Иммунотерапия в борьбе с опухолями

Размещено на http://www.allbest.ru/

Министерство здравоохранения Украины

Винницкий национальный медицинский университет им. Н.И. Пирогова

Кафедра микробиологии, вирусологии и иммунологии

Реферат

на тему:

Иммунотерапия больных со злокачественными опухолями

Работу выполнила

аспирант І года обучения

Кириченко О.В.

Винница, 2010

Биотерапия

В соответствии с современным определением (Rosenberg SA, 1997), биотерапия (Бт) включает в себя лечение пациентов с онкологическими заболеваниями путем активизации защитных систем организма или при помощи введения естественных полимерных молекул. Под определение средств Бт попадает широкий спектр разнообразных факторов, включающих наряду с противоопухолевыми вакцинами (ПВ) продукты современных биотехнологий с использованием моноклональных антител (МкАТ), цитокинов (Цк), клеточных факторов, а также средств, регулирующих активность генома, и другие молекулярные процессы жизнедеятельности клетки. Методы Бт вовлекают в противоопухолевую защиту иммунную систему, а также воздействуют на факторы и механизмы, контролирующие процессы ангиогенеза и апоптоза [1, 2].

Перспективы Бт -- это не только создание современных препаратов, число которых и далее будет пополняться, но и формирование целостного взгляда на природу новообразований на основе понимания молекулярно-клеточных механизмов этой патологии на уровне целостного организма и, соответственно, целенаправленное конструирование индивидуализированных методов воздействия на них. Использование методов Бт возвращает нас к системному взгляду на болезнь, который определяет состояние антиканцерогенеза «как систему комплексного воздействия, направленного как на саму опухоль, так и на организм в целом» (Р.Е. Кавецкий). Возвращение к Бт в первую очередь связано с методами иммунотерапии, предоставляющей возможность включения в систему иммунологического распознавания и ответа отдельных соединений с прогнозируемым эффектом. В отличие от химиотерапии, оказывающей прямое цитотоксическое действие на опухолевую клетку, при Бт такое воздействие происходит опосредованно. Возможна биохимиотерапия, когда применение биопрепаратов и цитостатиков способствует достижению синергизма их действия [3, 4]. Современные биотерапевтические подходы к системному и регионарному лечению при онколгических заболеваниях также предполагают реализацию «адресной» доставки лекарств и биологических молекул за счет привлечения наноразмерных носителей -- полимерных и металлических наночастиц, липосом, микрокапсул, липопротеинов и различных наносборок [5, 6].

Вакцинотерапия

Вакцины в онкологии -- это биологические препараты для активной иммунопрофилактики и иммунотерапии при злокачественных новообразованиях, содержащие опухолевые антигены. На их введение система иммунитета отвечает каскадом реакций, которые в конечном итоге приводят к целенаправленному лизису опухолевых клеток. В настоящее время вакцинотерапия (Вт) является признанным методом лечения многих видов злокачественных опухолей. ПВ способны индуцировать иммунный ответ как против первичной опухоли, так и против метастазов [7-9].

Профилактические ПВ предназначены для людей, принадлежащих к так называемым группам риска. Их действие направлено на индукцию специфического иммунного ответа, предупреждающего развитие опухолей, индуцированных онкогенными вирусами. К профилактическим можно отнести вакцины против вирусов гепатита В и С (гепатокарцинома) [10, 11] и против вирусов папилломы человека (рак шейки матки) [12, 13]. Терапевтические ПВ создаются на основе опухолевых клеток (ОК) или конструируются с использованием идентифицированных опухолеассоциированных антигенов (ОАА). Профилактическое применение вакцин этой группы невозможно из-за многочисленности различных видов опухолей и непредсказуемости их появления, потому такие ПВ используются для лечения больных с уже развившимися злокачественными новообразованиями [7, 9].

ПВ, предназначенные для клинического применения, должны быть безопасными, эффективными против широкого спектра опухолей одного гистологического типа, а также давать воспроизводимые результаты и сохранять стабильность свойств при длительном хранении [8, 14]. Важным фактором, определяющим эффективность ПВ, является размер опухоли, поэтому Вт целесообразно проводить для профилактики рецидивов и метастазов после максимального уменьшения опухолевой массы (хирургического лечения) [7, 9]. Основную стратегию конструирования ПВ можно рассматривать как выявление мишеней иммунного ответа (ОАА), создание иммуногенных форм и условий для распознавания таких антигенов, а также индукцию пролиферации и повышение активности сенсибилизированных иммунокомпетентных клеток [10, 14]. Поэтому наиболее ответственным этапом создания ПВ является выбор антигенов, обладающих способностью стимулировать эффективные противоопухолевые иммунные реакции. Несмотря на существенный прогресс в области идентификации ОАА, их использование для конструирования ПВ сопряжено с некоторыми трудностями, главной из которых является то, что значительная часть ОАА выявляется на определенных стадиях дифференцировки нормальных клеток в антенатальном и постнатальном периодах, поэтому к большинству этих антигенов организм толерантен [8, 9]. Трудности также вызывают способы индукции специфической реакции иммунной системы на ОК, особенно с учетом вариабельности биологических свойств опухоли (наличие клонов с различным потенциалом роста и степенью дифференцировки), что часто сопровождается изменением экспрессии ОАА на каждом этапе развития опухолевого процесса [14, 15].

Достижения молекулярной биологии делают процесс создания ПВ комплексным и разнообразным, однако не существует универсальной технологии, которая давала бы возможность получать наиболее эффективные ПВ. Вместе с тем выработаны категории параметров, по которым каждая вакцина может быть достаточно точно охарактеризована и воспроизведена. Первая категория характеризует используемый биоматериал как источник ОАА. Определяющими параметрами являются антигенная основа вакцины (цельные ОК, вирусный онколизат, нативные или рекомбинантные пептиды, ганглиозиды и так далее), валентность по антигенам (моновалентная/поливалентная) и антигенная гистосовместимость (аутологичная/аллогенная/ксеногенная) [7, 9, 14].

Вторая категория характеризует использование методов и технологий для усиления иммуногенности выбранного антигена. Она включает применение адъювантов, вирусных векторов, дендритных клеток (ДК), генных технологий [1, 14].

В настоящее время разработано огромное количество разнообразных ПВ, которые можно разделить на две основные группы [8, 14, 17]. Первую группу составляют вакцины из целых или лизированных аутологичных (клетки от больного, для которого готовится вакцина) или аллогенных (от разных пациентов или из нескольких клеточных линий) ОК: модифицированных физическими факторами (облучение, замораживание -- оттаивание и др.) [17, 18]; модифицированных с помощью адъювантов различной природы -- химических (денитрофенил, формалин) [19, 20], бактериальных (БЦЖ, продукты синтеза Bacillus subtilis) [1, 12], вирусных (вирусы коровьей оспы, болезни Ньюкасла) [19]; модифицированных генами (ИЛ-2, ФНО, интерферонов, ГМ-КСФ, костимулирующих молекул, TAG7) [23-26].

Присутствующий широкий спектр ОАА определяет возможность использования таких ПВ при соответствующей опухоли без оценки экспрессии отдельных антигенных детерминант. Вакцины этой группы поливалентны и изначально более иммуногенны, о чем свидетельствуют случаи утраты активности вакцин по мере их очистки [7]. В последние годы интерес к «цельноклеточным» вакцинам снова возрос, так как благодаря методам генной инженерии в ОК можно ввести новые гены антигенов или гены Цк, повышающие их иммуногенность [17].

Вторая группа ПВ базируется на генетически идентифицированных ОАА и включает: очищенные естественные или рекомбинантные ОАА [14, 27]; синтетические пептиды [18, 19]; ДНК [7, 13]; рекомбинантные вирусы (аденовирусы, вирус оспы (vaccinia, avipox)) [10, 11] и бактерии (BCG и Lysteria) [9, 12]; белки теплового шока [13]; антиидиотипические вакцины (на основе идиотипических детерминант иммуноглобулинов) [14] и т.п. Каждый вариант вышеперечисленных ПВ может использоваться для смешивания, трансфекции или трансдукции антиген-презентирующих клеток или же применяться с разнообразными адъювантами или Цк [7, 9, 13].

Некоторые группы исследователей в качестве альтернативы цельноклеточным и моновалентным антигенным вакцинам применяют клеточные экстракты или полуочищенные протеины [19]. Например, при меланоме используются секретированные белки или фрагменты клеточной мембраны (большие поливалентные иммуногены) [9, 17]. В качестве альтернативной вакцины также широко применяются шапероны, несущие наборы пептидов, включая опухоль-специфические белки, выделенные из аутологичных опухолей [7, 14]. Особенно перспективными кандидатами для вакцинотерапии пациентов с распространенными формами злокачественных опухолей, в том числе и резистентными к стандартному лечению, являются активированные ДК, которые представляют лимфоцитам пептидные фрагменты ОАА в ассоциации с молекулами комплекса гистосовместимости (HLA) [9]. Преимуществом таких вакцин является возможность индукции ответа против всех антигенов, меющихся в опухоли, без необходимости их идентификации. Для нагрузки ДК ОАА разработаны различные методы, включая нагрузку синтетическими пептидами, опухолевыми лизатами, опухолевой РНК [17]. Эффективность дендритно-клеточных ПВ широко продемонстрирована в экспериментальных и клинических исследованиях [7, 9, 17, 18].

Одним из многообещающих направлений представляется разработка ПВ на основе дендритом, которые получают с помощью гибридомной технологии при слиянии ОК и незрелых ДК. ДК в составе противоопухолевых вакцин используют совместно с опухолевыми АГ в качестве мощного эндогенного адъюванта, который вызывает индукцию специфического иммунного ответа, опосредованного ЦТЛ, в организме реципиента. ДК-вакцинотерапия относится к методам специфической активной ИТ, на которую в настоящее время возлагают большие надежды. Стандартная процедура получения вакцины включает генерацию незрелых аутологичных ДК путем инкубации их предшественников (CD34+-клеток, моноцитов) с цитокинами в различных комбинациях. Наиболее часто используют: ГМ-КСФ + ИЛ-4 и ГМ-КСФ + ФНО-б. Проходят испытания такие факторы как лиганд Flt3, лиганд c-kit, TGF-в1 и CD40L. Затем незрелые ДК нагружают опухолевыми АГ, инкубируют с факторами, индуцирующими их созревание (ЛПС, цитокины ИЛ-1, ГМ-КСФ и ФНО-б и др.), затем функционально полноценные клетки реинфузируют пациенту [7, 8].

К основным свойствам ДК относятся:

1) уникальная способность собирать Т-клетки на своей поверхности за счет наиболее высокой экспрессии собственных молекул главного комплекса гистосовместимости II класса (HLA-DR, -DP и -DQ) и молекул I класса;

2) способность при созревании экспрессировать молекулы CD80, CD86 и CD40, которые активируют соответствующие лиганды на Т-клетках - CD28, CTLA-4 и CD40L;

3) способность продуцировать ряд цитокинов, включая интерлейкин-12, который увеличивает иммунологический ответ за счет "направления" Т-клеток по пути дифференцировки их в Т-хелперы 1-ого типа;

4) способность захватывать растворимые антигены с помощью эндоцитоза;5) наличие эффективных механизмов для обработки (процессинга) сложных белков до иммуногенных пептидов;

6) способность выполнять высокодифференцированную роль в тимусе: индуцируют толерантность к собственным тканевым антигенам с помощью удаления развивающихся аутореактивных Т-клеточных клонов и др. Как показали исследования, количество ДК в организме больных злокачественными опухолями снижено, а сами они функционально неполноценны. ДК, выделенные из периферических лимфоидных и нелимфоидных тканей и периферической крови как экспериментальных животных с опухолями, так и онкологических больных не способны стимулировать специфический ответ цитотоксических Т-лимфоцитов (ЦТЛ) и слабо стимулируют Т-хелперы (Bernard J. et al., 1997; Gabrilovich D. et al., 1996; Zitvogel L. et al., 1996). Кроме того, на их поверхности было выявлено снижение экспрессии адгезивных и костимулирующих молекул, а также критическое снижение экспрессии HLA-молекул, особенно I класса.

Предполагается, что уменьшение количества ДК и потеря ими ряда функций может быть одной из главных причин отсутствия полноценного иммунного ответа на развивающуюся опухоль. ДК принадлежат к уникальным АПК, которые поглощают АГ, процессируют их и представляют в комплексе с молекулами МНС І или ІІ во вторичных лимфоидных органах для «ознакомления» (прайминга) «наивных» Т-клеток или активации Т-клеток со свойствами натуральных киллеров (НКТ) и НК-клеток.

ДК -- очень важное связующее звено между естественным и адоптивным иммунитетом, способным активировать первичный и вторичный иммунный ответ, индуцировать развитие иммунологической памяти 9-12]. В отличие от других АПК, ДК обладают несколькими дополнительными механизмами, позволяющими им представлять АГ в комплексе не только с молекулами МНС II класса, но и МНС I класса, что является ключевым моментом для мощной генерации ЦТЛ, способных инактивировать опухолевые клетки. Это так называемое перекрестное представление, когда АГ, обычно представляемые молекулами МНС II класса, могут быть представлены также и молекулами I класса [13, 14]. Одновременно запускается цитокиновый каскад и включается второй активационный сигнал, опосредованный молекулами костимуляции В7, которые экспрессируются в большом количестве на поверхности зрелых ДК.

Два сигнала существуют для того, чтобы избежать ответа на свои АГ. В случае злокачественных новообразований именно отсутствие второго сигнала зачастую делает невозможным формирование противоопухолевого ответа клетками иммунной системы. Исходя из вышеизложенного, можно предположить, что возможными механизмами реализации эффекта ДК-вакцинотерапии может быть обеспечение достаточной иммуногенности опухолевых АГ; создание условий для их эффективной презентации; преодоление местной или системной иммуносупрессии [15, 16].

Существуют разные методы получения ДК-вакцин[17, 18, 19]: нагрузка ДК пептидами АГ опухолей; рецепторопосредованное поглощение макромолекулярного АГ; трансфекция ДК РНК опухоли, кодирующее АГ, плазмидной ДНК, вирусными векторами; обеспечение взаимодействия с некротизованными опухолевыми клетками или их отдельными фракциями, с апоптотическими опухолевыми клетками; образование химер ДК с опухолевыми клетками; использование экзосом.

Все еще не прекращаются попытки получения универсальной ДК-вакцины против широкого спектра опухолей. Для этих целей необходимо осуществить выбор подходящего опухолевого АГ для «нагрузки» ДК. Интерес исследователей в этом плане привлек опухолеассоциированный АГ MUC-1, экспрессирующийся на клетках многих эпителиальных опухолей (рак поджелудочной, молочной железы, рак почки и др.) и антигены, кодируемые такими генами, как MAGE, BAGE и GAGE, экспрессируемые клетками опухолей различных гистологических типов, но отсутствующие в клетках нормальных тканей; полипептидный компонент теломеразы -- ее каталитическая субъединица -- обратная транскриптаза (TERT), так как теломераза не активна в нормальных тканях, но реактивируется более чем в 85% типов опухолей. ДК уже достаточно широко используют для индукции и получения большого количества антигенспецифических Т-лимфоцитов (ЦТЛ) не только in vivo, но и in vitro [10, 11, 12]. При этом сообщается о довольно высокой частоте стабилизации или регрессии опухоли или метастатических узлов, повышении продолжительности жизни больных онкологического профиля после их введения.

Первые попытки экспериментальной вакцинации ДК животных с опухолями были проведены в конце 1980 г. Успешно проведенные исследования способствовали дальнейшему развитию технологии вакцинотерапии ДК и ее использованию в клинике. Первые результаты клинических попыток использования ДК, нагруженных опухолевым АГ, для терапии больных злокачественными новообразованиями были описаны в 1996 г. у пациентов с неходжкинской В-клеточной лимфомой. У всех больных отмечали усиление специфического противоопухолевого иммунного ответа.

Из четырех исследованных случаев у одного пациента определяли полную регрессию опухоли, у другого -- частичную. В этом же году вакцинацию ДК получили больные метастатическим раком простаты, а в 1998 г. -- меланомой. В настоящее время клиническая эффективность противоопухолевых вакцин на основе ДК уже показана на большой группе больных, в частности с неходжкинской В-клеточной лимфомой, при локализованной и метастатической меланоме, при раке различной локализации, в том числе при раке яичника и миеломной болезни [13, 14, 15]. При этом использовались ДК различного происхождения (аутологичные и аллогенные), полученные из мононуклеаров периферической крови или костного мозга, различные способы нагрузки АГ. Для достижения эффекта вводилось от 2,6 до 37,6 млн зрелых ДК одноразово или за несколько раз (от 3 до 15) с различными временными интервалами (от 3 нед до нескольких месяцев) [16]. ДК, нагруженные АГ, вводили в метастатические лимфоузлы, перитуморально, внутривенно, внутрикожно или подкожно [17]. Показано, что способ введения ДК существенно влияет на их распределение в лимфоидной ткани, и это необходимо учитывать в каждой конкретной клинической ситуации [18]. В большинстве случаев ДК-вакцинотерапия не сопровождается развитием серьезных побочных эффектов, однако в единичных случаях у больных меланомой все же имело место развитие аутоиммунной патологии.

Еще одной достаточно серьезной проблемой ДК-вакцинотерапии является возможность индукции толерантности к опухоли в случае использования ДК с толерогенными свойствами, особенно велик риск при использовании клеток недостаточной степени зрелости [19]. Остается также много нерешенных проблем, связанных с методами изготовления ДК-вакцин, выбором опухолевого АГ, конструированием наиболее эффективных протоколов их применения с учетом режимов и способов введения, качества и количества используемых клеток.

Остается актуальным поиск методов мониторинга, в частности иммуномониторинга проводимой ДК-вакцинотерапии, что позволило бы подходить к данному методу биотерапии опухолей на объективной основе и прогнозировать успех или неудачу планируемого вида лечения. Как показывает накопленный клинический опыт, для достижения эффективности ДК-вакцинотерапии необходимы максимальное уменьшение размеров опухоли (циторедуктивные операции, химио-, лучевая терапия), достаточная иммунокомпетентность организма-опухоленосителя и одновременная активная неспецифическая иммунотерапия: введение FLT-3L, ГМ-КСФ, низких доз ИЛ-1,2,7,12, интерферона-г, антител к CTLA-4, что позволит усилить противоопухолевый иммунитет и предотвратить реци-див либо отдалить его. Между тем следует отметить, что в процессе клинических испытаний противоопухолевые вакцины применяли больным лишь на запущенной стадии заболевания и зачастую при отсутствии успеха от стандартной терапии, то есть фактически в клинике эти вакцины до сих пор полноценно не апробировались. Многие испытания пока прошли лишь первую фазу и не включали контрольные группы. Можно предположить, что применение противоопухолевых ДК-вакцин будет более эффективно у больных со злокачественными новообразованиями на ранних стадиях процесса после проведения циторедуктивного лечения и адекватных иммунокорригирующих мероприятий [11].

Они сохраняют мощный антиген-презентирующий аппарат ДК и способны стимулировать цитотоксические лимфоциты с развитием полноценного противоопухолевого ответа [19]. Важно, что презентация антигена Т-лимфоцитам происходит в сочетании со всем широким спектром костимулирующих молекул, секретируемых ДК. Такая стратегия позволяет создавать ПВ на основе аутологичных ДК и аллогенных ОК, охарактеризованных по антигенному составу, поэтому нет необходимости типировать больных и ОК по HLA. Результаты экспериментальных исследований позволили перейти к клиническому испытанию дендритомных вакцин, получены результаты I-II фазы исследований [16,18].

В Институте экспериментальной патологии, онкологии и радиобиологии им. Р.Е. Кавецкого НАН Украины проведены масштабные исследования по конструированию и изучению эффективности ПВ, приготовленных из аутологичных ОК с помощью продуктов синтеза B. subtilis В-7025 [11, 18]. Провеены доклинические и три фазы клинических исследований ПВ -- доказана эффективность применения ПВ в комплексной терапии больных колоректальным раком [18], раком легкого [11], желудка [18, 19], молочной железы, яичника, злокачественными опухолями головного мозга [11]. В экспериментальных и клинических исследованиях изучено влияние ПВ на характеристики специфического и неспецифического звеньев иммунной системы. Совокупность полученных результатов обосновывает применение разработанной ПВ в комплексной терапии больных онкологического профиля.

онкология биотерапия вакцина генотпрапия

Моноклональные антитела

МкАТ -- это белки (иммуноглобулины), вырабатываемые В-лимфоцитами в ответ а чужеродные вещества, селективно направленные против того или иного антигена, что является их существенным преимуществом по сравнению с классическими цитостатиками. За последние десятилетия созданы и изучены в предклинических исследованиях сотни МкАТ к различным антигенам, десятки из них дошли до стадии клинических испытаний, отдельные МкАТ получили разрешение на применение в качестве лекарственных средств. Максимален успех препаратов МкАТ, направленных либо против антигенов В-лимфоцитов (лечение пациентов с гемобластозами), либо против рецептора эпидермального фактора роста EGFR (лечение пациентов с солидными опухолями) [12, 14].

Ритуксимаб был первым противоопухолевым МкАТ, выпущенным швейцарской фирмой «Ф. Хоффман-Ля Рош Лтд» еще в 1997 г. Это химерные антитела против CD20, который экспрессируется более чем на 95% клеток В-клеточных неходжкинских лимфом (НХЛ); эффективен в комбинированном лечении при НХЛ высокой и низкой степени злокачественности, есть данные о способности МкАТ повышать чувствительность клеток лимфомы к действию химиопрепаратов [53, 54].

Офатумумаб -- человеческие рекомбинантные МкАТ против CD20 («Glaxo SmithKline», Великобритания), проходит III фазу клинических испытаний для лечения хронического резистентного В-клеточного лимфоцитарного лейкоза [15]. Алемтузумаб («Schering AG», Германия) -- гуманизированные МкАТ против CD52, который экспрессируется на нормальных и малигнизированных Т- и В-лимфоцитах, моноцитах, тимоцитах и макрофагах. Связывание МкАТ с CD52 приводит к лизису клеток вследствие активации комплемента, развития антитело-зависимой клеточной цитотоксичности, а также индукции апоптоза. Препарат выпущен на рынок в 2001 г. и применяется для лечения при В-клеточном хроническом лимфолейкозе (ХЛЛ) [13, 18].

Трастузумаб («Ф. Хоффман-Ля Рош Лтд», Швейцария) -- гуманизированные МкАТ против антигена Her2/neu -- члена семейства рецепторов (рецепторов тирозинкиназ) EGFR. Антиген гиперэкспрессирован на эпителиальных ОК протоков молочной и поджелудочной железы, яичников и пр. Гиперэкспрессия Her2/neu у 25-30% больных раком молочной железы коррелирует с плохим прогнозом течения заболевания и резистентностью опухоли к химиотерапии [16]. Применение трастузумаба повышает частоту и длительность терапевтического эффекта [17].

Цетуксимаб («Boehringer Ingelheim Pharma», Германия) -- химерные МкАТ против EGFR, экспрессия которых усилена, как отмечено выше, в клетках опухолей эпителиального происхождения (рак легкого, молочной железы, толстого кишечника) и сопровождается плохим прогнозом. Цетуксимаб ингибирует функции EGFR, сенсибилизирует цитотоксические эффекторные клетки в отношении экспрессирующих EGFR ОК, а также усиливает процессы апоптоза и способствует преодолению резистентности к лучевой и химиотерапии [14, 15].

Панитумумаб («Amgen», Швейцария) -- рекомбинантные человеческие МкАТ против EGFR, разрешен для лечения колоректального рака [15, 16]. Синтезированы также препараты, блокирующие пролиферативный сигнал тирозинкиназы EGFR, -- Эрлотиниб и Гефитиниб, которые проходят клинические испытания при немелкоклеточном раке легкого, раке молочной и поджелудочной железы [17].

В тех случаях, когда связывание МкАТ с соответствующим антигеном не приводит к гибели клеток, они могут использоваться как средства направленной доставки токсических агентов в опухоль. К таким препаратам относится иммунотоксин Гемтузумаб озогамицин («Wyeth», США) -- конъюгированные с токсином озогамицином МкАТ к антигену миелоидных клеток CD33, который экспрессирован на бластных клетках миелоидного ряда в 80% случаев острого миелоидного лейкоза. После связывания МкАТ с антигеном комплекс попадает в клетку, где токсин освобождается и расщепляет ДНК.

При злокачественных лимфомах применяется также дени-лейкиндифитокс -- мышиные МкАТ (анти-CD25)+дифтерийный токсин [1].

Существенный клинический эффект у больных НХЛ получен при применении радиоиммуно-конъюгатов: 90Y-ибритумомаб тиуксетан («Cell

Therapeutics», США) и 131I-тозитумомаб («Corina», Швейцария), -- которые представляют собой мышиные МкАТ против CD20 В-лимфоцитов человека, конъюгированные с бета-излучателями 90Y и 131I. Важнейшим направлением целенаправленной (таргетной) противоопухолевой терапии является создание препаратов, блокирующих опухолевый ангиогенез путем воздействия через фактор роста эндотелия сосудов VEGF [10, 11]. К ним относятся гуманизированные МкАТ против VEGF -- бевацизумаб («Ф. Хоффман-Ля Рош Лтд», Швейцария). Предотвращение взаимодействия VEGF с его рецепторами препятствует ангиогенезу, может разрушить уже сформировавшиеся сосуды и приводит к угнетению роста опухоли. Препарат эффективен у больных с опухолями почки и толстой кишки [12, 13, 14].

В России разрабатывается препарат на основе МкАТ ICO-25 к муциноподобному антигену мембран жировых глобул женского молока [68]; предклинические исследования показали возможность использования этих МкАТ для торможения роста опухолей эпителиального генеза, однако препарат обладает аллергизирующими свойствами. Разрабоана (НПЦ «Медбиоспектр», Россия) лекарственная форма нативных МкАТ против СD3-антигена Т-лимфоцитов человека, который экспрессируется на поверхности зрелых Т-лимфоцитов и тимоцитов, поэтому может быть использован для селективного подавления клеточного иммунитета [18].

В настоящее время проводятся исследования других возможных мишеней для воздействия с помощью МкАТ. К таким антигенам относятся фибронектин, EpCAM, интегрин, CD30, CD89, опухолеспецифичный антиген клеток рака почки, простат-специфичный мембранный антиген, раково-эмбриональный антиген и другие [13]. МкАТ против этих антигенов показали многообещающие предклинические результаты. Перспективным представляется и разрабатываемое комбинированное применение МкАТ и фото динамической терапии [11].

Цитокины

Цк -- биологически активные вещества пептидной природы, регулирующие широкий спектр процессов, протекающих в организме. Они вырабатываются преимущественно клетками иммунной системы, являясь одновременно и ее регуляторами; продуцентами Цк могут быть и эпителиоциты, а также эндотелиальные клетки. Цк участвуют в регуляции процессов эмбриогенеза, гемопоэза, иммунного ответа, мукозального гомеостаза, ангиогенеза, апоптоза, хемотаксиса [12]. Поскольку продукция Цк определяет развитие ряда заболеваний, ведется по-иск возможностей их применения (или применения их антагонистов) в терапевтических целях. Использование Цк с целью модуляции иммунного ответа является методом лечения при многих опухолях. За последние десятилетия накоплен огромный экспериментальный и клинический материал применения отдельных Цк в терапии злокачественных новообразований как важного дополняющего звена комплексного воздействия. Перспективным представляется сочетание Цк с другими средствами Бт (ПВ, МкАТ), химиопрепаратами [12-14].

Цк применяются в комплексных схемах, включающих адоптивную клеточную терапию или Вт [1, 14, 15], используются для конструирования генномо-дифицированных [13-15] и ДК ПВ [7, 9, 18]. Для противо опухолевой терапии наибольший интерес представляют интерлейкины (ИЛ) -1б, -2, -4, -12 [72, 74, 76]; интерфероны -- (ИФ-б, ИФ-г и их индукторы) [77, 78]; фактор некроза опухоли (ФНО-б) [79]; ГМ-КСФ [15]. Показания к применению цитокинотерапии при различных формах новообразований существенно отличаются.

Генотерапия

Современные подходы к генной терапии при опухолях основаны, во-первых, на нормализации работы мутировавшего гена (онкогена или гена-супрессора) и, во-вторых, на обучении иммунной системы организма распознавать ОАА и активировать противоопухолевый иммунный ответ. Прогресс в генной биотехнологии позволил конструировать генные ПВ и другие биологически активные вещества [18]. Вводя рекомбинантный ген или вирусный вектор в делящиеся клетки, можно восстановить утраченный генетический материал, исправить дефектные гены или усилить активность нужного гена [12].

Так, современные методы биотехнологии позволяют активировать гены-супрессоры злокачественного роста клеток, ускорить их апоптоз, повысить иммуногенность ОАА, увеличить способность эффекторных клеток распознавать ОК, изменять их обменные процессы [12, 13]. В целях снижения риска побочных эффектов, для внутриклеточной доставки генетического материала взамен вирусных векторов предлагаются наночастицы, например гидроксиапатита, хорошо адсорбирующие биомолекулы. Они могут применяться для увеличения специфичности терапии суицидными генами [14]. Таким образом, можно отметить, что Бт как направление клинической онкологии длительное время оставалась на уровне научных разработок, но за последние десятилетия смогла преодолеть порог, разделяющий экспериментальные исследования и клиническую практику. Вместе с тем ее развитие затрагивает и другое бурно развивающееся направление -- молекулярную биологию и внедрение в онкологию средств, созданных с помощью методологии этой науки. Наряду с адаптивной клеточной терапией и Вт, активно разрабатываемыми в последние десятилетия, в настоящее время внимание исследователей все больше привлекает применение МкАТ, генотерапии, вирусных векторов. Обобщая доступные в настоящее время данные можно с уверенностью сказать, что комплексное использование современных методов Бт открывает принципиально новые возможности в онкологии.

ЛИТЕРАТУРА

1. Ялкут СИ, Потебня ГП. Биотерапия опухолей. Киев: Книга-Плюс, 2010. 472 с.

2. Барышников АЮ. Биотерапия опухолей: неудачи и перспективы. Маммология 2007; 1: 13-6.

3. Gonzalez AB, Jimenez RB, Delgado PJR, et al. Biochemotherapy in the treatment of metastatic melanoma in selected patients. Clin Transl Oncol 2009; 11 (6): 382-6.

4. Cohen DJ, Hochster HS. Rationale for combining biotherapy in the treatment of advanced colon cancer. Gastrointest Cancer Res 2008; 2 (3): 145-51.

5. Torchilin VP. Targeted pharmaceutical nanocarriers for cancer therapy and imaging. AAPS J 2007; 9 (2): 15.

6. Саквина ОИ, Барышников АЮ. Липосомы в направленной доставке противоопухолевых препаратов. Рос биотер журн 2008; 7 (4): 80-5.

7. Kochenderfer JN, Gress RE. A comparison and critical analysis of preclinical anticancer vaccination strategies. Exp Biol Med 2007; 232: 1130-41.

8. Schlom J, Gulley JL, Arlen PM. Paradigm shifts in cancer vaccine therapy. Exp Biol Med 2008; 233: 522-34. 9. Itoh K, Yamada A, Mine T, Noguchi M. Recent advances in cancer vaccines: an overview. Jpn J Clin Oncol 2009; 39 (2): 73-80.

9.Chang MH, Chen TH, Hsu HM, et al. Prevention of hepatocellular carcinoma by universal vaccination against hepatitis B virus: the effect and problems. Clin Cancer Res 2005; 11: 7953-7.

10. Кlade CS, Wedemeyer H, Berg T, et al. Therapeutic vaccination of chronic hepatitis C nonresponder patients with he peptide vaccine IC41. Gastroenterol 2008; 134: 1385-95.

11. Kahn JA, Burk RD. Papillomavirus vaccines in perspective. Lancet 2007; 369: 2135-7.

12. Scarinci IC, Garcia FA, Kobetz E, et al. Cervical cancer prevention: new tools and old barriers. Cancer 2010; 116 (11): 2531-42.

13. Rosenberg S. Progress in human tumour immunology and іmmunotherapy. Nature 2001; 411 (6835): 380-4.

15. Mosca PJ, Hobeika AC, Clay TM, et al. Direct detection of cellular immune responses to cancer vaccines. Surgery 2001; 129 (3): 248-54.

16. Palena C, Schlom J. Vaccines against human carcinomas: strategies to improve antitumor immune responses. J Biomed Biotechnol 2010; 2010: 3806-97.

17. Потебня ГП, Лисовенко ГС, Чехун ВФ. Использование в клинической онкологии противоопухолевых вакцин на основе опухолевых клеток или их лизатов. Пробл клин мед 2006; 3 (7): 32-45.

18. Моисеенко ВМ, Данилов АО, Балдуева ИА и др.

I-II фаза клинической оценки эффективности генотерапии на основе аутологичных опухолевых клеток, модифицированных геном TAG7 у больных с диссеминированными солидными опухолями. Вопр онкол 2004; 50 (3): 293-303. 25.

19. Храновська НМ. Стратегія створення та результати терапевтичного застосування протипухлинних аутовакцин нового покоління на основі дендритних клітин. Онкол 2010; 12 (1): 134-9.

Размещено на Allbest.ru