Коли-фаги как индикаторы вирусного загрязнения питьевой воды

В исследованиях P. Paument и соавторов, проведенных на 7 водопроводных станциях в Канаде, показано отсутствие корреляции между обнаружением в очищенной питьевой воде энтеровирусов и бактериальных индикаторов: 7% проб питьевой воды, отвечающей бактериальным стандартам, содержат вирусы коксаки В3, В4, ЕСН07. Аналогичные результаты были получены и рядом отечественных исследователей [1-3].

Одновременно с усовершенствованием методов прямого вирусологического контроля качества воды, являющихся в достаточной степени дорогостоящими и сложными, исследователи разных стран изучали возможность контроля вирусного загрязнения с помощью косвенных индикаторных микроорганизмов. Основываясь на устойчивости различных представителей микрофлоры к факторам окружающей среды и дезинфекционным средствам, а также учитывая наличие других признаков, необходимых для санитарно-показательных микроорганизмов в качестве индикаторов вирусного загрязнения было предложено использовать следующие альтернативные показатели: фекальные стрептококки, коли-фаги, вирус полиомиелита, клостридии и др. Однако из указанных микроорганизмов только коли-фаги соответствовали требованиям, предъявляемым к индикаторным микроорганизмам, в частности, коли-фаги:

- не патогенны и безопасны для человека;

- имеют единый с энтеровирусами источник поступления в окружающую среду;

- по размерам, строению и физико-химическим свойствам, по устойчивости к факторам окружающей среды и дезинфектантам они наиболее близки к энтеровирусам;

- обнаруживаются по всех объектах, где обнаруживаются кишечные вирусы;

- не размножаются в воде:

- концентрации коли-фагов превышают таковые энтеровирусов;

- методы выделения коли-фагов просты, надежны и доступны любой практической бактериологической лаборатории.

В последующие годы на основании экспериментальных исследований и натуральных наблюдений ряд ученых подтвердили, что коли-фаги являются более адекватными индикаторами вирусного загрязнения, чем БГКП (ОКБ). Особенно четко индикаторное значение коли-фагов в отношении вирусного загрязнения было показано на водопроводных станциях Среднеазиатского региона [4]. На примере 2 водопроводных станций было установлено, что в воде, обработанной по 2-этапной схеме с использованием обеззараживания дозами хлора в соответствии с требованиями ГОСТа 2874-82 «Вода питьевая», наблюдалось интенсивное устранение бактериального загрязнения (в 100 000 раз от исходного), а содержание коли-фагов уменьшилось всего в 10-15 раз. При этом на фоне выделения коли-фагов в воде, стандартной по бактериологическим показателям, обнаруживались энтеровирусы. При низком исходном уровне загрязнения обработанная вода не содержала вирусов и коли-фагов.

Санитарно-бактериологические и эпидемиологические исследования, проведенные НИИЭЧ и ГОС им А.М. Сысина в городах, расположенных в разных природно-климатических зонах, показали, что динамика изменения процента нестандартных проб по коли-индексу не отражает уровня вирусной контаминации питьевых вод и их эпидемиологической безопасности в отношении возбудителей кишечных вирусных инфекции Статистическая обработка данных исследований выявила наличие прямой достоверной связи между содержанием коли-фагов и энтеровирусов (r = 0,4 при ... < 0.05) и отсутствие связи между к/индексом и наличием энтеровирусов (r = 0,03 при ... > 0,05). Выявлена прямая достоверная корреляционная связь между процентом выделяемости коли-фагов в питьевой воде, энтеровирусов и уровнем заболеваемости населения вирусным гепатитом А (r = 0,78; ... < 0,05). В то же время отсутствует достоверная корреляционная связь между уровнями к/индекса и заболеваемостью вирусным гепатитом А (r ⁼⁼ 0,0124 при ... >0,05).

С учетом вышеизложенного коли-фаги в качестве индикатора вирусного загрязнения воды вошли в ряд методических и нормативных документов водно-санитарного законодательства.

Итак, коли-фаги - это бактериальные вирусы, способные лизировать E.coli и формировать при t° = (37±1)°С через (18±2) ч зоны лизиса бактериального газона (бляшки) на питательном агаре.

Определение коли-фагов в питьевой воде заключается в предварительном накоплении их в среде обогащения на культуре E.coli и последующем выявлении зон лизиса (просветления) газона E.coli на питательном агаре. Исследование проводится титрационным методом. По эпидемическим показаниям параллельно проводят прямой метод выделения коли-фагов.

Согласно Сан-Пиц 2.1.4.559-96 «Питьевая вода. Гигиенические требования к качеству воды централизованных систем водоснабжения. Контроль качества» п.4.3.1 - «При исследовании микробиологических показателей качества питьевой воды в каждой пробе проводится определение ТКБ, ОКБ, ОМЧ и коли-фагов». При этом в п.4.3 данных Сан-Пин: «безопасность питьевой воды в эпидемическом отношении определяется её соответствием нормативам по микробиологическим показателям, представленным в табл. № 1, где исследование на наличие коли-фагов определяется только в системах водоснабжения из поверхностных источников перед подачей воды в распределительную сеть. Поскольку г. Биробиджан снабжается питьевой водой из подрусловых вод (подземные водоисточники), то согласно п.4.3 мы не должны исследовать питьевую воду на данный показатель, что в свою очередь противоречит п.4.3.1. Данное противоречие было разрешено, когда было издано информационно-методическое письмо по контролю качества питьевой воды № 1100/1670-98-111 от 24.07.98г., в которое были внесены уточнения к примечанию «3»: «определение проводится в системах водоснабжения из поверхностных и подземных источников перед подачей воды в распределительную сеть, а коли-фаги - еще и в сети». Таким образом, исследования из источников водоснабжения проводились на соответствие Сан-Пин 2.1.4.559-96 на показатели согласно п.4.3.1.

Но в 2002г. в работу поступил Сан-Пин 2.1.4.1074-01 «Питьевая вода. Гигиенические требования к качеству воды централизованных систем водоснабжения. Контроль качества», отменяющий предыдущий. И в данном документе противоречие было сохранено. А так как вышедший следом МЦК 4.2.1018-1 «Санитарно-микробиологический анализ питьевой воды» от 01.07.02 отменил МЦК 4.2.671-97 и информационное письмо № 1100/1670-98-111, но вопрос остается открытым и в настоящее время.

На данный момент времени контроль исходного уровня загрязнения на источниках водоснабжения проводится в собственных лабораториях (согласно программе производственного контроля), а также осуществляется Госсанэпиднадзор согласно ГОСТ 2761-84, а исследование воды перед подачей её в распределительную сеть и в сети на соответствие Сан-Пин 2.1.4.1074-01 на следующие показатели: ОКБ, ТКБ, ОМЧ и коли-фаги.

2. Анализ исследования питьевой воды и воды бассейнов, проведенных в централизованной бактериологической лаборатории за 2008-2010 гг.

Мною были также проанализированы результаты исследований воды бассейнов, т.к. качество пресной воды, поступающей в ванну бассейна должно отвечать гигиеническим требованиям к качеству воды централизованных систем питьевого водоснабжения вне зависимости от принятой системы водообеспечения и характера водообмена. Качество воды плавательных бассейнов по санитарно-микробиологическим показателям регламентируется Сан-Пин 2.1.2.568-98 «Гигиенические требования к устройству, эксплуатации и качеству воды плавательных бассейнов». Основными микробиологическими показателями являются: колиформпые бактерии, ТКБ, коли-фаги, лецитиназоположительный стафилококк.

При проведении исследований воды бассейнов нашей лабораторией за последние 3 года не было выявлено случаев, когда бы выделение коли-фагов не сопровождалось бы выделением колиформных бактерий (таб. 2). Возможно, это частично объясняется тем, чтo г. Биробиджан снабжается водой питьевой из подземных подруслопых вод, уровень загрязнения которых обычно ниже, чем поверхностных источников водоснабжения.

В апреле 2010 года при исследовании воды из распределительной сети в нашей лаборатории был получен следующий результат: выделены коли-фаги при соответствии данной пробы воды по остальным показателям, нормированным Сан-Пин 2.1.4.1074-01 (табл. № 1)

Это подтверждает теорию о том, что в результате обработки и обеззараживания водопроводной воды хлором или УФО в установленных режимах, как правило, устраняется бактериальное загрязнение, а более устойчивые формы микроорганизмов (в первую очередь вирусы) могут сохраняться и попадать в распределительную сеть.

Данный результат мы получили в апреле, когда происходит массивное таяние снега и исходный уровень загрязнения источников водоснабжения естественно повышается, что привело к возможности прохождения коли-фагов в распределительную сеть после обработки воды.

Исследование воды распределительной сети на наличие коли-фагов и ОКБ 2008г.

Таблица № 1

2009г.

таблица № 2

Исследование воды бассейнов на наличие коли-фагов и колиформн. бактерий 2008г.

Таблица № 4

2009г.

Таблица № 5

К сожалению, мы не можем проследить взаимосвязь между выделением коли-фагов и энтеровирусов, так как для этого необходимо производить забор воды параллельно из одних и тех же точек отбора проб и в одно время.

вирусологический контроль качество загрязнение вода

Заключение