Селективный блокатор кальциевых каналов I класса. Оказывает антиаритмическое, антиангинальное и гипотензивное действие. Снижает потребность миокарда в кислороде за счет снижения сократимости миокарда и уменьшения ЧСС. Вызывает расширение коронарных артерий и увеличение коронарного кровотока. Снижает тонус гладкой мускулатуры периферических артерий и ОПСС. Оказывает антиаритмическое действие при наджелудочковых аритмиях.

Производные 1,4-дигидропиридина являются блокаторами кальциевых каналов. Некоторые из них (нифсдипин, никардипин, амлодипин и др.) нашли применение в качестве антигипертензивных и антиан-гинальных средств. Наряду с этим они проявляют антиаритмическое действие, что в свое время вызывало интерес клиницистов [25].

3,4-Дигидро-(Ш)-пиримидиноны-2 являются близкими структурными аналогами 1,4-дигидропиридинов и обладают тем же спектром фармакологического действия.

С целью поиска новых эффективных сердечно-сосудистых средств среди дигидропиримидинов нами был синтезирован ряд 4-арил-5-нитро-6-фенил-3,4-ди-гидро-(1H)-пиримидинонов-2 (I - VII) и изучены фармакологические свойства этих соединений.

Новые соединения II - VII получены взаимодействием ?-нитроацетофенона, ароматических альдегидов и мочевины по аналогии с синтезом известного соединения I.

Реакция включает последовательно протекающие превращения: кислотно-катализируемую конденсацию альдегида и мочевины с образованием активных N-ацилиммониевых катионов, которые с нитроацето-феноном дают уреидопроизводные, циклизующиеся далее в дигидропиримидиноны.

Описание технологии

Контроль за ходом реакций и индивидуальностью соединений осуществляли методом ТСХ на пластинках Silufol UV-254, элюент -- СНС13. Данные элементного анализа соединений II - VII на С, Н, CI, F, N соответствуют вычисленным значениям.

4-(м-Фторфенил)-5-нитро-6-фенил-3,4-дигидро-(1H)-пиримидинон-2 (IV). К раствору 12,0 г (0,2 моль) мочевины в 75 мл изопропанола и 6 мл конц. НС1 добавляют 7,4 г (0,06 моль) м-фторбензальдегида, перемешивают 1 ч, оставляют на ночь. К реакционной смеси добавляют 6,6 г (0,04 моль) анитроацетофенона и кипятят 12 ч. Осадок отделяют, промывают последовательно этанолом, насыщенным раствором бикарбоната натрия, водой, снова этанолом и кристаллизуют из этанола. Получают 7,2 г (57 %) соединения IV.

Аналогично получают арилпроизводные I - III, V -- VII. Перекристаллизовывают из этанола (соединения I, И, III, VI), из 60 % водного этанола (V), из смеси этанол - диоксан, 2:1 (VII).

5.3 Получение ? - адреноблокаторов

Синтез гидрохлорида 1-(4'-метокси-карбонилфенокси) - 3- (2'', 6'' - диметилпиперидино) пропанола-2 (I)

При поиске веществ, обладающих ?-адреноблокирующей активностью, было найдено соединение (I), являющееся производным 1-фенокси-3-аминопропанола, которое не уступает по эффективности неселективному ? - адреноблокатору пропранололу [21].

Синтез соединения I осуществлен реакцией натриевой соли фенола с эпихлоргидрином и последующим взаимодействием образующегося эпоксида с амином по схеме:

Описание технологии получения гидрохлорида 1 - (4' - метокси-карбонилфенокси) - 3 - (2'', 6'' - диметилпиперидино) пропанола - 2 (I)

К смеси 6,2 г (0,04 моль) метилового эфира п - оксибензойной кислоты и 11,1 г (0,12 моль) эпихлоргидрина приливают в течение 1,5 часа и при перемешивании 50 мл 1 н. NaOH, перемешивают в течение 1 часа и выдерживают при 20 ?С около 16 часов. Реакционную массу экстрагируют хлороформом, экстракт высушивают безводным Na2SO4, упаривают в вакууме, под конец с добавлением толуола. Остаток растворяют в метаноле, добавляют 5,7 г (0,05 моль) 2,6-диметилпиперидина и кипятят в течение 6 часов, после чего упаривают в вакууме. Твердый остаток кристаллизуют из петролейного эфира, растворяют в абсолютном эфире, добавляют эфирный раствор хлористого водорода и получают 6,7 г гидрохлорида I.

Синтез гидрохлоридов 4 - [2 - окси - 3- трет - бутил (4 - нитробензил) аминопропокси] скатола (I а, б)

В медицине широко применяются ?-адреноблокаторы бопиндолол, характеризующийся значительной длительностью действия, и пиндолол, действие которого непродолжительно [22].

Были синтезированы пара-нитро- и пара-фторбензильные производные 4-оксискатола (I а, б), превосходящие пиндолол и бопиндолол по длительности действия. Синтез осуществлен из эпоксида (IV) действием на него соответствующих аминов (III а, б) по схеме

R=NO2 (а), F (б)

Описание технологии получения гидрохлорида 4 - [2- окси - 3 - трет - бутил (4 - нитробензил) аминопропокси] скатола (I а)

Смесь 8,72 г (0,043 моль) 4-(2,3-эпоксипропокси) скатола (IV) и 8,5 г (0,04 моль) 4-нитробензил-трет-бутиламина (III а) нагревают в течение 20 часов при температуре 110 120 ?С, плав охлаждают, смешивают с 20 мл спирта, осадок отфильтровывают, кристаллы промывают 10 мл этилацетата и получают 10,1 г основания II а. Основание растворяют при нагревании в 125 мл ацетона, охлаждают и подкисляют раствором соляной кислоты в спирте до pH 4,55,0. Оставляют на 12 часов при 5 ?С, осадок отфильтровывают, промывают 10 мл ацетона и получают 8,92 г оранжевых кристаллов с температурой плавления 204 ?С. Из маточного раствора выделяют дополнительно 2,65 г продукта. Общий выход составляет 63 %.

Гидрохлорид 4- [2 - окси - 3 - трет - бутил (4 - фторбензил) аминопропокси] скатола (I б) получают аналогичным образом из 4-(2,3-эпоксипропокси) скатола (IV) и 4-фторбензил-трет-бутиламина (III б).

6. Фармакопейный анализ препаратов

Согласно Закону Украины "О Лекарственных средствах", статья 2, Государственная Фармакопея Украины ? это правовой акт, который содержит общие требования, предъявляемые к лекарственным средствам, фармакопейные статьи (монографии), а также методики контроля их качества.

Соответствие лекарственных веществ требованиям Фармакопеи проверяют физическими, химическими, физико-химическими и биологическими методами.

Физические методы анализа предусматривают изучение физических свойств вещества, не прибегая к химическим реакциям. К ним относятся: определение растворимости, прозрачности или степени мутности, цветности; влажности, температуры плавления, кипения [12].

Химические методы исследования основаны на химических реакциях. К ним относятся: определение зольности, реакции среды (рН), характерных числовых показателей масел и жиров (кислотное число, йодное число, число омыления и т. д.).

Для целей идентификации лекарственных веществ используют только такие реакции, которые сопровождаются наглядным внешним эффектом, например изменением окраски раствора, выделением газов, выпадением или растворением осадков и т. п.

К химическим методам исследования относятся также весовые и объемные методы количественного анализа, принятые в аналитической химии (метод нейтрализации, осаждения, окислительно-восстановительные методы и др.).

Качественный и количественный анализ органических лекарственных веществ, как правило, проводят по характеру функциональных групп в их молекулах.

С помощью физико-химических методов изучают физические явления, которые происходят в результате химических реакций (измерение интенсивности окраски в зависимости от концентрации вещества в колориметрическом методе и т.д.). К физико-химическим методам относятся: оптические (фотометрия, включающая фотоколориметрию и спектрофотомерию, и т.д.), электро-химические (потенциометрический и полярографический методы), хроматографические методы.

Для определения прозрачности и цветности используют одинаковые пробирки из бесцветного прозрачного нейтрального стекла с плоским дном. Сравнивают равные слои исследуемой жидкости и свежеприготовленного эталона. Сравнение проводят в рассеянном дневном свете через 5 минут после приготовления эталона при определении прозрачности, просматривая образцы вдоль вертикальной оси пробирок на чёрном фоне, а при определении цветности? вдоль вертикальной оси либо перпендикулярно оси (горизонтально) на белом фоне. Исследуемая жидкость считается прозрачной и бесцветной, если она выдерживает сравнение с водой или растворителем, который использовался для приготовления исследуемой жидкости, а также, если её опалесценция не превышает опалесценцию эталона и окраска не более интенсивная, чем эталона, соответственно [23].

Измерение с помощью поляриметра оптической активности используется в фармакопейных целях главным образом для установления подлинности вещества и испытания на чистоту (отсутствие оптически неактивных посторонних веществ). Оптической активностью называется свойство отклонять плоскость поляризации при прохождении через них прямолинейно поляризованного света [24].

Оптическое вращение -- это угол, на который отклоняется плоскость поляризации при прохождении поляризованного света через слой жидкости. Вещества считаются правовращающими или левовращающими в зависимости от того, вращается ли плоскость поляризации по часовой стрелке или против нее, что устанавливается наблюдением в направлении источника света. Вращение вправо обозначается (+), а вращение влево (-).

В Международной фармакопее оптическое вращение (?) выражается в угловых градусах. В системе единиц СИ угол оптического вращения выражается в радианах (рад).

Удельное оптическое вращение [?]D?? жидкости представляет собой угол вращения ?, выраженный в градусах, площади поляризации при длине волны линии D спектра натрия (?=589,3 нм), измеренный при 20 ?C, рассчитанный для толщины слоя исследуемого вещества 1 дециметр и разделенный на плотность, выраженную в граммах на кубический сантиметр.

Удельное оптическое вращение [?]D?? вещества в растворе представляет собой угол вращения ?, выраженный в градусах, площади поляризации при длине волны линии D спектра натрия (?=589.3 нм), измеренный при 20 ?C и рассчитанный для толщины слоя 1 дециметр в пересчете на содержание 1 грамма вещества в 1 миллилитре раствора. Для удельного оптического вращения в растворе всегда указывают растворитель и концентрацию раствора.

Для того чтобы определить кислотность раствора, находят его pH -- число, которое условно характеризует концентрацию ионов водорода в водных растворах. Обычно для определения pH используют потенциометрический метод, основанный на измерении разницы потенциалов между двумя соответствующими электродами, которые опущены в исследуемый раствор: один из электродов чувствителен к ионам водорода (чаще всего стеклянный электрод), другой -- электрод сравнения (например, насыщенный каломельный электрод).

Определение температур плавления используется в фармакопейных спецификациях главным образом для установления подлинности данного вещества, так как наличие примесей в веществе приводит к более или менее заметному снижению его температуры плавления [24].

Самым распространённым способом определения температуры плавления лекарственных веществ является капиллярный метод, позволяющий установить температуру, при которой последняя твёрдая частица сгущенного вещества в капиллярной трубке переходит в жидкую фазу [23].

Чтобы рассчитать потерю массы вещества при сушке, которая выражается в процентах (масса/масса), определенное количество исследуемого вещества загружают во взвешенный бюкс, который заранее высушен, и сушат до постоянной массы или втечение рекомендуемого отдельной фармакопейной статьёй времени.

Для нахождения количества сульфатной золы обычно применяется следующая методика: точно взвешивают около 1 грамма вещества или такое количество, которое указано в частной статье, в подходящем тигле (обычно платиновом) и смачивают серной кислотой (~1760 грамм на литр); слегка нагревают для удаления избытка кислоты и прокаливают при температуре около 800° С до удаления всех черных частиц; снова смачивают серной кислотой (~1760 г/л) и вновь прокаливают; прибавляют небольшое количество карбоната аммония и прокаливают до постоянной массы [24].

Метод тонкослойной хроматографии используется в фармакопейном анализе для идентификации как самих лекарственных веществ, так и их примесей. Адсорбентом служит тонкий, равномерный слой сухого мелкоизмельченного материала, нанесенного на подходящую подложку, например, на стеклянную пластинку, алюминиевую фольгу или пластмассовую пленку. Подвижная фаза движется по поверхности пластинки (обычно под действием капиллярных сил); хроматографический процесс может зависеть от адсорбции, распределения или комбинации обоих явлений, что в свою очередь зависит от адсорбента, его обработки и природы используемых растворителей. Во время хроматографирования пластинка находится в хроматографической камере, которая обычно насыщена парами растворителя. В испытаниях на подлинность тонкослойная хроматография служит для сравнения поведения идентифицируемого материала и стандартного образца, обычно аутентичного исследуемому веществу. Если оба вещества продвигаются во время хроматографического процесса на одинаковое расстояние, можно предположить, что эти вещества идентичны.

Для установления подлинности удобно определять отношение расстояния, пройденного неизвестным веществом, к расстоянию, пройденному либо фронтом растворителя, либо стандартным образцом. На полученной хроматограмме отношение расстояния, пройденного на адсорбенте данным веществом, к расстоянию, пройденному передним краем растворителя или подвижной фазы (оба расстояния измеряют от точки нанесения испытуемого вещества), есть величина Rf, характерная для данного вещества в данной хроматографии ческой системе. Отношение расстояний, пройденных испытуемым веществом и стандартным образцом, принимают за величину Rr. На практике величины Rf могут значительно варьировать в зависимости от конкретных экспериментальных условий, поэтому величина Rr, определенная по отношению к стандартному образцу, подвергнутому хроматографированию на той же пластинке, имеет более достоверное числовое значение. Еще более надежные результаты дает сравнение с аутентичным образцом, как описано выше, и именно эта методика используется для фармакопейных целей.

Для определения положения неокрашенного вещества на полученной хроматограмме обычно необходимо обрабатывать хроматограмму реактивом, который либо обугливает разделенные вещества, либо переводит их в окрашенные или флуоресцирующие производные. Часто применяют и другой удобный метод: проводят хроматографию на пластинке, пропитанной веществом, сильно флуоресцирующим под воздействием коротковолнового ультрафиолетового света. Площади на пластинке, занятые веществами, поглощающими при той же длине волны, выглядят как темные пятна на флуоресцирующем фоне.

Наиболее ценные результаты дает применение тонкослойной хроматографии в качестве метода оценки низких уровней примесей в медицинских веществах. Для этой цели вещество наносят на хроматографическую пластинку и после хроматографирования любые вторичные пятна, которые могут быть видны на хроматограмме после соответствующего проявления, сравнивают по размеру и интенсивности с пятнами, которые дают небольшие количества ожидаемых примесей при одновременном хроматографировании на той же пластинке. Для этой методики нужно иметь в наличии ожидаемые примеси, поэтому в некоторых статьях предписывается использование аутентичных образцов примесей.

Абсорбционная спектрофотомерия -- измерение количества поглощенной веществами электромагнитной радиации определенной и узкой волновой области приближенного монохроматического излучения.

Спектральная область, используемая в фармакопейных измерениях, распространяется от коротковолновой ультрафиолетовой (190 380 нм) до видимой (380780 нм) области спектра.

Спектрофотомерия в видимой области (ранее обычно использовался термин колориметрия) -- измерение количества поглощенного излучения в видимой области спектра, обычно немонохроматического, но ограниченного применением окрашенных или интерференционных фильтров.

Ультрафиолетовые и видимые спектры вещества обычно не отличаются высокой степенью избирательности. Тем не менее, они чрезвычайно удобны для количественных определений, а для многих веществ служат дополнительным средством установления подлинности.

Применение абсорбционной спектрофотомерии в видимой и ультрафиолетовой областях спектра для методик количественного определения основано на том факте, что поглощаемость вещества обычно является константой, независимой от интенсивности падающего излучения, длины кюветы и концентрации, вследствие чего концентрация может быть определена фотометрически.

Инфракрасная область электромагнитного спектра, используемая в фармацевтическом анализе, охватывает интервал 2,5--40мкм.

Спектрофотометрические измерения в инфракрасной области спектра используются в основном как испытания на подлинность. Инфракрасный спектр уникален для каждого данного химического соединения.

Для определения подлинности исследуемого вещества сравнивают полученное значение поглощения раствора со значением величины поглощения эталонного раствора.

Поглощение (А) -- десятичный логарифм обратной величины пропускаемости (Т).

Пропускаемость (Т) -- частное от деления интенсивности света, прошедшего через вещество, на интенсивность света, падающего на вещество.

Поглощаемость (?) -- частное от деления поглощения (А) на концентрацию вещества (с), выраженную в граммах на литр, и длину слоя поглощения в сантиметрах (b).

Спектр поглощения -- часто выражаемое графически отношение поглощения или любой функции поглощения к длине волны или любой функции длины волны.

Многие нерастворимые в воде соединения проявляют кислотные или основные свойства при растворении в органических растворителях. Таким образом, выбор подходящего растворителя позволяет определять многие такие соединения с помощью неводного титрования. Далее, в зависимости от того, какая часть соединения является физиологически активной, можно титровать эту часть путем правильного выбора растворителя и титранта. Чистые вещества можно титровать непосредственно, но часто бывает необходимо отделить активный ингредиент лекарственных форм от мешающих наполнителей и носителей. Конец титрования можно определять визуально по изменению окраски или потенциометрически.

К соединениям, которые можно титровать как кислоты, относятся кислотные галогениды, ангидриды кислот, карбоновые кислоты, аминокислоты, энолы, такие, как барбитураты и ксантины, имиды, фенолы, пирролы, сульфаниламиды. К соединениям, которые можно титровать как основания, относятся амины, азотсодержащие гетероциклические соединения, четвертичные аммониевые соединения, щелочные соли органических кислот, щелочные соли неорганических кислот и некоторые соли аминов. Многие соли галоидоводородных кислот можно титровать в уксусной кислоте или уксусном ангидриде после прибавления ацетата ртути, который удаляет ион галоида переведением в неионизированный комплекс галогенида ртути. Гидрохлориды слабых оснований, не содержащие группировок, способных ацетилироваться, можно также титровать в уксусном ангидриде без добавления ацетата ртути, используя в качестве индикатора малахитовый зеленый или кристаллический фиолетовый. Титрования, проводимые при избытке уксусного ангидрида, следует применять с осторожностью, так как любая реакция ангидрида с титруемым веществом может привести к заниженным результатам.

При титровании основных соединений обычно используют объемный раствор хлорной кислоты в ледяной уксусной кислоте, хотя в особых случаях удобнее использовать раствор хлорной кислоты в диоксане. При титровании кислых соединений часто применяют объемный раствор метилата лития в растворе метанол -- толуол. Для многих случаев удобно использовать раствор гидроокиси тетрабутиламмония в толуоле; метилат натрия, ранее широко применявшийся, часто может давать вызывающий затруднения желатинообразный осадок.

Титриметрическое определение воды методом Карла Фишера основано на количественной реакции между водой и реактивом, состоящим из двуокиси серы и йода в безводном пиридине и обычно метанола. Реакцию проводят в подходящем растворителе, таком, как метанол или уксусная кислота. Конец титрования определяют при помощи электрической цепи, состоящей из микроамперметра, платиновых электродов и батареи напряжением 1,5 2 В, соединенной через переменное сопротивление порядка 2000 Ом. Сопротивление устанавливают таким образом, чтобы начальный ток проходил последовательно через платиновые электроды и микроамперметр. После каждого прибавления реактива стрелка микроамперметра отклоняется, но быстро возвращается в исходное положение. Когда титрование окончено, стрелка остается в отклоненном положении 10 15 секунд. Кроме того, конец титрования может быть определен вольтаметрическим методом. К платиновым электродам прилагают разность потенциалов порядка 30 50 мВ для обеспечения постоянного поляризационного тока и раствор титруют реактивом. Разность потенциалов определяют при помощи микровольтметра. Конечную точку считают достигнутой, когда вольтметр показывает устойчивое падение напряжения. При вольтаметрическом методе конечная точка может быть установлена графически путем построения зависимости напряжения от объема реактива и определения начала падения напряжения.