Главная База знаний "Allbest" Медицина Биохимические исследования при заболеваниях сердечно-сосудистой системы

Биохимические исследования при заболеваниях сердечно-сосудистой системы

Использование лабораторных маркеров для диагностики кардиологических заболеваний. Исследование показателей свертывания крови. Оценка состояния гемостаза. Определение миоглобина и протромбина по Квику. Основные режимы работы биохимических анализаторов.

Рубрика Медицина
Вид дипломная работа
Язык русский
Дата добавления 31.01.2018
Размер файла 1,9 M

Отправить свою хорошую работу в базу знаний просто. Используйте форму, расположенную ниже

Студенты, аспиранты, молодые ученые, использующие базу знаний в своей учебе и работе, будут вам очень благодарны.

Страница:

Данный показатель назван как «суммарная окислительная модификация липопротеидов сыворотки крови» (СОМ. Расчёт СОМ проводился по следующей формуле: СОМ- ОЛП + РЛП.

Определение малонового диальдегида. Вторичным (промежуточным) продуктом ПОЛ является малоновый диальдегид (МДА). Его количество определяли колориметрическим способом.

Метод основан на образовании в кислой среде триметинового комплекса, состоящего из одной молекулы МДА и двух молекул 2-тиобарбитуровой кислоты, который обладает розовым цветом. Количество МДА рассчитывали исходя из 8о= 1,56х105М-1 см"1 и выражали в нМ/мг окисленных липопротеидов.

Внеэритроцитарный гемоглобин (ВЭГ) плазмы крови определяли спектрофотометрическим методом, описанным A.B. Каракшевым, В.П. Вячевым [1973], полученные результаты выражали в мМУл.

Калликреинкининовая система сыворотки крови. Общую белок-эстеразную активность (ОБЭА) определяли спектрофотометрически по скорости гидролиза эфирной связи под действием протеиназ исследуемой сыворотки в молекуле синтетического субстрата методом Frautschold, Werle [1961] в модификации Т.С. Пасхиной, Г.Н. Яровой [1970]. Эстеразную активность сыворотки выражали в дезагрегации (ДА) определяли с помощью анализатора агрегации тромбоцитов. Результаты выражали в процентах.

Время свёртывания крови (ВС) (мин.), активированное частичное тромбопластиновое время (АЧТВ) (с), тромбиновое время (ТВ) (с), содержание фибриногена в плазме крови (Ф) (г/л) определяли на анализаторе показателей гемостаза.

Исследование концентрации фибриногена Б осуществляли по X.JI. Ломазовой, 1971 [цит. по Балуда В.П., 1980], растворимого фибрина по В. Lipinski, К. Worowski, 1968. Уровень фибрин- мономерных комплексов определяли с помощью набора компании Vitaldiagnosticsо-фенантролиновым методом. Содержание данных показателей выражали в г/л.

Для характеристики противосвёртывающих механизмов системы свёртывания крови определяли активность антитромбина П1 (%) на анализаторе показателей гемостаза.

О состоянии фибринолитической системы крови судили по общей фибринолитической активности эуглобулиновой фракции плазмы (мин), определяемой с помощью набора реагентов компании Vitaldiagnostics. Содержание в плазме продуктов деградации фибриногена и фибрина (г/л) определяли по L. Nannigo, М. Juet, 1967, комплексов гепарина с фибриногеном (г/л) - по В.Б. Воробьёву, Н.И. Голубенковой, 1987.

Методы определения реологических свойств крови. Для оценки реологических свойств крови определяли гематокритную величину (%) на автоматическом гематологическом анализаторе КХ-21; свободную седиментацию эритроцитов (мм) - по Д.Е. Ванькову, 1971; агрегацию эритроцитов крови (%) с использованием расчётного способа по Dintenfass[Ваньков Д.Е., 1971].

Активность лейкоцитарной эластазы (КФ 3.4.21.37) оценивали путём определения её энзиматической активности с синтетическим субстратом [Доценко B.JI. и соавт., 1994]

Активность аг-макроглобулина определяли спектрофотометрически по сохраняющейся аргинин-эстеразной активности комплекса трипсин аг- макроглобулин, образующегося после взаимодействия избытка трипсина с сывороткой крови, разведённой в 10 раз; и последующей инактивацией свободного, не связанного с а2-макроглобулином, трипсина соевым ингибитором трипсина [Нартикова В.Ф., Пасхина Т.С., 1979]. Активность аг- макроглобулина выражали в ИЕ/мл.

Активность ai-протеиназного ингибитора оценивали спектрофотометрически по торможению аргинин-эстеразной активности трипсина разведённой в 50 раз сывороткой крови [Доценко B.JI. и соавт., 1994]. Активность ai-протеиназного ингибитора выражали в условных ингибиторных единицах в мл сыворотки крови (ИЕ/мл). За 1 ИЕ принято такое количество сыворотки, которое тормозит гидролиз трипсином 1 мкмоль ОБЭА за 1 мин. При 25°С.

Методы оценки состояния гемостаза. О системе гемостаза судили путём оценки состояния сосудисто- тромбоцитарного, коагуляционного, антикоагулянтного звеньев, общей фибринолитической активности.

Сосудисто-тромбоцитарный компонент гемостаза оценивали на основании определения количества тромбоцитов в крови (Т) (х 10%), используя для подсчёта кровяных пластинок гематологический анализатор КХ-21. Спонтанную агрегацию тромбоцитов (CAT), АДФ - индуцированную агрегацию тромбоцитов (ИАТ) и способность тромбоцитарных агрегатов к

В целях правильного освещения количественных изменений изучаемых показателей, а также контроля предположения о наличии или отсутствии связи между ними, была проведена статистическая обработка полученного материала с использованием компьютерной программы Microsoft Excel Windows.

Обработку полученных данных осуществляли методом вариационной статистики с вычислением средней арифметической величины (М), среднеквадратического отклонения (а), средней ошибки средней арифметической (m). Оценку значимости различий двух независимых и зависимых совокупностей выполняли с помощью критерия t Стьюдента.

Различия считали достоверными при р<0,05, что соответствует критериям, принятым в медико-биологических исследованиях.

Корреляционный анализ выполняли с использованием электронных таблиц Excel. Определялось наличие взаимосвязей между показателями велоэргометрии, основными параметрами катаболизма коллагена, конечными продуктами метаболизма глюкозы, кислородтранспортной функции эритроцитов, антиоксидантной защиты, модифицированных липопротеидов, активности протеиназ и их ингибиторов, гемостаза в различных биологических жидкостях у юношей с ПМК. Объективным результатом считался коэффициент корреляции г, равный или более 0,349 (р<0,05).

ГЛАВА 3. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

Рассмотрим результаты определения разных форм оксипролина у пациентов с ПМК представлены в таблице 1.

Содержание связанного оксипролина в обеих группах пациентов с ПМК достоверно не отличалось от контроля. В то же время уровень свободного оксипролина в 1-й и 2-й группах больных с ПМК превышал значения у здоровых лиц соответственно в 1,51 и 2,08 раза (р<0,05) и зависел от функционального состояния сердечно-сосудистой системы.

Содержание свободного оксипролина является показателем интенсивности катаболизма коллагена, вызванного неполноценностью его структуры при соединительнотканной дисплазии. При нарушениях синтеза коллагена уменьшаются поперечные связи в его фибриллах, что приводит к возрастанию содержания легкорастворимого коллагена. Поэтому у больных с нарушенным метаболизмом соединительной ткани увеличивается экскреция оксипролина с мочой, содержание его свободной фракции и уменьшается содержание связанной фракции.

Таблица 1 Уровень свободного и связанного оксипролина сыворотки крови в зависимости от функционального состояния сердечно-сосудистой системы у юношей с первичным ПМК, X ± т

Показатель/ Группы пациентов

Группа сравнения, п=30

1-я группа,

п=62

2-я группа,

п=38

О связ., мкг/мл

0,32±0,087

0,20±0,074

0,174±0,083

О своб., мкг/мл

1,42±0,19

2,15±0,26*

2,95±0,28*»

Примечание к таблице 1: * - р<0,05 по сравнению с контролем; р<0,05 во 2-й группе по сравнению с 1-й группой.

Результаты, полученные в группе сравнения и представленные в таблицах 1-11 соответствуют литературным данным [Хозин A.A., 2002; Лысенко A.B., Арутюнян A.B., Козина Л.С., 2005; Ягода A.B., Гладких H.H., 2005; Василёнок A.B., 2008; Литвинов A.B., 2008; Andrew М., Vegh Р., Johnston М. et al., 2006].

Следует отметить, что в нашем исследовании выраженность изменений зависела от функционального состояния сердечно-сосудистой системы. У пациентов во 2-й клинической группе уровень свободного оксипролина в 1,37 раза превышал значение в 1-й клинической группе (р<0,05). Данный факт отражает патогенетический механизм нарушения структурно-функционального состояния соединительной ткани, неоднозначный в анализируемых группах.

Полученные результаты обосновывают необходимость углублённого анализа состояния ключевых гомеостатических систем у пациентов с неодинаковыми функциональными возможностями. В этой связи представлялось актуальным исследовать причины и механизмы формирования различного функционального состояния у пациентов с разной выраженностью повреждений в структуре соединительной ткани.

3.1 Окислительно-восстановительные процессы и активность ферментов антиоксидантной защиты в эритроцитах и ротовой жидкости у юношей с пролапсом митрального клапана

Окислительно-восстановительные процессы в организме составляют важную часть любого звена метаболизма и необходимы как для обеспечения энергетических потребностей, так и для доставки и утилизации кислорода в тканях. Они регулируются различными системами и поддерживают сбалансированное взаимодействие реакций образования продуктов оксидации, а также механизмов контроля, ведущих к их торможению при избыточной активности реакций антиоксидации.

Кислородтранспортную функцию эритроцитов оценивали по концентрации гемоглобина, количеству эритроцитов, содержанию 2,3-ДФГ, ВЭГ в крови и сопоставляли полученные данные с функциональным состоянием сердечно-сосудистой системы, определённым с использованием инструментальных методов.

В крови концентрация НЬ достоверно не отличалась от контроля как в 1-й, так и во 2-й клинических группах (таблица 2). В то же время содержание эритроцитов у пациентов 1-й группы превышало данные группы сравнения на 21,89% (р<0,05) и 2-й группы - на 23,3% (р<0,05).

Концентрация 2,3-ДФГ-молекулярного регулятора сродства гемоглобина к кислороду в эритроцитах пациентов с ПМК 1-й и 2-й клинических групп превышала значения в контрольной группе соответственно в 2,68 и 2,33 раза (р<0,05). При этом способность эритроцитов к отдаче кислорода тканям у контингента 2-й группы была выражена в меньшей степени (на 13,08%), чем в 1-й группе (р<0,05).

Более высокий рост 2,3-ДФГ у пациентов 1-й группы свидетельствовал, по нашему мнению, о более выраженных адаптивных возможностях у этой группы пациентов.

Таблица 2

Параметры кислородтранспортной функции эритроцитов в зависимости от функционального состояния сердечно-сосудистой системы у юношей с ПМК, X ± ш

Показатель/ Группы пациентов

Группа сравнения,

п=30

1-я группа, п=62

2-я группа,

п=38

г/л

Гемоглобин,

132,23±8,64

0

149,43±9,5

131,37±7,65

Эритроциты, х1012/л

4,34±0,44

5,29±0,35*

4,29±0,25»

2,3-ДФГ,

мкМУмл

4,74±0,30

*

12,69±0,32

11,03±0,35*«

ВЭГ, мМУл

21,1±1,04

84,45±1,14

103,62±1,22*

*

*

Примечание к таблице 2: * - р<0,05 по сравнению с контролем, *- р<0,05 по сравнению с группой 1.

Полученные нами данные свидетельствовали о сдвигах метаболического обеспечения кислородтранспортной функции эритроцитов крови. Отмечается рост концентрации 2,3-ДФГ в эритроцитах этих групп, что свидетельствует о конформационных изменениях структуры гемоглобина (переход из Я - в Т- конформацию) и приводит к снижению сродства гемоглобина к кислороду.

Подобные явления принято рассматривать как адаптационный механизм, направленный на улучшение снабжения тканей кислородом. Характер изменения уровня 2,3-ДФГ является выражением

«надёжности» адаптационных механизмов, связанным с повышением эффективности функции системы транспорта и утилизации кислорода, а также гарантом сохранения структурно-функциональной целостности эритроцитов.

Метаболический ацидоз, согласно эффекту Вериго-Бора, способствует сдвигу кривой диссоциации оксигемоглобина вправо, что характеризуется повышенной диссоциацией оксигемоглобина в тканевых капиллярах, с одной стороны, а с другой стороны, ведёт к деструкции клеточных мембран и разрушению клеток.

Данные события подтверждаются одновременным ростом уровня ВЭГ в крови пациентов с ПМК 1-й и 2-й клинических групп в 4,91 и 4,0 раза соответственно относительно контрольной группы, что указывает на значительное повышение прооксидантной активности. ВЭГ можно рассматривать в качестве косвенного параметра, отражающего целостность эритроцитарных мембран.

Нарушение стабильности клеточных мембран связано с изменением структуры мембран эритроцитов, возможно, обусловленным активацией перекисного окисления липидов. При этом в билипидном слое плазмолеммы происходит накопление диенового коньюгата, который впоследствии превращается в малоновый диальдегид, сшивающий молекулы липидов и понижающий текучесть мембраны.

Вследствие этого мембрана становится более хрупкой. Содержание ВЭГ отражает выраженность деструктивных процессов в эритроцитах. В ходе проведенного исследования установлено значительное увеличение концентрации этого метаболита у пациентов с ПМК, более выраженное у лиц с высокими функциональными возможностями. Значение ВЭГ в 1-й клинической группе на 22,7% превышало показатели во 2-й клинической группе (р<0,05).

Выявленные особенности регуляции газотранспортных процессов в эритроцитах при ПМК диктуют необходимость анализа более глубоких механизмов реакции системы крови, формирующихся в ответ на дегенеративные изменения в сердце.

Анализ эритроцита как функционального компонента системы кровообращения при соединительнотканных дисплазиях позволяет сделать заключение о разной чувствительности звеньев этой системы к формирующейся гипоксии.

Выявлены как общие закономерности включения адаптивного модуляционного механизма, так и специфические, отражающие индивидуальную устойчивость к гипоксии. Регистрация коэффициента лактат/пируват позволяет определить эти индивидуальные особенности.

У больных с ПМК в эритроцитах выявлены достоверные различия в концентрации пировиноградной кислоты (ПВК), лактата и соотношения лактат/пируват по сравнению с контролем. Важно подчеркнуть, что регистрировались отличия результатов в двух анализируемых группах.

Как видно из таблицы 3, концентрация лактата в эритроцитах в 1-й группе превышала значения в группе сравнения в 2,23 раза, а во 2-й группе на 51,4%, р<0,05.

Таблица 3

Содержание конечных продуктов гликолиза в эритроцитах в зависимости от функционального состояния сердечно-сосудистой системы у юношей с ПМК, X ± т

Показатель/ Группы пациентов

Группа сравнения, п=30

1-я клиническая группа, п=62

2-я клиническая группа, п=38

ПВК, мкМ/мл

0,17±0,016

0,25±0,054

0,34±0,032*

Лактат, мкМ/мл

2,1±0,122

4,69±0,16*

3,18±0,18*»

Лактат/пируват

12,07±0,42

18,76±0,21*

9,35±0,31**

Примечание к таблице 3: * - р<0,05 по сравнению с контролем, *- р<0,05 по сравнению с группой 1.

У больных 2-й клинической группы уровень ПВК Э был выше, чем в группе сравнения, на 95,4% (р<0,05). Следует отметить, увеличение уровня ПВК положительно влияет на газотранспортную функцию эритроцитов, обеспечивая рост количества 2,3-ДФГ и улучшая процессы микроциркуляции. Очевидно, что полученные результаты отражают роль адаптационных механизмом эритроцитов, направленным на оптимизацию процессов оксигенации тканей в условиях гипоксии.

Повышенную концентрацию ПВК при неадекватном увеличении концентрации ЛЭ можно считать результатом значительно усиленного гликолиза. Объективным показателем интенсивности окислительно- восстановительных процессов является коэффициент лактат/пируват. Коэффициент Л/П в 1-й группе превышал значения в группе сравнения на 55,4%, что было обусловлено напряжённостью гликолиза и могло отражать усиление метаболического обеспечения функциональной активности эритроцитов (рис. 2). Во 2-й группе исследуемый показатель был на 22,5% ниже, чем в группе сравнения (р<0,05). Надо полагать, что в этой группе наблюдался более низкий приспособительный потенциал механизмов, направленных на снижение гипоксии. Выявлено статистически достоверное превышение коэффициента Л/П в эритроцитах больных 1-й клинической группы по сравнению со 2-й группой в 2,0 раза (р<0,05). Полученные факты позволяют полагать, что в исследуемых группах в разной степени реализуются молекулярные механизмы компенсации гипоксии.

Таким образом, у больных ПМК в эритроцитах выявлены значительные нарушения окислительно-восстановительных процессов, отражающие как общие гипоксические изменения, так и индивидуальные особенности реакции организма на гипоксию.

Рисунок 4

Коэффициент лактат/пируват в эритроцитах у юношей с различным функциональным состоянием сердечно-сосудистой системы при ПМК

Примечание к рисунку 4: р< 0,05 по сравнению с группой сравнения. <0> - р<0,05 по сравнению с 1-й группой.

Известно, что в условиях недостаточного снабжения тканей кислородом для сохранения гомеостаза запускается цепь биохимических и физиологических приспособительных реакций. На клеточном уровне такие изменения включают переход энергетического метаболизма на анаэробный путь. Этот процесс осуществляется вследствие возникающих сдвигов внутриклеточной среды (например, рост концентрации и т.д.), которые тормозят активность ферментов аэробного биологического окисления и растормаживают анаэробный гликолиз.

В то же время воздействие гипоксического стимула вызывает формирование приспособительных реакций, направленных на повышение функциональной активности клеток. Проведенный в рамках исследования анализ позволяет сделать вывод, что у пациентов как 1-й группы, так и 2-й с ПМК, развивается тканевая гипоксия, характеризующаяся повышением1 концентрации пировиноградной и молочной кислот. В то же время степень выраженности сдвигов указывает на неравнозначность процессов развития гипоксии у отдельных индивидов.

Нами установлено статистически достоверное превышение коэффициента лактат/пируват в эритроцитах больных 1-й клинической группы по сравнению со 2-й в 2,0 раза (р<0,05).

Проведенный в рамках исследования анализ позволяет сделать вывод, что у пациентов с ПМК коэффициент лактат/пируват отражает функциональное состояние сердечно-сосудистой системы. Соотношение Л/П, превышающее значение в контроле в 1,55 и более раз ассоциируется с сохраненным функциональным резервом. В случае величины данного показателя ниже, чем в группе сравнения в 1,29 раза требуется проведение мероприятий, направленных на повышение приспособительных возможностей организма у юношей с ПМК.

В современных социально-экологических условиях при действии различных факторов окружающей среды большинство функциональных сдвигов носит выраженный адаптивный характер. В этом аспекте перспективным направлением может являться биохимический анализ ротовой жидкости. Доступность и полная неинвазивность получения для лабораторного исследования подчёркивают её ценность, как в диагностике преморбидных и патологических состояний, так и для оценки эффективности проводимого лечения. Анализ ротовой жидкости представляет собой одну из наиболее значимых альтернатив анализу крови, в ряде случаев не только дополняя, но даже его заменяя.

Проведенный нами анализ (таблица 4) выявил достоверное превышение концентрации пировиноградной кислоты во 2-й группе по сравнению с контролем в 2,28 раза соответственно (р<0,05). Уровень лактата в 1-й и 2-й группах по сравнению со здоровыми лицами был ниже в 1,63 и 3,14 раза (р<0,05).

Таблица 4

Содержание конечных продуктов гликолиза в ротовой жидкости в зависимости от функционального состояния сердечно-сосудистой системы у юношей с ПМК, X ± ш

Показатель/ Группы пациентов

Группа сравнения, п=30

1-я клиническая группа, п=64

2-я клиническая группа, п=73

ПВК, мкМУмл

0,18±0,01

0,21±0,08

0,41±0,07**

Лактат, мкМУмл

1,79±0,14

1Д0±0,11*

0,57±0,2*«

Лактат/ пируват

9,94±0,13

5,37±0,15*

1,38±0,11*»

Примечание к таблице 4: * - р<0,05 по сравнению с контролем, *- р<0,05 по сравнению с группой 1.

Соотношение лактат/пируват в 1-й и 2-й группах было меньше, чем в группе сравнения в 1,85 и 7,2 раза соответственно (р<0,05). Это, вероятно, было связано с компенсаторной перестройкой обмена глюкозы у юношей с ПМК и являлось проявлением индивидуального ответа организма на гипоксию. Такой дисбаланс между явным снижением концентрации лактата и повышением концентрации ПВК по всей вероятности отражало нарушение координированного хода окислительных процессов в ротовой жидкости у больных с ПМК.

Представляло интерес проанализировать полученные данные с точки зрения формирования различных вариантов компенсаторной перестройки организма, связанной с различной выраженностью и продолжительностью тканевой гипоксии.

Кроме того, концентрация пирувата в ротовой жидкости во 2-й группе в 2 раза превышала значения в 1- й группе (р<0,05). Во 2-й группе уровень лактата был ниже, чем в 1-й группе на 48,18% (р<0,05). Соответственно коэффициент лактат/пируват был в 3,89 раза ниже во 2-й группе по сравнению с 1-й (р<0,05).

Вынужденное снижение использования энергетических субстратов и уменьшение интенсивности физиологически важных способов высвобождения энергии являлось документальным свидетельством вовлечения в патологический процесс всего организма, что постепенно могло привести к энергодефициту. Данный факт мог служить предпосылкой к формированию различных вариантов приспособительной перестройки организма, связанной с различной выраженностью и продолжительностью тканевой гипоксии. Низкий коэффициент лактат/пируват во 2-й клинической группе отражал ограниченные функциональные возможности клеток. С практической точки зрения представляется важным, что изменение метаболических показателей в ротовой жидкости могут рассматриваться как неинвазивные лабораторные маркёры оценки функционального состояния сердечно-сосудистой системы (рис. 5).

Подводя итоги анализа метаболического обеспечения, проведенного в эритроцитах и ротовой жидкости можно высказать предположение о том, что полученные результаты могут иметь важное практическое и теоретическое значение, подтверждающие роль гипоксии в формировании функционального состояния сердечно-сосудистой системы у юношей с ПМК.

В связи с вышеизложенным, представляется целесообразным оценить роль системы антиоксидантной защиты, также относящейся к кислородзависимым процессам, с целью поиска маркёров специфичности приспособительных реакций сердечно-сосудистой системы у больных с ПМК и отражающих индивидуальность приспособительных перестроек гомеостаза.

Рисунок 5. Коэффициент лактат/пируват в ротовой жидкости юношей с различным функциональным состоянием сердечно-сосудистой системы при ПМК. Примечание к рисунку 5: р< 0,05 по сравнению с группой сравнения. <0> - р<0,05 по сравнению с 1-й группой.

В нормально функционирующих клетках содержание продуктов свободнорадикального окисления находится на крайне низком уровне, несмотря на обилие субстратов ПОЛ. Это свидетельствует о достаточно мощной антиоксидантной защитной системе. К ферментам, оказывающим антиоксидантное действие, относятся супероксиддисмутаза, каталаза, глутатионредуктаза. Ферменты необходимы для реакции инактивации свободных радикалов. Каждая ткань обладает определённой буферной ёмкостью антиоксидантной защиты. Метаболический фон любой клетки зависит от характера информации, поступающей из окружающей среды. Носителями этой информации являются первичные мессенджеры: гормоны, цитокины, нейротрансмиттеры.

Кроме того, в передачу сигнала включаются вторичные мессенджеры. В качестве вторичных посредников принимают активное участие активные формы кислорода (О2-, Н2О2, ОН и гидроперекиси липидов), осуществляющие регулирующую роль в процессах роста клеток, апоптозе, клеточной адгезии, свёртывания крови и т.д. Имеются прямые доказательства, основанные на наблюдениях, что низкие (микромолярные) концентрации активных форм кислорода могут увеличивать рост или усиливать ответ на стимуляцию роста во многих типах клеток млекопитающих. Антиоксиданты, в свою очередь, подавляют нормальную клеточную пролиферацию. В разных биологических системах соответственно тканевой специфичности метаболизма превалируют определённые компоненты антиоксидантной системы. Неодинаковая функциональная значимость биоантиоксидантов для разных тканей предопределяет различия в локальных проявлениях их недостаточности и определённое место в патогенезе заболевания. Несомненно, что важная роль ферментов АОЗ в механизмах клеточной защиты определяет интерес к анализу этой системы, изменения в которой могут служить показателем индивидуальных реакций приспособления к гипоксии у пациентов с ПМК.

Результаты определения активности ферментов АОЗ представлены в таблице 5.

Таблица 5

Активность антиоксидантных ферментов в эритроцитах в зависимости от функционального состояния сердечно-сосудистой системы у юношей с ПМК, X ± ш

Показатель/ Группы пациентов

Группа сравнения

п=64

1-я группа,

п=73

2-я группа,

, п=30

К, мКат/г НЬ

5,65±0,14

1,73±0,18*

1,23±0,17*«

СО

Д,ед.акт./гНЬ х 102

1,66±0,27

10,35±0,92*

6,53±0,38*»

ГР, мкМУгНЬ

хЮ4

2,52±0,16

5,12±0,18*

4,67±0,22*

Примечание к таблице 5: * - р<0,05 по сравнению с контролем, *-р<0,05 по сравнению с группой 1.

Активность ферментов антиоксидантной защиты сравнивали у больных с ПМК, рандомизированных в соответствии с клинико-функциональным статусом на 2 группы.

Анализ состояния компонентов антиоксидантной защиты у больных с ПМК выявил наличие достоверных различий в активности каталазы, СОД и глутатионредуктазы эритроцитов по сравнению со здоровыми лицами (таблица 5).

У больных 1-й группы активность СОД и ГР соответственно была выше в 6,23 и 2,03 раза по сравнению с контролем (р<0,05). У больных 2-й группы наблюдались аналогичные изменения с меньшей степенью выраженности. Превышение над контрольными значениями для СОД и ГР составило 3,99 и 1,85 раза (р<0,05). Активность К была, наоборот ниже, чем в группе сравнения, в 3,26 раза в 1-й группе и в 4,59 раза во 2-й (р<0,05).

При сравнении 1-й и 2-й групп пациентов с ПМК установлена достоверная разница в активности каталазы и СОД. В 1-й группе по сравнению со 2-й активность К была выше на 40,6%, (р<0,05). В то же время

активность СОД была больше в 1-й группе по сравнению со 2-й на 58,5%, (р<0,05). Достоверной разницы по активности ГР между 1-й и 2-й группами обнаружено не было.

Выявленные изменения свидетельствовали о нарушении координированного хода антиоксидантных процессов у пациентов с ПМК, степень выраженности которых зависит от функционального состояния сердечно-сосудистой системы.

Наибольший рост активности СОД и глутатионредуктазы наблюдается в 1-й группе больных с ПМК. Он свидетельствует об усилении процессов детоксикации, что, по нашему мнению, является одним из компенсаторных механизмов. СОД И ГР выступают естественными акцепторами электронов в условиях инициации перекисного окисления липидов. Исходя из полученного фактического материала, можно полагать, что ведущей молекулярной причиной снижения функциональных возможностей у пациентов 2-й группы с ПМК является истощение ферментативной антиоксидантной защиты.

Полученные результаты имеют важное теоретическое и практическое значение. Прежде всего, очевидно участие вышеназванных биохимических систем в механизмах регуляции приспособительных процессов у больных с ПМК. В связи с этим целесообразно рассмотреть пути повышения функциональных возможностей сердечно-сосудистой системы с позиции метаболической регуляции.

Обращает внимание выраженная стимуляция активности СОД глутатионредуктазы в эритроцитах у больных 1-й группы. Супероксиддисмутаза катализирует дисмутацию супероксида в кислород и пероксид водорода.

Таким образом, она играет важнейшую роль в антиоксидантной защите практически всех клеток, так или иначе находящихся в контакте с кислородом. Супероксидный радикал (О2-) спонтанно довольно быстро дисмутирует в кислород О2 и пероксид водорода Н202 (-105 М-1 при рН 7). Тем не менее, супероксид ещё быстрее реагирует с некоторыми другими молекулами-мишенями, такими как оксид азота N0, образуя при этом пероксинитрит.

Однако, супероксиддисмутаза обладает самой высокой известной каталитической скоростью реакции (-109 М-1 б-1). Реакция лимитирована только частотой столкновения супероксида с ферментом (т.н. диффузионно-лимитированная реакция), благодаря чему супероксиддисмутаза защищает клетку от повреждающего действия супероксида.

Супероксид является одним из основных прооксидантов в клетке, поэтому СОД играет одну из ключевых ролей в антиоксидантной защите организма. СОД, кроме того, способствует защите от пролиферации гладкомышечных клеток, индуцированной ЛПНП, подвергнутых окислительному повреждению.

Особое место в антиоксидантной системе организма, антиоксидантном статусе принадлежит глутатион-ферментному автономному объединению: глутатион, глутатионпероксидаза, глутатион-Б-трансфераза, глутатион- редуктаза. Известно, что мощнейшим «поставщиком» свободных радикалов является перекись водорода. Ферментный комплекс заставляет перекисные радикалы вступать в реакцию друг с другом, после чего образуются вода и кислород.

Для сохранения активности глутатионферментного комплекса, необходимы селен, витамины А, С, Е, Б- содержащие аминокислоты и, естественно, глутатион. Весь этот глутатионферментный комплекс предотвращает нарушение клеточных мембран вследствие разрушения пероксидов.

Известно, также, что недостаток в среде НАДФН4" препятствует иорегенерации глутатиона и, тем самым, нарушает глутатионпероксидазный механизм антиперекисной защиты эритроцитов. При этом также затормаживается активность каталазы, что наиболее выражено в группе 2. В этой связи накопление Н2О2 и липопероксидов, может вызвать разрушение эритроцитарной стромы и развитие тяжёлой анемии.

При нарушении баланса антиоксидантных ферментов в эритроцитах вероятно накопление прооксидантов - сывороточного железа, стимуляторов лейкоцитов - М и С- реактивного белка. Необходимо учитывать характер сдвигов антиоксидантной защиты при ПМК, полученный при исследовании эритроцитов.

При дополнении традиционной терапии представлялось целесообразным включение низкомолекулярных антиоксидантов, направленно устраняющих избыток активных форм кислорода (в частности н2о2).

Важная физиологическая роль в окислительно-восстановительных реакциях принадлежит церулоплазмину. Являясь гликопротеидом а.2- глобулиновой фракции сыворотки крови человека, церулоплазмин может действовать как прооксидант или как антиоксидант в зависимости от наличия других факторов.

В присутствии супероксида (например, в воспаленном сосудистом эндотелии), он выступает катализатором окисления липопротеидов низкой плотности. На основании результатов эпидемиологических исследований, церулоплазмин рассматривается как независимый фактор риска сердечно-сосудистых заболеваний.

Действуя как ферроксидаза, церулоплазмин выполняет важнейшую роль в регуляции ионного состояния железа - окислении Бе2+ в Ре3+. Поддержание нормального транспорта и метаболизма железа - жизненно важная функция церулоплазмина. При дефиците железа происходит активация транскрипции гена церулоплазмина гипоксия-индуцибельным фактором-1 (НПМ), который также активирует гены эритропоэтина, трансферрина и его рецептора.

Церулоплазмин относится к острофазным реактантам. Концентрация его в крови повышается во время воспаления, инфекции, травматических состояний - вследствие активации транскрипции гена церулоплазмина а- интерфероном и цитокинами.

Исходя из того, что церулоплазмин выполняет в организме ряд важных биологических функций: повышает стабильность клеточных мембран; участвует в иммунологических реакциях; ионном обмене; оказывает антиоксидантное действие; стимулирует гемопоэз, представлялось актуальным исследование церулоплазмина в сыворотке крови у пациентов с ПМК в зависимости от функционального состояния сердечно-сосудистой системы.

По результатам проведенного нами исследования выявлено значительное повышение содержания церулоплазмина в сыворотке крови у пациентов как 1-й, так и 2-й клинических групп соответственно на 92,0 и 47,99 % (р<0,05).

Следует отметить, что у пациентов 1-й клинической группы этот показатель на 22,93% превышал значения во 2-й клинической группе (р<0,05). Таким образом, выявлено более выраженное повышение содержания ЦП в 1-й клинической группе, что можно рассматривать как приспособительную реакцию в ответ на активацию перекисного окисления липидов.

Это свидетельствует о сохранении компенсаторных возможностей организма в целом и сердечно-сосудистой системы в частности в 1-й клинической группе. В то же время неадекватное повышение содержания ЦП во 2-й клинической группе можно рассматривать в качестве маркёра снижения функциональных возможностей сердечно-сосудистой системы.

Таблица 6

Содержание церулоплазмина в сыворотке крови в зависимости от функционального состояния сердечно-сосудистой системы у юношей с ПМК, X ± ш

Показатель/ Группы пациентов

Группа сравнения, п=30

1-я группа, п=262

2-я группа, п=238

Церулоплаз ми н, мг/л

35,4±2,82

67,97±4,84*

52,39±4,73*«

Примечание к таблице 6: * - р<0,05 по сравнению с контролем, *- р<0,05 по сравнению с группой 1.

Липопротеиды - макромолекуляриые комплексы. Они служат транспортной формой липидных компонентов в токе крови. Липопротеиды классифицируют на основании их подвижности в электрическом поле или гидратированной плотности в условиях усиленной гравитации или препаративном ультрацентрифугировании (флотация или седиментация). Плотность увеличивается от хиломикронов, далее идут ЛПОНП, ЛППП, ЛПНП и, наконец, ЛПВП.

Существуют разнообразные способы изучения различных фракций липопротеидов сыворотки крови. В частности, широко распространены: ультрацентрифугирование, электрофоретическое разделение, оценка количественного состава липопротеидных фракций по содержанию в них белковых и липидных компонентов (ХС, ТГ, белок и другие), а также по их способности к окислению с последующим образованием ТБК-активных продуктов реакции.

Однако важно подчеркнуть, что состав циркулирующих в крови липопротеидов не статичен. Они находятся в динамическом состоянии с постоянным обменом компонентами между различными типами.

Известно, что изменение окислительно-восстановительного потенциала клеток сопровождается сдвигом соотношения кофакторов, таких как НАД7 НАДН1", НАДФ/НАДФН4", что приводит к нарушению координации метаболических процессов, в частности, превращений углеводов и липидов и их транспортных форм. Липопротеиды плазмы транспортируют метаболиты, гормоны, витамины, поддерживают гомеостаз холестерина, поэтому их функциональное и физико-химическое состояние является важным звеном в оценке приспособительных возможностей организма.

Общепризнано, что атеросклероз и тромбоз - взаимосвязанные процессы. Наиболее частые, в том числе фатальные, осложнения у пациентов с атеросклерозом вызваны тромбозом в различных сосудистых бассейнах (острый коронарный синдром, инсульт, острый тромбоз артерий нижних конечностей).

В этой связи представлялось актуальным оценить вклад липидных нарушений в патогенез коагулопатий при ПМК и оценить степень выраженности описываемых расстройств в группах с различным функциональным состоянием сердечно-сосудистой системы. В доступной нам литературе сведений о нарушениях липопротеидного спектра крови у больных с ПМК выявлено не было.

Нами предпринята попытка проанализировать основные показатели липидограммы у пациентов ПМК с различным функциональным состоянием сердечно-сосудистой системы. Полученные результаты представлены в таблице 8.

Таблица 8

Основные показатели липидограммы у юношей с ПМК в зависимости от функционального состояния сердечно-сосудистой системы, X ± ш

Показатель/ Группы пациентов

Группа сравнения, п=30

1-я клиническая группа, п=262

2-я клиническая группа, п=238

ХС, моль/л

4,45±0,25

4,52±0,23

4,4±0,21

ХС ЛПВП, ммоль/л

1,48±0,12

1,27±0,12

1,25±0,11

ХС ЛПНП, ммоль/л

2,97±0,22

3,25±0,21

3,19±0,23

ИА, усл. Ед.

2,00±0,13

2,55±0,14

2,63±0,14

ТГ, ммоль/л

1,65±0ДЗ

1,84±0,12

1,85±0,12

Примечание к таблице 8: * - р<0,05 по сравнению с контролем, *-р<0,05 по сравнению с группой 1.

Как видно из таблицы 8, достоверной разницы между данными липидограммы у больных 1-й и 2-й клинических групп не выявлено. Отсутствовала также достоверная разница между показателями липидограммы у больных с ПМК и группой сравнения. Данный факт свидетельствовал о том, что патогенез ПМК в данной возрастной группе не ассоциирован с нарушениями липопротеидного обмена. Кроме того, среди обследованных нами пациентов не было лиц с наследственной гиперхолестеринемией, которая характеризуется изменениями в липидограмме уже в юношеском возрасте.

Поскольку, кроме клеточных и субклеточных мембран, другой важной мишенью свободно-радикальной атаки при окислительном стрессе являются циркулирующие в крови липопротеиды, то изучение особенностей их метаболизма особенно актуально в условиях системного окислительного стресса при оценке функционального состояния сердечно-сосудистой системы у юношей с пролапсом митрального клапана.

Мишенью перекисного окисления являются главным образом ненасыщенные жирные кислоты, входящие в состав ТГ, эфиров холестерина, фосфолипидов. Наименее подвержены окислению фосфолипиды липопротеидов, так как их жирные кислоты постоянно обновляются благодаря обмену с фосфолипидами плазматических мембран. Липопротеиды крови участвуют во многих процессах информационного обмена с клеточными структурами организма, и степень их окисленности отражает устойчивость организма к накоплению прооксидантных метаболитов, в частности АФК.

Активные кислородные метаболиты вызывают окислительную модификацию ХС ЛПНП и ХС ЛПОНП, в ходе которой они приобретают свойства цитотоксических соединений, что может служить интегральным показателем окислительного повреждения в организме. Учитывая, что патогномоничным при гипоксии является усиление радикалообразования, сопровождающегося модификацией макромолекул, представлялось интересным оценить уровень модифицированных липопротеидов у данного контингента пациентов. Результаты анализа процессов модификации липопротеидов приведены в таблице 9.

Таблица 9

Содержание модифицированных липопротеидов у юношей с ПМК в зависимости от функционального состояния сердечно-сосудистой системы, X ± ш

Показатель/ Группы пациентов

Группа сравнения, п=30

-я группа, п=6^

-я_ группа, п=73

ЛП, нмоль МДА/г белка

3,31±0,045

7,55±0,023*

9,40±0,021**

ЛП, нмоль/гМ Д А/г белка

4,28±0,054

2,84±0,011 *

1,94±0,012**

СОМ

7,59±0,41

10,39±0,34*

11,34±0,43*

А, нм/мг липидов

5,52±0,56

7,64±0,38*

10,23±0,42**

Примечание к таблице 9: * - р<0,05 по сравнению с контролем, *- р<0,05 по сравнению с группой 1.

Обнаружено значительное повышение концентрации ОЛПР в 1-й и 2-й группах больных с ПМК соответственно в 2,28 и 2,84 раза (р<0,05) по сравнению с контролем. В то же время, содержание РЛПР было, наоборот, достоверно снижено как в 1-й, так и во 2-й клинических группах, в 1,51 и 2,21 раза по сравнению со здоровыми лицами (р<0,05), что свидетельствует о наличии оксидативного стресса.

Следует отметить, что степень снижения РЛПР и повышения ОЛПР была наибольшей в группе больных со сниженными функциональными возможностями. Так концентрация окисленных липопротеидов на 24,5% превышала, а содержание резистентных к окислению липопротеидов на 31,69% было ниже значения во 2-й группе по сравнению с 1-й (р<0,05).

Представлялось интересным вычисление суммарной концентрации окисленных и резистентных к окислению липопротеидов, дающих интегративную картину об уровне активности процессов ПОЛ в липопротеидных частицах. Данный показатель назван как «суммарная окислительная модификация липопротеидов сыворотки крови» (СОМ) [Микашинович З.И. и соавт., 2008].

СОМ превышала значения в 1-й и 2-й группах по сравнению с контролем соответственно на 36,89 и 49,41% (р<0,05). Это свидетельствовало о повреждении транспортных форм липидов - липопротеидов, в большей степени выраженном в группе пациентов со сниженными функциональными возможностями.

В последнее время появились разноречивые сообщения о роли липопротеидов. В частности, есть сведения о том, что окисленные липопротеиды могут действовать как лиганды, запускающие каскад внутриклеточных сигналов через ц-АМФ или инозитол-трифосфатный путь.

Они увеличивают концентрацию цитозольного кальция в эндотелиальных клетках гладких мышц сосудов, являются активаторами фосфолипаз С и Д, проявляют ряд физиологических эффектов, что обеспечивает их вовлечение в процессы сокращения, локального иммунного ответа и вазомоторного тонуса.

В условиях тканевой гипоксии наблюдается солюбилизация и активация лизосомальных ферментов, что приводит к интенсивному перевариванию собственных тканей. Активация цикло- и липооксигеназного путей сопровождается накоплением лейкотриенов, тромбоксанов, простагландинов, которые могут способствовать разнообразным нарушениям в системе микроциркуляции, формируя молекулярную основу патогенеза разной степени выраженности гемостатических расстройств при ПМК.

С другой стороны, окисление ЛПНП и ЛПОНП возможно только в том случае, если они сами являются антиоксидантами. Устойчивость липопротеидов к Си-индуцированному окислению коррелирует с содержанием в них а-токоферола, а накопление продуктов ПОЛ возможно только после полного исчезновения витамина. Поскольку основной антиоксидантный эффект ЛИНИ и ЛПОНП реализуется через их способность сорбировать органические гидроперекиси, то такой характер течения метаболических процессов в ЛИНИ и ЛПОНП на фоне выраженного изменения активности антиоксидантных ферментов эритроцитов, можно считать приспособительной реакцией организма юношей с ПМК на оксидативный стресс. Очевидно, ,что и нарушение захвата окисленных лйпопротёидбв рецепторами не случайно" т а к к а к это ~позволяет пролонгировать их время жизни в токе крови и, тем самым, обеспечивает их использование в качестве «спасательного круга» неспецифической АОЗ организма в условиях дискоординации специфического звена.

Менее выраженные расстройства в 1-й группе пациентов, возможно, говорят о большей устойчивости гепариносаждённой фракции липопротеидов (ЛПОНП, ЛИНИ) к окислению в условиях гипоксии, что молено считать одним из механизмов клеточной адаптации, направленной на сохранение транспортных форм липидов - липопротеидов.

Нарушение структурной организации мембран, характеризующиеся повышением уровня цитозольного кальция, приводит к неконтролируемому каскадному запуску Са - зависимых реакций. В первую очередь - это активация протеолитических ферментов, липаз, эндонуклеаз. Представлялось актуальным исследование активности протеиназ, которые по существу контролируют все процессы метаболизма.

Известно, что протеолитические ферменты или протеиназы занимают особое место в жизнедеятельности организма. Расщепляя одну или несколько пептидных связей в белковой молекуле, протеиназы активируют или изменяют свойства белков, что может служить пусковым механизмом различных биохимических процессов. Протеиназы участвуют в рецептор - медиаторной передаче, в координации и осуществлении защитных реакций организма, в том числе таких, как гемокоагуляция, фибринолиз, кининогенез, активация системы комплемента.

Активность протеиназ зависит, как правило, от скорости их образования из неактивных предшественников и инактивации специфическими ингибиторами, которые присутствуют в клетках, тканях, в плазме крови и составляют так называемый антипротеолитический потенциал [Бочков В.Н., Добровольский А.Б., Кушлинский Н.Е., 2008]. При взаимодействии протеолитических ферментов и их ингибиторов сохраняется определенное равновесие, которое может нарушаться при определенных патологических условиях, что ведет к негативным последствиям для организма, вплоть до развития критических состояний [Ткачук В.А., 2004].

Все вышеперечисленное, а также возможное участие протеиназ в процессах деструкции тканей, воспалении, репарации и проявлении особых клинических симптомов, возникающих при пролапсе митрального клапана, обусловило необходимость данного исследования, задачей которого явилось изучение роли сериновых протеиназ в формировании различного функционального состояния у пациентов с ПМК. Для этого было проведено определение общей белокэстеразной активности в сыворотке крови, лейкоцитарной эластазы, а также их ингибиторов: альфа!-протеиназного ингибитора и альфаг - макроглобулина.

Полученные нами данные представлены в таблице 10.

Таблица 10

Активность протеиназ и их ингибиторов в крови у юношей с первичным ПМК в зависимости от функционального состояния сердечно-сосудистой системы, X ± т

Показатель/ Группы пациентов

Группа сравнения, п=30

1-я группа, п=64

2-я группа, п=73

ОБЭА, мэе/мл

269,03±15,9

223,9±16,3*

285±21,2«

ЛЭЛ, мэе/мл

195,52±12,76

307,13±13,85*

350,25±14,06*»

а2 МГ, ИЕ/мл

4,75±0,69

6,38±0,35*

6,99±0,38*

(Х1ПИ, ИЕ/мл

27,74±2,45

27,99±2,31

22,95±2,41

ЛЭЛ/ ^ ПИ

7,05±0,75

10,97±0,77*

15,26±0,73*®

Примечание к таблице 10: * - р<0,05 по сравнению с контролем, *- р<0,05 по сравнению с группой 1.

Проведенное нами исследование выявило повышение ОБЭА во 2-й группе на 27,3% (р<0,05) по сравнению с 1-й группой (таблица 10). По сравнению с контролем показатель ОБЭА в 1-й клинической группе был на 16,78% ниже (р<0,05), что свидетельствовало о стабильности кининовой системы у пациентов с высокими функциональными возможностями и подтверждалось клиническими и инструментальными данными. В то же время у пациентов 2-й клинической группы достоверной разницы с контролем обнаружено не было. Полученные нами результаты подчёркивают важную роль в патогенезе ПМК активности эндопептидаз, принадлежащих к сериновым протеиназам.

Следует отметить, что эластазы проявляют специфичность к пептидным связям, образованным карбоксильными группами глицина, аланина, валина, лейцина, изолейцина, а также других аминокислот, дающих гидрофобные остатки в полипептидных цепях. В активном центре этих ферментов имеется классическая для сериновых протеиназ консервативная триада из остатков серина, гистидина и аспарагиновой кислоты, которые образуют ансамбль, осуществляющий нуклеофильную атаку на пептидные связи белков, и проводят их гидролитическое расщепление.

Основное место приложения эластаз - общая энзиматическая эластазолитическая функция в различных органах и тканях. Однако эластин не единственный белковый субстрат этих протеиназ. Они способны также гидролизировать гистоны, основной белок миелина, гемоглобин и множество белков плазмы крови, в том числе факторы гемокоагуляции, фибринолиза, калликреин-кининовой системы и комплемента. Но что для нас является особенно важным - коллагены Ш, VI и VIII генетических типов и протеогликаны.

Основной протеиназой азурофильных гранул полиморфноядерных лейкоцитов, имеющей нейтральный оптимум рН и оказывающей наиболее разрушительное действие на биологические структуры, является лейкоцитарная эластаза. Известно, что она освобождается из первичных гранул лейкоцитов в процессе их дегрануляции. Дегрануляционная активность адгезированных на эндотелиальных клетках лейкоцитов приводит к повреждению не только эндотелиальных клеток и базальных мембран, но и белков плазмы крови, в том числе факторов свертывающей и фибринолитических систем, а также белков так называемой контактной фазы активации гемостаза, куда входят высокомолекулярный кининоген, прекалликреин, факторы XI и XII.

Анализ содержания ЛЭЛ в сыворотке крови у больных с ПМК выявил выраженное превышение данного показателя как в 1-й, так и 2-й клинических группах, на 57,08 и 79,14% соответственно по сравнению с контролем (р<0,05). Следует отметить, что у больных со сниженными приспособительными возможностями ЛЭЛ была активирована в большей степени, чем в группе с высокими функциональными возможностями. Разница носила достоверный характер и составила 14% (р<0,05).

Лейкоцитарная эластаза выполняет важнейшую биорегулирующую и патогенетическую роль: осуществляет защиту от поражения микроорганизмами, разрушение и удаление бактериальных структур (протеолиз фагоцитируемых белков), повреждение тканей, в т.ч. эндотелия и экстрацеллюлярного матрикса, деструкцию белков плазмы крови, гидролиз ангиотензиногена с образованием ангиотензина I, гидролиз Сз и С4 компонента комплемента с образованием анафилатоксинов. Лейкоцитарная эластаза контролирует заживление ран, миграцию нейтрофилов, внеклеточное ремоделирование тканей, обмен соединительно-тканных белков, является активатором коллагеназы IV, лигандом интегринов СД 116/СД 18.

ЛЭЛ отличается высокой скоростью гидролиза широкого спектра белков и поэтому вовлекается в деструкцию различных тканей и участвует в патогенезе многих заболеваний. Повышение активности лейкоцитарной эластазы у пациентов с ПМК, возможно является одним из механизмов деструкции коллагена, маркёром которой является увеличение фракции свободного оксипролина.

Однако степень повышения свободного оксипролина выражена в большей степени, чем степень увеличения содержания лейкоцитарной эластазы. Вероятно, на деструкцию коллагена у пациентов с ПМК оказывают и другие факторы, значение которых предстоит ещё выяснить. Возможность влияния лейкоцитарной эластазы на факторы свёртывания и фибринолиза объясняет наличие выраженных сдвигов в системе гемостаза у пациентов с ПМК и их неоднозначный характер в зависимости от функционального состояния сердечно-сосудистой системы. Всё вышесказанное подтверждает необходимость поиска новых, исследованных на молекулярном уровне, способов снижения данной ферментной системы.

Контроль над активностью эластазы в организме осуществляют плазменные и тканевые ингибиторы протеиназ. В плазме крови содержится, по крайней мере, семь белковых ингибиторов сериновых протеиназ

- (серпинов), составляющих около 10% всех белков

плазмы крови. Среди них агпротеиназный ингибитор (а,]-ПИ) имеет наибольшую молярную концентрацию и играет ключевую роль в эндогенной регуляции активности лейкоцитарной эластазы. а]-ПИ - один из основных белков острой фазы воспаления, обеспечивающий ~ 80 % антипротеолитического потенциала плазмы крови. Как правило, происходит быстрое связывание освобождающейся лейкоцитарной эластазы ингибиторами плазмы крови: альфагпротеиназным ингибитором (агПИ) и отчасти альфаг- макроглобулином (аг-МГ).

В связи с этим представлялось актуальным исследование содержания щ -протеиназного ингибитора и аг-макроглобулина в сыворотке крови у пациентов с ПМК в зависимости от функционального состояния сердечно-сосудистой системы. В нашем исследовании активность оц-протеиназного ингибитора у больных ПМК 1-й и 2-й клинических групп достоверно не отличалась от группы сравнения.

Данный факт можно объяснить тем, что в некоторых случаях а протеиназный ингибитор может подвергаться окислению реактивными метаболитами кислорода, и его действие на лейкоцитарную эластазу становится малоэффективным.

Следует отметить, что патологические процессы, связанные с дефицитом ел-ПИ - распространенные состояние, передаваемые по наследству. Этот белок, активно синтезируемый гепатоцитами при воспалении, когда происходит массированное освобождение протеиназ из лейкоцитов, поврежденных тканей, микроорганизмов, а также, и особенно, в случаях генетически обоснованного дефицита ai-ПИ, может быстро расходоваться на связывание этих протеиназ и подвергаться инактивации химическими или биологическими оксидантами, табачным дымом и протеолитическими ферментами. В последствии, низкий уровень ингибиторного потенциала приводит к неконтролируемому протеолизу со стороны эластазы и развитию тяжелых патологических состояний.

Страница:


Подобные документы

Работы в архивах красиво оформлены согласно требованиям ВУЗов и содержат рисунки, диаграммы, формулы и т.д.
PPT, PPTX и PDF-файлы представлены только в архивах.
Рекомендуем скачать работу.

© 2000 — 2023, ООО «Олбест» Все права защищены