

в) наблюдается уменьшение лимфоцитов

г) появляются бластные клетки

5. Норма ретикулоцитов у женщин:

а) 0,5-2,7%

б) 0,5-2,1%

в) 1-3%

г) 2,1-3,4%

6. Особенности ретикулоцитов:

а) наличие зернисто-сетчатой субстанции

б) наличие на переферии большого ядра

в) отсутствие зернистости

г) наличие включений

7. Ретикулоциты окрашивают следующими красителями:

а) р-р азура I

б) р-р Люголя

в) р-р бромтимолового синего

г) все ответы верны

8. В лейкограмму входит все кроме:

а) моноцитов

б) лимфоцитов

в) тромбоцитов

г) эозинофилов

9. Малосимптомный инфекционный лимфоцитоз характерезуется:

а) увеличением базофилов

б) увеличением лимфоцитов

в) понижением моноцитов

г) все ответы верны

10. Функции ретикулоцитов:

а) запуск немедленного гомеостаза

б) защитная

в) участвует в реакциях клеточного иммунитета

г) осуществляет синтез белка, гема, пуринов

Вариант 2

1. Молодые эритроциты образующиеся после потери нормобластами ядер, это:

а) тромбоциты

б) ретикулоциты

в) нормоциты

г) эритробласты

2. Понижение уровня ретикулоцитов характерно для:

а) глистные инвазии

б) прием цитостатиков

в) воспаление

г) интоксикация организма

3. Среди реакций миелоидного типа доминируют

а) промиелоцитарные нейтрофильные реакции

б) моноцитарные реакции

в) нейтрофильные реакции со сдвигом влево

г) реакции трех ростков миелопоэза

4. Лейкемоидные реакции разделяются на следующие кроме:

а) лимфоидные

б) лейкопенические

в)моноцитарные

г)миелоидные

5. Ретикулоциты окрашивают следующими красителями:

а) р-р Люголя

б) р-р метиленового синего

в) р-р бромтимолового синего

г) все ответы верны

6. Особенности ретикулоцитов:

а) наличие зернисто-сетчатой субстанции

б) наличие на переферии большого ядра

в) отсутствие зернистости

г) наличие включений

7. Повышение ретикулоцитов сопровождается при:

а) кровопотерях

б) на фоне лечения В12 фолиеводиффецитной анемии

в) малярия

г)все ответы верны

8. Норма ретикулоцитов у мужчин:

а)2-4%

б)0,5-0, 9%

в)0,2-1,7%

г)0,3-2,9%

9. Симптомы инфекционного мононуклеоза

а) головная боль

б) ангина

в) зубная боль

г) все ответы верны

10. Увеличение количества эозинофилов наблюдается при:

а) гельминтозах

б) аллергиях

в) бронхиальной астме

г) все ответы верны

Список использованной литературы:

1. Руководство по гематологии / Под ред. А.И. Воробьева. М.: Ньюдиамед, 2003.

2. Энциклопедия клинических лабораторных тестов / Под ред. Н. Тица. М.: Ла-бинформ, 1997.

3. Владимирская Е.Б. Механизмы кроветворения и лейкемогенеза. М.: Династия, 2007.

4. Луговская С. А. Ретикулоциты / С. А. Луговская, М. Е. Почтарь. -- М., 2006.

5. Тареев Е. М. Анемия брайтиков / Е. М. Тареев. -- М., 1929.

6. NCCLS. Methods for Reticulocyte Counting (Automated Blood Cell Counters, Flow Cytometry, and Supravital Dyes); Approved Guideline. -- 2nd еd. NCCLS document H44-A2. -- Wayne, Pennsylvania, 2004.

7. Methods for Reticulocyte Counting (Automated Blood Cell Counters, Flow Cytometry, and Supravital Dyes); Approved Guideline. -- 2nd еd. -- Vol. 24, № 8. 5. Алексеев Н. А. Анемии / Н. А. Алексеев. -- СПб. : Гиппократ, 2004. -- 512 с.

8. Энциклопедия клинических лабораторных тестов / ред. Н. Тиц: пер. с англ. -- М.: Лабинформ, 1997. -- 960 с.

9. Козинец Г. И. Кровь и инфекция / Г. И. Козинец, В. В. Высоцкий, В. М. Погорелов [и др.]. -- М. : Триада-Фарм, 2001. -- С. 98-101. 8. Приказ МЗ СССР № 1175 от 21.11.7.

10. Любина А. Я., Ильичева Л. П. и соавторы - "Клинические лабораторные исследования" - Москва, "Медицина", 1984 г.

11. Справочник по клиническим лабораторным методам исследования. Под ред. Е. А. Кост. Москва "Медицина" 1975 г.

12. Справочник "Лабораторные методы исследования в клинике" под редакцией Меньшикова В. В. - Москва, "Медицина", 1987 г

13. Камышников В. С. Карманный справочник врача по лабораторной диагностике - Москва, «МЕДпресс-информ», 2007 год.

14. Шиффман Ф. Дж. М. Патофизиология крови. М.: Бином, 2001.

15. Руководство по гематологии / Под ред. А.И. Воробьева. М.: Ньюдиамед, 2003.

16. Балуда, В.П. Физиология системы гемостаза / В.П. Балуда [и др.]. - М., 1995.

17. Гематология: новейший справочник / под ред. К.М. Абдулкодырова. - М., 2004. - С. 250-337.

18. Васина, Н.И. Информационные ресурсы Internet/ Н.И. Васина; РРГУ.- М., 1999.

Размещено на Allbest.ru