Вирусный гепатит С

Проблема вирусного гепатита C, ее актуальность для Абхазии. Строение и свойства вируса, его жизненный цикл. Источник возбудителя и заражения. Условия вирусного гепатита С. Иммунная система микроорганизма. Клиническая картина хронического заболевания.

Рубрика Медицина
Вид курсовая работа
Язык русский
Дата добавления 03.05.2013
Размер файла 1,5 M

Отправить свою хорошую работу в базу знаний просто. Используйте форму, расположенную ниже

Студенты, аспиранты, молодые ученые, использующие базу знаний в своей учебе и работе, будут вам очень благодарны.

Размещено на http://www.allbest.ru/

Абхазский государственный университет

Биолого-географический факультет

Кафедра экспериментальной биологии и медицины

Курсовая работа

Вирусный гепатит C

студентки 5-го курса спец. мед. биохимия

Чанба Асмат Гарриевны

научный руководитель: академик раен, профессор,

д. м. н. Шевцова Зинаида Всеволодовна

Сухум - 2013

Содержание

  • Введение
  • 1. Этиология
  • 2. Строение и свойства вируса
  • 3. Эпидемиология
  • 4. Патогенез
  • 5. Лабораторная диагностика
  • Заключение
  • Список литературы

Введение

Вирусный гепатит C представляет серьезную проблему Здравоохранению и человечеству в целом. Согласно ВОЗ в мире количество людей, инфицированных вирусом гепатита C, составляет 700 млн, из которых 80% уже имеют хроническую форму заболевания.

Вирус гепатита C прозвали "ласковым убийцей" и это вполне обосновано, так как он обладает уникальными свойствами, заключающиеся в большинстве случаев, в незаметной форме течения с переходом в хронизацию. Исходом которой является цирроз печени и немного реже рак.

Проблема вирусного гепатита C чрезвычайно актуальна и для Абхазии, потому что количество больных неуклонно растет. Военные события создали в Республике немало трудностей для успешной борьбы с этой проблемой. Следует отметить, что если раньше передача вируса происходила преимущественно при переливании крови, лечебно-диагностических процедурах и парентеральных вмешательствах, то в последние годы на первое место вышли внутривенное введение наркотиков и половые контакты.

Целью курсовой работы являлся сбор и анализ литературных данных, характеризующих гепатит С. Работа выполнена на базовой кафедре экспериментальной биологии и медицины АГУ с использованием библиотечного фонда НИИЭПиТ АНА.

1. Этиология

Историческая справка

Минуло 20 лет со времени идентификации вируса гепатитаC. Путь к его открытию был достаточно трудным и долгим. После обнаружения Бламбергом антигена, который был назван "австралийским антигеном", оказавшимся поверхностным антигеном вируса гепатита B, и в 1973г.С. Файнстоуном в фекалиях больного возбудителя гепатита А, были разработаны методы серологической диагностики инфекции, и во многих странах внедрен в практику скрининг донорской крови. Однако, у людей после переливания крови, свободной от антигена ВГВ и ВГА, развивался посттрансфузионный гепатит. Это указывало на существование еще одного типа посттрансфузионного вирусного гепатита, который стали называть "вирусный гепатит ни A ниB". [14] Многие ученые были заинтересованы в этиологической природе этого неизвестного вируса. Однако, были трудности в его изучении потому, что вирус не размножался в культуре клеток, не был виден в электронный микроскоп, его было мало в биологических жидкостях и не патогенен для мелких лабораторных животных, а в эксперименте инфекционный процесс можно воспроизвести только у высших обезьян.

Вирус гепатита С - это единственный вирус открытие которого произошло с помощью молекулярно - биологического метода. Это исключительный случай в истории вирусологии. Произошло это благодаря К. Чу и его коллегам, которые в 1981 году ультрацентрифугированием плазмы крови инфицированных вирусом ГНАНВ шимпанзе выделили из нее молекулы нуклеиновых кислот, соответствующие по размерам геномам небольших вирусов. Далее было получено множество копий этих нуклеиновых кислот. Эти ДНК-копии были инкорпорированы в бактериофаги, которые использовали как векторы для введения их в бактерии. Было получено около 1млн клонов, сформировавших своеобразную "библиотеку" рекомбинантных клонов в бактериофагах. Затем из "библиотек" были исключены те клоны, которые имели высокую степень гибридизации с ДНК-шимпанзе. Оставшимися бактериофагами были инфицированы бактерии, размножение которых сопровождалось и экспрессией пептидов, детерминируемых указанными клонами. Продукты экспрессии этих клонов были протестированы на способность специфически связываться с антителами, выделенными из крови инфицированных шимпанзе. В результате были изолированы бактерии, которые синтезировали серологически активный рекомбинантный пептид, реагирующий с антителами, выделенными из сыворотки не только экспериментально зараженных шимпанзе, но и нескольких больных ГНАНВ. Это указывало на то, что пептид, по всей вероятности, является фрагментом вирусспецифического белка, принадлежащего возбудителю ГНАНВ. [16]

"Вырезав" из ДНК бактериофага последовательность, кодирующую пептид, исследователи использовали ее в качестве "зонда" для гибридизационного анализа исходной фаговой "библиотеки" клонов ДНК-копии вирусного генома. Оказалось, что она не гибридизируется с последовательностями РНК из печени здоровых шимпанзе, но гибридизируется с участками РНК, выделенной из печени зараженных шимпанзе. Последующий молекулярный анализ этой РНК позволил прийти к выводу, что возбудителем этого ГНАНВ является РНК-содержащий вирус, обладающий оболочкой. Авторы назвали его "вирусом гепатита C". [16] На основании результатов такого анализа авторы предположили, что судя по основным свойствам, ВГС таксономически может принадлежать к семействам либо тога - либо флавивирусов. И наконец, идентифицировав вирусспецифический белок, эти исследователи на его основе почти вслепую создали первую экспериментальную радиоиммунологическую тест - систему, позволяющую идентифицировать инфекцию путем выявления антител к этому вирусспецифическому белку.

Таким образом, 1989 год положил начало новому периоду, ознаменовавшемуся детальным изучением ВГС и вызываемой им инфекции и разработкой доступных методов ее лабораторной диагностики. [24]

2. Строение и свойства вируса

Вирус гепатита С систематизирован в семейство Flaviviridae, род Hepacivirus. Вирион представляет собой небольшой сферической формы вирус, диаметром 55-65 нм. Геном вируса представлен как видно из рис.1.1 одноцепочечной +РНК, протяженностью около 10000 нуклеотидов, вокруг которого находятся структурные белки капсида и суперкапсидная оболочка с пепломерами. [9] На рис.1.2 показаны белки, которые образуются в результате нарезания в начале синтезированного единого полипептида - это три структурных белка - сердцевинный белок core и два гликопротеина оболочки Е1 - Е2 и 5 неструктурных белков - NS1, NS2, NS3, NS4, NS5. Гены, кодирующие структурные белки, расположены у 5' области генома вируса, а неструктурные у 3' области. [11]

Рис. 1.1 Вирус гепатита С [9]

Таблица 1.2. Структура генома ВГС [24]

Структурные белки

Неструктурные белки

N

T

5'

C

C

E1

E2

NS2

NS3

NS4

NS5

С

3'

R

R

К каждому из этих белков вырабатываются антитела, обнаруживаемые в крови больного гепатитом C. Геном ВГC обладает чрезвычайно высокой гетерогенностью. Известно 10-14 генотипов и более 50 подтипов вируса. Наиболее вариабельным регионом ВГС является участок E2/NS1, включающий в себя 2 гипервариабельные области (HVR1, HVR2). [19] Причинами изменчивости являются ошибки репликации, катализируемой вирусной РНК - зависимой РНК - полимеразой. В инфицированном организме вирус присутствует в виде, так называемых квазивидов. Образование квазивидов имеет большой биологический смысл, поскольку, таким образом, вирус "ускользает" от иммунного ответа хозяина. Вирусы после попадания в системный кровоток проходят определенный жизненный цикл в гепатоцитах, как показано на рис.1.4. Депротеинизация - разрушение белков капсида, освобождение вирусного генома - одноцепочечной РНК, репликация на матричной цепочке, с помощью репликаз, транскрипция - переписывание информации и передача на рибосому, на рибосоме происходит синтез вирусных белков, сборка вирионов и выход нового потомства с помощью пачкования. Помимо печеночной репликации вируса имеет место внепеченочная репликация в тканях лимфоидного и нелимфоидного происхождения. Размножение вируса в лимфоцитах приводит к нарушению их иммунологических функций и дает возможности вирусу избегать иммунологического контроля. [2]

Рис. 1.4 Жизненный цикл вируса ГС [2]

Вирус устойчив к нагреванию до 50°С, при кипячении сохраняется всего в течении 2 мин. Инактивируется хлороформом и ультрафиолетовым облучением. При комнатной температуре выживает на различных поверхностях, например, в засохшей капле крови сохраняет активность от 16 часов до 4-х дней. [13]

3. Эпидемиология

Вирусный гепатит C относится к антропонозным не трансмиссивным кровяным вирусным инфекциям. Природный резервуар вируса не известен. Источником возбудителя является человек, больной острым или хроническим ГС и основное значение имеют лица с отсутствием яркой клинической симптоматики. Пути заражения гепатитом С - парентеральный и вертикальный. К парентеральному относятся искусственные и естественные пути, в 10% случаев путь передачи инфекции неизвестен. [15] К естественным относятся заражение половым путем и в меньшем проценте случаев - контактно - бытовым - через общие предметы гигиены. Искусственный путь передачи связан с любым повреждением кожных и слизистых покровов нестерильными инструментами. [11]

Парентеральное введение наркотиков считается причиной появления примерно половины всех инфекций вирусом ГС. Восприимчивость к данной инфекции различных людей неодинакова и в большой степени определяется инфицирующей дозой. Риску подвергаются лица, имеющие беспорядочные половые контакты - в частности гомосексуалисты, люди, находящиеся на гемодиализе, так же при посещении стоматологических учреждений, салонов пирсинга и акупунктур, при маникюрных и педикюрных манипуляциях. Подвержены риску и медицинские работники, работающие с кровью и патологоанатомы. РНК вируса у инфицированных обнаруживается как в крови, так и в сперме и слюне. Однако, концентрация вируса в этих жидкостях очень мала, в крови составляет приблизительно 100 вирионов на мл. Введение одноразовых шприцов, игл, катеторов, проверка донорской крови и специальная обработка препаратов крови - безусловный прогресс в борьбе с ВГС. В последние годы зарегистрировано, что доля полового пути в структуре передачи вируса ГС значительно возросла и имеет некоторые закономерности. При гетеросексуальных контактах с ВГС положительным риск заражения составляет примерно 10 - 15%. [3] Гомосексуалисты - мужчины заражаются, приблизительно 95 - 99%. Передача вируса половым путем происходит в том случае, если инфицированный секрет или инфицированная кровь проникает в здоровый организм партнера через слизистую. Однако одного только инфицированного секрета недостаточно для того, чтобы произошло заражение. Должны присутствовать предрасполагающие факторы: большое количество вируса в выделяемом организмом секрете, нарушенная целостность слизистой, с которой вирус соприкасается, присутствие других половых инфекций (вирусных или бактериальных). [5]

Наличие вируса гепатита C в организме беременной женщины является проблемой. В связи с этим идентификация факторов, повышающих риск вертикальной передачи вируса от матери плоду является первоочередной задачей. В какое время происходит инфицирование ребенка - в пренатальном периоде, во время родов или в постнатальном - неизвестно. В единичных исследованиях показано наличие РНК ВГС в амниотической жидкости. Риск передачи HCV от матерей, инфицированных только этим вирусом, составляет в среднем 4,5-5,0 % и расценивается как низкий. Степень риска резко возрастает при наличии у матери коинфекции ВИЧ/HCV и при применении наркотиков, определенном генотипе вируса. M. Окамото и коллеги в 2000г. отметили, что высокая вирусная нагрузка у матери (>>2,5Ч106 РНК копий/мл), естественные роды и отсутствие анти - NS-антител являются серьезными факторами риска вертикальной передачи вируса от матери ребенку. Исследования показали также наличие РНК ВГС в грудном молоке, но влияние грудного вскармливания на возможность развития гепатита С у ребенка в настоящее время остается предметом дискуссии, но при наличии трещин и других повреждений молочной железы грудное вскармливание необходимо прекратить. [18]

Предполагается, что вирус ГС проник в человеческую популяцию около 300 лет назад и распространился повсеместно. К настоящему времени число людей, инфицированных вирусом ГС, превышает 700 млн., т.е. около 3-4% населения земного шара. Так, например, в Южной Америке по данным за 2005год, вирусом гепатита C инфицировано примерно 4% населения, Африке 2-2,2%, Азии-2-3%, США до 3%, Японии 1,2%. В Российской Федерации с 1994г. до 2000г. число инфицированных выросло с 3% до 21%. [8] Официальная регистрация данного заболевания во многом затруднена из-за слабой выявляемости данного вида гепатита. Ежегодно в разных странах заболеваемость гепатитом C возрастает. Во многом данное явление связывают с ростом наркомании (38-40% зараженных гепатитом C принимают внутривенно наркотики). Большинство инфицированных являются скрытыми носителями. Установлено, что наибольшее распространение имеют генотипы 1а, 1b, 2а, 2b, 3а. Они доминируют в Европе, Северной Америке, Азии и Океании. [12] В России и в Абхазии чаще встречаются генотип 1а,1b, а генотипы 2а, 2b, 3а относятся к редко выявляемым. Для нашей страны проблема наркомании и вместе с тем рост числа инфицированных составляет большую проблему. Так на период 1 января 2009года по данным Республиканского наркологического диспансера МЗ РА из 1500 обратившихся и обследовавшихся 500 были инфицированы вирусом ГС. И из года в год число заболеваемости растет.

4. Патогенез

Обязательным условием развития ВГC - инфекции является проникновение вируса в гепатоциты, где в основном и происходит его репликация, известно, что она осуществляется через синтез комплементарных промежуточных форм - цепей РНК с негативной полярностью (-РНК). [7]

В патогенезе инфекции большую роль играют свойства вируса, от которых зависит течение и исход гепатита С. Большую роль играет генотип вируса. Считается, что лица, имеющие генотип 1в, болеют тяжелее и труднее поддаются противовирусной терапии. На практике отмечено, что у некоторых лиц одновременно могут существовать два и более генотипов, хотя это бывает не так часто. Склонность к чрезвычайной изменчивости вируса в течение инфекции у одного и того же человека обусловливает неэффективность гуморального и клеточного иммунного ответа, то есть вирус успешно ускользает от иммунной защиты хозяина. И именно поэтому благополучно персистирует в организме хозяина. И, несмотря на наличие вирусспецифического иммунного ответа, у большинства инфицированных лиц не приводит к элиминации вируса и не защищает от реинфекции. Вирус имеет много генотипов, 6 из которых встречаются чаще всего и считаются основными. [4]

Иммунная система макроорганизма на вирус ГС отвечает мобилизацией врожденных факторов - гуморального и клеточного иммунитета. Но уже через несколько дней факторы врожденной иммунной защиты подключают адаптивный иммунитет, который направлен как на элиминацию свободных вирусных частиц, так и на элиминацию вируса, проникшего в клетки, и ингибирование репликации вируса. Характер иммунного ответа при инфекции зависит от доминирующего участия клонов СD4 Т - лимфоцитов - хелперов типов 1 и 2, которые различаются по продуцируемым ими цитокинам и роли в стимулировании развития иммунного ответа по клеточному или гуморальному типу. Регуляторный цитокин - ИЛ-12 участвует в направлении иммунного ответа в сторону Th1 или Th2. Когда в организме происходит активация Th1 - лимфоцитов, стимулирующих иммунный ответ по клеточному типу - это чаще ведет к полной элиминации вируса и наступает спонтанное выздоровление, или же инфекция протекает более легко. Если же активируются Th2 - лимфоциты, стимулирующие преимущественно гуморальное звено, наблюдается персистенция вируса в организме и неэффективность иммунитета хозяина, и при этом чаще развивается хронический процесс. Таким образом, нарушение баланса продукции цитокинов Th1/Th2 - клетками играет важную роль в иммунопатогенезе и исходе инфекции. [22]

На течение и исход болезни также влияют такие факторы как: злоупотребление алкоголем, коинфекции - вирусом иммунодефицита человека, гепатитом В и другими гепатотропными вирусами, наличие нарушений липидного обмена и ряда других факторов, влияющих на состояние имунной системы хозяина. [13]

На ранних этапах изучения ХГС среди механизмов поражения печени предполагалось преобладание прямого цитопатического эффекта вируса, что основывалось на принадлежности вируса ГС к семейству Flaviviridae, наблюдениях корреляции между уровнем виремии и активностью печеночного процесса, более быстрого прогрессирования ВГC - инфекции на фоне иммуносупресси.

А на сегодняшний день в поражении инфицированных вирусом ГС гепатоцитов рассматриваются:

· прямой цитопатический эффект вируса - действие компонентов вириона или вирусспецифических продуктов на клеточные маркеры и структуры гепатоцита;

· иммунноопосредованное повреждение, направленное на внутриклеточные антигены вируса ГС, представляющее собой либо непосредственное взаимодействие цитопатического Т - лимфоцита с клеткой - мишенью, либо опосредованное цитокинами;

· индуцированный вирусом аутоиммунный механизм повреждения. [21]

4. Формы течения инфекции

Вирусный гепатит C по формам многообразен. Клиническое течение может быть острым или хроническим, при котором выделяют латентную фазу и фазу реактивации, стертым и очень редко, чаще всего при сочетании с гепатитом В - фульминантным. Как видно из рис.4.1 клиническая манифестация с выраженными проявлениями наблюдается у 10-15% больных. Из которых 48 - 75% инфицированных переходят в хроническую форму или у 25-52% наступает спонтанное излечение. Субклиническое течение наблюдается у 85-90%, у которых, как правило, процесс приобретает хроническую форму, или же из них 10-15% могут спонтанно излечиться. [13]

Рис.4.1 Различные варианты течения гепатита [2]

Острый ГС протекает в легкой форме обычно в течение 6-8 недель с медленным появлением в крови специфических антител и чаще острая форма ГС остается нераспознанной. Латентная форма течения клинически почти не проявляется и длительное время, до 20 лет, может быть не выявлена. У больных может быть небольшая слабость, вялость, нерезкое ухудшение аппетита, иногда тяжесть в правом подреберье. Умеренно увеличены печень и селезенка. Недаром ВГС назван Львовым " ласковым убийцей" - он долгое время сидит в клетках печени и размножается, при этом, клинически никак не проявляясь, то есть у подавляющего большинства больных гепатитом C заболевание протекает без желтухи с незначительными признаками интоксикации. [8]

Как видно из рис.4.2 при острой форме инфекции выделяют следующие фазы: инкубационный период, острая фаза, которая наблюдается редко. В случае, если острая фаза проявилась, то больной может выздороветь, или гораздо чаще после острой наступает хроническая фаза, которая может продолжаться от 12 до 20 лет. В случае отсутствия острой фазы - процесс приобретает хроническую форму с исходом в цирроз и рак печени. [5]

Рис.4.2 Фазы ВГC - инфекции [5]

Клиническая картина хронической ВГC - инфекции характеризуется не только признаками патологии печени, но и разнообразными внепеченочными поражениями, которые обычно более выражены, чем "печеночные" симптомы, и имеют место у 40 - 45% больных ГС. ВГС - это генерализованная инфекция, с вовлечением в процесс не только печени, но и многих других органов и тканей. В таблице 4.3 перечислены возможные, наиболее часто встречающиеся внепеченочные проявления хронического ГС.

Таблица 4.3.

ВНЕПЕЧЕНОЧНЫЕ ПРОЯВЛЕНИЯ ХРОНИЧЕСКОЙ ВГС-инфекции [23]

Эндокринные

Гипертиреоз

Сахарный диабет

Поражение глаз

Язвы роговицы

Увеит

Нейромышечные и суставные

Синдром Гийена-Барре

Артриты, артралгии

Почечные

Гломерулонефрит

Аутоиммунные

Аутоиммунный гепатит 1 и 2 типа Дерматомиозит

При ВГС нередко обнаруживается ряд органоспецифических антител (АТ к тиреоглобулину, к микросомам щитовидной железы, к тромбоцитам и др.), в основе образования которых наряду с активацией В-лимфоцитов лежат механизмы молекулярной мимикрии. Определение органоспецифических антител позволяет предполагать аутоиммунные механизмы в основе некоторых внепеченочных поражений. В развитии внепеченочных поражений обсуждается также роль возможной репликации ВГС в различных органах и тканях (помимо печени и кроветворной системы) с развитием цитотоксических Т - клеточных реакций, направленных как на антигены вируса, так и, возможно, на аутоантигены, образующиеся вследствие непосредственного повреждающего действия вируса на клеточном уровне. [23]

вирусный гепатит хроническое заболевание

Исходом хронической ВГС - инфекции, как показано на рис.4.4 может быть - цирроз и рак печени (гепатоцеллюлярная карцинома). Цирроз возникает, приблизительно у 20-30% больных вирусным гепатитом С, а рак у 2-6%.

Рис.4.4 Исход хронической ВГС-инфекции

При циррозе печени нормальные печеночные клетки замещаются на фиброзную ткань. Изменение строения органа и утрата нормальных печеночных клеток приводит к тому, что печень не в состоянии выполнять свои функции. В частности: нарушается синтез белков плазмы крови, нарушается синтез белков необходимых для нормального свертывания крови при кровотечении, печень не в состоянии обезвреживать токсины. Возникает портальная гипертензия - повышение давления в воротной вене из-за сдавления мелких сосудов печени разросшейся фиброзной тканью. Кровь в результате идет в "обход" печени по коллатералям. Отсюда - расширенные геморроидальные вены, вены вокруг пупка, так называемая "голова медузы", а также расширенные и извитые вены в нижней трети пищевода, из которых нередко возникает обильное кровотечение. Нарушается и отток желчи из печени, что способствует развитию желтухи. [6]

Рак печени - это еще одно осложнение хронического гепатита C, при котором наблюдается резкое ухудшение общего состояния, быстрая потеря массы тела, боль в правой верхней половине живота. Диагностические процедуры (УЗИ, КТ) могут выявить изменение размеров печени и наличие опухоли. Окончательный диагноз устанавливают при биопсии опухоли. При циррозе и раке печени, применяемая терапия направлена лишь на замедление процесса. Согласно данным ВОЗ, ВГС ежегодно является причиной около 1,5 млн. случаев смерти. [6]

5. Лабораторная диагностика

Диагностика ВГС основывается на сочетании специфических и неспецифических методов исследования. В первую очередь надо выяснить есть ли у пациента в анамнезе: переливания крови, оперативные вмешательства, внутривенное введение наркотиков. К специфическим методам относятся: ИФА (обнаружение в крови анти - HCV) и ПЦР (обнаружение в крови РНК HCV). К неспецифическим относятся: определение протромбинового времени и фибриногена, определение активности ферментов, качественное и количественное определение билирубина, осадочные пробы. Диагностика так же базируется на данные инструментального исследования с помощью УЗИ - выявление гепатоспленомегалии и биопсии печени. [5]

Схема обследования пациента как показано на рис.5.1 включает: твёрдофазный иммуноферментный анализ "РекомбиБест анти - ВГС", который выявляет антитела к набору рекомбинантных белков - неструктурных. В случае, если тест сомнительный и нужно исключить факт ошибки необходимо провести "подтверждающий тест", который выявляет антитела к большему набору рекомбинантных белков - структурных и неструктурных. В случае положительного результата важно поставить полимеразную цепную реакцию, которая направлена на определение вирусной нагрузки и генотипа вируса. Затем желательно для выяснения активности процесса проверить количество аминотрансфераз в крови, а также другие показатели, характеризующие функцию печени.

Рис. 5.1 Схема обследования пациента

Специфические методы диагностики.

Диагностическим стандартом является обнаружение вирусной РНК при помощи ПЦР и обнаружение антител к антигенам вируса методом ИФА. Антитела образуются к каждому из вирусных белков, расположенных в структурных и неструктурных областях HCV, что объясняет их неодинаковую специфичность и диагностическую ценность. [5]

Иммуноферментный анализ (ИФА)

Иммуноферментный анализ обладает высокой чувствительностью, специфичностью и позволяет обнаружить антитела к вирусу гепатита С в 95% случаев хронической инфекции. Сам факт наличия антител говорит лишь о том, что у человека присутствует вирус гепатита С, но вот уточнить - последствия ли это перенесенной ранее инфекции, хроническая форма заболевания или острое его течение - невозможно. Известно, что при инфицировании вирусом гепатита C существует "серологическое окно" - т.е. антитела появляются в крови больного человека не раньше, чем через 2-3 недели после начала заболевания. Известны даже случаи, когда такой период затягивается до 3 месяцев, и на протяжении всего этого времени серологические тесты дают отрицательный результат, несмотря на наличие вируса в крови. ИФА используется в качестве скрининга представителей всех групп риска и особенно рекомендуются в качестве первичной диагностики пациентам с клиническими признаками заболеваний печени. [14]

Набор реагентов:

v планшет разборный с иммобилизованными рекомбинантными антигенами ВГС;

v положительный контрольный образец, инактивированный (К-);

v отрицательный контрольный образец, инактивированный (К-);

v конъюгат (антитела диагностические против иммуноглобулинов человека, меченные пероксидазой хрена);

v тетраметилбензидин (ТМБ);

v стоп - реагент;

v Схема анализа:

I - инкубация образцов сыворотки (плазмы) крови человека с белками иммуносорбента при температуре (37±1)°С в течение 30 мин.

II - инкубация с конъюгатом при температуре (37±1)°С в течение 30 мин, в котором антитела мечены пероксидазой хрена.

III - инкубация с хромогеном при температуре (37±1)°С в течение 30 мин.

IV - остановка реакции и учет результатов.

Клинический материал - сыворотка или плазма крови человека.

Постановка: исследуемую сыворотку наносят на поверхность лунок, на которой уже сорбирован стандартный коммерческий АГ (вирусный лизат, рекомбинантные белки или синтетические антигенные детерминанты), к которому предполагается обнаружить АТ. Инкубируют, промывают и вносят стандартную антивидовую сыворотку, содержащую АТ к глобулинам первой, исследуемой. Т.е., если исследуемая на АТ сыворотка человека, то антивидовая сыворотка должна содержать АТ к иммуноглобулину человека, меченые пероксидазой. После инкубации и промывания добавляют субстрат - ТМБ. Инкубируют в темноте, затем добавляют стоп-реагент и учитывают в "Унискане, определяя оптическую плотность.

Антитела к вирусу гепатита C носят общую аббревиатуру anti-HCV:

· Anti - HCV присутствуют как при остром (они могут обнаруживаться уже с 4 - 6 недели после инфицирования), так и при хроническом гепатите. Выявляются при скрининге тестом РекомбиБест анти - ВГС к неструктурным белкам;

· Anti - HCV total (суммарные антитела) также встречаются как у тех, кто переболел гепатитом С и выздоровел, так и при хронической инфекции, а после успешного лечения сохраняются длительное время, при этом их титры постепенно снижаются. У ряда больных с самоограничивающимся течением инфекции anti - HCV никогда не появляются. [17]

Для подтверждения специфичности положительных или сомнительных результатов, полученных в скрининговых исследованиях, разработан подтверждающий тест - "РекомбиБест анти - ВГС подтверждающий тест”. Тест-система представляет собой набор компонентов, основой которого являются рекомбинантные антигены ВГС, соответствующие участкам белков, кодируемых структурной (core) и неструкткрной (NS3, NS4, NS5) областью генома ВГС, иммобилизованные раздельно на поверхности лунок разборного полистиролового планшета. За счёт увеличения концентрации отдельных адсорбированных белков достигается увеличение чувствительности и специфичности тест-системы. Выявление антител к отдельным конкретным белкам имеет диагностическое значение. [9]

Одним из основных маркеров активности патологического процесса является репликация вируса, для доказательства которой необходимо выявление самого вируса или его компонентов методом ПЦР (полимеразная цепная реакция). Это очень важный метод определения наличия РНК вируса, так как исследование позволяет выявить присутствие даже малого количества вируса в крови с высокой точностью, тогда как другими методами это сделать невозможно. Обоснованием для проведения ПЦР служит присутствие Anti HCV.

Полимеразная цепная реакция (ПЦР)

В основе ПЦР лежит многоцикловой процесс, напоминающий естественную репликацию нуклеиновой кислоты, причем каждый цикл состоит из последовательных этапов.

Выявление РНК ВГС позволяет выявлять инфекцию в самом раннем периоде заболевания, сокращая период "серологического окна" на 50 - 60 дней.

Выявление РНК ВГС необходимо также при проведении противовирусной терапии, т.к. исчезновение вирусной РНК в процессе лечения является основным критерием эффективности терапии. [9]

Постановка:

Из исследуемого материала (сыворотка или плазма крови, печеночный биоптат) выделяется РНК ВГС. Учитывая, что нуклеиновая кислота ВГС представлена РНК, а для амплификации необходима молекула кДНК, при помощи фермента - обратной транскриптазы, происходит образование однонитевых молекул кДНК ВГС. На следующем этапе к определенному участку каждой из цепей кДНК ВГС присоединяются т. н. праймеры - короткие олигонуклеотиды, комплементарные известным нуклеотидным последовательностям. Сравнение первичной структуры 5'UTR области генома различных изолятов ВГС выявило их незначительную изменчивость (между генотипами, гомология нуклеотидов - 92-98%, а внутри генотипа 98-99%). Это сделало предпочтительным выбор праймеров из этой зоны РНК ВГС и их применение в диагностических тест-системах, выпускаемых у нас в стране и за рубежом. [9]

Далее, при помощи фермента ДНК - зависимой ДНК полимеразы происходит синтез новых участков ДНК. В настоящее время в качестве источника этого фермента чаще всего используют бактерии Thermophilus termus (Tth-полимераза) или Thermophilus aquaticus (Taq-полимераза). Обладая термостабильностью в присутствии ионов марганца и магния, этот фермент может быть одновременно использован для синтеза комплементарных одноцепочечных молекул кДНК ВГС и амплификации избранных участков кДНК. На завершающем этапе одного цикла реакции, при помощи ДНК полимеразы происходит синтез новых цепей комплементарных кДНК ВГС. Многократное повторение циклов реакции приводит к накоплению фрагментов кДНК ВГС, которые возможно зарегистрировать при помощи электрофореза в полиакриламидном геле с последующей визуальной детекцией или же с применением гибридизации с олигонуклеотидными зондами, что увеличивает чувствительность и специфичность применяемых диагностических препаратов. [9]

o ПЦР в реальном времени ("Real-time RT PCR") - один из наиболее перспективных вариантов количественного метода выявления РНК ВГС. Принцип метода заключается в способности гидролизовать последовательности кДНК в направлении 5'-- - 3'. В реакции применяется специальный зонд, меченный двумя флюоресцентными красителями, имеющими близкие максимумы поглощения и флюоресценции. При наличии продуктов амплификации Tag-полимераза расщепляет зонд, что приводит к предотвращению переноса энергии от одной молекулы красителя к другой, и тем самым предотвращает выход кванта света. Специальный прибор осуществляет учет реакции и математическое моделирование кинетики флюоресценции на каждом этапе реакции, что позволяет получить информацию об исходной концентрации РНК ВГС. Отличительной особенностью "ПЦР в реальном времени" является возможность уменьшить время получения результата, и этот метод более чувствителен для выявления даже маленького количества копий РНК ВГС.

o Методы генотипирования РНК ВГС. Определение принадлежности ВГС к определенному генотипу и субтипу нашло свое применение для решения не только чисто научных, но и практических вопросов. Например: поиск источника инфекции во время вспышек гепатита С или прогнозирование эффективности применяемой терапии.

"Золотой стандарт" генотипирования ВГС - непосредственное определение первичной структуры РНК ВГС с его последующим филогенетическим анализом, что позволяет четко охарактеризовать данный изолят вируса. Получить эту информацию возможно при использовании следующих вариантов секвенирования:

ь прямого;

ь на основе стандартного клонирования;

ь секвенирования продуктов ПЦР реакции (Limited-sequencing).

Несмотря на точность получаемого результата, метод непосредственного секвенирования не используется в практическом здравоохранении из-за технических сложностей проведения исследования и высокой стоимости работ. Вместе с тем наличие информации о первичной структуре РНК ВГС является референтным методом генотипирования, а наличие приборов для автоматического секвенирования упрощает получение результата. [15]

Неспецифические методы диагностики

Определение протромбинового времени и фибриногена

При гепатитах происходят изменения в свертывающей системе крови, и определение различных факторов свертывания крови является тестом для оценки функционального состояния печени. Так как в печени синтезируются факторы свертывания и белки плазмы крови. Наиболее характерны изменения протромбина и фибриногена. [1]

Метод определения фибриногена по Рутбергу:

К 1мл плазмы крови добавляют 0,1мл 5% -ного р - ра хлорида кальция и 0,1мл р - ра тромбина (активность 15с). Образовавшийся сгусток переносят на обеззоленный бумажный фильтр и просушивают другим фильтром до сухого состояния. Взвешивают сухой фибрин на торсионных весах. В норме масса сухого фибрина - 9-12мг. Для расчета концентрации фибриногена в плазме крови массу сгустка умножают на экспериментально установленный коэффициент 22,2. В норме концентрация фибриногена в крови равна 0,2 - 0,4 г в 100мл. [1]

Метод Квика:

В пробирку вносят 0,1 мл испытуемой плазмы крови 0,1 мл суспензии тромбопластина, ставят в водяную баню при 37?С на 60с. Затем приливают 0,1мл 0,025г хлорида кальция и включают секундомер. Отмечают время свертывания крови. Опыт повторяют 2 - 3 раза и определяют средний показатель. Протромбиновое время при стандартизированном тромбопластине в норме составляет 12 - 15с.

При поражении печени наблюдается удлинение протромбинового времени, так как в печени вырабатываются факторы свертывания крови. [1]

Определение активности ферментов крови

Определение активности c - глутамилтранспептидазы (ГГТП):

ГГТП катализирует перенос c-глутамила с глутатиона на аминокислоту или пептид. Фермент занимает важное место в метаболизме аминокислот. ГГТП располагается в основном на мембранах клеток, обладающих высокой секреторной активностью - эпителиальные клетки, печеночные канальца, проксимальные канальца нефрона, клеток панкреатической экзокринной ткани, выводных протоков, ворсинчатых клеток тонкой кишки.

Исследуемый материал: сыворотка крови.

В пробирку вносят 0,5 мл субстрата и помещают в водяную баню при t 37pС, приливают 0,05 мл сыворотки, перемешивают и инкубируют 15 мин при 37pС. Затем прибавляют 3мл раствора уксусной кислоты и перемешивают.

Измеряют на спектрофотометре при длине волны 410 нм или на ФЭК при длине волны 400 - 500 нм в кювете с толщиной слоя 1см против холостой пробы. Окраска стабильна в течение нескольких часов. Расчет активности проводят по калибровочной кривой. [1]

Пределы активности имеют половые различия:

Мужчины - 0,19 - 0,83 мккат/л;

Женщины - 0,12 - 0,54 мккат/л.

Значительное повышение имеет место при обструктивных поражениях печени, внепеченочной обтурации желчных протоков. Повышение активности возникает при циррозе, гепатите, сахарном диабете, гепатоме, при раке поджелудочной железы. [20]

Определение активности лактатдегидрогеназы (ЛДГ)

Лактатдегидрогеназа - гликолитический фермент, обратимо катализирующий окисление L - лактата в пировиноградную кислоту. Фермент широко распространен в организме человека.

Исследуемый материал: сыворотка крови.

0,1 мл сыворотки, разведенной 1: 2, смешивают с 0,3 мл раствора НАД, прогревают 5мин при t 37pС. Затем добавляют 0,8 мл 0,03 моль/л раствора пирофосфата натрия и 0,2 мл 0,45 моль/л раствора лактата натрия, инкубируют смесь при 37pC 15 мин. После инкубации добавляют 0,5 мл раствора 2,4 - динитрофенилгидрозина, выдерживают 20 мин при комнатной температуре Затем добавляют 5 мл 0,4 моль/л раствора едкого натра, перемешивают и через 10 мин измеряют на ФЭКе в кювете с толщиной слоя 1см при длине волны 500 - 560 нм против холостой пробы. Расчет активности производят по калибровочному графику. [1]

Пределы активности: 0,66 - 2,66 мккат/л.

Активность ЛДГ в сыворотке крови резко возрастает при почечных заболеваниях, лейкозах, при всех заболеваниях, протекающих с некрозом тканей: гепатиты, панкреатиты, инфаркт миокарда, опухоли. При остром гепатите активность ЛДГ в сыворотке крови повышена в первые недели желтушного периода, при легкой и среднетяжелой формах заболевания, активность фермента возвращается к нормальному уровню довольно быстро. [20]

Определение активности аминотрансфераз (АЛТ) (АСТ)

АЛТ и АСТ - это органоспецифические ферменты. АЛТ (АлАТ) присутствует в очень больших количествах в печени и почках, в меньших - в скелетных мышцах и сердце. АСТ (АсАТ) распределена во всех тканях тела. Наибольшая аквтивность имеется в сердце, печени, скелетных мышцах и эритроцитах.

Определение уровня аланинаминотрансферазы (АЛТ) на сегодняшний день является недорогим неинвазивным методом для оценки активности заболевания. Последовательные определения уровня этого фермента могут помочь лучше оценить повреждения ткани печени.

Аланинаминотрансфераза (АлАТ) катализирует реакцию между L-аланином и 2-оксоглутаратом, в результате которой они превращаются в L - глутамат и соль пировиноградной кислоты. Определение основано на измерении оптической плотности гидразонов 2 - оксоглутаровой и пировиноградной кислот в щелочной среде.

Аспартатаминотрансфераза (АсАТ) катализирует реакцию между L - аспартатом и 2 - оксоглутаратом, в результате которой они превращаются в L - глутамат и оксалоацетат. Определение основано на определении оптической плотности гидразонов 2 - оксоглутаровой и пировиноградной кислот в щелочной среде.

Постановка:

Исследуемый материал - свежая сыворотка без следов гемолиза.

Реагенты: №1 - Субстратная смесь; №2 - Раствор 2,4 - ДНФГ; №3-Калибратор: пируват натрия; №4 - Гидроокись натрия.

Время для АсАТ: 1 час, АлАТ: 30 м

Внести в пробирки

Опытная проба

Холостая

Субстратно-буферный р-р

0,5

0,5

Сыворотка крови

0,1

-

Инкубировать в водяной бане при 37?С (АЛТ-30мин, АСТ-60 мин)

Раствор 2,4 ДНФГ

0,5

0,5

Сыворотка крови

-

0,1

Через 20 минут в пробирки внести по 5 мл 0,4 моль/л раствора NaOH и через 5-10 минут фотометрировать против холостой пробы в интервале длин волн 500-560 нм, в кюветах с толщиной поглощающего слоя 1см.

Пределы активности: 5 - 40 Е/л. [1]

Соотношение активности АСТ / АЛТ называют "коэффициент де Ритиса". В норме этот коэффициент равен 1,33±0,42. При инфаркте миокарда активность АСТ в крови увеличивается 8 - 10 раз, АЛТ - 1,5-2,0 раза. Наиболее резко активность АСТ увеличивается при некрозе ткани, так как выходит в кровь и митохондриальная и цитоплазматическая формы фермента. При инфаркте миокарда значение коэффициента де Ритиса резко возрастает. При гепатитах активность АЛТ в крови увеличивается в 8 - 10 раз по сравнению с нормой, а АСТ в 2-4 раза. Коэффициент де Ритиса снижается до 0,6. Однако при циррозе печени этот коэффициент увеличивается, что свидетельствует о некрозе клеток, при котором в кровь выходят обе формы АСТ. [20]

Щелочная фосфотаза (ЩФ)

ЩФ расщепляет в N-метил-D-глюкаминовом буфере 4-нитрофенилфосфат с образованием 4-нитрофенола и фосфата. ЩФ больше всего вырабатывается в печени, костях, кишечнике, плаценте, легких. Активность фермента возрастает у детей в периоде быстрого роста, у женщин - в последнем триместре беременности. А также повышение фермента наблюдается при повышенном метаболизме в костной ткани: при заживлении травмы, недостатке витамина D в пище.

Исследуемый материал: сыворотка. Длина волны: 405нм; Длина оптического пути: 1см; Температура инкубации - 37?С. Пробы перемешивают и фотометрируют против холостой. Стабильность окраски - не менее 8 часов.

Норма: 278 - 830 нмоль/с. [1]

Определение билирубина

Количественное определение общего и прямого билирубина методом Йендрашека - Грофа

Исследуемый материал: сыворотка без следов гемолиза.

Реагенты: Кофеиновый реагент; Сульфаниловая кислота; Натрия нитрит; Хлорид натрия.

Общий билирубин определяется на основе реакции с диазотированной сульфаниловой кислотой, после диссоциации неконъюгированного (непрямого, свободного) билирубина при участии кофеинового реагента. Для определения содержания конъюгированного билирубина из реакционной смеси исключается кофеиновый реагент. Концентрация непрямого билирубина рассчитывается по разнице концентрации между общим и неконъюгированным билирубином. Для определения связанного билирубина через 5 минут после добавления диазореактива для общего - через 20 мин. Непрямой билирубин определяют по разнице между общим и прямым билирубином.

Норма: общий билирубин - 8,5-20,5 мкмоль/л

прямой-2,5-5,1 мкмоль/л. [1]

Качественные реакции на билирубин с диазореактивом

Исследуемый материал: сыворотка крови.

К 0,25 мл диазореактива добавляют 0,5 мл сыворотки, если изменился цвет (до красного) в течение 1 минуты - это говорит о присутствии связанного билирубина.

Осадочные пробы

Применение осадочных проб с диагностической целью основано на снижении коллоидной устойчивости белков плазмы при гепатитах. В норме же белки плазмы крови находятся в коллоидном состоянии и отличаются высокой устойчивостью. При постановке осадочных проб, которые сопровождаются химическим вмешательством, приводит к преципитации белков, приводящая к помутнению или образованию хлопьев. [1]

Тимоловая проба

При взаимодействии сыворотки с тимоловым раствором появляется помутнение вследствии образования глобулинофосфо-липидного комплекса. К 3мл рабочего реагента добавляют 0,05 мл сыворотки, инкубируют при комнатной температуре точно 30 мин. Фотометрируют при длине волны 630 - 660 нм в кювете толщиной 1см.

Норма: 0-4 МЕ.

Увеличение мутности при тимоловой пробе при наличии клинических данных свидетельствуют о поражении печени. Тимоловая проба положительна у 70 - 80% больных острым вирусным гепатитом, как правило уже в первые 5 дней желтушного периода.

Тимоловая проба является одним из наиболее чувствительных и надежных показателей активности патологического процесса в печени. [1]

Сулемовая проба

Сулема в присутствии белков образует коллоидный раствор солей ртути. Нарушение дисперсности белковых фракции сыворотки крови вызывает осаждение грубодисперсных частиц. Реакция оценивается по плотности осадка.

Исследуемый материал: сыворотка.

При добавлении к сыворотке крови раствора ртути дихлорида появляется мутность. Результаты выражаются в миллилитрах 0,1% раствора ртути дихлорида, добавляемого к 0,5 мл сыворотки негемолизированной крови, разведенной 1мл изотонического раствора натрия дихлорида, до появления стойкого помутнения, когда через вертикальный слой жидкости становится невозможным прочтение газетного текста.

Норма: 1,6 - 2,2 мл 0,1 раствора ртути дихлорида.

При хроническом активном гепатите проба положительна у 75 - 80% больных. [1]

Инструментальные методы диагностики

Инструментальная диагностика представляет существенное дополнение к лабораторным показателям.

Рентген, УЗИ - позволяют определить состояния печени, ее размеры, а также определить ее сопутствующее увеличение селезенки.

Радиоизотопная гепатография - с этой целью используют гепатотропные соединения: бингальскии-розовый, его метят йодом или используют коллоидное золото, вводят внутривенно и применяют радиометрический прибор. Вначале его ставят в области сердца - показывает время выведения из крови в печень изотопа и накопление его в печени. В норме максимальное накопление краски в печени 16-20 мин. Через 24 мин. в печени не должно быть более 2,5% препарата. Так оценивается поглотительная и выделительная функции печени и прохождение краски через желчные пути. При патологии скорость прохождения краски замедляется. [5]

Сканирование печени - это графическое изображение распространения гепатотропного соединения, меченного йодом или коллоидным золотом, вводимого внутривенно. Сканирование проводят 30мин.

В норме видно диффузное и равномерное распространение изотопов. При патологии - контуры размыты, неравномерны, печень носит пятнистый характер, то есть, нормальные участки сочетаются с участками, где мало вещества.

В сложных случаях прибегают к лапароскопии и чрескожной биопсии печени. Они дают возможность обнаружить характерные морфологические признаки каждого патологического процесса печени. Биопсия позволяет установить: диагноз, активность процесса в печени с помощью индекса гистологической активности, степень хронизации процесса с помощью индекса фиброза, эффективность проводимой терапии, а также - прогноз для данного больного. [17]

Заключение

Вирусный гепатит C представляет серьезную проблему здравоохранению и находится в центре внимания ВОЗ, в связи с тем, что из года в год происходит безудержный рост инфицированности. Так как вирусный гепатит C в большинстве случаев протекает субклинически, стоит вопрос об обследовании групп риска, что может способствовать раннему выявлению инфекции. Стратегия борьбы с вирусом гепатита С включает комплексный подход, направленный на все звенья эпидемического процесса. В первую очередь - это раннее выявление источника инфекции - скрытых инфицированных - путем проведения диспансеризации, с особенным акцентом на людей, входящих в группы риска. Эти группы представляют: наркоманы, лица, имеющие беспорядочные половые контакты - в частности гомосексуалисты, люди, находящиеся на гемодиализе. Риску можно подвергаться и при посещении стоматологических учреждений, салонов пирсинга и аккупунктур, при маникюрных и педикюрных манипуляциях. Подвержены риску и медицинские работники, работающие с кровью и патологоанатомы. После выявления источника инфекции необходимо проведение противовирусного лечения для разрыва путей передачи возбудителя. Поскольку вопрос о вакцинопрофилактике находится в состоянии разработки, на первый план выступает неспецифическая профилактика - это санитарно - просветительная работа, особенно с молодежью, чтобы подрастающие знали о возможных путях передачи вируса, также играет важную роль комплексная программа борьбы с наркоманией. Знание правил предупреждения от заражения обязательно для каждого человека. Таким образом, на сегодняшний день в борьбе с гепатитом С ведущая роль принадлежит неспецифическим профилактическим мероприятиям. Хоть и не существует пока эффективной вакцины человечество в силе своевременной диспансеризацией хотя бы сократить это повсеместное распространение вируса, которое в настоящее время носит характер пандемии.

Список литературы

1. Анализы. Полный справочник // Под ред. Ю.Ю. Елисеева. - М., 2010. - С.45-47, 114-120,122 - 124, 129 - 130, 292-294.

2. Анохина Я.С. Инфекционные болезни. Полный справочник. - М., 2007. - С.444-449.

3. Балаян М.С., Михайлов М.И. Вирусные гепатиты // Энциклопедический словарь. М., 1999. - С. 113-115.

4. Бацких С.Н., Морозов С.В. Вирус гепатита С 3-го генотипа: такой "простой", такой "сложный" // Терапевтический архив. - 2012. - №11. - С. 4-7.

5. Елисеев Ю.Ю. Инфекционные болезни. - М., 2008. - С. 440-446.

6. Ивашкин В.Т., Комаров Ф.И. Краткое руководство по гастроэнтерологии. - М., 2001. - С. 262-266.

7. Игнатова Т.М., Серов В.В. Патогенез ВГС // Архив патологии. - 2001. - №3. - С. 54-58.

8. Коршунова Г.С. Эпидемическая ситуация по вирусным гепатитам В, С,D в Российской Федерации // Гепатит В, С,D - проблемы диагностики, лечения и профилактики. - М., 1999. - С. 111-112.

9. Лабораторная диагностика вирусных гепатитов // каталог - вектор БЕСТ // 2002. - С. 3.

10. Лакина Е.И., Кущ А.А. РНК вируса гепатита C в организме больных хроническим гепатитом С // Вопросы вирусологии. - 2002. - №2. - С. 4-11.

11. Лобзин Ю.В., Казанцев А.Г. Справочник по инфекционным болезням. - С. - Петербург. - 1991. - С. 344-354.

12. Львов Д.К., Самохвалов Е.И. Закономерности распространения вируса гепатита C в России // Вопросы вирусологии. - 1999. - №4. - С. 157-161.

13. Львов Д.К. Медицинская вирусология. - М., 2008. - С.234, 483-488.

14. Мамедов М.К., Михайлов М.И. К 20-летию идентификации вируса гепатита С // Журнал микробиологии, эпидемиологии и иммунобиологии. - 2010. - №5. - С. 120-124.

15. Макарик Т.В., Романова Е.А. Вирусный гепатит С: новое в эпидемиологии и методах диагностики // Гематология и трансфузиология. - 2001. - №3. - С. 86-91.

16. Михайлов М.И. От вируса гепатита С до ТТV и далее // Вирусные гепатиты. Достижения и перспективы. - 2005. - №2. - С.11-15.

17. Момыналиев K. T., Говорун В.М., Перспективы применения методов ДНК-диагностики в лабораторной службе // Клин. лаб. диагн. - 2000. - № 4. - С. 25-32.

18. Самохвалов Е.И., и др. Особенности перинатальной передачи ВГС // Вопросы вирусологии. - 2009. - №1. - С. 12-15.

19. Сапронов Г.В., Николаева Л.И. Вирус гепатита С: мишени для терапии и новые лекарственные препараты // Вопросы вирусологии. - 2012. - №5. - С. 12-13.

20. Северин Е.С. Биохимия. М., ГЭОТАР-МЕД, 2004. - С. 470-472.

21. Серов В.В., Апросина З.Г., Крель П.Е. Хронический вирусный гепатит - одна из наиболее важных проблем современной медицины // Архив патологии. - 2004 г. - №6. - С. 6-11.

22. Собчак Д.Н., Корочкина О.В. Особенности цитокиновой регуляции иммунного ответа у больных с острой HCV - инфекцией // Терапевтический архив. - 2005. - №11. - С. 23-25.

23. Соринсон С.Н. Вирусные гепатиты в клинической практике. С. - Петербург. - 1999. - С. 183-188.

24. Учайкин В.Ф. Руководство по инфекционным болезням. - М., ГЭОТАР-МЕД, 2002. - С. 140-142.

Размещено на Allbest.ru


Подобные документы

  • Географическое распределение генотипов вируса гепатита В. Мутантные формы вируса. Методы современной диагностики инфекции. Выявление клинико-биохимических, иммунологических особенностей хронического вирусного гепатита В у детей с различными генотипами.

    магистерская работа [121,5 K], добавлен 31.07.2015

  • Определение вирусного гепатита. Его возбудитель. Источник инфекции и механизм ее передачи. Распространенность заболевания в популяции. Роль половых контактов в передаче вируса. Клиническое течение и симптомы развивающегося гепатита. Диагностика и лечение.

    презентация [2,1 M], добавлен 26.10.2014

  • История открытия вирусного гепатита. Резистентность к физическим и химическим факторам. Культивирование и механизм передачи возбудителя. Патогенез, диагностика, методы лечения и профилактики гепатита. Характерные особенности вируса гепатита В, С, Д, Е.

    курсовая работа [51,0 K], добавлен 24.06.2011

  • Этиология, патогенез и клинические проявления вирусного гепатита А. Основные механизмы и пути передачи гепатита. Лабораторные признаки вирусного гепатита А. Основные клиническое проявления вирусного гепатита В. Профилактика и лечение гепатитов.

    презентация [1,7 M], добавлен 26.10.2017

  • Понятие и причины гепатита С как наиболее тяжелой формы вирусного гепатита, которую называют еще посттрансфузионным гепатитом, морфология и этиология вируса-возбудителя, его патогенез и этапы развития заболевания. Диагностика и лечение гепатита С.

    реферат [27,3 K], добавлен 19.04.2014

  • Понятие и общая характеристика гепатита А как инфекционного вирусного заболевания, его клинические проявления и симптомы, пути заражения. Методика диагностирования и принципы составления схемы лечения гепатита А. Оценка необходимости вакцинации.

    презентация [1,3 M], добавлен 14.03.2017

  • Описания воспалительного заболевания печени, возбудителем которого является вирус гепатита C. Исследование источников вируса, инкубационного периода. Клинические особенности гепатита. Лабораторная диагностика. Лечение и профилактика вирусных гепатитов.

    презентация [61,8 K], добавлен 19.11.2014

  • Инфекционное заболевание печени. Пути передачи вирусного гепатита В. Технология производства и особенности введения вакцин. Экстренная профилактика острого гепатита с желтухой, бессимптомного вирусоносительства до острой печеночной недостаточности.

    презентация [271,1 K], добавлен 23.10.2014

  • Исследование особенностей вирусного инфекционного воспалительного заболевания печени. Характеристика признаков, основных симптомов и форм гепатита. Инкубационный период и пути заражения вирусом гепатита. Профилактика вирусных инфекционных заболеваний.

    презентация [715,7 K], добавлен 04.12.2014

  • Этиология, эпидемиология, патогенез и источник инфекции гепатита А. Особенности лечения больного. Дифференциальная диагностика вирусного гепатита с лептоспирозом и псевдотуберкулезом. Исследование органов дыхания, кровообращения и пищеварения больного.

    история болезни [26,6 K], добавлен 24.09.2012

Работы в архивах красиво оформлены согласно требованиям ВУЗов и содержат рисунки, диаграммы, формулы и т.д.
PPT, PPTX и PDF-файлы представлены только в архивах.
Рекомендуем скачать работу.