Классическая чума свиней. Особенности проявления и специфическая профилактика

- прямыми и косвенными связями между дикими и домашними свиньями.

- устойчивостью ВКЧС, длительным вирусоносительством, разнообразием путей его передачи от больных кабанов здоровым при непосредственных контактах или через объекты внешней среды, инфицированные выделениями больных животных, длительным поддержанием вируса в популяциях благодаря конгенитальному заражению плодов;

- антропогенным воздействием на среду обитания кабанов, взаимному обмену вирулентным вирусом при наличии больных среди диких и домашних свиней вследствие отсутствия скотомогильников и убойных площадок, захоронении трупов павших или внутренностей вынужденно убитых животных в землю, вынужденное использование дикими свиньями кормов, пищевых отходов, подстилки на полях и фермах;

- последующий контакт особей этого вида приводит к распространению болезни внутри популяции, а их миграция (суточный переход достигает 10-20 км) расширяет ареал носительства вируса. Не исключена в этом процессе роль кровососущих членистоногих. Дополнительным связующим звеном с домашними свиньями могут быть пищевые отходы вследствие использования человеком мяса кабанов.

Результаты эпизоотологического анализа показал, что эпизоотии чумы среди кабанов на территории Беларуси были зарегистрированы в 1901, 1906, 1911, 1912,1927, 1936, 1964, 1972, 1974 и в 1991 гг. Эпизоотию чумы диких кабанов регистрировали на территории "Беловежской Пущи" (1901 г.), в дальнейшем Государственного заповедно-охотничьего хозяйства "Беловежская Пуща" (ГЗСХ), Государственного национального парка "Беловежская Пуща" и в 1991 г. в урочище колхоза им. Фрунзе Шкловского района Могилевской области. Предполагается, что источником возникновения чумы в 1964 г., и в ГЗСХ "Беловежская Пуща" в 1972 г. явились больные чумой домашние животные, находившиеся в личном пользовании. Затем от диких кабанов заболели домашние свиньи в Гродненской области - была доказана возможность взаимного перезаражения домашних и диких свиней. К 2005 г. численность диких кабанов в Беларуси достигла 1,3 тысяч, на Украине - 39 тысяч, там эпизоотия в 30% случаев распространяется от диких кабанов.

При анализе вспышек эпизоотий диких кабанов выявлен ряд закономерностей: Появление заболевания в зоне, где имеется много естественного корма и высокая плотность животных; появление чумы свиней в августе-сентябре месяце; заболевает преимущественно молодняк. Следует отметить, что чума диких кабанов, как правило, совпадает с эпизоотиями указанной инфекции у домашних свиней.

Вспышки чумы диких кабанов в 1991-1997 гг. были отмечены в центральной части России в Смоленской, Брянской, Калужской, Тверской и Московской областях. В 25% случаев чуму диких кабанов в Беларуси выявляли на границе с Россией и в 75% случаев на границе с Польшей в "Беловежской пуще".

В течение 1964-1977 гг. чуму регистрировали поочередно в Белоруссии, Молдавии, Западной Украине, Центральной России, Северном Кавказе и Приморье. В 1986-1989 гг. КЧС охватила Молдавию, Одесскую, Черновицкую и др. области Украины. В 1990-1991 гг. случаи распространения КЧС среди кабанов, а затем и домашних свиней установлены в Брянской, Тверской, Смоленской, Московской, Курской и других областях. Неблагополучны по чуме кабанов средняя полоса России, Северный Кавказ, Приморье, Забайкалье, Бурятия, Днестровско-Бугское междуречье, Закарпатье, Беловежский лесной массив. В Приморском крае чума также широко распространена в хозяйствах 12 районов.

В настоящее время профилактика против чумы диких кабанов дорогостоящая, трудоемкая и не всегда проводится [31, 22, 3, 56, 53, 39, 43, 15].

6. Патогенез

Патогенез при КЧС необходимо рассматривать на клеточном уровне и на уровне целого организма. Установлено, что тип взаимодействия вируса с клетками - персистентный, проникновение вируса в клетку - рецепторза-висимое. Несмотря на продуктивную инфекцию, широкий спектр вирулентных свойств возбудителя - от высоковирулентных до авирулентных (иммунизирующих) штаммов, многообразие клинических, морфологических и иммунологических форм проявления болезни, обширные поражения тканей и органов in vivo, возбудитель не оказывает ЦПД на зараженную клетку и, следовательно, не ясен патогенетический механизм in vitro. Система мононуклеарных фагоцитов обеспечивает диссеминацию вируса в организме свиней.

На уровне целого организма вирусный патогенез представляется так: инфект (ВКЧС) - ворота инфекции (миндалины и носоглотка) - первичная виремия (10-16-24 ч после заражения) - максимальное накопление ВКЧС в органах иммунной системы (лимфоузлы, селезенка, костный мозг, лимфоидные образования слизистой оболочки пищеварительного (пейеровы бляшки, миндалины и солитарные узелки) и дыхательного трактов). На 4-6-е сутки - вторичная инфекция. На 4-е сутки после инфицирования - вирусовыделение с секретами и экскретами. Распространение вирулентного вируса по всему организму обычно заканчивается в пределах 5-6 дней.

Патогенез КЧС можно рассматривать как вирусиндуцированное нарушение ферментных систем у больных животных, в частности, поражения поджелудочной железы с поступлением в кровь химотрипсина и развитием автоиммунного процесса. В организме вирус размножается в лимфоцитах лимфоузлов, селезенки, костного мозга и эндотелии кровеносных сосудов, вызывая дистрофические и некротические изменения.

Макрофаги (МФ) являются не только эффекторной клеткой иммунной системы, но и секреторной, обладающей значительным цитолитическим потенциалом (протеазы и свободные радикалы кислорода). Неспецифическая цитотоксичность МФ селезенки резко возрастает при персистенции вирусов в клетках. Под действием репродукции ВКЧС ингибируется фагоцитарная функция и активируется секреторная функция МФ. В то же время ВКЧС не оказывает прямого ЦПД на лимфоциты, так как все попытки показать in vitro тяжелые нарушения реактивности Т- и В-лимфоцитов имели отрицательный результат. Поэтому поражение клеток (некроз лимфоцитов) при КЧС является результатом непрямого действия вируса, и развивается в результате активации цитолитического потенциала зараженных клеток-мишеней (МФ) при непосредственном контакте с другими клетками (лимфоцитами, эпителиальными, эндотелиальными и др.). Либо разрушение лимфоцитов может быть вызвано усиленным высвобождением глюкокортикостероидов из гиперпластической коры надпочечников.

Вирус вызывая гибель Т- и В-лимфоцитов приводит к истощению лимфоидной ткани, атрофии тимуса, "мраморности" лимфоузлов и иммунодефициту. Указанные изменения приводят не только к развитию лейко- и лимфопении (количество лейкоцитов снижается до 2 тысяч и ниже в мкл), но и к развитию анемии (постоянный симптом при КЧС), к нарушению дифференциации иммунокомпетентных клеток, что, в конечном итоге, приводит к угнетению продукции иммуноглобулинов, в том числе, специфических антител. Это способствует активации вторичной инфекции и КЧС осложняется пастереллезом, сальмонеллезом, гемофилезами и др., что сопровождается развитием крупозно-геморрагической пневмонии, дифтеритического (некротического) или фолликулярно-язвенного колита и тифлита. Кроме того, макроорганизм в отличие от культивируемых клеток имеет систему кровообращения. Следовательно, возникают циркулярные нарушения кровообращения, вызванные непрямым воздействием вируса - развивается тромбоцитопения, мукоидное и фибриноидное набухание, некроз стенок кровеносных сосудов, накопление кислых мукополисахаридов. и, как следствие, повышение их проницаемости. Тромбоцитопения и изменение коагуляционных параметров, по-видимому, является основным фактором в патогенезе геморрагического диатеза при КЧС. ВКЧС вызывает повреждение циркулирующих тромбоцитов, начиная со второго дня после заражения. Так как заметная тромбоцитопения наблюдается вскоре после заражения.

В результате таких изменений возникают множественные диапедезные кровоизлияния в слизистых и серозных оболочках, коже и паренхиматозных органах. В результате поражения кровеносных сосудов микроциркуляторного русла развиваются инфаркты в селезенке.

В ЦНС, в результате повреждения кровеносных сосудов и вторичных воспалительных процессов, происходит развитие периваскулярных инфарктов, характерных для негнойного энцефалита лимфоцитарного типа, что приводит к появлению таких клинических признаков, как возбуждение или явление депрессии.

Доказано что разрушение мегакарицитов в костном мозге, тоже, является важным патогенетическим фактором.

Распространенная точка зрения в настоящее время состоит в том, что патологические процессы и летальный исход определяются разрушением В-лимфоцитов или В-лимфобластов в зародышевых центрах лимфоузлов.

Существуют шесть концепций патогенетического механизма при КЧС: 1) КЧС как иммунопатологический процесс циркулирования в крови комплексов АТ-АГ и их оседания на поверхности сосудов; 2) КЧС как процесс нарушения коагуляционных механизмов крови; 3) КЧС как сверхострый паралимфобластический лейкоз; 4) КЧС как процесс вирусиндуцированного расстройства ферментных систем организма с гиперпродукцией химотрипсина; 5) КЧС как процесс вирусиндуцированного поражения надпочечников с гиперпродукцией глюкокортикостероидов из гиперплазированной корковой зоны; 6) КЧС как процесс вирусиндуцированной активации клеток СМФ и (или) нейтрофилов с гиперпродукцией цитотоксинов-протеаз и свободных радикалов кислорода.

Клетки, зараженные ВКЧС, не несут или несут очень мало вирусного АГ на своей поверхности, поэтому инфицированные клетки могут избегать иммунной атаки клеток хозяина. Подтверждается патогенетическое значение протеаз - выраженнее болеют КЧС более упитанные животные, получающие богатый белками корм (опыты на крысах показали, что у них при таком режиме кормления усиливается образование протеаз). Установлены резкие возрастные колебания уровня химотрипсина в крови и соответствующие изменения уровня лимфоцитов.

Исход развившихся патологических процессов зависит от степени вирулентности вируса, иммунного статуса организма животного и условий внешней среды. Если заражение животных с низким иммунным статусом произошло высоковирулентным вирусом на фоне воздействия неблагоприятных факторов внешней среды, то патологический процесс развивается интенсивно, происходят глубокие патоморфологические и функциональные изменения в организме, и животное быстро погибает. Если же заражение происходит слабовирулентным штаммом вируса КЧС или животное имеет высокий иммунный статус, нет воздействия неблагоприятных факторов внешней среды на организм, быстрой гибели животных не наступает.

Если происходит заражение высоковирулентным вирусом КЧС супоросных свиноматок, инфицируются их плоды. Вирус КЧС может вызвать внутриутробную гибель плодов, отек кожи и подкожной клетчатки, асцит, широкий спектр неправильного развития, врожденный тремор и гибель новорожденных вскоре после рождения. При заражении супоросных свиноматок слабовирулентным вирусом инфицируется, как правило, часть плодов, а остальные поросята могут рождаться свободными от ВКЧС. То есть, толерантность и длительное, даже пожизненное, вирусоносительство создается у части поросят, а остальные, после снижения колострального иммунитета, заболевают КЧС от вирусоносителей своего же помета. Это относится и к вакцинному штамму. Клинические признаки у таких животных могут полностью отсутствовать, однако они играют ведущую роль в поддержании стационарности хозяйства по КЧС. Выявление и элиминация таких поросят из стада - необходимая мера борьбы с КЧС. С учетом указанных особенностей патогенеза КЧС у свиноматок запрещена их вакцинация в период супоросности против этой болезни - их иммунизируют до случки.

Много сделано для выяснения патогенеза конгенитальной персистентной инфекции вирусом КЧС. Стадия беременности, на которой вирус достигает плода, является важным патогенетическим фактором. Данные, полученные при экспериментальном заражении вирусом КЧС супоросных свиноматок, показывают, что плод должен быть инфицирован за 65 дней до опороса, чтобы возникла персистентная инфекция. Рассмотрены несколько патогенетических путей, включая возможность того, что вирус КЧС может, инфицируя и разрушая лимфоидные клетки, индуцировать нарушения иммунологических функций, следствием чего является долговременная иммунологическая толерантность у развивающегося плода. Другой патомеханизм может заключаться в том, что вирус избегает гуморального и клеточного иммунного ответа хозяина; так как клетки, инфицированные вирусом КЧС, не содержат или содержат небольшое количество вирусного антигена на поверхности клеток и таким образом могут ускользать от иммунологической атаки иммунной системы.

Персистентно инфицированные поросята могут жить в течение нескольких месяцев и постоянно выделять вирус. Клинические признаки могут быть минимальными или полностью отсутствовать.

Иммунологическая ареактивность (толерантность) персистентно инфицированных животных носит специфический характер: такие животные дают иммунный ответ на другие антигены Однако лимфоцитопения, ослабленный синтез иммуноглобулинов, а возможно и другие иммуносупрессивные воздействия отрицательно сказываются на устойчивости персистентно инфицированных животных к оппортунистическим инфекциям бактериальной и иной природы [31, 32, 43].

В отличие от хронической форме КЧС, при персистентной КЧС-инфекции не обнаруживали ни специфических антител, ни комплексов антиген-антитело. Следовательно, пренатальные и ранние неонатальные КЧС-инфекции могут индуцировать иммунологическую толерантность.

Персистентной инфекцией считают инфекцию, длящуюся более 30 дней [69]. Персистенция вируса вызывает развитие различных клинических форм КЧС. Условно выделяют хроническую и "late onset disease" - поздние или отдаленные проявления КЧС.

У свиней, перенесших начальную-острую или подострую стадию инфекции, может развиться хроническая форма КЧС. Хроническая форма характеризуется длительными и перемежающимися периодами болезни, приводит к отставанию в росте, относительно широкая голова и маленькое туловище, прогибающаяся спина, поражение кожи, т. е "заморыши". Анорексия, лихорадка, диарея, облысение и последующие дерматиты наиболее заметные клинические признаки. Начальная острая реакция с анорексией, депрессией и лихорадкой сменяется периодом общего клинического улучшения. В этот период титр вируса в сыворотке крови невысок или вообще отсутствует, а антиген вируса сосредоточен обычно в эпителиальных клетках миндалин, слюнных желез, тонкого кишечника и почек. После наступает рецидив болезни со смертельным исходом. Свиньи с хронической КЧС могут болеть несколько месяцев,.но все они гибнут.

Позднее проявление КЧС (late onset disease) характеризуется начальным периодом с отсутствием видимых клинических признаков болезни. Симптомы начинают развиваться через несколько месяцев после заражения и состоят из легкой анорексии и депрессии, конъюнктивита, дерматита, диареи, замедления роста, нарушения двигательных функций, которые заканчиваются парезом. Температура тела может быть нормальной или повышенной. Лейкопения - постоянный симптом персистентной КЧС, но в последней стадии болезни может развиться лейкоцитоз.

Такая инфекция может быть следствием инфицирования животного слабовирулентными штаммами ВКЧС в период внутриутробного развития после которой животные выздоравливают. Уровень виремии при таких инфекциях остается высоким в течении всей жизни животного, виремия временно может снижаться после потребления антител из молозива.

У свиней, у которых не проявляется нормальный иммунный ответ после первоначального контакта с вирусом наблюдаются два феномена:

- повторный контакт их с ВКЧС может привести к гиперактивности, характеризующейся более коротким инкубационным периодом и более тяжелым течением заболевания, в сравнении с первично инфицированными свиньями;

- может развиваться повышенная резистентность к вирулентному ВКЧС.

Помимо клинически проявляющихся форм КЧС бывают и субклинические (бессимптомные или инаппарантные) формы инфекции [6, 69, 32, 31, 22, 46, 18, 43].

7. Экспериментальная инфекция

У экспериментально зараженных вирусом КЧС (ВКЧС) поросят массой 40-50 кг оценивали распределение его в плазме, моноцитах, Т- и В-лимфоцитах крови. Вирус обнаружили в плазме крови раньше, чем в любой из субпопуляций многоядерных клеток. В моноцитах, Т- и В-лимфоцнтах ВКЧС выявлен в одинаковые сроки и в аналогичных титрах. При развитии лимфопении наблюдали истощение В-клеток. Первыми инфицировались клетки крови -гранулоциты при острой форме классической чумы свиней, развившейся после экспериментального оронозального заражения. На 7-ой день после заражения вирус обнаружен в моноядерных клетках крови. Лейкоциты крови, Т-лимфоциты крови и гранулоциты высокой плотности оставались либо неинфицированными, либо их инфекционность была ниже, чем у моноядерных клеток крови. Фракция моноядерных клеток крови содержала больше вирус-инфицированных клеток по сравнению с другими фракциями лейкоцитов.

Для изучения возможности искусственно индуцированной вертикальной передачи полевого ВКЧС спаривали двух свиней, экспериментально инфицированных ВКЧС средней патогенности. Спустя 171 день было получено 3 мертворожденных и 6 мумифицированных плодов позитивных по ВКЧС (данные иммунофлуоресценции и ОТ-ПЦР). Последовательности гена Е2 штаммов, выделенных от двух из трех поросят, соответствовали штаммам, выделенным от борова, а степень соответствия Е2-последовательности штамма от третьего поросенка была выше со штаммами от борова, чем от свиноматки. Е2-последовательности штаммов от свиноматки различались до и после спаривания. После спаривания они были идентичны Е2-последовательностям штаммов от борова. Таким образом, при репродукции ВКЧС в свиньях имеет место выраженная штаммовая селекция, механизм которой требует дальнейшего исследования [43].

8. Клинические признаки и патологоанатомические изменения

Продолжительность инкубационного периода зависит от степени вирулентности вируса и чувствительности животных, длится он 3-9 дней, реже 12 (может до 21 дня). Течение может быть острое, подострое, хроническое и редко - сверхострое (молниеносное). По клиническому проявлению различают: септическую, нервную, грудную, кишечную и атипичную формы болезни.

Сверхострое течение болезни наблюдается редко и только у молодых поросят. Оно характеризуется быстрым течением, температурой тела до 41-42°С, учащенным сердцебиением и дыханием, появлением красных пятен в коже, рвотой при полном отказе от корма, быстро прогрессирующей слабостью. Клинические признаки на фоне колострального иммунитета бывают еще более сглаженными. Животное погибает через 1-2 дня.

Острое течение болезни (септическая форма) характерна для начала эпизоотии. Первый признак - повышение температуры тела до 41 - 41,9°С, постоянный тип лихорадки, как правило, на 2-3-й день отмечают отказ от корма, вялость в движениях, появляется озноб, иногда позыв к рвоте или рвота, запор, сменяющийся поносом (иногда кровавым), коньюнктивит, сопровождающийся покраснением конъюнктивы, опуханием и склеиванием век слизисто-гнойным экссудатом. Затрудненное мочеиспускание, моча может приобретать темно-коричневый цвет. Общая слабость сопровождается учащенным и затрудненным дыханием, сердечной недостаточностью, синюшностью пятачка, кожи ушей, шеи, живота.

Больные животные с трудом передвигаются, больше лежат, из ноздрей вытекают слизисто-гнойные истечения, иногда с примесью крови. Хвост раскручен, голова опущена, отмечают слабость задних конечностей, шаткую походку, сгорбленность спины, жажду. В коже внутренних поверхностей бедер, живота, шеи, у основания ушных раковин, у свиноматок вокруг сосков вымени появляются пустулы, заполненные экссудатом желтоватого цвета. Через 2-3 дня на месте пустул образуются струпья или различной величины язвы. Одновременно с пустулами или независимо от них на нежных участках кожи появляются мелкие точечные кровоизлияния, которые в дальнейшем сливаются в красные или багрово-фиолетовые пятна, не исчезающие при надавливании, иногда вся кожа принимает красный цвет. При предубойном осмотре свиней мелкие кровоизлияния иногда бывают не заметны, но резко выступают после ошпаривания и очистки туши.

Супоросные свиньи абортируют.

В начале болезни отмечают лейкоцитоз до 35-45 тыс. в 1 мкл, с пятого дня лейкоцитоз сменяется лейкопенией до 2 тыс. лейкоцитов в 1 мкл крови. В лейкограмме выявляется сдвиг ядра влево до юных и миелоцитов, отмечается эозинофилия.

Перед смертью температура тела у животных снижается до 35-36°С. Погибают животные на 7-10 день. Летальность 80 - 100%.

Нервная форма относиться к молниеносному и острому течению. У свиней отмечают некоординированные, манежные движения, дрожание и параличи задних конечностей, судороги. Температура тела может повышаться до 40,5-41,5°С или быть в пределах нормы. Могут возникать внезапные эпилептические припадки, сменяющиеся длительным угнетением, апатией и сонливостью. Животные погибают при явлениях эпилепсии или коматозного состояния в течение 24-48 часов. Но не редко болезнь переходит в подострое течение и затягивается до 3 недель.

При подостром течении редко отмечается выздоровление. Температура тела при подостром течении несколько ниже, чем при остром.

При затяжном течении наблюдается осложнение КЧС вторичными бактериальными инфекциями: сальмонеллез, пастереллез.

Подострое течение (осложненное пастереллезом) КЧС длится 2-3 недели, поражения локализуются в органах дыхания (легочная форма). У животных наблюдают затрудненное дыхание (свиньи принимают позу "сидячей собаки"), кашель, иногда удушье, признаки бронхопневмонии, слизисто-гнойные истечения из носа. Лихорадка постоянного типа, температура тела выше 40°С. Болезнь чаще всего кончается гибелью животного.

При хроническом течении (осложнение сальмонеллезом) поражения локализуются в органах пищеварения (кишечная форма). Отмечают фолликулярно-язвенный или диффузно-дифтеритический колит и тифлит, который проявляется запорами, сменяющимися поносами, извращенным аппетитом, перемежающей лихорадкой. Свиньи худеют, больше лежат, передвигаются с трудом. В большинстве случаев болезнь заканчивается гибелью животного. При благополучном исходе аппетит улучшается, прекращается понос, животные становятся подвижными. Выздоровевшие свиньи на длительный срок остаются вирусоносителями.

Нередко наблюдают осложнение чумы одновременно сальмонеллезом и пастереллезом (смешанная форма). Наблюдается симптомокомплекс характерный для грудной и кишечной формы - животные быстро гибнут.

Хроническое течение характеризуется продолжительным течением болезни (до 2-х месяцев и более), тяжелым крупозно-дифтероидным поражением ЖКТ, гнойно-фибринозным воспалением легких и плевритом. У больных животных аппетит понижен или отсутствует, наблюдается конъюнктивит, понос, иногда сменяющийся запором, анемия и прогрессирующее исхудание; поросята становятся заморышами (постнатальная гипотрофия). Голова и хвост у них опущены книзу, спина изогнута, заостренный зад отвисает, задние конечности подогнуты под живот. Животные больше лежат, зарывшись в подстилку. Температура тела повышена, но нередко повышение температуры отсутствует. Часто отмечают сморщивание кожи покрытой экзематозными струпьями, некрозы кончиков ушей и хвоста. Животные полностью не выздоравливают и остаются вирусоносителями. Летальность составляет 30-60 %.

Характерной особенностью КЧС в последние десятилетия в Европе является именно хроническое течение болезни, а у свиноматок нарушается функция воспроизводства (бесплодие, аборты, мертворождаемость).

Атипичная форма болезни встречается чаще у сосунов и отъемышей, имеющих колостральный иммунитет или зараженных слабовирулентным штаммом вируса серогруппы С. Для нее характерно подострое и хроническое течение продолжительностью 2-3 недели и более. В первые 7-10 дней болезнь проявляется анорексией, коньюнктивитом, отсутствием или незначительным повышением температуры тела без сильно выраженного нарушения общего состояния. Одни животные полностью выздоравливают, у других болезнь осложняется вторичными бактериальными инфекциями, приводящими к появлению массовых пневмоний и энтероколитов, которые приводят к гибели животных или превращению их в заморышей.

Способствует появлению этих форм, размножение вирулентных штаммов в недостаточно иммунном организме, в частности, у привитых инактивированными вакцинами. Мертворождаемость, отставание в росте свидетельствуют о заражении плодов через плаценту. Конгенитальная передача вируса может сопровождаться персистентной виремией в течение всей жизни животных или очень длительного периода. В первые недели жизни у поросят, родившихся с персистентной виремией, не находят никаких видимых признаков болезни, но такие животные выделяют вирус заражая других. В одном помете могут быть поросята инфицированные и неинфицированные и клинически невозможно отличить поросят, имеющих вирус в крови, от здоровых животных. Только через некоторое время наблюдали хроническое течение болезни, отставание в росте, описан врожденный тремор мышц, связанный с хроническим течением КЧС. Гибель наступает в возрасте 3-8 недель.

Патологоанатомическне изменения при КЧС очень вариабельны и зависят от формы, течения болезни и наличия осложнений секундарной инфекцией (сальмонеллез, пастереллез и др.) Наиболее типичные патологоанатомическне изменения встречаются у подсвинков и взрослых животных. Острая (септическая) форма чумы протекает обычно без осложнения вторичной инфекцией. При вскрытии трупов таких свиней отмечают обычно их хорошую упитанность. На краях век и в углах глаз образуются коричневые корочки. Конъюнктива, слизистые оболочки носа и рта анемичны. Кожа ушей, шеи, живота, внутренней стороны бедер пятнисто или диффузно окрашены в багрово-красный цвет, видны точечно-пятнистые кровоизлияния. Отмечается выраженный геморрагический диатез в различных органах. Наиболее характерные изменения в лимфоузлах, селезенке костном мозге, тимусе и почках. Лимфоузлы подчелюстные, заглоточные, шейные, средостенные, бронхиальные, желудочные, селезеночные, печеночные, околопочечные, брыжеечные и прямой кишки, (преимущественно головы и шеи) - увеличены в 2-3 раза, сочные, вишнево-красного цвета снаружи, имеют мраморный вида на разрезе. Селезенка обычных размеров или несколько уменьшена, пульпа темно-красная, рыхлая, ножом не соскабливается, часто (в 40-50% случаев) с инфарктами по краю органа. Они имеют вид плотных черно-красных (на разрезе центр серо-желтого цвета) припухлостей возвышающихся над поверхностью органа клиновидной или неправильной зубчатой формы. Тимус уменьшен в размере, атрофирован. Почки, печень, миокард анемичные, в состоянии зернистой дистрофии. Почки обычно бледные, с многочисленными точечными кровоизлияниями в корковом слое и слизистой лоханок. Геморрагии встречаются также в слизистых оболочках мочеточников и мочевого пузыря, гортани и надгортанника, желудка, тонкого и толстого кишечников, в серозных оболочках (плевре, брюшине, эпикарде).

В ребрах на границе костной и хрящевой частей выявляются характерные макроскопические изменения эпифизарной линии: изломанность, утолщение, помутнение, кровоизлияния под ней.

В желудке, тонком и толстом кишечнике обнаруживают острое катаральное воспаление слизистых оболочек, точечные и пятнистые кровоизлияния в них, гиперплазию и некрозы пейеровых бляшек и солитарных фолликулов. Реже обнаруживают геморрагический или крупозно-геморрагический гастроэнтерит.

При чуме, осложненной пастереллезом, кроме изменений, присущих септической форме наблюдают также крупозно-геморрагическую пневмонию, множественные некрозы окруженные демаркационной зоной серого или красного цвета, серозно-геморрагический или фибринозный плеврит и перикардит. Пневмония имеет лобарный характер, локализуется в задних и реже средних и передних долях легких. Для нее характерно обилие в экссудате эритроцитов (геморрагический акцент), некрозы паренхимы легких, серозный или геморрагический отек интерстиция. Интерстициальная ткань утолщена и выступает в виде светлых или красных тяжей, в которых видны расширенные лимфатические сосуды.

При чуме, осложненной сальмонеллезом, болезнь протекает преимущественно хронически и характеризуется язвенно-некротическими процессами в пищеварительном тракте (глотке, миндалинах, желудке и кишечнике). Наиболее часто поражаются слепая и ободочная кишки, там находят дифтерические "бутоны" и язвы, реже диффузное дифтерическое воспаление. При диффузно-дифтеритическом воспалении слизистая оболочка толстого кишечника шероховата, изрыта бороздами, с поверхности покрыта мертвыми массами, напоминающими отрубевидный налет. Реже аналогичное дифтеритическое воспаление обнаруживают в тонком кишечнике, желудке и даже в миндалинах.

Отмечают экзему и некрозы кожи, очаги бронхопневмонии, фибринозный плеврит и перикардит, а также характерные для острой чумы изменения в лимфоидных органах и почках.

Одновременно с КЧС может протекать также отечная болезнь поросят [17].

Гистологические изменения при КЧС неспецифические. Большая часть процессов, на которых может базироваться гистологическая диагностика, легко распознается на вскрытии (геморрагический лимфаденит, инфаркты селезенки и др.) Диагностическую ценность представляют изменения кровеносных сосудов, в основном в легких, с которыми связано формирование ряда характерных для чумы патологических процессов в различных органах (лимфоузлах, селезенке, почках, ЦНС и др.). В лимфоузлах устанавливают полнокровие сосудов, гомогенизацию, фибриноидное набухание и некроз стенок сосудов, микронекрозы лимфоцитов, очаговые скопления плазмоцитов, чаще по ходу сосудов. В селезенке, в зоне инфаркта, отмечают некроз ткани, а вне зоны - кровоизлияния, очаги кариорексиса лимфоцитов и небольшие группы незрелых клеток лимфоидного ряда. В почках зернистая дистрофия и некроз канальцевого эпителия, гломерулонефрит и кровоизлияния в виде петехий и экхимозов во всех слоях, а также в слизистую лоханки мочевого пузыря. В большинстве случаев (70-90%) в головном и спинном мозге обнаруживают негнойный лимфоцитарный энцефаломиелит с периваскулярными лимфоцитарными инфильтратами, очаговой пролиферацией клеток микроглии (глиальных узелков) и дистрофией ганглиозных клеток [22, 24, 30, 31, 32, 36, 43].

Патоморфологические изменения при различных формах КЧС представляют в виде следующих патологоанатомических диагнозов:

Патологоанатомический диагноз септической формы:

1. Геморрагический диатез.

2. Геморрагический лимфаденит.

3. Инфаркты в селезенке.

4. Зернистая дистрофия печени, почек, миокарда.

5. Острый катаральный или крупозно-геморрагический гастроэнтерит.

6. Катарально-гнойный коньюнктивит.

7. Общая анемия.

8. Гисто: негнойный лимфоцитарный энцефаломиелит (во всех отделах) головного и спинного мозга.

КЧС, осложненная сальмонеллезом:

1. Слоистые пуговчатые струпья на слизистой оболочке толстого кишечника (очаговый дифтеритический колит, чумные бутоны).

2. Фолликулярно-язвенный колит и тифлит.

3. Диффузный дифтеритический (некротический) колит и тифлит.

4. Хроническая катаральная бронхопневмония.

5. Серозно-фибринозный плеврит и перикардит.

6. Оспоподобная корочковая сыпь в коже.

7. Истощение и общая анемия.

КЧС, осложненная пастереллезом:

1. Крупозная, крупозно-геморрагическая пневмония.

2. Серозно-фибринозный плеврит и перикардит.

3. Все процессы, характерные для септической формы [31].

9. Диагностика

Диагноз на КЧС ставят на основании эпизоотологических данных, клинических признаков, патологоанатомических изменений с обязательным подтверждением лабораторными исследованиями, а в сложных случаях - ставят биопробу на животных.

Из эпизоотологических данных при КЧС учитывают восприимчивость к этой болезни всех возрастных групп cвиней, пород и линий независимо от времени года. Обращают внимание на возможный завоз в хозяйство вирусоносителей или необезвреженных боенских отходов, высокую заболеваемость (90-100%) и летальность (80-100%) свиней. Устанавливают благополучие хозяйства по КЧС в прошлом, полноту и эффективность проводимых мероприятий по профилактике КЧС. При этом анализируют схему специфической профилактики КЧС и других инфекционных болезней этого вида животных в хозяйстве, продолжительность и условия хранения используемой вакцины, уровень иммунного статуса вакцинированных свиней, условия их содержания и кормления, другие вопросы, касающиеся общей и специфической профилактики заболевания. Учитывают заболеваемость и падеж диких и принадлежащих населению свиней, с клиническим проявлением и патологоанатомическими изменениями, характерными для этого заболевания.

При постановке клинического диагноза нужно учитывать, что болезнь может вызываться различными серовариантами вируса КЧС: А, В и С.

Из клинических признаков при острой форме КЧС наиболее характерными являются: лихорадка постоянного типа, резкое угнетение, отказ от корма, шаткая походка, конъюнктивит, геморрагический синдром (точечные или пятнистые кровоизлияния в коже, в области спины, живота, шеи, бедер, груди, ушей). Имеет место быстрое распространение заболевания среди поголовья разного возраста при высоком уровне смертности (до 100%) через 1-2 недели после проявления клинических симптомов.

В отличие от острой формы чумы свиней практически невозможно поставить клинический диагноз в случаях подострой, хронической или поздно установившейся формы чумы свиней из-за сильной изменчивости клинических и патологоанатомических признаков. Подострое и хроническое течение характеризуется менее выраженными клиническими признаками, чем при остром течении, появлением симптомов поражения органов пищеварения или дыхания и лихорадки ремитирующего типа.

Наиболее характерным гематологическим изменением при КЧС является лейкопения, а также отсутствие лечебного эффекта при использовании антибиотиков.

Для септической формы (острое течение) при постановке патологоанатомического диагноза характерными патологоанатомическими признаками являются: геморрагический диатез, геморрагический лимфаденит с мраморным рисунком поверхности их разреза, инфаркты в селезенке, зернистая дистрофия печени, почек, миокарда, острый катаральный или крупозно-геморрагический гастроэнтерит, катарально-гнойный конъюнктивит и общая анемия. При гистоисследовании головного и спинного мозга обнаруживают во всех его отделах негнойный лимфоцитарный энцефаломиелит.

При осложнении КЧС пастереллезом и гемофилезной плевропневмонией (подострое течение) обнаруживают крупозную или крупозно-геморрагическую пневмонию, фибринозный плеврит и перикардит, а при чуме, осложненной сальмонеллезом (хроническое течение) - очаговое дифтеритическое воспаление солитарных фолликулов ободочной и слепой кишок с образованием круглых пуговчатых струпьев (чумные бутоны).

При возникновении подозрения на чуму предварительный диагноз должен быть подтвержден соответствующими результатами лабораторной диагностики, включающей вирусологические исследования - выделение и идентификацию возбудителя методами:

- иммунофлюоресценции - исследуют мазки-отпечатки миндалин и других органов павших и убитых животных, а также криосрезы тканей. МФА отличается относительной специфичностью и быстротой выполнения. Однако во избежание неточностей при использовании этого метода следует иметь в виду, что иммунофлюоресцирующая специфическая сыворотка должна иметь высокие титры антител, она должна быть моновалентной, полученной от свиней, не обработанных другими антигенами; патматериал для исследования должен быть отобран не позже 2-3 ч. после смерти животного, фиксирован в ацетоне или замораживанием и сразу же отправлен на исследование.

Существенным недостатком метода иммунофлюоресценции является то, что вакцинный вирус сохраняется в организме иммунизированных свиней до 15 дней после вакцинации и методом флюоресцентного анализа не дифференцируется от полевого вируса. В организме же толерантных поросят, полученных от вакцинированных супоросных свиноматок (особенно в 10-кратной дозе), вакцинный штамм может персистировать в течение всей жизни животных.

- полимеразной цепной реакции - предназначена для обнаружения вируса классической чумы свиней. В основе метода лежит многократное повторение циклов денатурации ДНК (после получения из вирусной РНК фрагментов ДНК) в исследуемой пробе при температуре плюс 94?С, гибридизации (отжига) с исследуемой ДНК специфических олигонуклеотидных затравок (праймеров) при температуре плюс 60°С и синтез с них комплементарных цепей ДНК с помощью термостабильной ДНК полимеразы при температуре плюс 72°С. С помощью данной тест-системы вирус КЧС может быть обнаружен в инфицированных культурах клеток и патматериале от больных и павших животных (кровь, селезенка, сердце, печень) в течение от 8 до 24 часов.

Относительно эффективным при выявлении вируса классической чумы свиней является также метод иммуноферментного анализа и цитохимический вариант иммуноферментного анализа (ЦВИА).

Для обнаружения вируса КЧС в патологическом материале могут использоваться РНГА, РДП, иммуноэлектроосмофорез (ИЭОФ) и другие.

Серо - и ретроспективная диагностика КЧС в последние годы базируется на использовании преимущественно трех серологических реакций: реакция нейтрализации флюоресцирующих микробляшек (РНФБ); реакции непрямой ИФ и непрямой вариант твердофазного ИФА.

Выделение вируса из патматериала производится заражением культуры клеток ПК-15 (перевиваемая линия клеток почки поросенка). Вирулентные штаммы ВКЧС в этой культуре активно репродуцируются при плюс 39-40°С, образуя большие флюоресцирующие участки клеток. Вакцинные штаммы в культуре ПК-15 размножаются медленно при плюс 33-34°С, образуя небольшие флюоресцирующие участки клеток.

Идентификация вируса КЧС проводится методами МФА, ИФА, ПЦР или нейтрализации флюоресцирующих микробляшек. Последний метод используется также для дифференциации эпизоотических и вакцинных штаммов вируса. Срок исследований - 15 дней.

В лабораторию для исследований следует направлять кусочки селе- зенки, миндалин, заглоточных, подчелюстных и брыжеечных лимфоузлов почек, легких, пробы крови и костного мозга из грудной кости, отобранные в первые 2 часа после гибели или убоя больных животных. Материал отбирают в стерильную посуду и доставляют в термосе со льдом. От новорожденных поросят (до приема молозива) берут кровь (1-2 мл) помещают в пенициллиновые флаконы, которые хранят и транспортируют для исследования в замороженном виде. Если пробы крови берут от нескольких безмолозивных поросят, то они должны быть из разных пометов. Материал для исследования направляют с сопроводительным письмом, в котором указывают эпизоотическое состояние хозяйства, отмеченные симптомы болезни, патологоанатомические изменения.

Для гистоисследования в лабораторию посылают кусочки полушарий головного мозга, продолговатого мозга, четверохолмия, спинного мозга. Кусочки указанных органов (1-2 х 1 х 1 см) помещают в стеклянные банки с 10%-ным водным раствором формалина. Объем консерванта берут в 10 раз больше, чем объем взятого патматериала.

Данная схема лабораторных исследований на КЧС принята во всех европейских странах.

В настоящее время диагностикумы готовятся на основе моноклональных антител, что позволяет дифференцировать не только эпизоотические и вакцинные штаммы вируса, но и близкородственные пестивирусы.

На основании изучения эпитопного профиля 18 штаммов ВКЧС с использованием МАт к трем пестивирусам (ВКЧС, BflKFC и ПЮ) был выявлен у 4 штаммов нетипичный для ВКЧС профиль и высказана гипотеза, что свиньи чувствительны не только к пестивирусам КРС и овец, но и другим вирусам чумы, хозяин которых еще не установлен [63].

С помощью вируснейтрализующих МАт было установлено, что ответственным за индукцию протективного иммунного ответа против КЧС является оболочечный гликопротеин gp55 [70, 71]. С ним же связана и нейтрализация инфекционности вируса антителами.

В отдельных случаях прибегают к постановке биопробы, которая является относительно не дорогим, но исключительно достоверным методом диагностики.

В каждом отдельном случае на проведение биопробы необходимо иметь разрешение Главного управления ветеринарии Республики Беларусь. Биопроба должна проводиться под методическим руководством Республиканской ветеринарной лаборатории в условиях, исключающих возможность рассеивания возбудителя. Подтверждение диагноза биопробой можно получить лишь через 30 суток и более, после установления сероконверсии у переболевших поросят [25].

В отдельных случаях биологическая проба при диагностике КЧС является решающей. Однако условий для ее постановки в Республике Беларусь нет из-за отсутствия свиней неиммунных к классической чуме.

Диагноз на КЧС следует считать установленным при выделении вируса из патологического материала в культуре клеток и его идентификации или положительной биопробе.

При диагностике КЧС во всех сомнительных случаях надо исключить (или подтвердить) такие болезни как африканская чума свиней, рожа, сальмонеллез, пастереллез, листериоз, болезнь Ауески, ТГС, болезнь Тешена, дизентерию, отравления протекающие с признаками геморрагического диатеза.

Лечение неэффективно, больных КЧС свиней немедленно убивают. В случае выздоровления больные КЧС свиньи остаются вирусоносителями в течение 1 года и более [32, 31, 22, 46, 7, 50, 51, 52, 8,48, 9, 42, 15, 58, 53, 23, 30, 25, 35, 33, 10, 34].

10. Иммунитет и специфическая профилактика

10.1 Живые вакцины

Иммунитет при КЧС обусловлен ВНА. Из-за отсутствия экспрессии вирусспецифических белков на поверхности клеток иммунные реакции, направленные на цитолиз инфицированных клеток, не "работают". Однако формирование резистентности к заражению вакцинированных свиней происходит до выявления ВНА. Лейкоциты и лимфоциты иммунизированных свиней способны лизировать аутогенные инфицированные ВКЧС клетки (лейкоциты). Однако эти же клетки либо вовсе не вызывают цитолиз незараженных лейкоцитов, либо лизируют их в меньшей степени. Возможно, что наряду с нейтрализацией ВКЧС AT важную роль играют иммунологические реакции, опосредуемые клетками, в частности ЕК (естественные киллеры) и ЦТЛ (цитотоксические лимфоциты).

Однако при анализе методом проточной цитометрии с использованием специфических моноклональных антител линии лейкоцитов свиней, инфицированных штаммами Вашингтон и Селлпест ВКЧС типичные симптомы болезни развивались у животных, зараженных штаммами Вашингтон и Альфорт. Они сопровождались значительной лейкопенией и слабой краткосрочной активностью В-клеток, отмечена также слабая стимуляция популяции Т-клеток. У животных, инфицированных аттенуированным штаммом Селлпест, наблюдали активацию иммунного ответа.

Впервые о возможности иммунизации свиней против КЧС сообщил Дорсет в 1904 г. В результате опытов по симультанным прививкам (одновременное применение сыворотки содержащей НАТ к ВКЧС и заражение кровью больных свиней) было доказано, что этим способом можно вызвать у свиней прочный и продолжительный иммунитет. В 1931 году этот метод был введен в ветеринарную практику. Однако после такой иммунизации иногда регистрировались осложнения, систематические прививки могли создавать стационарные очаги КЧС.

Новая эра в специфической профилактике КЧС (начиная с 50-х годов) связана с получением аттенуированных вакцинных штаммов: Ровак и Гудзон, которые были оставлены по причине высокой реактогенности - вызывали гибель части привитых животных (до 30%) и нарушение эмбрионального развития, а также китайского лапинизированного (адаптированного к организму кроликов) "С" синонимы ("К", LC, LPC), и двух культуральных - японского (GPE) и французского (Tiverval). При усовершенствовании технологии изготовления живой вакцины из китайского штамма С последний адаптировали к размножению в различных культурах клеток. Используя этот штамм, был приготовлен ряд культуральных вакцин, которые занимают первое место в арсенале средств специфической профилактики против КЧС. Это ВГНКИ, ЛК-ВННИВВиМ; АСВ-лапинизированная (Россия); Suvac (Венгрия); Cellpest (Польша); Pestiffa (Merial, Франция);TVM (Чехия); Egermann (Reims, Германия); Norden; Мinnesota Anchor; Colvasan Sanocon Portcivac (Мексика); "Челвак"; Сidepest; gpE; PAV-250; МРК-LC и др [32, 31, 47, 24, 44, 45, 57].

Сухая лапинизированная вирусвакцина (АСВ) из штамма "К" против чумы свиней представляет собой высушенную вирусосодержащую ткань селезенки, лимфоузлов и дефибринированную кровь кроликов, зараженных лапинизированным вирусом чумы свиней штамма "К". Сухие культуральные вакцины отличаются от вирусвакцины АСВ более высоким содержанием вакцинного вируса: ВГНКИ - примерно в 10 раз, ЛК-ВНИИВВиМ - в 10-100 раз.

Сухая культуральная вирусвакцина ВГНКИ представляет собой культуральный штамм "К" вируса КЧС, выращенный в первичной культуре клеток почки плода свиньи (ППС) лиофильновысушенный.

Сухая культуральная вирусвакцина ЛК-ВННИВВиМ против КЧС получена на основе шт. К ВКЧС, выращенного в культуре клеток тестикул ягнят и лиофильно высушенного. Препарат обладает высокой иммуногенностью и полностью лишен вирусных контаминантов, патогенных для свиней. Вакцина не уступает по активности лучшим мировым аналогам - вирусвакцине GPE (Япония) и Phiverval (Франция), но и превосходит их по универсальности применения и потенциальной безвредности. Все характеристики вирусвакцины ЛК-ВНИИВВиМ соответствуют требованиям Европейской фармакопеи и общепризнанным мировым стандартам. С помощью живой вирусвакцины ЛК-ВНИИВВиМ можно создавать специфическую защиту от заболевания и гибели 100% вакцинированных свиней уже через 48 ч после однократного внутримышечного введения ее в дозе 6,0 lg ИмД₅₀/гол.

Штамм К обладает слабой реактогенностью для свиней всех возрастов, включая новорожденных поросят и супоросных свиноматок, он не передается неиммунным животным и при совместном содержании с иммунными, и не реверсирует при пассировании на свиньях (6-12 до 30 пассажей). Шт. К может проникать через плацентарный барьер, однако, он не приводит к аномалиям развития плода [31, 32]. Он также не персистирует у привитых свиней, а после экспериментального заражения последних вирулентный вирус не выделяется из организма вакцинированных животных. После однократной прививки свиней старше 3-месячного возраста иммунитет наступает через 3-5 дней.

В 1994 году во ВНИИВВиМ получен методом селекции вакцинный штамм "ЛК-К" из штамма "ЛК" - ВНИИВВиМ. Этот штамм обладает способностью репродуцироваться как в первичных, так и перевиваемых культурах клеток, накапливаться в высоких титрах. Он очень иммуногенен, вызывает 100%-ную иммунную защиту. Фенотипически шт. ЛК-КС отличался от шт. С отсутствием вызывать гипертермическую реакцию у кроликов при внутривенном введении [47]. Вакцину применяют двукратно внутримышечно по 2,0 мл с интервалом 10-14 дней. Противопоказаний к применению вакцины нет. Свиноматок вакцинируют в любые сроки супоросности, но не позднее, чем за три недели до опороса. Иммунитет наступает через 30 дней после первой вакцинации и сохраняется в течение 6 месяцев.

НПО "Нарвак" выпускает сухую культуральную вирусвакцину "КС" против КЧС, которая применяется в отдельных свиноводческих хозяйствах Республики Беларусь. Эта живая лиофилизированная вакцина из клонированного шт. ЛК. Вирус выращивается в роллерной культуре клеток ТЯ. Вакцина "КС" отличается от аналогичных живых вакцин против КЧС ("ЛК-ВНИИВВиМ", "С", "GP" и др.) более высокой концентрацией вакцинного вируса (10^6,5-10^7,5 ТЦД₅₀/мл) или (<8,0 lg ИмД₅₀/мл), получаемого при его репродукции in vitro, и в способе ее применения. В основе применения препарата, в неблагополучных по КЧС хозяйствах, лежит гипервакцинация, при которой вакцина "КС" вводится свиноматкам (можно супоросным) и хрякам в дозе 500000-1000000 ИмД₅₀, а поросятам (можно новорожденным) - 200000 ИмД₅₀ по схеме: свиноматкам - за две недели до случки и за 20-30 дней до опороса; поросятам на 10-15-й и 90-100-й дни жизни; хрякам 2 раза в год. Вакцина неревертабельна (неверсибельна), нереактогенна и безопасна для свиней любого возраста, не передается горизонтально, быстро создает продолжительный напряженный иммунитет (не менее 2 лет) у иммунокомпетентных свиней.

В двух хозяйствах (25000 свиней), где гипервакцинация длилась 10-12 месяцев, КЧС была полностью ликвидирована, в дальнейшем перешли на профилактические прививки свиней вакциной ЛК-ВНИИВВиМ согласно наставлению (1000 ИмД₅₀). Спустя два года оба хозяйства оставались благополучными по КЧС [48, 47, 43].

Вакцина Сidepest получена из штамма С адаптированного к культуре клеток почки свиньи линия SK-6. Рекомендуемая доза для практического применения - 400-600 ТКИД₅₀. У 6-8 недельных серонегативных поросят прочный иммунитет наступал на 7-й день и длился более 6 месяцев (срок наблюдения). Титр ВНА у них через 6, 12, и 26 недель после вакцинации был 1:16-1:256, который защищал всех привитых животных от заболевания и гибели после заражения вирулентным вирусом, однако через две недели после заражения титр ВНА увеличивался (1:200-1:1000), что свидетельствовало об ограниченном размножении вирулентного вируса в вакцинированном организме, клинически устойчивом к экспериментальному заражению.

Вакцину Pestiffa производит фирма "Мериал" используя для размножения вакцинного вируса линию клеток почки ягнят (IR04). При интраназальном заражении привитых свиней (шт. С, вакцина Pestiffa) в дозе 100 ИД₅₀ свиньи с титром ВНА 1:12,5-<1:50 проявляли все признаки инфицирования, кроме гибели. При титре 1:50-1:300 вирус размножался (бустерный эффект), но не выделялся и не распространялся горизонтально, что представляет интерес с эпизоотологической точки зрения.

Штамм С, адаптированный к клеткам RK13 (почки кролика) уже после 10 пассажей утратил исходную патогенность, сохранив высокую иммунизирующую активность и получил название СРА (C-Porto-Allegre), а вакцина из него - PAV-250. Для его промышленного размножения более эффективной оказалась культура клеток эмбриона кролика.

Японский вакцинный штамм GPE получили пассированием слабовирулентного штамма ALD в разных клеточных культурах при 30?С. Вакцинный шт. GPE в отличие от исходного вирулентного хорошо размножался в культуре клеток морской свинки (G-маркер) при 30?С и плохо при 40?С (Т-маркер). GPE - вакцина на основе этого штамма стимулирует выработку ВНА у молодняка в титре 1:32-1:256 [47].

Штамм Tiverval получили из вирулентного штамма Альфорт после более чем 170 серийных пассажей в КК при 29-30?С, и его идентифицируют по нескольким маркерам in vitro.

В Болгарии получена лиофилизированная живая бивалентная вакцина против КЧС и болезни Ауески. Препарат оказался безвредным для поросят и овец, стимулирует стойкий иммунитет к обеим инфекциям.